口腔黏膜癌变进程中固有免疫细胞与免疫检查点分子表达趋势验证及交互作用预测 被引量：1

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作者 李凯玉 石丽娟 +3 位作者 刘林鑫 王杰 聂敏海 刘旭倩 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期192-206,共15页

目的研究口腔黏膜癌变进程中基于数据计算验证的固有免疫细胞和免疫检查点分子的表达趋势,并通过预测其交互作用,探索免疫治疗抑制口腔黏膜癌变进程的方法。方法1)利用癌症基因组图谱对口腔黏膜癌变进程中的免疫细胞和免疫检查点分子进... 目的研究口腔黏膜癌变进程中基于数据计算验证的固有免疫细胞和免疫检查点分子的表达趋势,并通过预测其交互作用,探索免疫治疗抑制口腔黏膜癌变进程的方法。方法1)利用癌症基因组图谱对口腔黏膜癌变进程中的免疫细胞和免疫检查点分子进行全面评分,筛选出干扰肿瘤细胞免疫逃逸的固有免疫细胞和免疫检查点分子;2)收集血常规资料,对口腔黏膜癌变进程中外周血免疫细胞进行统计学分析,筛选外周血中可能影响口腔黏膜癌变进程的免疫细胞;3)对口腔黏膜癌变进程各阶段中基于数据计算验证的固有免疫细胞和免疫检查点分子进行免疫组织化学染色;4)采用特殊染色鉴定口腔黏膜癌变进程各阶段中基于数据计算验证的固有免疫细胞;5)对口腔黏膜癌变进程中基于数据计算验证的固有免疫细胞和免疫检查点分子进行生存分析,验证固有免疫细胞和免疫检查点分子与口腔鳞状细胞癌预后间的关联。结果在口腔黏膜癌变进程中,单核细胞、中性粒细胞表达呈上升趋势;嗜酸性粒细胞表达呈升降单峰趋势;肥大细胞表达呈下降趋势;免疫检查点分子细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)和细胞程序性死亡-配体1(PD-L1)的表达呈上升趋势。单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞表达趋势与CTLA4和PD-L1免疫检查点分子的表达趋势正相关;肥大细胞表达趋势与CTLA4和PD-L1免疫检查点分子的表达趋势负相关。单核细胞、中性粒细胞和嗜酸性粒细胞可能促进CTLA4和(或)PD-L1介导的肿瘤细胞免疫逃逸,加速口腔黏膜癌变进程;肥大细胞可能抑制CTLA4和(或)PD-L1介导的肿瘤细胞免疫逃逸,延缓口腔黏膜癌变进程。结论干扰固有免疫中特定免疫细胞可在一定程度上调控CTLA4和(或)PD-L1的表达,抑制肿瘤细胞免疫逃逸,延缓口腔黏膜癌变进程。 展开更多

关键词 口腔黏膜癌变 免疫治疗 免疫逃逸 固有免疫细胞 免疫检查点分子

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遥感成像技术在口腔疾病诊疗应用的研究进展

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作者 曹梦颖 石蕊 +1 位作者 于瀚雯 刘程程 《国际口腔医学杂志》 北大核心 2025年第1期107-116,共10页

遥感技术是应用传感仪器对远距离目标所辐射和反射的电磁波信息进行收集、处理并最后成像的一种探测技术。近年来,遥感技术与医学交叉融合,在疾病空间分析、精细导航定位和实时医学图像终端等领域展现了广阔的应用前景。作为一种非侵入... 遥感技术是应用传感仪器对远距离目标所辐射和反射的电磁波信息进行收集、处理并最后成像的一种探测技术。近年来,遥感技术与医学交叉融合,在疾病空间分析、精细导航定位和实时医学图像终端等领域展现了广阔的应用前景。作为一种非侵入性的技术,遥感技术不仅可以帮助医生对病灶进行高精度的定位和诊断,还可以结合人工智能等技术手段,对疾病进行预警。本文综合介绍了红外热成像技术、微波成像技术、太赫兹成像技术和高光谱成像技术等遥感成像技术应用于疾病诊疗的原理和优势,并阐述了常见遥感成像技术在龋病病变组织早期的检测、口腔癌边缘和波及范围评估、口腔软硬组织微小变化的探测等口腔诊疗中的应用现状和前景,以期为相关研究提供新思路。 展开更多

关键词 遥感成像技术 红外热成像 微波成像 太赫兹成像 高光谱成像 龋病 口腔癌症 远程医疗

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靶向趋化因子配体1对口腔鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为的影响

