冠状病毒S蛋白的结构和功能研究进展

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作者 黎梦帆 李青阳 +2 位作者 宋艳雯 宋振辉 张兴翠 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第9期4241-4252,共12页

冠状病毒(coronavirus,CoV)是具有包膜的单股正链RNA病毒,作为人和动物的重要致病原,冠状病毒感染主要导致宿主呼吸系统、肝脏、胃肠道以及神经系统出现急性或慢性症状。冠状病毒可感染人类和多种动物,严重危害人体健康和畜牧业发展。... 冠状病毒(coronavirus,CoV)是具有包膜的单股正链RNA病毒,作为人和动物的重要致病原,冠状病毒感染主要导致宿主呼吸系统、肝脏、胃肠道以及神经系统出现急性或慢性症状。冠状病毒可感染人类和多种动物,严重危害人体健康和畜牧业发展。绝大多数冠状病毒的刺突(spike,S)蛋白由S1亚基和S2亚基组成,在病毒感染细胞过程中分别负责受体结合和与细胞膜融合,其在病毒的组织或宿主嗜性和毒力等方面发挥着重要作用,是冠状病毒感染细胞的关键蛋白。本文重点对冠状病毒S蛋白的结构和功能进行综述,以期为冠状病毒的入侵机制研究提供参考。 展开更多

关键词 冠状病毒 S蛋白 结构 功能

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丁酸在亚急性瘤胃酸中毒和动物健康方面作用机制的研究进展 被引量：9

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作者 朱智 纪邑奇 +1 位作者 黄文明 左福元 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期4201-4212,共12页

反刍动物饲喂高谷物饲粮易诱发亚急性瘤胃酸中毒(SARA),导致采食量和消化率降低,瘤胃和肠上皮的黏膜屏障受损,肝脏脓肿和炎症反应增加。丁酸作为微生物的发酵产物和上皮细胞的能量来源,影响瘤胃液pH和胃肠道微生物区系,促进上皮生长发... 反刍动物饲喂高谷物饲粮易诱发亚急性瘤胃酸中毒(SARA),导致采食量和消化率降低,瘤胃和肠上皮的黏膜屏障受损,肝脏脓肿和炎症反应增加。丁酸作为微生物的发酵产物和上皮细胞的能量来源,影响瘤胃液pH和胃肠道微生物区系,促进上皮生长发育。作为信号分子,丁酸参与多个信号通路,在细胞功能、信号转导、机体免疫等方面发挥作用。丁酸通过激活G蛋白偶联受体(GPR)引起多种转录因子的活化,或者作为组蛋白去乙酰化酶(HDAC)抑制剂在基因表达的表观遗传调控中发挥作用。本文综述了丁酸尤其是在高谷物饲粮中添加丁酸盐对反刍动物瘤胃、肠道和肝脏的影响以及分子作用机制,为缓解SARA的危害提供理论依据。 展开更多

关键词 丁酸 亚急性瘤胃酸中毒 黏膜屏障 G蛋白偶联受体 组蛋白去乙酰化酶抑制剂

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抗生物膜肽研究进展 被引量：7

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作者 张阳 程鹏 +1 位作者 李晓芬 陈红伟 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期216-223,共8页

细菌生物膜导致的细菌耐药性增加受到了广泛关注。抗生物膜肽是一类具有抑制和杀灭细菌生物膜独特优势的抗微生物肽,有望成为理想的抗细菌生物膜的新型抗菌药物。就抗生物膜肽与生物膜各组分间的相互作用、抗生物膜肽对生物膜形成的干... 细菌生物膜导致的细菌耐药性增加受到了广泛关注。抗生物膜肽是一类具有抑制和杀灭细菌生物膜独特优势的抗微生物肽,有望成为理想的抗细菌生物膜的新型抗菌药物。就抗生物膜肽与生物膜各组分间的相互作用、抗生物膜肽对生物膜形成的干预作用及其调控、抗生物膜肽目前存在的问题及其解决思路以及抗生物膜肽未来的应用领域等展开综述。 展开更多

关键词 细菌生物膜 抗生物膜肽 相互作用

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免疫共沉淀联合质谱技术筛选蓝舌病病毒NS4蛋白的互作蛋白

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作者 马鲜平 陈玉娟 +8 位作者 罗世美 卓晓静 杨义彬 刘祎毅 蔡旭研 唐艺匀 陈畅昶 魏小蓉 易华山 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期779-789,共11页

