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用Fura-2双波长荧光法测定神经细胞内游离钙 被引量:25
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作者 卢步峰 黄诒森 鲁友明 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1994年第3期275-277,共3页
采用新型Ca ̄(2+)荧光指示剂Fura-2建立双波长荧光法测定分离的大鼠神经细胞内游离钙浓度([Ca ̄(2+)]_i).结果显示,在静息状态下,其[Ca ̄(2+)]_i为109±12nmol/L.30mmol/... 采用新型Ca ̄(2+)荧光指示剂Fura-2建立双波长荧光法测定分离的大鼠神经细胞内游离钙浓度([Ca ̄(2+)]_i).结果显示,在静息状态下,其[Ca ̄(2+)]_i为109±12nmol/L.30mmol/LKCl可显著增加[Ca ̄(2+)]_i,并且KCl的这种效应呈一定的剂量依赖关系,提示该法灵敏、可靠. 展开更多
关键词 荧光指示剂 神经细胞 游离钙
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蛋白激酶C对大鼠缺血海马突触体谷氨酸摄取的调控作用 被引量:12
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作者 卢步峰 鲁友明 黄诒森 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第3期371-375,共5页
采用大鼠海马脑片体外缺血模型,观察海马突触体内蛋白激酶C(PKC)活性的变化,以及这种变化对突触体谷氨酸(GLU)摄取的影响。结果显示:海马脑片体外“缺血”10min,其突触体内PKC活性基本不变,而缺血30min,... 采用大鼠海马脑片体外缺血模型,观察海马突触体内蛋白激酶C(PKC)活性的变化,以及这种变化对突触体谷氨酸(GLU)摄取的影响。结果显示:海马脑片体外“缺血”10min,其突触体内PKC活性基本不变,而缺血30min,突触体内PKC活性显著上升(P<0.01,n=6);非N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体拮抗剂DNQX有效地抑制PKC活性的同时,可降低胞外GLU的堆积,而NMDA受体阻断剂AP_5无作用。进一步实验证明,PKC激动剂PDB浓度依赖性地抑制突触体对3H-GLU的摄取(IC50=131±10μmol/L),此抑制作用可由PKC抑制剂H-7(100μmol/L)抵消。提示脑缺血诱发GLU堆积的作用机理可能是:脑缺血引发钙内流导致GLU过量释放,GLU又通过突触前非NMDA受体激活PKC,抑制其自身摄取,正反馈性加重胞外GLU的堆积。 展开更多
关键词 蛋白激酶 海马 突触体 缺血 谷氨酸
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钙离子和蛋白激酶C对大鼠缺血海马脑片谷氨酸堆积的影响 被引量:6
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作者 卢步峰 鲁友明 黄诒森 《生物化学杂志》 CSCD 1995年第1期104-107,共4页
采用大鼠海马脑片体外缺血模型观察钙离子和蛋白激酶C(PKC)对神经元胞外谷氨酸(GLU)堆积的影响,结果显示:海马脑片在体外“缺血”10min,GLU在胞外的浓度增加4倍(从32±4升高到113±10pmol... 采用大鼠海马脑片体外缺血模型观察钙离子和蛋白激酶C(PKC)对神经元胞外谷氨酸(GLU)堆积的影响,结果显示:海马脑片在体外“缺血”10min,GLU在胞外的浓度增加4倍(从32±4升高到113±10pmol/(min.mgPr).n=6).N型钙通道拮抗剂蝙蝠葛苏林碱(DSL)或无钙培养液均能有效抑制这种浓度的升高(P<0.01).提示缺血10min引发的GLU浓度升高是受Ca2+内流调控的.当脑片在缺血状况下孵育30min,DSL只部分抑制这种GLU堆积,而无钙培养液则无影响,但这额外的GLU堆积可被PKC抑制剂H-7完全阻断,而被PKC激动剂PDB所加强;且不受钙调蛋白抑制剂Calmdazolium和8-溴-cAMP影响.提示缺血30min,胞外GLU的堆积受钙内流和PKC双重调控。 展开更多
关键词 钙离子 蛋白激酶 海马脑片 谷氨酸堆积 脑缺血
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缺血性脑损伤海马神经元磷酸肌醇系统的变化及其机制的探讨
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作者 卢步峰 黄森 鲁友明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第5期488-491,共4页
采用四动脉闭塞全脑缺血模型,观察大鼠缺血30min再灌注21d不同时间中,外源性谷氨酸(Glu)对海马脑片磷脂酰肌醇(PI)代谢的影响和偶联该系统的G蛋白功能变化。结果显示,Glu(500μmol/L)对正常和缺血再... 采用四动脉闭塞全脑缺血模型,观察大鼠缺血30min再灌注21d不同时间中,外源性谷氨酸(Glu)对海马脑片磷脂酰肌醇(PI)代谢的影响和偶联该系统的G蛋白功能变化。结果显示,Glu(500μmol/L)对正常和缺血再灌注海马脑片肌醇磷酸(IP)生成均具明显的促进作用(P<0.01,n=9),其中以缺血再灌注后IP的升高为显著,并且这种Glu刺激的IP堆积效应随缺血再灌注时间的延长在21d中持续存在。与此同时,还观察到缺血再灌注24h至7d中,海马神经元Glu受体密度(Bmax)显著下降(P<0.01,n=8),亲和力(Kd)无显著变化。提示脑缺血再灌注后Glu刺激的PI代谢增强是由于Glu受体与磷脂酶C(PLC)间产生高反应所致。应用四氟化铝(AlF_4 ̄-)可得到与上述Glu刺激IP生成相同的结果,而氨甲酰胆碱(Cah)和去甲肾上腺素(NE)对IP水平的作用不受脑缺血和再灌注的影响。表明缺血状态下的这种Glu与PLC间的高反应可能是特异的,并通过偶联该系统的G蛋白功能变化介导。 展开更多
关键词 蛋白质 磷脂酰肌醇类 脑缺血 海马 神经元
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