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作者 李晶莹 许译文 +2 位作者 刘梦琳 聂敏海 刘旭倩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第2期169-175,共7页

目的:探讨趋化因子配体1(CCL1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对人口腔舌鳞状细胞癌细胞HSC-4增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:收集2018年1月至2020年6月期间在西南医科大学附属医院口腔颌面外科手术切除的28例OSCC组织标本和患... 目的:探讨趋化因子配体1(CCL1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对人口腔舌鳞状细胞癌细胞HSC-4增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法:收集2018年1月至2020年6月期间在西南医科大学附属医院口腔颌面外科手术切除的28例OSCC组织标本和患者临床特征资料,以及行阻生牙拔除术切除的10例正常牙龈标本。常规培养OSCC细胞HSC-4,实验分为对照组(不加病毒)、NC组(转染对照慢病毒载体)、shCCL1组(转染敲减CCL1慢病毒载体)和CCL1组(培养基含60 ng/mL CCL1重组蛋白),免疫组化法和WB法检测OSCC组织及细胞中CCL1蛋白的表达,并分析其表达水平与患者临床特征的关系;qPCR法、CCK-8法、克隆形成实验、划痕愈合实验、Transwell小室实验和流式细胞术分别检测各组HSC-4细胞中CCL1 mRNA的表达、细胞增殖、迁移、侵袭能力和细胞凋亡情况。结果:CCL1蛋白在OSCC组织及HSC-4细胞中均呈高表达(均P<0.01)且与肿瘤临床分期有关联(P<0.05)。在HSC-4细胞中成功敲减CCL1的表达(P<0.0005),敲减CCL1表达能抑制HSC-4细胞的增殖(P<0.05,P<0.01)、迁移与侵袭能力(均P<0.05)并促进其凋亡(均P<0.05);CCL1重组蛋白处理对HSC-4细胞的作用与之相反(P<0.05,P<0.01,P<0.0001)。结论:CCL1在OSCC组织中呈高表达且与OSCC的临床分期有关联,CCL1可能参与调控HSC-4细胞的增殖、迁移、侵袭及凋亡。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 HSC-4细胞 趋化因子配体1(CCL1) 增殖 迁移 侵袭 凋亡

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巨噬细胞集落刺激因子对口腔鳞状细胞癌细胞生长和迁移的影响

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作者 许译文 李晶莹 +3 位作者 刘林鑫 徐英娇 聂敏海 刘旭倩 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第6期565-570,共6页

目的研究巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达情况及其对OSCC细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响。方法收集正常牙龈组织和OSCC组织,采用免疫组织化学法和Western blotting检测MCSF蛋白的表达情况。将HSC-4细胞分为... 目的研究巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达情况及其对OSCC细胞增殖、凋亡和迁移能力的影响。方法收集正常牙龈组织和OSCC组织,采用免疫组织化学法和Western blotting检测MCSF蛋白的表达情况。将HSC-4细胞分为空白对照组(未转染处理)、shNC组(转染无序列质粒载体病毒)和shMCSF组(转染沉默MCSF质粒载体慢病毒),实时定量PCR检测细胞中MCSF mRNA水平,Western blotting检测细胞中MCSF蛋白表达水平。采用细胞划痕实验和Transwell实验检测HSC-4细胞迁移能力,采用TUNEL细胞凋亡实验检测HSC-4细胞凋亡能力,采用细胞集落形成实验检测HSC-4细胞增殖能力。结果MCSF在OSCC组织和HSC-4细胞中高表达,在正常牙龈组织和人永生化角质形成细胞(Hacat)中低表达。shMCSF组HSC-4细胞迁移和增殖能力较shNC组减弱,shMCSF组HSC-4细胞凋亡能力较shNC组增强(P<0.05)。结论MCSF在OSCC中表达升高,并可促进OSCC细胞迁移和增殖,减少凋亡。 展开更多

关键词 巨噬细胞集落刺激因子 口腔鳞状细胞癌 迁移 凋亡 增殖

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微小RNA-302a-3p靶向溶酶体相关膜蛋白5抑制口腔鳞状细胞癌侵袭转移的研究

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作者 余丽 周铁军 +8 位作者 吴晓 蔺辛红 张晓艳 赖永先 廖新月 斯航 冯云 简洁 冯燕 《华西口腔医学杂志》 北大核心 2025年第4期547-558,共12页