[目的]筛选蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)NS4蛋白颉颃干扰素(interferon, IFN)信号通路的内源性互作蛋白,以便进一步研究NS4抑制IFN信号转导的作用机制。[方法]在前期仙台病毒(Sendai virus, SeV)诱导IFN信号通路基因表达研究基础... [目的]筛选蓝舌病病毒(Bluetongue virus, BTV)NS4蛋白颉颃干扰素(interferon, IFN)信号通路的内源性互作蛋白,以便进一步研究NS4抑制IFN信号转导的作用机制。[方法]在前期仙台病毒(Sendai virus, SeV)诱导IFN信号通路基因表达研究基础上,利用免疫共沉淀方法从转染NS4融合eGFP标签表达载体pcDNA3.1-NS4-eGFP和pcDNA3.1-eGFP空载体的HEK-293T细胞中钓取NS4互作蛋白,对免疫沉淀物进行SDS-PAGE分析,免疫共沉淀洗脱液进行质谱鉴定及生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR检测候选蛋白的编码基因表达特征。[结果]通过免疫共沉淀及质谱鉴定分析和数据库比对,共获得189个差异表达蛋白。生物信息学分析结果显示,候选蛋白主要参与蛋白转录、翻译、病毒感染及免疫调控。亚细胞定位分析结果显示,差异表达蛋白主要定位于细胞核、细胞质以及胞质-胞核,筛选出4个与BTV NS4蛋白存在互作的候选蛋白:多聚嘧啶束结合蛋白1(PTBP1)、细胞周期依赖性蛋白激酶9(CDK9)、N-端豆蔻酰化酶1(NMT1)和Y盒结合蛋白1(YBX1)。实时荧光定量PCR结果显示,与对照组相比,SeV刺激72 h后,试验组PTBP1、NMT1、YBX1、CDK9基因mRNA表达量均显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01)。[结论]BTV NS4蛋白颉颃IFN信号通路与PTBP1、NMT1、YBX1、CDK9蛋白表达上调有关,本试验结果为进一步研究BTV NS4蛋白颉颃宿主天然免疫应答的分子机制提供靶标参考。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒(BTV) 免疫共沉淀 质谱分析 NS4蛋白

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蓝舌病病毒非结构蛋白研究进展 被引量：1

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作者 赵瑶 易华山 +2 位作者 马鲜平 李前勇 谢远兵 《中国奶牛》 2020年第10期45-49,共5页

蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染动物宿主细胞后,病毒非结构蛋白进行表达而参与病毒基因的复制、基因组的组装及病毒粒子的释放。BTV基因组至少编码NSP1、NSP2、NSP3/NS3a和NSP44种非结构蛋白(non-structural proteins,NSPs),这些... 蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)感染动物宿主细胞后,病毒非结构蛋白进行表达而参与病毒基因的复制、基因组的组装及病毒粒子的释放。BTV基因组至少编码NSP1、NSP2、NSP3/NS3a和NSP44种非结构蛋白(non-structural proteins,NSPs),这些NSPs在BTV基因组的复制、组装及拮抗宿主细胞干扰素免疫应答等方面发挥重要的作用。本文就BTV主要结构蛋白、非结构蛋白最新的研究进展进行了综述,为BTV新型疫苗的研发、病毒诊断及病毒基因组复制及组装机制提供基础。 展开更多

关键词 蓝舌病病毒 结构蛋白 非结构蛋白

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益生菌防治猪流行性腹泻研究进展 被引量：7

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作者 张淑娟 牛铮 +5 位作者 阚子斐 张依玲 徐沙沙 邹宏 张静怡 宋振辉 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第8期64-69,共6页

