外泌体介导的靶向基因运送及在心血管疾病中的应用 被引量：5

1

作者 李雪 党喜同 曾晓荣 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1286-1294,共9页

外泌体是体内几乎所有细胞分泌的具有双层脂质膜结构的纳米级小囊泡。外泌体大小均匀,平均直径为40-120 nm,存在于所有体液中。外泌体曾一度被认为是细胞成熟过程中清除废弃细胞器的‘垃圾袋’。但近年研究显示：外泌体含有丰富的来源... 外泌体是体内几乎所有细胞分泌的具有双层脂质膜结构的纳米级小囊泡。外泌体大小均匀,平均直径为40-120 nm,存在于所有体液中。外泌体曾一度被认为是细胞成熟过程中清除废弃细胞器的‘垃圾袋’。但近年研究显示：外泌体含有丰富的来源于‘供体细胞’的信号分子,如蛋白质、DNA、mRNA、miRNA以及lncRNA等。当外泌体与‘受体细胞’融合时,这些信号分子便被运送到‘受体细胞’,从而实现细胞-细胞之间的通讯,影响‘受体细胞’的生理病理过程。虽然外泌体的研究目前主要集中在癌症等疾病的预防、诊断与治疗中,但是越来越多的研究显示,外泌体在心血管系统的生理及病理过程中同样发挥着重要作用。本文将对外泌体的起源、分离与纯化方法及外泌体介导的‘细胞-细胞’之间的通讯机制进行综述,并重点论述利用基因工程技术对外泌体进行靶向运输的方法及靶向外泌体运送在心血管疾病治疗中的应用。 展开更多

关键词 外泌体 MIRNA 靶向基因运送 心血管疾病 基因治疗

全文增补中

膜电位对人牙囊干细胞成骨分化的作用及其电生理机制研究

2

作者 顾煜婕 杨宜丹 +6 位作者 廖思琪 王荷一 周蕊 兰小蓉 徐晓梅 左东川 曾锦 《口腔医学研究》 北大核心 2025年第5期413-419,共7页

目的:探讨膜电位对人牙囊干细胞(human dental follicle stem cells,hDFCs)成骨分化的作用及其电生理机制。方法:组织块结合酶消化法分离、培养hDFCs。构建载有人Kir2.1钾通道特异短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)基因序列的慢病毒... 目的:探讨膜电位对人牙囊干细胞(human dental follicle stem cells,hDFCs)成骨分化的作用及其电生理机制。方法:组织块结合酶消化法分离、培养hDFCs。构建载有人Kir2.1钾通道特异短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)基因序列的慢病毒载体。采用慢病毒转染结合Kir2.1钾通道特异阻断剂(4-甲氧基苄基-1-萘基甲基-胺盐,ML133),通过成骨分化诱导、茜素红染色、定量逆转录聚合酶链反应(real-time reverse transcriptase-polymerase chain reaction,RT-qPCR)以及全细胞膜片钳实验方法,观察药物阻断Kir2.1钾通道的功能或抑制Kir2.1钾通道的表达对hDFCs成骨分化能力以及膜电位的影响。降低细胞外钾离子的浓度(1 mmol/L),通过钙离子成像观察促使膜电位超极化对细胞内钙离子浓度的影响。采用钙池操纵钙通道(store-operated Ca^(2+)channels,SOCs)阻断剂(La^(3+))以及内质网钙泵阻断剂毒胡萝卜素(Thapsigargin,TG),通过钙离子成像鉴定SOCs通道在hDFCs介导的钙离子内流,并评估其在膜电位超极化导致hDFCs胞内钙离子浓度变化中的作用。结果:茜素红染色、RT-qPCR以及全细胞膜片钳结果显示,药物阻断Kir2.1钾通道的功能或抑制Kir2.1钾通道的表达能够抑制hDFCs成骨矿化能力、成骨相关基因(RUNT相关转录因子2、骨钙素)的表达,并能够逆转hDFCs成骨分化过程中发生的膜电位超极化。钙成像结果显示:(1)SOCs通道介导hDFCs的钙离子内流。(2)促使膜电位超极化能够引起hDFCs胞内钙离子浓度的升高,该作用可被药物阻断Kir2.1钾通道的功能或抑制Kir2.1钾通道的表达抑制;可通过移除细胞外钙离子抑制;可被SOCs通道阻断剂抑制。结论:Kir2.1钾通道介导的膜电位超极化参与hDFCs成骨分化的调控,其机制与hDFCs胞内钙离子浓度的升高有关,而SOCs通道介导的钙离子内流在这一过程中起到重要作用。 展开更多

