[目的]探究Ⅲ型纤连蛋白域包含蛋白5(typeⅢfibronectin domain-containing protein 5,FNDC5)基因对藏猪低氧适应性的调控作用。[方法]以藏猪和大约克猪为实验动物,提取其耳组织DNA,分段扩增FNDC5基因的5′侧翼区、3′侧翼区和CDS区,测...[目的]探究Ⅲ型纤连蛋白域包含蛋白5(typeⅢfibronectin domain-containing protein 5,FNDC5)基因对藏猪低氧适应性的调控作用。[方法]以藏猪和大约克猪为实验动物,提取其耳组织DNA,分段扩增FNDC5基因的5′侧翼区、3′侧翼区和CDS区,测序后筛选单核苷酸多态性(SNPs)位点。采集实验猪心脏、肺脏组织,提取其RNA及总蛋白,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测FNDC5基因mRNA的表达量,采用Western blot法检测FNDC5蛋白的表达量。采集藏猪和大约克猪颈动脉血样各30头份,测定血液生理指标。将猪骨骼肌卫星细胞(PSMSC)分为常氧组(氧气体积分数21%)及体积分数5%和1%氧气组,常氧组又分为PGC-1α激活剂ZLN005添加组、PGC-1α抑制剂SR-18292添加组和空白对照组,培养后分别采用RT-qPCR和Western blot法检测FNDC5基因mRNA和蛋白的表达量。[结果]在FNDC5基因CDS区,2种猪未检测到SNPs位点;在5′侧翼区,2种猪有3个SNPs位点,分别为g.-118A>G、g.-790T>C和g.-931A>G;在3′侧翼区,大约克猪无SNP位点,藏猪有4个多态性位点(分别为g.46G>T、g.56G>C、g.517T>C和g.1028G>A)。这些SNPs可能是藏猪低氧适应性的重要调控位点。藏猪的白细胞数、红细胞数、血红蛋白质量浓度、红细胞压积、血小板计数、血小板压积指标极显著高于大约克猪(P<0.01),红细胞分布宽度变异系数极显著低于大约克猪(P<0.01),其他指标与大约克猪无显著差异,推测藏猪具有更强的低氧适应能力。藏猪心脏FNDC5基因和蛋白表达量极显著高于大约克猪,肺脏FNDC5基因表达量极显著高于大约克猪。在PSMSC中,FNDC5基因和蛋白的表达量均随着氧体积分数的降低而显著或极显著降低;PGC-1α激活剂ZLN005可极显著促进FNDC5基因的表达,抑制剂SR-18292可极显著抑制FNDC5基因的表达。[结论]FNDC5基因和部分血液生理指标可能与藏猪的低氧适应性相关;PGC-1α可正向调控FNDC5基因的表达。展开更多