猪流行性腹泻易感宿主为各个年龄段的猪,症状的轻重随年龄的大小而有所不同,其中以新生仔猪最为严重[1]。最近几年,猪消化道疾病中猪流行性腹泻发病率、死亡率明显提高,流行特点和发病症状也发生了一定的改变。猪流行性腹泻病毒传播途... 猪流行性腹泻易感宿主为各个年龄段的猪,症状的轻重随年龄的大小而有所不同,其中以新生仔猪最为严重[1]。最近几年,猪消化道疾病中猪流行性腹泻发病率、死亡率明显提高,流行特点和发病症状也发生了一定的改变。猪流行性腹泻病毒传播途径主要是直接、间接接触和气溶胶传播[2]。猪感染后,病毒主要是在小肠黏膜上皮细胞中复制。由于病毒增殖首先造成机体小肠上皮细胞正常结构被破坏,继而出现细胞功能障碍。肠绒毛出现萎缩、脱落、空泡化,造成了肠壁变薄,吸收表面积减少,同时干扰肠道菌群(GM)的平衡,降低益生菌的数量,从而使小肠吸收消化功能降低;另外,肠黏膜上皮细胞内的碱性磷酸酶(ALP)、氨基肽酶(APs)等活性降低或者缺乏,导致肠腔无法将小分子物质进一步分解、吸收,致使营养物质吸收障碍. 展开更多

关键词 猪流行性腹泻 小肠上皮细胞 间接接触 营养物质吸收 病毒增殖 新生仔猪 消化功能 小肠吸收

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微生物-肠-脑轴调控蛋鸡应激性异常行为的研究进展 被引量：5

7

作者 邹昕羽 CHENG Hengwei +1 位作者 金美兰 江莎 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1859-1868,共10页

现代养禽业采用的高密度笼养体系、分阶段饲养、断喙等管理措施可引起禽的过度应激,使它们出现啄羽、攻击或同类相食等异常行为。肠道菌群被视为一种跨物种的虚拟内分泌器官,通过肠-脑轴的双向通讯整合来自代谢、免疫、内分泌和神经通... 现代养禽业采用的高密度笼养体系、分阶段饲养、断喙等管理措施可引起禽的过度应激,使它们出现啄羽、攻击或同类相食等异常行为。肠道菌群被视为一种跨物种的虚拟内分泌器官,通过肠-脑轴的双向通讯整合来自代谢、免疫、内分泌和神经通路发出的信号,并通过肠神经和迷走神经等外周神经系统、5-羟色胺和短链脂肪酸等微生物代谢产物以及免疫系统等途径调控动物应激反应及相应异常行为。本文系统地总结了蛋鸡饲养管理措施所造成的禽过度应激行为,并对微生物-肠-脑轴对鸡应激及其相关行为调控的可能机制进行论述,旨在为益生菌在蛋鸡饲养管理的推广应用提供参考依据。 展开更多

关键词 蛋鸡 应激 异常行为 肠道菌群 微生物-肠-脑轴

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术苦芩总多糖对湿热泄泻仔猪肠道菌群和免疫功能的影响 被引量：6

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作者 陶未来 刘佳 +4 位作者 刘琼丹 郝永峰 胡宇 朱兆荣 刘娟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期913-924,共12页

旨在探究术苦芩总多糖(ZKQPs)对湿热泄泻仔猪肠道菌群和免疫功能的影响。通过HPLC分析ZKQPs的单糖组成,体外抑菌试验研究ZKQPs体外对常见肠道致病菌的直接影响,同时建立仔猪腹泻模型,用白头翁散(PP)及3种剂量的ZKQPs(25、50和75 mg·... 旨在探究术苦芩总多糖(ZKQPs)对湿热泄泻仔猪肠道菌群和免疫功能的影响。通过HPLC分析ZKQPs的单糖组成,体外抑菌试验研究ZKQPs体外对常见肠道致病菌的直接影响,同时建立仔猪腹泻模型,用白头翁散(PP)及3种剂量的ZKQPs(25、50和75 mg·kg^(-1))治疗腹泻仔猪,治疗结束后,收集小肠各段组织、盲肠内容物,对菌落进行鉴定与计数;通过16S rDNA高通量测序分析肠道菌群的变化,测定小肠免疫相关细胞因子mRNA表达。结果显示:ZKQPs一级结构主要由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖和木糖构成。在体外试验中,大肠杆菌、沙门菌、猪源产气荚膜梭菌肠道常见有害菌对ZKQPs敏感,并在一定范围内呈现浓度依赖性。动物试验中,ZKQPs有效促进了腹泻仔猪肠道乳酸杆菌的生长,对致病大肠杆菌生长有较强的抑制作用,其中,50 mg·kg^(-1)ZKQPs影响最为显著。16S rDNA高通量测序结果表明,ZKQPs调节了腹泻仔猪菌群Alpha多样性,对肠道菌群在纲和属水平上有显著影响,腹泻仔猪芽胞杆菌纲、乳酸杆菌属相对丰度显著下降,梭菌纲相对丰度显著上升;ZKQPs治疗后芽胞杆菌纲、乳酸杆菌属相对丰度均显著上升且高于正常值,梭菌纲相对丰度极显著下降,显著改善了腹泻仔猪肠道菌群结构。仔猪腹泻时,小肠各段Th1细胞因子IL-2 mRNA水平上升(P<0.01),Th2细胞因子IL-4、IL-5 mRNA水平均下降;ZKQPs治疗后,腹泻仔猪小肠各段IL-2 mRNA水平下降,IL-4、IL-5 mRNA水平普遍上升,且不同细胞因子mRNA水平在小肠不同位置变化有所差异,50和75 mg·kg^(-1)ZKQPs治疗后对其影响最为显著,综合分析50 mg·kg^(-1)ZKQPs治疗腹泻仔猪对细胞因子mRNA水平影响最大。综上表明,ZKQPs在体外对常见肠道致病菌生长具有良好的抑制作用,可以改变腹泻仔猪肠道微生物群的丰富度和多样性,提高乳酸杆菌属的相对丰度,并改善菌群结构,同时调节肠道免疫反应,有效增强了仔猪抗腹泻能力。 展开更多

