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砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子表达及生精细胞凋亡的影响 被引量:2
1
作者 戴研平 高晓勤 《解剖学杂志》 CAS 2019年第4期354-357,共4页
目的:探讨砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子(AIF)表达及生精细胞凋亡的影响.方法:雄性SD大鼠被随机分为对照组和染砷组.采用自由饮用方式进行连续染毒6个月.采用免疫印迹及实时荧光定量PCR检测AIF表达水平;采用TUNEL法观察生精细胞凋亡的情... 目的:探讨砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子(AIF)表达及生精细胞凋亡的影响.方法:雄性SD大鼠被随机分为对照组和染砷组.采用自由饮用方式进行连续染毒6个月.采用免疫印迹及实时荧光定量PCR检测AIF表达水平;采用TUNEL法观察生精细胞凋亡的情况.结果:免疫印迹及实时荧光定量PCR结果显示,与对照组比较,染砷组大鼠睾丸内AIF蛋白及mRNA表达水平均显著增高.TUNEL法检测结果显示与对照组比较,染砷组生精上皮凋亡细胞平均灰度值显著增高.结论:砷染毒时AIF介导的非caspase依赖性凋亡途径可能参与了大鼠生精细胞凋亡. 展开更多
关键词 砷染毒 凋亡诱导因子 生精细胞 凋亡 大鼠
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血管内皮细胞生长因子及其受体2在慢性砷染毒大鼠睾丸中的表达及其意义 被引量:1
2
作者 戴研平 高晓勤 《解剖学杂志》 CAS 2020年第3期186-189,F0002,共5页
目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体2(VEGFR2)在慢性砷中毒大鼠睾丸中的表达及意义。方法:健康清洁级雄性SD大鼠随机分为高、中、低剂量砷染毒组和对照(蒸馏水)组,采用经口自由饮用方式进行染毒,连续染毒6个月。H-E染色观察... 目的:研究血管内皮细胞生长因子(VEGF)及其受体2(VEGFR2)在慢性砷中毒大鼠睾丸中的表达及意义。方法:健康清洁级雄性SD大鼠随机分为高、中、低剂量砷染毒组和对照(蒸馏水)组,采用经口自由饮用方式进行染毒,连续染毒6个月。H-E染色观察睾丸一般形态学变化,免疫荧光化学法对睾丸组织VEGF和VEGFR2的表达进行定位,采用实时荧光定量PCR法检测睾丸组织VEGF和VEGFR2的mRNA表达变化,流式细胞术观察精子的凋亡率。结果:与对照组比较,中、高剂量砷组大鼠体质量明显降低,睾丸组织质量也明显降低,而低剂量砷组大鼠体质量、睾丸质量、睾丸脏器系数差异无统计学意义。对照组睾丸结构正常,染砷组大鼠睾丸组织上皮结构疏松,层次排列紊乱,层次逐渐减少,精原细胞出现空泡样改变,睾丸间质充血、渗出等,尤其中、高剂量砷组有较明显的变化。与对照组比较,各染毒组VEGF和VEGFR2的mRNA表达水平均较低,砷染毒组大鼠精子凋亡率较高,差异均有统计学意义。结论:慢性砷中毒时,VEGF可能通过旁分泌-自分泌的方式参与调控大鼠睾丸的功能,VEGF及其受体2在砷中毒大鼠精子发生和发育过程中起重要作用。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 血管内皮细胞生长因子受体2 砷中毒 睾丸
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亚慢性砷染毒对大鼠睾丸中水通道蛋白9及睾酮表达的影响 被引量:1
3
作者 戴研平 高晓勤 秦海霞 《解剖学杂志》 CAS 2020年第1期22-25,共4页
目的:研究亚慢性砷染毒对大鼠睾丸中水通道蛋白9(AQP9)及睾酮表达的影响,为砷中毒导致的男性不育提供理论依据。方法:雄性SD大鼠随机分为高、中、低剂量砷染毒组和对照(蒸馏水)组,采用经口自由饮用方式进行染毒,连续染毒14周。染毒结束... 目的:研究亚慢性砷染毒对大鼠睾丸中水通道蛋白9(AQP9)及睾酮表达的影响,为砷中毒导致的男性不育提供理论依据。方法:雄性SD大鼠随机分为高、中、低剂量砷染毒组和对照(蒸馏水)组,采用经口自由饮用方式进行染毒,连续染毒14周。染毒结束后,取血和双侧睾丸,采用电感耦合等离子体发射光谱仪测定血浆及睾丸中砷浓度,采用免疫组织化学法检测AQP9的表达变化,ELISA检测血清中睾酮的浓度,H-E染色观察睾丸组织形态学改变。结果:与对照组比较,染砷组血浆和睾丸中有明显的砷积累。AQP9蛋白在睾丸组织中间质细胞表达增强,中、高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义。与对照组比较,低剂量组睾酮浓度下降,差异无统计学意义,中、高剂量组与对照组比较,差异有统计学意义。染毒组大鼠生精上皮出现不同程度损害,睾丸间质充血、渗出等,尤以中、高剂量组变化明显。结论:亚慢性砷中毒可以引起血浆及睾丸砷浓度增加,影响AQP9的表达,导致大鼠睾丸组织病理学改变和睾酮分泌紊乱,对大鼠的睾丸组织和生殖功能造成损伤。 展开更多
关键词 睾丸 亚慢性砷中毒 水通道蛋白9 睾酮 大鼠