目的探讨溶酶体相关膜蛋白5(LAMP5)和miR-302a-3p在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对OSCC侵袭转移的影响。方法癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析OSCC中LAMP5的表达及其作为预后指标的灵敏度。蛋白质印迹、定量聚合酶链反应(qRT-PCR)... 目的探讨溶酶体相关膜蛋白5(LAMP5)和miR-302a-3p在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及其对OSCC侵袭转移的影响。方法癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析OSCC中LAMP5的表达及其作为预后指标的灵敏度。蛋白质印迹、定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和细胞免疫染色检测LAMP5在OSCC组织及细胞中的表达。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)、细胞免疫染色、迁移和侵袭实验评估LAMP5对细胞增殖、迁移和侵袭的影响。微小RNA(miR)靶向预测网站预测调控LAMP5的miR并采用双荧光素酶报告实验验证。裸鼠荷瘤模型评估敲低LAMP5对OSCC生长的影响。结果LAMP5在OSCC组织和细胞中高表达且具有较高的诊断灵敏度。敲低LAMP5显著抑制OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭;而过表达LAMP5则促进OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭。LAMP5的表达受miR-302a-3p的调控。敲低LAMP5显著抑制荷瘤小鼠OSCC肿瘤的生长。结论LAMP5通过增加OSCC细胞的增殖、迁移和侵袭促进OSCC的恶性进展,其表达受到miR-302a-3p因子的负向调控。 展开更多

关键词 微小RNA-302a-3p 溶酶体相关膜蛋白5 口腔鳞状细胞癌 侵袭转移

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CD105标记的微血管密度在口腔黏膜良性淋巴组织增生病的表达及与临床病理特征的相关性 被引量：2

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作者 张昊 李荷香 +3 位作者 赵亚男 刘慧娟 刘旭倩 侯亚丽 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期846-850,共5页

目的:观察微血管密度(MVD)在口腔黏膜良性淋巴组织增生病(BLOM)的表达,分析其与临床病理特征之间的相关性。方法:用免疫组织化学染色法检测CD105-MVD在30例BLOM和15例正常黏膜中的表达,分析其与临床病理特征之间的相关性。结果:与正常... 目的:观察微血管密度(MVD)在口腔黏膜良性淋巴组织增生病(BLOM)的表达,分析其与临床病理特征之间的相关性。方法:用免疫组织化学染色法检测CD105-MVD在30例BLOM和15例正常黏膜中的表达,分析其与临床病理特征之间的相关性。结果:与正常对照组相比,BLOM组CD105-MVD计数明显增多(P<0.05)。BLOM组内肿物型、非糜烂型和糜烂型CD105-MVD计数依次升高(P<0.05),但两两比较,CD105-MVD计数仅在肿物型和糜烂型BLOM中有统计学意义(P<0.001 7)。CD105-MVD计数和BLOM炎症程度相关,轻中度炎症组BLOM CD105-MVD计数明显低于重度炎症组(P<0.05)。结论:BLOM中有明显的血管生成现象,CD105可能参与了其中的血管形成。 展开更多

关键词 黏膜良性淋巴组织增生病(BLOM) CD105 MVD 病理特征

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肥大细胞在口腔黏膜良性淋巴组织增生病中的表达及与临床病理的关系 被引量：1

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作者 张昊 刘慧娟 +3 位作者 李荷香 宋鹏 刘旭倩 侯亚丽 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期482-486,共5页

目的:探讨肥大细胞(mast cell,MC)在口腔黏膜良性淋巴组织增生病(benign lymphoadenosis of oral mucosa,BLOM)中的表达及与临床病理关系。方法:甲苯胺蓝组织化学和免疫组化染色观察30例BLOM和15例正常黏膜MC数量、脱颗粒率,分析其与临... 目的:探讨肥大细胞(mast cell,MC)在口腔黏膜良性淋巴组织增生病(benign lymphoadenosis of oral mucosa,BLOM)中的表达及与临床病理关系。方法:甲苯胺蓝组织化学和免疫组化染色观察30例BLOM和15例正常黏膜MC数量、脱颗粒率,分析其与临床病理关系。结果:2种染色MC总数及甲苯胺蓝染色MC脱颗粒率较正常黏膜增高(P<0.05),与年龄、性别、部位、病程及炎症轻重程度和黏膜固有层淋巴滤泡的形成无明显相关性(P>0.05)。结论:MC总数和脱颗粒率在BLOM明显增高,提示MC增殖和脱颗粒在BLOM发生发展中发挥重要作用。 展开更多