关键词 术苦芩总多糖 腹泻仔猪 肠道菌群 免疫

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西南部分地区中兽医验方收集分析与典型案例 被引量：1

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作者 叶芮伶 任秋敏 +3 位作者 曹茂雨 尚杨斐 朱兆荣 刘娟 《中国兽药杂志》 2021年第7期69-75,共7页

中兽医是我国优秀的传统文化遗产,但随着近几年畜牧行业的发展和壮大,中兽医传统经方验方传承面临困境。为了改善这种困境,使中兽医更好应用于临床,服务于社会,传承并发扬中兽医学。研究选用问卷调查法,交流访谈法及文献资料法对西南片... 中兽医是我国优秀的传统文化遗产,但随着近几年畜牧行业的发展和壮大,中兽医传统经方验方传承面临困境。为了改善这种困境,使中兽医更好应用于临床,服务于社会,传承并发扬中兽医学。研究选用问卷调查法,交流访谈法及文献资料法对西南片区中兽医验方进行收集,并对其进行归纳整理、分析,分析了验方来源地分布情况、验方使用时间情况、验方治疗病症情况及验方临床应用典型案例,可为中兽医发展及兽医临床医学提供参考。 展开更多

关键词 中兽医 验方 西南地区

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ACE2对猪流行性腹泻病毒体外感染传代猪小肠上皮细胞的影响

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作者 任莉鑫 张静怡 +3 位作者 徐沙沙 杨柳 张兴翠 宋振辉 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1238-1248,共11页

为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪... 为探究血管紧张素转换酶2(angiotensin converting enzyme 2,ACE2)在猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)感染仔猪过程中发挥的作用,本研究通过转录组学分析仔猪肠道ACE2在PEDV感染前后表达的变化情况,然后利用猪小肠上皮细胞(porcine intestinal epithelial cells, IPEC-J2细胞)模型,通过RT-qPCR、Western blot检测PEDV感染后ACE2的mRNA、蛋白表达水平的变化。过表达与抑制表达ACE2后通过RT-qPCR、Western blot、TCID50检测PEDV复制水平。结果显示,PEDV感染IPEC-J2后ACE2的mRNA及蛋白表达水平均显著下调,与转录组学结果一致。过表达ACE2组PEDV感染量显著上升,抑制表达ACE2组PEDV感染量显著下降。本研究在细胞水平上验证了ACE2在PEDV感染过程中的作用,即PEDV感染能够使ACE2表达量下降,在IPEC-J2细胞中过表达ACE2能提高PEDV复制水平,抑制ACE2的表达可降低PEDV复制水平。 展开更多

关键词 血管紧张素转换酶2 ACE2 猪流行性腹泻病毒 猪小肠上皮细胞

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课程思政理念下的兽医药物分析课程教学改革与实践 被引量：3

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作者 陈红伟 周洋 +6 位作者 何玉张 谢三磊 魏述永 宋振辉 吴俊伟 刘娟 罗艺晨 《安徽农业科学》 CAS 2021年第19期257-258,261,共3页