关键词 人牙囊细胞 成骨分化 Kir2.1通道 膜电位超极化 钙离子

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温度敏感型离子通道基因在哺乳动物内脏器官和血管中的表达研究 被引量：2

3

作者 刘浩然 范新荣 +2 位作者 李鹏云 李涛 曾博 《四川动物》 北大核心 2016年第4期517-522,共6页

温度敏感型离子通道广泛存在于哺乳动物内脏器官和血管组织,在多种生理功能的调节中起重要作用。本研究以雄性比格犬和雄性SD大鼠的心脏、肝、脾、肾、肺、主动脉、肺动脉、肺静脉、股动脉、股静脉及颈总动脉为材料提取RNA,经逆转录PCR... 温度敏感型离子通道广泛存在于哺乳动物内脏器官和血管组织,在多种生理功能的调节中起重要作用。本研究以雄性比格犬和雄性SD大鼠的心脏、肝、脾、肾、肺、主动脉、肺动脉、肺静脉、股动脉、股静脉及颈总动脉为材料提取RNA,经逆转录PCR以及半定量方法获得这些通道基因的表达情况。结果显示:TRPV1在2种动物的上述组织中均有表达,而TRPV2和TRPM5在所有组织中均无表达;TRPV3仅表达在大鼠的肝、肺及肺动脉中,在狗的所有组织中均无表达;TRPV4在狗的肺中无表达,在2种动物的其他组织中均有表达;TRPM2在大鼠的主动脉、心脏、肺动脉中无表达,在2种动物的其他组织中均有表达;TRPM3在狗的肺、肺动脉及大鼠的肺、心脏、主动脉中无表达,在2种动物的其他组织中均有表达;TRPM4在狗的肺动脉以及大鼠的脾、肾、心脏中没有检测到表达,在2种动物的其他组织中均有表达;TRPM8在狗的肝、脾、肾以及大鼠的肾中无表达,在2种动物的其他组织中均有表达;TRPA1仅在大鼠的肺和脾中有表达。本研究比较全面地展示了温度敏感型离子通道基因在哺乳动物内脏器官和血管中的表达情况,为进一步探究其在哺乳动物生理调节中的功能奠定基础。 展开更多

关键词 温度敏感 瞬时电位受体通道 哺乳动物 基因表达 内脏器官 血管

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钙泄漏发生机制及其与心房颤动作用关系的研究进展 被引量：3

4

作者 申华 奚望 +3 位作者 王擎 高阳 李妙龄 王志农 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期646-650,共5页

钙离子作为一种普遍存在的信使参与了各种细胞的病理生理过程。钙信号与心肌细胞的收缩性和兴奋性相关,心房肌细胞钙稳态异常是心房颤动发生的重要机制之一,肌浆网钙通道2型雷尼丁受体(ryanodine receptor2,Ry R2)稳定性下降导致的钙泄... 钙离子作为一种普遍存在的信使参与了各种细胞的病理生理过程。钙信号与心肌细胞的收缩性和兴奋性相关,心房肌细胞钙稳态异常是心房颤动发生的重要机制之一,肌浆网钙通道2型雷尼丁受体(ryanodine receptor2,Ry R2)稳定性下降导致的钙泄漏是钙稳态异常的重要原因。钙泄漏包括钙火花、钙波,可引发异常除极活动甚至动作电位,在心房病理改变基质的基础上诱发心房颤动。本文主要总结了钙泄漏的表现形式、影响因素及其在心房颤动发生和发展中的作用。 展开更多