关键词 黏膜良性淋巴组织增生病(BLOM) 口腔 肥大细胞(MC) 脱颗粒

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TRPM4通道对人口腔颊黏膜成纤维细胞增殖和迁移的影响

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作者 王薛藤 聂敏海 +2 位作者 左东川 邓浩 曾锦 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第5期490-495,共6页

目的:验证TRPM4(transient receptor potential melastatin-4)在口腔颊黏膜成纤维细胞的表达,探讨其对人口腔颊黏膜成纤维细胞迁移与增殖中的作用。方法:收集人正常颊黏膜组织进行原代细胞提取与原代培养;采用RT-PCR和细胞免疫荧光方法... 目的:验证TRPM4(transient receptor potential melastatin-4)在口腔颊黏膜成纤维细胞的表达,探讨其对人口腔颊黏膜成纤维细胞迁移与增殖中的作用。方法:收集人正常颊黏膜组织进行原代细胞提取与原代培养;采用RT-PCR和细胞免疫荧光方法检测成纤维细胞中TRPM4的表达。全细胞膜片钳记录成纤维细胞TRPM4通道的全细胞电流。MTT法和细胞划痕实验分别检测应用TRPM4通道特异性阻断剂(9-菲酚)或特异性siRNA抑制TRPM4通道的功能对成纤维细胞增殖和迁移的影响。结果:人口腔颊黏膜成纤维细胞功能性表达TRPM4。抑制TRPM4通道的功能能够明显降低成纤维细胞的增殖和迁移能力。结论:TRPM4通道参与成纤维细胞增殖以及迁移能力的调控。 展开更多

关键词 颊黏膜成纤维细胞 TRPM4 细胞增殖 细胞迁移

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误诊为慢性口腔溃疡病变的弥漫性大B细胞淋巴瘤病例报告及依据文献的患者生存分析 被引量：5

9

作者 张梦莲 聂敏海 +3 位作者 刘耀强 李丹 胡馨月 刘旭倩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期500-504,共5页

目的:探讨硬腭部位被误诊为慢性口腔溃疡病变的非霍奇金(NHL)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法:回顾性分析1例发生在硬腭以溃疡为临床表现并诊断为DLBCL患者的临床、病理资料,行HE染色,免疫组化SP法检... 目的:探讨硬腭部位被误诊为慢性口腔溃疡病变的非霍奇金(NHL)弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的临床病理特征、诊断及鉴别诊断。方法:回顾性分析1例发生在硬腭以溃疡为临床表现并诊断为DLBCL患者的临床、病理资料,行HE染色,免疫组化SP法检测病变及周围组织形态及其中相关蛋白和基因表达。从TCGA数据库下载46例DLBCL患者的转录本、临床数据及生存数据,用Logrank检验Kaplan Meier(KM)生存分析比较高低表达两组之间的生存差异。结果:硬腭病损临床表现似溃疡,无特异性,病变及周围组织中Bcl2、Bcl6、CD20、CD45、PAX5、MUM1阳性,vimentin部分阳性,CD3少量阳性;Ki-67阳性率约为80%;CD10、CD21、CD30、CyclinD1、S-100、CKpan阴性。EBER原位杂交阴性。细胞形态特征及免疫组化表型符合DLBCL。MUM1表达与无病生存期(DFS)有明显关联(P=0.033),高表达组的DFS更短。结论:首发在硬腭的结外型DLBCL临床可以以慢性口腔溃疡为表征,易误诊,结合病理学、免疫组化及原位杂交检测可提高本病诊断的准确性。 展开更多

关键词 口腔溃疡 误诊 病理 弥漫性大B-细胞淋巴瘤 硬腭

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四川泸州地区口腔扁平苔藓致病危险因素分析 被引量：10

10

作者 郭梦瑶 聂敏海 刘旭倩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期632-636,共5页

目的:探究四川泸州地区口腔扁平苔藓(OLP)致病危险因素。方法:纳入至西南医科大学附属口腔医院就诊的OLP患者(病例组,n=171)及同期的口腔黏膜健康者(对照组,n=165)进行22个变量的问卷调查,所得数据行单因素分析后再行Logistic回归分析,... 目的:探究四川泸州地区口腔扁平苔藓(OLP)致病危险因素。方法:纳入至西南医科大学附属口腔医院就诊的OLP患者(病例组,n=171)及同期的口腔黏膜健康者(对照组,n=165)进行22个变量的问卷调查,所得数据行单因素分析后再行Logistic回归分析,筛选出危险因素并进行危险度的排序。结果:单因素分析显示13个变量可能对OLP的发病有影响(P<0.05),Logistic分析显示OLP致病因素按危险度从高至低排列为:失眠、抑郁、性别(女性)、喜食熏烤类食物、焦虑、消化系统疾病、年龄、口内局部刺激。结论:OLP为多因素疾病,其预防措施的制定须从多方面考虑。 展开更多