动物药学专业人才已经逐渐成为各大兽药GMP企业急需的人力资源,而兽医药物分析课程是该专业的核心主干课程。充分汲取动物药学专业课中蕴含的思政资源,引导学生树立正确的世界观、乐观进取的人生观和积极向上的价值观。梳理药物分析理... 动物药学专业人才已经逐渐成为各大兽药GMP企业急需的人力资源,而兽医药物分析课程是该专业的核心主干课程。充分汲取动物药学专业课中蕴含的思政资源,引导学生树立正确的世界观、乐观进取的人生观和积极向上的价值观。梳理药物分析理论与实验实训教学中蕴含的思政元素,将其融入药物分析课程教学中,并对融入的措施与实践进行了简要总结,旨在提高动物药学专业兽医药物分析课程课堂教学的育人效果,并为其他专业课程的思政教育提供参考。 展开更多

关键词 动物药学 药物分析 课程思政 教学改革

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鸭凝血因子Ⅷ的原核表达及多克隆抗体制备

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作者 刘英 唐小涓 +3 位作者 刘静静 张雯瑾 赖泓江 李德龙 《现代畜牧兽医》 2021年第6期13-16,共4页

为制备鸭凝血因子Ⅷ的多克隆抗体,试验根据抗原决定簇预测软件对鸭Ⅷ因子全基因序列进行分析,发现Ⅷ因子主要抗原决定簇位于C端,对鸭ⅧC端(Ⅷ-C)进行密码子优化、原核表达;免疫小鼠制备多抗,并利用ELISA测定效价。结果显示,优化后的Ⅷ-... 为制备鸭凝血因子Ⅷ的多克隆抗体,试验根据抗原决定簇预测软件对鸭Ⅷ因子全基因序列进行分析,发现Ⅷ因子主要抗原决定簇位于C端,对鸭ⅧC端(Ⅷ-C)进行密码子优化、原核表达;免疫小鼠制备多抗,并利用ELISA测定效价。结果显示,优化后的Ⅷ-C能在Escherichia coli表达;Ⅷ-C在Escherichia coli BL21(DE3)中能高效表达;多克隆抗体效价超过1∶10^(4)。研究结果为后续鸭肝窦内皮细胞鉴定提供试验材料。 展开更多

关键词 凝血因子Ⅷ 原核表达 多克隆抗体

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参苓白术散对溃疡性结肠炎模型小鼠的疗效评价 被引量：13

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作者 马琪 翁与竞 +3 位作者 李佳 覃施媛 何燕凤 马旭东 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期785-792,共8页

目的探究参苓白术散对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的疗效。方法选用雄性BALB/c小鼠(6~8周龄,18~20 g)36只,随机分成6组,每组6只。A组:参苓白术散高剂量组;B组:参苓白术散中剂量组;C组:参苓白术散低剂量组;D组:柳... 目的探究参苓白术散对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的疗效。方法选用雄性BALB/c小鼠(6~8周龄,18~20 g)36只,随机分成6组,每组6只。A组:参苓白术散高剂量组;B组:参苓白术散中剂量组;C组:参苓白术散低剂量组;D组:柳氮磺胺吡啶治疗组;E组:空白对照组;F组:模型组。以连续7 d自由饮用3.5%葡聚糖硫酸钠水溶液建立急性UC模型,造模同时分别灌胃给予不同药物治疗,观察记录小鼠临床表现并结合疾病活动指数评分(DAI)以及处死后的结直肠长度、结肠黏膜损伤眼观评分、结肠组织病理学评分等综合评价参苓白术散对UC模型小鼠的治疗效果。结果与E组比较,F组小鼠DAI评分显著升高,结肠明显缩短,结肠黏膜损伤眼观评分及组织病理学评分显著升高。B组小鼠的病情改善优于A、C、D组。结肠黏膜损伤评分显示,F组与B组比较差异有显著性(P<0.05)。参苓白术散可以改善小鼠结肠组织局部损伤,缓解小鼠UC的症状。结论参苓白术散对UC模型小鼠有良好的治疗效果,参苓白术散中剂量的疗效优于参苓白术散高剂量和低剂量。 展开更多

关键词 溃疡性结肠炎 参苓白术散 葡聚糖硫酸钠

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与鸭C4结合蛋白互作的鸭疫里默菌外膜蛋白的筛选及鉴定 被引量：2