关键词 2型雷尼丁受体 钙泄漏 钙火花 钙波 心房颤动

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TWIK-1通道在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用及其机制

5

作者 张恒羲 熊蕾 +6 位作者 巫悦 吕金花 左征 李若兰 张德绸 刘平 左东川 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期895-901,共7页

目的:探讨TWIK-1通道在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用和电生理机制。方法:构建载有人TWIK-1、TWIK-1 shRNA或TWIK-1-T118i突变体基因序列的慢病毒载体。人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞(human induced pluripotent stem c... 目的:探讨TWIK-1通道在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用和电生理机制。方法:构建载有人TWIK-1、TWIK-1 shRNA或TWIK-1-T118i突变体基因序列的慢病毒载体。人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞(human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes,hiPSC-CMs)分为对照组和TWIK-1敲减组。HL-1小鼠心肌细胞分为对照组、TWIK-1通道过表达组和TWIK-1-T118i突变体通道过表达组。通过膜片钳监测细胞外低钾(1 mmol/L)对各组心肌细胞膜电位以及全细胞电流的影响。结果:电流钳结果显示,在1 mmol/L细胞外钾条件下,hiPSC-CMs以及过表达人TWIK-1通道的HL-1小鼠心肌细胞膜电位呈现去极化并导致异常自发起搏活动的发生,该现象可通过移除细胞外液钠离子或敲减TWIK-1基因消除;而对照HL-1小鼠心肌细胞以及过表达人TWIK-1-T118i突变体通道的HL-1小鼠心肌细胞膜电位呈现超极化,不伴有异常自发起搏活动的发生。电压钳结果显示,在低钾条件下,在发生异常自发起搏活动的hiPSC-CMs可记录到TWIK-1介导的钠漏电流,该电流可被TWIK-1非选择性阻断剂quinine阻断。结论:低血钾时,TWIK-1通道介导的钠漏电流导致人心肌细胞异常起搏活动的发生。 展开更多

关键词 TWIK-1双孔钾通道 低钾血症 心肌细胞 异常起搏活动

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Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾诱发心肌细胞异常起搏活动中的作用

6

作者 向晋贤 吕金花 +6 位作者 姜杨馨 曾锦 刘力 张滢莹 刘铮 王晓斌 左东川 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第6期1207-1211,共5页

目的:探讨Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用。方法:构建载有人Kir2.1、Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞(hiPSC-... 目的:探讨Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾诱发人心肌细胞异常起搏活动中的作用。方法:构建载有人Kir2.1、Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使人诱导多能干细胞分化来源心肌细胞(hiPSC-CMs)过表达Kir2.1、Kir2.1-E224G突变体或Kir4.1钾通道。通过膜片钳监测细胞外低钾(1 mmol/L)对各组hiPSC-CMs静息膜电位以及全细胞电流的影响。结果:在1 mmol/L低钾条件下,电流钳结果显示,过表达Kir2.1钾通道的hiPSC-CMs呈现双静息膜电位(超极化和去极化并存),并且在静息膜电位去极化时发生异常自发起搏活动。而过表达Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道的hiPSC-CMs静息膜电位呈现超极化且不导致异常自发起搏活动的发生。电压钳结果显示,过表达Kir2.1钾通道的hiPSC-CMs呈现N型跨膜电流;而过表达Kir2.1-E224G突变体以及Kir4.1钾通道的hiPSC-CMs呈现典型的钾通道电流。结论:Kir2.1钾通道的内向整流特性在低血钾导致人心肌细胞异常自发起搏活动的过程中起关键作用。 展开更多

关键词 Kir2.1钾通道 低钾血症 心肌细胞 异常起搏活动

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虚拟生理心脏模型及房颤机制研究进展 被引量：3

7

作者 罗存金 游婷婷 +3 位作者 刘彤 赫颖 王宽全 张恒贵 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第10期976-992,共17页