关键词 口腔扁平苔藓(OLP) 危险因素 LOGISTIC回归分析

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miR-149-5p靶向FGF5调节人口腔鳞状细胞癌细胞凋亡和上皮-间质转换及微管形成 被引量：4

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作者 卢霞 王忠朝 +2 位作者 邓霞 范丽苑 李文慧 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1479-1485,共7页

目的:探究miR-149-5p对人口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞凋亡、上皮-间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及微管形成的影响及作用机制。方法:miR-149-5p mimic(mimic)和pcDNA-FGF5(FGF5)单转或共... 目的:探究miR-149-5p对人口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞凋亡、上皮-间质转换(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及微管形成的影响及作用机制。方法:miR-149-5p mimic(mimic)和pcDNA-FGF5(FGF5)单转或共转CAL-27细胞系,RT-PCR、Western blot检测FGF5表达;双荧光素酶报告实验验证miR-149-5p和FGF5靶向关系;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测Bax/Bcl-2蛋白表达;观察EMT细胞形态转化,Western blot检测CAL-27细胞上皮标记物E-钙黏蛋白(E-cadherin,E-cad)及间质标记物N-钙黏蛋白(N-cadherin,N-cad)表达;成管实验检测CAL-27细胞微管样形成能力,Western blot检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达。结果:miR-149-5p mimic能明显抑制CAL-27细胞中FGF5的表达(P=0.000);miR-149-5p mimic能明显减弱FGF5野生质粒的荧光素酶活性(P=0.000);miR-149-5p mimic可明显上调CAL-27细胞凋亡率及Bax/Bcl-2比值(P=0.000),并逆转FGF5过表达导致的细胞凋亡率(P=0.014)及Bax/Bcl-2比值上调(P=0.000)。miR-149-5p mimic抑制EMT细胞形态由圆形到纺锤形转变,并逆向转换FGF5过表达导致的间质样细胞形态。miR-149-5p mimic可上调CAL-27细胞中E-cad的表达(P=0.000)、下调N-cad的表达(P=0.000),逆转FGF5过表达引起的E-cad表达下调(P=0.020)和N-cad表达上调(P=0.000)。miR-149-5p过表达能明显抑制CAL-27细胞微管结节形成(P=0.002),降低VEGF蛋白表达水平(P=0.000),逆转过表达FGF5引起的VEGF表达上调(P=0.000)。结论:miR-149-5p能抑制OSCC细胞的EMT和微管形成能力并促进细胞凋亡,作用机制与靶向抑制FGF5表达有关。 展开更多

关键词 miR-149-5p 口腔鳞状细胞癌 上皮-间质转换 微管形成 细胞凋亡 FGF5

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饰胶蛋白聚糖与口腔鳞状细胞癌发生发展的相关性研究 被引量：3

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作者 赖永先 聂敏海 +1 位作者 陈潇 刘旭倩 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2020年第5期437-442,共6页

目的:探讨饰胶蛋白聚糖(Decorin,DCN)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达和意义,及DCN影响OSCC发生发展的可能机制。方法:采用免疫组织化学法检测DCN、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EG... 目的:探讨饰胶蛋白聚糖(Decorin,DCN)在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达和意义,及DCN影响OSCC发生发展的可能机制。方法:采用免疫组织化学法检测DCN、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、致癌基因C-Myc和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂(cyclin dependent kinase inhibitor,P21)四种因子在OSCC组织和正常口腔黏膜组织中的表达;用脂质体法将DCN质粒转入HSC-3细胞中,采用Real time PCR和Western blot检测DCN过表达对EGFR、C-Myc和P21表达的影响。结果:随着OSCC分化程度的降低,DCN蛋白和P21蛋白的阳性表达率逐渐降低,EGFR蛋白和C-Myc蛋白的阳性表达率逐渐升高(P<0.05);与空载体组和对照组相比,转染组EGFR和C-Myc mRNA表达量和蛋白表达水平皆降低,P21 mRNA表达量和蛋白表达水平皆升高(P<0.05)。结论:DCN与OSCC的发生、发展过程紧密相关,其对OSCC的作用可能通过调节EGFR、C-Myc和P21实现。 展开更多