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作者 李德龙 谷九龙 +5 位作者 徐兴胜 王思媛 刘婷 陈思怀 高继业 李继祥 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2825-2835,共11页

旨在筛选并鉴定与鸭C4结合蛋白(C4b-binding protein,C4BP)互作的鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,R.anatipestifer)外膜蛋白。本研究将保存的R.anatipestifer复苏培养,提取外膜蛋白,以鸭C4BPα作为诱饵蛋白进行His pull-down及L... 旨在筛选并鉴定与鸭C4结合蛋白(C4b-binding protein,C4BP)互作的鸭疫里默氏菌(Riemerella anatipestifer,R.anatipestifer)外膜蛋白。本研究将保存的R.anatipestifer复苏培养,提取外膜蛋白,以鸭C4BPα作为诱饵蛋白进行His pull-down及LC-MS/MS蛋白质谱鉴定,筛选与鸭C4BP可能发生互作的候选外膜蛋白;将各候选蛋白进行克隆、原核表达,免疫小鼠制备多克隆抗体,利用Far-western blot验证与鸭C4BP发生相互作用的R.anatipestifer外膜蛋白;针对候选蛋白及C4BPα各功能结构域进行克隆及原核表达,利用Far-western blot鉴定候选蛋白及与C4BP的相互作用位点;利用ELISA对补体因子C3b、C4b及C4BP在R.anatipestifer表面沉积情况进行测定,验证候选蛋白的功能。结果显示,经His pull-down及LC-MS/MS蛋白质谱分析,共筛选出3个与鸭C4BP发生相互作用的R.anatipestifer外膜蛋白,即ECE-1、SODs和Omp62;成功获得3个外膜蛋白多克隆抗体,ELISA检测3种多克隆抗体效价均超过1∶6400,Western blot检测3种多克隆抗体可以与重组蛋白发生特异性反应;Far-western blot结果显示,仅ECE-1能够与C4BP发生相互作用,并且只有ECE-1全长能与鸭C4BP相互作用,而鸭C4BP与ECE-1的相互作用区域位于C4BPα的SCR 2和SCR 3;当健康鸭血清稀释度为3.125%时,ECE-1抗体能够显著促进补体因子C3b、C4b在R.anatipestifer表面的沉积作用(P<0.05),当健康鸭血清稀释度为6.25%时,ECE-1抗体能够显著抑制C4BP在R.anatipestifer表面的沉积作用(P<0.05)。本研究成功筛选并鉴定出1个与C4BP互作的R.anatipestifer外膜蛋白ECE-1,为进一步阐明R.anatipestifer免疫逃逸机制奠定了基础。 展开更多

关键词 鸭C4结合蛋白 鸭疫里默氏菌 外膜蛋白

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可转移黏菌素耐药基因mcr:控制革兰阴性菌感染“最后一道防线”的严峻挑战 被引量：1

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作者 胡俊 丁帅帅 魏述永 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期504-519,共16页

可转移黏菌素耐药基因(mobile colistin resistance,mcr)于2016年由中国学者首次报道,随后陆续在全球50余个国家及20余种宿主细菌中检测到10类43个突变体,其编码蛋白MCR具有2个保守的结构域和相似的预测蛋白结构,氨基酸序列相似性为32%~... 可转移黏菌素耐药基因(mobile colistin resistance,mcr)于2016年由中国学者首次报道,随后陆续在全球50余个国家及20余种宿主细菌中检测到10类43个突变体,其编码蛋白MCR具有2个保守的结构域和相似的预测蛋白结构,氨基酸序列相似性为32%~82.93%。研究发现,mcr可随宿主细菌在动物、人类和环境中广泛传播,严重降低了黏菌素这一控制兽医临床多重耐药革兰阴性菌感染“最后一道防线”的治疗效果及使用价值。mcr的全球传播可能基于其复杂的遗传背景,目前共发现14种阳性质粒,其水平转移也与插入序列ISApl1等众多可移动遗传元件有关。mcr在不同菌株甚至菌属间的传播已对全球公共卫生安全构成威胁,如何防控其传播尚需进一步关注。 展开更多

关键词 MCR 流行情况 同源性 分子特征 遗传背景

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抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用 被引量：1