房颤是临床上最常见的持续性心律失常.揭示房颤的发病机制和病理生理过程是其诊断、预防、治疗、药物研发及临床设备设计的关键,而实验和临床只能呈现细胞或亚细胞的局部特性及房颤病症的宏观结果.随着生物信息技术、统计分析技术等的发... 房颤是临床上最常见的持续性心律失常.揭示房颤的发病机制和病理生理过程是其诊断、预防、治疗、药物研发及临床设备设计的关键,而实验和临床只能呈现细胞或亚细胞的局部特性及房颤病症的宏观结果.随着生物信息技术、统计分析技术等的发展,运用多物理尺度的虚拟生理心脏模型,来实现宏观结果与微观机制相统一的研究方法备受关注.本文综述了离子通道、心肌细胞、心脏组织及器官等多尺度的虚拟生理心脏模型研究进展,探讨了近年来基于虚拟生理心脏模型的房颤机制研究以及房颤的治疗手段,提示了房颤研究的挑战和未来的发展方向. 展开更多

关键词 心律失常 房颤 虚拟心脏 计算机仿真 计算生物学

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生物节律钟基因参与心肌缺血再灌注损伤机制的研究进展 被引量：1

8

作者 段维 谭兴 +1 位作者 叶鹏 王伟忠 《生理科学进展》 CAS 2023年第3期170-176,共7页

生物节律(biological rhythm)系统由位于下丘脑视交叉上核的中枢时钟和各种组织的外周时钟组成,负责协调机体生理功能,在维持正常的生命活动中具有重要意义。生物节律系统通过神经体液等方式参与心脏功能调控,而机体生物节律紊乱与心血... 生物节律(biological rhythm)系统由位于下丘脑视交叉上核的中枢时钟和各种组织的外周时钟组成,负责协调机体生理功能,在维持正常的生命活动中具有重要意义。生物节律系统通过神经体液等方式参与心脏功能调控,而机体生物节律紊乱与心血管疾病发生密切相关。近年来,大量研究表明心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury)程度具有明显的昼夜差异,缺血再灌注损伤后心脏的不良重构和功能障碍与生物节律钟基因相关,但其确切机制尚未明确。因此,本文就生物节律钟基因在心肌缺血再灌注损伤发生机制中的作用进行综述,为探索心肌缺血再灌注损伤的防治新策略提供理论依据。 展开更多

关键词 生物节律 钟基因 心肌缺血再灌注损伤

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纳米二氧化硅生物毒性的研究进展 被引量：3

9

作者 刘亚琴(综述) 曹济民(审校) 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2020年第2期220-224,共5页

纳米二氧化硅因为其独特的理化性质而被广泛应用于抗菌剂、分子探针、药物载体等多个领域中。由于纳米材料自身结构和功能的活跃性,其生物安全性近年来也成为毒理学研究的热点。文章综合国内外现有研究报道,从纳米二氧化硅在细胞水平和... 纳米二氧化硅因为其独特的理化性质而被广泛应用于抗菌剂、分子探针、药物载体等多个领域中。由于纳米材料自身结构和功能的活跃性,其生物安全性近年来也成为毒理学研究的热点。文章综合国内外现有研究报道,从纳米二氧化硅在细胞水平和动物水平的毒性作用、影响毒性作用的因素和毒性作用机制进行综述,为纳米二氧化硅的研发、应用和生物安全性提供参考。 展开更多

关键词 纳米二氧化硅 毒性 生物安全性

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低钾条件下TWIK-1双孔钾通道对小鼠心肌细胞膜电位的影响及其机制研究 被引量：2

10

作者 李东梅 杨雅雯 +1 位作者 党喜同 左东川 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1980-1985,共6页