关键词 鳞状细胞癌 饰胶蛋白聚糖 表皮生长因子受体 致癌基因 细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂

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黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化的影响 被引量：2

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作者 邹湘渝 曾琴 +1 位作者 刘萍 聂敏海 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期17-22,共6页

目的探究黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的影响。方法不同浓度(0、1、5、10μmol·L-1)的TAE226作用于人口腔鳞状细胞癌HSC-3和HSC-4细胞24、48、72 h后,实时定量聚合酶链反应检测EMT标志物E-... 目的探究黏着斑激酶抑制剂TAE226对人口腔鳞状细胞癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的影响。方法不同浓度(0、1、5、10μmol·L-1)的TAE226作用于人口腔鳞状细胞癌HSC-3和HSC-4细胞24、48、72 h后,实时定量聚合酶链反应检测EMT标志物E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的mRNA表达;蛋白质印迹法检测E-cadherin、Vimentin在TAE226作用48 h后的蛋白表达。结果实时定量聚合酶链反应检测表明,随着TAE226作用时间和浓度的增加,E-cadherin mRNA的表达增加,Vimentin mRNA的表达降低(P<0.05)。蛋白质印迹法检测表明,随着TAE226浓度的增加,E-cadherin蛋白的表达增加,Vimentin蛋白的表达降低(P<0.05)。结论TAE226能有效抑制人口腔鳞状细胞癌细胞株的EMT进程,有望成为治疗口腔鳞状细胞癌的有效药物之一。 展开更多

关键词 黏着斑激酶抑制剂TAE226 上皮间质转化 口腔鳞状细胞癌

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外泌体为载体的微小RNA-1基因运送抑制人口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖的研究 被引量：2

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作者 伍宝琴 黎春晖 +1 位作者 张梦莲 聂敏海 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期136-142,共7页

目的用供体细胞基因过表达的方法构建微小RNA-1(miR-1)高表达的细胞内源性外泌体,探讨以外泌体为载体,运送miR-1对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖的作用。方法采用超速离心法提取过表达miR-1的HEK293细胞的外泌体,并用透射电子显微镜、... 目的用供体细胞基因过表达的方法构建微小RNA-1(miR-1)高表达的细胞内源性外泌体,探讨以外泌体为载体,运送miR-1对口腔鳞状细胞癌CAL-27细胞增殖的作用。方法采用超速离心法提取过表达miR-1的HEK293细胞的外泌体,并用透射电子显微镜、纳米颗粒分析仪、Western blot及定量聚合酶链反应(qPCR)进行外泌体鉴定。过表达miR-1的HEK293细胞外泌体(miR1-EXO)、HEK293细胞的外泌体(CON-EXO)及等体积磷酸盐缓冲液(PBS)分别与CAL-27细胞共培养,用免疫荧光检测外泌体向细胞的转运,用qPCR检测CAL-27细胞miR-1及下游靶基因MET的表达变化,用噻唑蓝比色法(MTT)检测CAL-27细胞增殖情况,用流式细胞术进行细胞周期检测。同时,miR1-EXO、CON-EXO及等体积PBS分别与人正常口腔黏膜上皮角化细胞(NOK)共培养,用MTT法检测NOK细胞增殖情况。结果miR1-EXO、CON-EXO均呈典型的球形或杯状结构,直径约110 nm,并高表达外泌体标志性蛋白CD9、Alix及Tsg101。miR1-EXO中miR-1的表达量为285.80±14.33,CON-EXO的表达量为1.00±0.06,二者间有统计学差异(P<0.0001)。免疫荧光及qPCR结果显示,与CAL-27细胞共培养后,miR1-EXO被CAL-27细胞摄取,miR1-EXO CAL-27细胞的miR-1表达水平高于CONEXO及PBS,miR-1下游靶基因MET表达水平下调。MTT及细胞周期结果显示,与CAL-27细胞共培养后,miR1-EXO G0/G1期细胞比例高于CON-EXO和PBS,抑制CAL-27细胞增殖,而miR1-EXO对NOK细胞增殖的影响很小。结论供体细胞基因过表达的方法可使过表达miR-1的HEK293细胞分泌高表达miR-1的外泌体,并且高表达miR-1的外泌体可以将miR-1运送到CAL-27细胞,下调MET基因表达,抑制CAL-27细胞增殖。 展开更多

