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福林(Folin)——酚试剂法(Lowry法)测定波长的选择
被引量：
4
1
作者
杨典洱
于培兰
+1 位作者
潘颖
牛宇欣
《铁道劳动安全卫生与环保》
1996年第2期147-148,共2页
认为Folin—酚试剂法测定波长应是750nm,而其改良法的测定波长是650nm。
关键词
福林-酚试剂法
分光光度法
波长
蛋白质
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职称材料
hHGF-αcDNA的克隆及表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
党素英
程牛亮
+3 位作者
牛勃
王惠珍
赵建滨
张祖珣
《山西医科大学学报》
CAS
2001年第2期100-103,共4页
目的 定点突变法扩增制备完整hHGF αcDNA ,克隆并构建其原核表达载体。方法与结果 以含有人HGFcDNA全序列的质粒 pRC/CMV hHGF为模板 ,设计合成一对特异引物进行聚合酶链反应 (PCR) ,扩增hHGF αcDNA基因 ,琼脂糖凝胶电泳检测 ,结果...
目的 定点突变法扩增制备完整hHGF αcDNA ,克隆并构建其原核表达载体。方法与结果 以含有人HGFcDNA全序列的质粒 pRC/CMV hHGF为模板 ,设计合成一对特异引物进行聚合酶链反应 (PCR) ,扩增hHGF αcDNA基因 ,琼脂糖凝胶电泳检测 ,结果显示扩增得到了 1 34kb长的目的基因产物。将扩增产物以限制性内切酶XhoⅠ酶将其切为 386bp、95 4bp两个片段 ,分别以EcoRⅠ /XhoⅠ、XhoⅠ /BamHⅠ与 pBSKS载体连接重组 ,对目的基因分段克隆后进行序列测定 ,结果表明除通过定点突变引入的起始密码ATG、终止密码子TAA、TGA及EcoRⅠ、BamHⅠ识别位点外 ,扩增得到的PCR产物序列与Nakamura等报道的HGFcDNA中不包括前体序列的α链部分完全相同。将以EcoRⅠ /XhoⅠ、XhoⅠ /BamHⅠ从pBSKS HGF α 386、pBSKS HGF α 95 4中切出的 386bp、95 4bp两个片段以EcoRⅠ /BamHⅠ与pBV2 2 0连接构建重组表达质粒 pBV2 2 0 HGF α ,限制性内切酶图谱分析显示HGF αcDNA插入到载体pBV2 2 0的EcoRⅠ /BamHⅠ位点 ,插入方向正确。温度诱导表达 ,SDS PAGE显示一分子量与单体hHGF α链吻合的蛋白带 ,证明表达质粒构建成功。结论 设计制备了hHGF α链cDNA ,克隆建立了hHGF α链原核表达质粒。
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关键词
肝细胞生长因子
克隆
CDNA
基因表达
载体构建
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职称材料
题名
福林(Folin)——酚试剂法(Lowry法)测定波长的选择
被引量：
4
1
作者
杨典洱
于培兰
潘颖
牛宇欣
机构
首都医科大学生物化学教研室
生物
遗传学
教研室
出处
《铁道劳动安全卫生与环保》
1996年第2期147-148,共2页
文摘
认为Folin—酚试剂法测定波长应是750nm,而其改良法的测定波长是650nm。
关键词
福林-酚试剂法
分光光度法
波长
蛋白质
分类号
TQ937 [化学工程]
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职称材料
题名
hHGF-αcDNA的克隆及表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
党素英
程牛亮
牛勃
王惠珍
赵建滨
张祖珣
机构
山西
医科大
学
生物
化学
与分子
生物
学
教研室
首都医科大学生物化学教研室
出处
《山西医科大学学报》
CAS
2001年第2期100-103,共4页
基金
山西省归国留学人员科研基金资助项目
文摘
目的 定点突变法扩增制备完整hHGF αcDNA ,克隆并构建其原核表达载体。方法与结果 以含有人HGFcDNA全序列的质粒 pRC/CMV hHGF为模板 ,设计合成一对特异引物进行聚合酶链反应 (PCR) ,扩增hHGF αcDNA基因 ,琼脂糖凝胶电泳检测 ,结果显示扩增得到了 1 34kb长的目的基因产物。将扩增产物以限制性内切酶XhoⅠ酶将其切为 386bp、95 4bp两个片段 ,分别以EcoRⅠ /XhoⅠ、XhoⅠ /BamHⅠ与 pBSKS载体连接重组 ,对目的基因分段克隆后进行序列测定 ,结果表明除通过定点突变引入的起始密码ATG、终止密码子TAA、TGA及EcoRⅠ、BamHⅠ识别位点外 ,扩增得到的PCR产物序列与Nakamura等报道的HGFcDNA中不包括前体序列的α链部分完全相同。将以EcoRⅠ /XhoⅠ、XhoⅠ /BamHⅠ从pBSKS HGF α 386、pBSKS HGF α 95 4中切出的 386bp、95 4bp两个片段以EcoRⅠ /BamHⅠ与pBV2 2 0连接构建重组表达质粒 pBV2 2 0 HGF α ,限制性内切酶图谱分析显示HGF αcDNA插入到载体pBV2 2 0的EcoRⅠ /BamHⅠ位点 ,插入方向正确。温度诱导表达 ,SDS PAGE显示一分子量与单体hHGF α链吻合的蛋白带 ,证明表达质粒构建成功。结论 设计制备了hHGF α链cDNA ,克隆建立了hHGF α链原核表达质粒。
关键词
肝细胞生长因子
克隆
CDNA
基因表达
载体构建
Keywords
hepatocyte growth factor
DNA, comp lementory
cloning, gene
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
福林(Folin)——酚试剂法(Lowry法)测定波长的选择
杨典洱
于培兰
潘颖
牛宇欣
《铁道劳动安全卫生与环保》
1996
4
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下载PDF
职称材料
2
hHGF-αcDNA的克隆及表达载体的构建
党素英
程牛亮
牛勃
王惠珍
赵建滨
张祖珣
《山西医科大学学报》
CAS
2001
1
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职称材料
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