目的:探讨在细胞外低钾条件下TWIK-1双孔钾通道对小鼠HL-1心肌细胞膜电位的影响及其分子机制。方法:构建载有人TWIK-1或TWIK-1-T118i突变体基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)或HL-1小鼠心肌细胞表达... 目的:探讨在细胞外低钾条件下TWIK-1双孔钾通道对小鼠HL-1心肌细胞膜电位的影响及其分子机制。方法:构建载有人TWIK-1或TWIK-1-T118i突变体基因序列的慢病毒载体。通过病毒转染的方法使中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)或HL-1小鼠心肌细胞表达TWIK-1或TWIK-1-T118i突变体。通过膜片钳记录在细胞外正常钾(5.4 mmol/L)及低钾(2.7 mmol/L)条件下的膜电位及全细胞电流。结果:电流钳结果显示,在2.7 mmol/L钾条件下,表达人TWIK-1通道的CHO细胞及HL-1小鼠心肌细胞膜电位呈现去极化,当细胞外液的钠离子被替换为N-甲基-D-葡萄糖胺(NMDG)时,膜电位去极化现象消失;而表达人TWIK-1-T118i突变体通道的CHO细胞及HL-1小鼠心肌细胞膜电位呈现超极化。电压钳结果显示,在2.7 mmol/L钾条件下,在表达人TWIK-1通道的CHO细胞及HL-1小鼠心肌细胞可记录到内向阳离子电流,当细胞外液的钠离子替换为NMDG时,该内向阳离子电流消失。结论:在细胞外低钾条件下,TWIK-1通道介导的内向钠离子电流能够引起HL-1小鼠心肌细胞膜电位发生去极化。 展开更多

关键词 低钾血症 心肌细胞 膜电位 去极化 TWIK-1双孔钾通道

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周期性张应变影响下血管平滑肌细胞分泌的外泌体携带的miRNA分析

11

作者 姜隽 曹玉 +1 位作者 朱晓玲 李涛 《医用生物力学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第A01期86-86,共1页

目的血管平滑肌细胞(VSMCs)被证明可以产生外泌体,参与VSMCs之间以及与其他细胞之间的对话。周期性张应变在调控VSMCs的生物学行为方面具有重要意义,但周期性张应变对VSMCs产生外泌体的影响尚不清楚。方法利用Flexcell FX-4000TM Tensio... 目的血管平滑肌细胞(VSMCs)被证明可以产生外泌体,参与VSMCs之间以及与其他细胞之间的对话。周期性张应变在调控VSMCs的生物学行为方面具有重要意义,但周期性张应变对VSMCs产生外泌体的影响尚不清楚。方法利用Flexcell FX-4000TM Tension系统对大鼠胸主动脉平滑肌细胞施加生理性的周期性张应变(10%,1 Hz)以及模拟高血压的周期性张应变(20%,1 Hz)24 h,收集VSMCs的培养基。低温差速离心法及聚乙二醇沉淀法获取VSMCs源性外泌体。通过透射电镜(TEM)观察外泌体形态及大小,小RNA测序法检测VSMCs在不同的周期性张应变下产生的外泌体携带的miRNAs差异。通过脂质体转染法将miR-155-5p mimics转染到体外培养的大鼠胸主动脉内皮细胞(ECs)。采用硝酸还原酶法检测ECs培养基中的内皮源性一氧化氮(NO)含量。结果 TEM检测VSMCs可产生大量直径40~100 nm的外泌体。VSMCs在模拟高血压的周期性张应变下产生的外泌体和生理性周期性张应变下产生的外泌体具有不同的miRNA表达谱。其中,miR-155-5p在模拟高血压的周期性张应变下产生的VSMCs源性外泌体中高表达。将miR-155-5p mimics转染ECs后NO合成减少。结论内皮源性一氧化氮合酶(eNOS)被报道是miR-155-5p在ECs中的靶标。高血压环境下VSMCs通过外泌体携带miR-155-5p作用于ECs并引起NO合成减少,反过来影响VSMCs的舒张功能,这可能是高血压时内皮依赖性血管舒张受损的重要原因。 展开更多

关键词 周期性张应变 高血压 生理性 miRNA 外泌体 平滑肌细胞

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针刺原位开窗胸主动脉腔内修复术治疗主动脉夹层累及主动脉弓