关键词 外泌体 微小RNA-1 口腔鳞状细胞癌 细胞增殖

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小分子锌指蛋白1在4-硝基喹啉-N-氧化物诱导SD大鼠颊黏膜癌变中的表达研究

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作者 余丽 刘旭倩 +2 位作者 陈雨荷 陈潇 聂敏海 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期133-138,共6页

目的研究口腔黏膜癌变中小分子锌指蛋白1(LMO1)在基因转录和蛋白水平的表达变化。方法取本课题组前期4-硝基喹啉-N-氧化物(4NQO)饮水法构建鳞癌动物模型的49例样本进行苏木精-伊红(HE)染色,依据上皮异常增生程度确定实验组病理分级并确... 目的研究口腔黏膜癌变中小分子锌指蛋白1(LMO1)在基因转录和蛋白水平的表达变化。方法取本课题组前期4-硝基喹啉-N-氧化物(4NQO)饮水法构建鳞癌动物模型的49例样本进行苏木精-伊红(HE)染色,依据上皮异常增生程度确定实验组病理分级并确定实验分组;免疫组织化学染色定性确定LMO1的表达部位;实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)和Western blot检测5组样本中LMO1 mRNA和蛋白的表达。结果HE染色确定对照组7例,轻度组6例,中度组11例,重度组9例,OSCC组16例。免疫组织化学染色检测可见,LMO1主要表达于细胞质,对照组、轻度组、中度组、重度组和OSCC组的阳性表达率分别为14.3%、33.3%、81.8%、88.9%、93.8%。RT-qPCR检测可见,对照组LMO1 mRNA的表达量最低,OSCC组最高,对照组与轻度组间mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),其余各组组间两两比较,mRNA的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测可见,随着上皮异常增生程度的加重,LMO1的蛋白表达量逐渐上升,在OSCC组中表达最高。结论口腔黏膜癌变进程中,LMO1 mRNA和蛋白异常表达,且mRNA和蛋白表达量随上皮异常增生程度的加重而增加。 展开更多

关键词 小分子锌指蛋白1 口腔鳞状细胞癌 上皮异常增生

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原发性干燥综合征发病机制的研究进展 被引量：14

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作者 刘茂华 聂敏海 +1 位作者 陈中林 刘旭倩(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1017-1020,共4页

原发性干燥综合征(pSS)是一种慢性自身免疫性疾病,其发病机制尚未明确,也无较好的治疗方法。随着分子生物学技术日趋成熟,pSS研究已逐步向分子水平深入,本文就目前国内外pSS发病机制研究进行综述,以期为明确其发病机制及探究其治疗方法... 原发性干燥综合征(pSS)是一种慢性自身免疫性疾病,其发病机制尚未明确,也无较好的治疗方法。随着分子生物学技术日趋成熟,pSS研究已逐步向分子水平深入,本文就目前国内外pSS发病机制研究进行综述,以期为明确其发病机制及探究其治疗方法提供参考。 展开更多

关键词 原发性干燥综合征 发病机制 靶向治疗 表观遗传修饰 代谢异常

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阿司匹林对人牙龈成纤维细胞增殖及凋亡的影响 被引量：4

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作者 邱燕玲 聂敏海 +2 位作者 余丽 陈雨荷 刘旭倩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期598-601,共4页

目的:探讨阿司匹林对人牙龈成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法:原代培养人牙龈成纤维细胞( HGFs),免疫组化鉴定,MTT 法筛选最佳代次,CCK-8 法、流式细胞仪检测法检测不同浓度阿司匹林作用后HGFs 的增殖、凋亡情况。结果:原代和传代培养... 目的:探讨阿司匹林对人牙龈成纤维细胞增殖、凋亡的影响。方法:原代培养人牙龈成纤维细胞( HGFs),免疫组化鉴定,MTT 法筛选最佳代次,CCK-8 法、流式细胞仪检测法检测不同浓度阿司匹林作用后HGFs 的增殖、凋亡情况。结果:原代和传代培养的HGFs 呈成纤维细胞样。免疫组化显示细胞Vimentin 表达阳性,CK 表达阴性。MTT 结果显示第3 代HGFs增殖活跃。CCK-8 显示低浓度组( 0. 25 ~ 0. 8 mol /L)阿司匹林促进HGFs 增殖,中( 2 ~ 6 mol /L)、高( 8 ~ 12 mol /L)浓度组均抑制HGFs 增殖,各组内差异无统计学意义( P > 0. 05),组间差异有统计学意义( P < 0. 05)。流式结果显示中高浓度组阿司匹林促进HGFs 凋亡,组间比较( P < 0. 05)。结论:低浓度阿司匹林促进HGFs 增殖,中高浓度阿司匹林可诱导HGFs 凋亡。 展开更多