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附睾血管内皮生长因子基因慢病毒干扰载体的构建
4
作者 戴研平 王平 高晓勤 《解剖学杂志》 CAS 2022年第5期445-448,共4页
目的:以血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA为靶点,设计、构建VEGF的RNA干扰慢病毒载体,并对其在大鼠附睾的沉默效果进行验证。方法:构建3种附睾VEGF-shRNA慢病毒表达载体VEGF-shRNA-1、VEGF-shRNA-2、VEGF-shRNA-3,提取3种阳性克隆质粒测序... 目的:以血管内皮生长因子(VEGF)的mRNA为靶点,设计、构建VEGF的RNA干扰慢病毒载体,并对其在大鼠附睾的沉默效果进行验证。方法:构建3种附睾VEGF-shRNA慢病毒表达载体VEGF-shRNA-1、VEGF-shRNA-2、VEGF-shRNA-3,提取3种阳性克隆质粒测序,转染HEK293-T细胞后产生慢病毒质粒。大鼠随机分为空白对照组、NC-shRNA阴性感染组、VEGF-shRNA-1感染组、VEGF-shRNA-2感染组、VEGF-shRNA-3感染组,将病毒液分别注射到各组大鼠双侧附睾;实时荧光定量PCR及蛋白免疫印迹检测各组大鼠附睾VEGF的mRNA及蛋白沉默效果。结果:测序结果证明3种慢病毒载体被包装成功。感染大鼠附睾后,VEGF感染组mRNA及蛋白表达量均较阴性感染组和空白对照组明显降低,其中以VEGF-shRNA-3感染组干扰效果更为有效。结论:成功设计了VEGF基因的RNA干扰靶点和制备了VEGF基因的慢病毒载体,VEGF-shRNA-3能有效抑制附睾VEGF的表达。 展开更多
关键词 慢病毒干扰 血管内皮生长因子 基因沉默 附睾 大鼠
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过氧化物酶6在慢性砷中毒大鼠附睾的表达及意义
5
作者 戴研平 高晓勤 《解剖学杂志》 CAS 2019年第4期350-353,共4页
目的:研究过氧化物酶6(Prdx6)在慢性砷中毒大鼠附睾中的表达及意义,为砷中毒导致的男性不育提供理论依据.方法:健康清洁级雄性SD大鼠随机分为高(60 mg/L)、中(12 mg/L)、低(2.4 mg/L)剂量砷染毒组和对照(蒸馏水)组,采用经口自由饮用方... 目的:研究过氧化物酶6(Prdx6)在慢性砷中毒大鼠附睾中的表达及意义,为砷中毒导致的男性不育提供理论依据.方法:健康清洁级雄性SD大鼠随机分为高(60 mg/L)、中(12 mg/L)、低(2.4 mg/L)剂量砷染毒组和对照(蒸馏水)组,采用经口自由饮用方式进行染毒,连续染毒6个月.采用免疫印迹及实时荧光定量PCR法检测Prdx6的表达变化及意义,透射电镜观察精子超微结构变化.结果:免疫印迹及实时荧光定量PCR结果显示,与对照组比较,各染毒组Prdx6的蛋白及mRNA表达水平均显著较低.透射电镜结果显示对照组精子结构正常,砷染毒各组精子尾部中段线粒体均出现了病理损害.结论:慢性砷中毒对大鼠附睾中Prdx6的表达有影响,引起精子超微结构改变,说明其与男性不育有一定的关系. 展开更多
关键词 过氧化物酶6 砷中毒 附睾 大鼠
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蛋白激酶B2慢病毒载体的构建及其沉默效果的验证
6
作者 戴研平 高晓勤 《解剖学杂志》 CAS 2021年第2期118-122,共5页
目的:利用RNA干扰技术,以蛋白激酶B 2(AKT2)的mRNA为靶点,设计、构建AKT-2的RNA干扰慢病毒载体,并对其沉默效果进行验证。方法:根据目的基因设计3个小干扰RNA(siRNA)靶点,进行引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切... 目的:利用RNA干扰技术,以蛋白激酶B 2(AKT2)的mRNA为靶点,设计、构建AKT-2的RNA干扰慢病毒载体,并对其沉默效果进行验证。方法:根据目的基因设计3个小干扰RNA(siRNA)靶点,进行引物合成。将单链的引物退火成双链oligo序列,连接入双酶切线性化的RNA干扰载体。测序验证正确的转化子,进行高纯度质粒抽提。提取3种阳性克隆质粒测序,转染HEK293-T细胞后产生慢病毒质粒。实验大鼠被随机分为5组,每组10只,空白对照组不注射慢病毒,NC-shRNA阴性感染组、PL-AKT2-shRNA-1感染组、PL-AKT2-shRNA-2感染组、PL-AKT2-shRNA-3感染组。大鼠附睾分别被注射200μL含有NC-shRNA、PL-AKT2-shRNA-1、PLAKT2-shRNA-2、PL-AKT2-shRNA-3的病毒液;免疫印迹检测大鼠附睾AKT2的蛋白沉默效果。结果:测序结果证明3种慢病毒载体被包装成功。感染大鼠附睾后,AKT2的蛋白表达量均较阴性感染组和正常对照组明显降低,其中以PL-AKT2-shRNA-3质粒组干扰效果更为有效。结论:成功设计了AKT-2基因的RNA干扰靶点和制备了AKT-2基因的慢病毒载体,基因沉默效果明显。 展开更多
关键词 蛋白激酶B2 慢病毒干扰 基因沉默 附睾
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