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作者 李会 熊静 +8 位作者 梅翠 王士源 周洋 李晓芬 付贵花 张阳 程鹏 何玉张 陈红伟 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期1576-1586,共11页

旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性... 旨在考察鼠源抗菌肽CRAMP的安全性、稳定性及其在清除铜绿假单胞菌生物被膜中的作用。采用兔血红细胞悬液的溶血性和小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)的细胞毒性考察CRAMP的安全性;采用不同温度、蛋白酶、金属离子和酸碱梯度对CRAMP抗菌活性的影响,考察其稳定性;通过在6孔细胞培养板中构建铜绿假单胞菌(PAO1株)成熟生物被膜,以人源抗菌肽LL-37和3种抗菌药为对照,采用结晶紫染色法检测生物被膜量,平板菌落计数法对生物被膜活菌数进行计数,苯酚-硫酸法结合Folin-酚试剂法检测生物被膜胞外基质含量,激光扫描共聚焦显微镜(CLSM)观察CRAMP干预PAO1生物被膜形态学的变化。结果显示,CRAMP在所测试浓度下对兔血红细胞溶血率均<2%;在62.5~125 mg·L^(-1)时对RAW264.7没有细胞毒性。温度(25~100℃)、两种盐离子(Na^(+)、K^(+))以及pH为5~10时对CRAMP的抗菌活性没有影响;胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶均不同程度影响了CRAMP的抗菌活性。6孔细胞培养板中,4倍MIC的CRAMP极显著降低了PAO1生物被膜量(减少率为76.74%,P<0.01),极显著减少了生物被膜中的活菌数量(减少了1.2个CFU·mL^(-1),P<0.01),效果优于LL-37和3种抗菌药。CRAMP组的胞外基质显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05)。CLSM结果显示:与对照组相比较,4MIC浓度下,CRAMP组的细菌总荧光强度(PI+SYTO)显著低于空白对照组和LL-37组(P<0.05);与空白对照组相比,CRAMP组和LL-37组的死菌荧光强度/活菌荧光强度比值(PI/SYTO)均极显著增大(P<0.01)。综上表明,CRAMP具有低溶血性、低细胞毒性,除蛋白酶作用不稳定外,具有较好的稳定性,对PAO1成熟生物被膜具有明显的清除作用,且效果优于LL-37,具有良好的药物开发前景。 展开更多

关键词 生物被膜 鼠源抗菌肽CRAMP 细胞毒性 稳定性 激光扫描共聚焦显微镜

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猪戊型肝炎病毒ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢的lncRNA-mRNA调控网络的鉴定 被引量：4

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作者 焦寒伟 周志雄 +6 位作者 李梦娟 肖玉 李博文 郭晓奕 曾慧 顾国婧 帅学宏 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第12期4618-4627,共10页

为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western ... 为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western blotting检测ORF3蛋白过表达成功后,运用lncRNA高通量组学测序,筛选出差异表达的lncRNA并进行靶向差异基因预测,对lncRNA靶向差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,初步鉴定出与核黄素代谢信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络。Western blotting结果显示,在约为12 ku处出现目的条带,说明成功实现腺病毒介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中过表达。lncRNA高通量组学测序结果显示,共发现102个显著差异表达lncRNAs表达量上调,80个显著差异表达lncRNAs表达量下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,初步挖掘出lncRNA(MSTRG.13995.2)和lncRNA(MSTRG.1960.1)可能是与核黄素代谢信号通路相关的显著差异表达lncRNA,分别通过顺式调控其靶向基因APC-5和FLAD1来影响核黄素代谢信号通路。本试验初步鉴定出lncRNA(MSTRG.13995.2)-APC5和lncRNA(MSTRG.1960.1)-FLAD1可能是影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络。 展开更多

关键词 猪 戊型肝炎病毒(HEV) ORF3蛋白 HEPG2细胞 核黄素代谢 lncRNA-mRNA调控网络

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猫传染性腹膜炎病毒N蛋白的原核表达及多抗制备 被引量：6

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作者 牛铮 徐沙沙 +7 位作者 张静怡 张依玲 阚子斐 张淑娟 邹宏 邹卓岚 冉玲 宋振辉 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1-9,共9页

猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)是冠状病毒中的重要成员,也是引起猫传染性腹膜炎的主要病原.参考GenBank数据库中FIPV核衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,以病料组织中提取的RNA为模板,反转录成cDNA,通过PCR特异性扩增N基因序列,将其克隆至pM... 猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)是冠状病毒中的重要成员,也是引起猫传染性腹膜炎的主要病原.参考GenBank数据库中FIPV核衣壳蛋白基因序列,设计特异性引物,以病料组织中提取的RNA为模板,反转录成cDNA,通过PCR特异性扩增N基因序列,将其克隆至pMD19-T载体并转化至Trans5α感受态细胞,经筛选、菌液PCR与限制酶双酶切鉴定后,获得重组克隆质粒pMD19-T-N.以pMD19-T-N为模板,亚克隆N基因,将其与Pet-28a载体连接后转化至表达菌株Rosetta感受态细胞,完成Pet-28a-N重组表达质粒的构建.用IPTG诱导N蛋白表达,将纯化后的重组N蛋白皮下多点注射免疫比利时兔,制备多克隆抗体.最终通过Western-Blot与免疫组化技术检测多克隆抗体的特异性.FIPV N蛋白多克隆抗体的制备,为猫传染性腹膜炎的进一步研究及临床治疗提供了必备的实验材料. 展开更多

关键词 猫传染性腹膜炎病毒 蛋白表达和纯化 多克隆抗体制备 特异性鉴定

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蛋鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和传染性法氏囊病病毒混合感染的诊断 被引量：5

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作者 李汶蔓 韦潼 +4 位作者 吴文静 姜鸿睿 王雪柯 郭格言 李德龙 《动物医学进展》 北大核心 2022年第9期129-133,共5页

为诊断蛋鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和传染性法氏囊病病毒混合感染病例,在流行病学、临床诊断和尸体剖检的基础上,通过胶体金试纸条检测、病理组织学检查及PCR对该病例进行实验室诊断。结果显示,病鸡精神沉郁,被毛粗乱,体型消瘦,... 为诊断蛋鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和传染性法氏囊病病毒混合感染病例,在流行病学、临床诊断和尸体剖检的基础上,通过胶体金试纸条检测、病理组织学检查及PCR对该病例进行实验室诊断。结果显示,病鸡精神沉郁,被毛粗乱,体型消瘦,伏地不起,叫声低沉,拉黄绿色稀粪。眼观病变为空肠淋巴滤泡和盲肠扁桃体肿胀,胰腺坏死,法氏囊肿大,腿肌出血。显微镜下表现为空肠固有层淋巴细胞数量增多,盲肠扁桃体内淋巴细胞数量增多,法氏囊囊小结淋巴细胞数量减少,周围有炎性细胞浸润。PCR扩增出3个目的基因片段(535、488、720 bp),经NCBI Blast比对分析,3个片段序列分别与NDV、H9亚型AIV和IBDV相似性最高。胶体金检测显示NDV和AIV阳性。据病理学及病原学诊断结果判定该病例为蛋鸡新城疫病毒、H9亚型禽流感病毒和传染性法氏囊病病毒混合感染。 展开更多

关键词 新城疫病毒 禽流感病毒 传染性法氏囊病病毒 混合感染 诊断

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影响鸡脂肪肝出血综合征的因素及“多重打击”学说 被引量：5

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作者 张弥 涂闻君 +1 位作者 张奇 江莎 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期2453-2469,共17页

鸡脂肪肝出血综合征(fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是笼养鸡非感染性死亡的主要原因之一,以肝组织质脆、破裂出血、突然死亡为主要特征。鸡由于其生理特性较哺乳动物更易形成FLHS,但鸡FLHS发病机制尚未明确。本文将从FLHS疾... 鸡脂肪肝出血综合征(fatty liver hemorrhagic syndrome,FLHS)是笼养鸡非感染性死亡的主要原因之一,以肝组织质脆、破裂出血、突然死亡为主要特征。鸡由于其生理特性较哺乳动物更易形成FLHS,但鸡FLHS发病机制尚未明确。本文将从FLHS疾病发生的多重影响因素如遗传、营养、激素、环境、肠道微生物等方面进行阐述,列举和对比研究人员通过改变鸡饲粮成分或使用激素等构建FLHS模型的方法,提出“多重打击”学说的发病机制,以期为鸡FLHS研究提供一定的参考。 展开更多

关键词 鸡脂肪肝出血综合征 影响因素 模型 “多重打击”学说

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