关键词 阿司匹林 人牙龈成纤维细胞( HGFs) 细胞增殖 细胞凋亡

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HSG细胞中MBD2对AQP5表达的调控作用 被引量：2

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作者 陈中林 聂敏海 +4 位作者 贾颖 叶艳艳 邓舒婷 黄葳 刘旭倩 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期955-960,共6页

目的探讨人下颌下腺细胞(human submandibular gland,HSG)中,甲基化CpG结合域蛋白2(menthyl-CpG-binding domain protein 2,MBD2)是否影响水通道蛋白调控-5(aquaporin 5,AQP5)的表达,为干燥综合征(Sj?gren’s syndrome,SS)的治疗提供新... 目的探讨人下颌下腺细胞(human submandibular gland,HSG)中,甲基化CpG结合域蛋白2(menthyl-CpG-binding domain protein 2,MBD2)是否影响水通道蛋白调控-5(aquaporin 5,AQP5)的表达,为干燥综合征(Sj?gren’s syndrome,SS)的治疗提供新的思路。方法体外培养HSG细胞,通过AQP5的启动子质粒与MBD2-siRNA或MBD2过表达质粒共转染HSG细胞,利用双荧光素酶报告基因系统检测AQP5启动子的活性;再用MBD2-siRNA或MBD2过表达质粒转染HSG细胞,利用RT-PCR及Western blot技术检测MBD2和AQP5在mRNA水平及蛋白水平上表达的改变。结果①MBD2-siRNA转染HSG细胞后,AQP5 pro活性分别上调49.30%和58.35%(P<0.05), AQP5在mRNA水平上表达上调35.40%和471.19%(P<0.05),蛋白水平上调56.16%和82.78%(P<0.05)。结果表明:MBD2-siRNA转染HSG细胞后,AQP5启动子活性增加,AQP5表达上调。②MBD2过表达质粒转染HSG细胞后,AQP5 pro活性分别下调25.36%、30.52%及34.78%(P<0.05), AQP5在mRNA水平上表达下调8.06%和87.60%(过表达质粒1μg组与对照组相比无统计学意义,P>0.05;过表达质粒2μg组与对照组相比差异有统计学意义P<0.05),在蛋白水平上表达下调44.50%和53.18%(P<0.05)。实验结果表明:MBD2转染ASG细胞后,AQP5启动子活性降低,AQP5的表达下降(P<0.05)。结论 MBD2可以下调AQP5的表达,这与SS患者的AQP5表达趋势一致,因此MBD2可能成为干燥综合征基因治疗的新靶点。 展开更多

关键词 干燥综合征 MBD2 AQP5 基因治疗

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白细胞表达趋势在监测癌前病损和OSCC早期诊断中的价值研究 被引量：2

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作者 李腾艳 聂敏海 +1 位作者 陈潇 刘旭倩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期753-757,共5页

目的:探讨白细胞表达趋势在监测癌前病损和OSCC早期诊断中的价值。方法:对OSCC患者(52例)、口腔扁平苔藓(OLP)患者(61例)及正常口腔黏膜(NOM)者(55例)血常规中白细胞各项参数进行回顾性分析。结果:在OSCC组中:MONO、MONO-R、EOS、EOS-R... 目的:探讨白细胞表达趋势在监测癌前病损和OSCC早期诊断中的价值。方法:对OSCC患者(52例)、口腔扁平苔藓(OLP)患者(61例)及正常口腔黏膜(NOM)者(55例)血常规中白细胞各项参数进行回顾性分析。结果:在OSCC组中:MONO、MONO-R、EOS、EOS-R指标均高于OLP和(或)NOM组;BASO、BASO-R、LYM、LYM-R指标低于NOM和(或)OLP组(P<0.05)。结论:白细胞亚型的表达趋势可能作为监测OLP即癌前病损恶变、早期诊断OSCC的依据。 展开更多

关键词 白细胞 口腔鳞状细胞癌(OSCC) 癌前病损 炎症 超敏反应

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