12

作者 朱俊龙 徐通洁 +5 位作者 李朋 代江红 陈豪 窦涠 刘勇 何虎强 《中国介入影像与治疗学》 北大核心 2024年第9期517-521,共5页

目的观察针刺原位开窗胸主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗主动脉夹层(AD)累及主动脉弓的效果。方法回顾性分析16例接受针刺原位开窗TEVAR重建主动脉弓分支的AD累及主动脉弓患者,记录开窗数目、技术成功率及治疗相关并发症;通过随访评估夹层... 目的观察针刺原位开窗胸主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗主动脉夹层(AD)累及主动脉弓的效果。方法回顾性分析16例接受针刺原位开窗TEVAR重建主动脉弓分支的AD累及主动脉弓患者,记录开窗数目、技术成功率及治疗相关并发症;通过随访评估夹层修复、开窗分支血管通畅性及有无内漏等,记录患者生存情况。结果对16例均成功植入主动脉主体支架;对其中4例植入Z0、Z1及Z2区三开窗支架,6例植入Z1及Z2区双开窗支架,2例植入Z0及Z1区双开窗支架,4例植入Z2区单开窗支架。头臂干(BCT)开窗成功率83.33%(5/6),对1例未成功开通者行左颈总动脉(LCCA)-右颈总动脉搭桥术;LCCA开窗成功率100%(12/12);左锁骨下动脉(LSA)开窗成功率87.50%(14/16),对2例未顺利开窗者改行腋-腋动脉人工血管旁路转流术。治疗技术成功率100%(16/16)。TEVAR中1例发生Ⅰa型内漏,以弹簧圈栓塞后好转;1例TEVAR结束后出现心包压塞而死亡。15例接受随访,中位随访时间20个月,期间出现短暂性脑缺血发作及主体支架近端起始处局部小夹层各1例,均未经特殊处理而改善;1例出现Ⅰ型、2例出现Ⅲ型内漏,予近端开窗覆膜支架植入或以弹簧圈栓塞后好转;1例因冠心病死亡。结论针刺原位开窗TEVAR治疗AD累及主动脉弓有效且安全。 展开更多

关键词 主动脉夹层 胸主动脉腔内修复术 原位开窗 治疗效果

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注射异丙肾上腺素建立大鼠心肌肥厚模型 被引量：6

13

作者 赵美眯 李卓 +4 位作者 杨艳 张翀翯 陈思充 曾晓荣 郝丽英 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期406-408,412,共4页

目的采用异丙肾上腺素诱导心肌肥厚,建立大鼠模型,并研究该动物模型的基本特性。方法大鼠背部皮下注射剂量为5 mg/kg的异丙肾上腺素,每日1次,连续注射14 d。结果模型组大鼠的全心重/体质量,左心室重/体质量均明显增加。模型组大鼠血清... 目的采用异丙肾上腺素诱导心肌肥厚,建立大鼠模型,并研究该动物模型的基本特性。方法大鼠背部皮下注射剂量为5 mg/kg的异丙肾上腺素,每日1次,连续注射14 d。结果模型组大鼠的全心重/体质量,左心室重/体质量均明显增加。模型组大鼠血清中羟脯氨酸(HYP)含量显著增加。模型组大鼠心肌组织中总超氧化物歧化酶(SOD)含量与对照组相比显著降低,而丙二醛(MDA)含量明显升高。结论皮下注射异丙肾上腺素14 d,可成功诱导大鼠心肌肥厚模型,为深入研究心肌肥厚的确切机制奠定基础。 展开更多

关键词 心肌肥厚 异丙肾上腺素 动物模型

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miR-1调控靶基因HCN4在风湿性心脏病心房颤动中的作用 被引量：8

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作者 付勇 毛亮 +4 位作者 李妙龄 于风旭 李新 廖斌 邓明彬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第15期2419-2423,共5页

目的通过检测风湿性心脏病(风心病)心房颤动(房颤)患者右心耳组织miR-1及其靶基因HCN4表达,探讨miR-1参与风心病房颤的可能机制。方法 36例风心病患者根据是否存在房颤,分为房颤组(AF组)和窦性心律组(SR组),术前均进行心脏彩超、心电图... 目的通过检测风湿性心脏病(风心病)心房颤动(房颤)患者右心耳组织miR-1及其靶基因HCN4表达,探讨miR-1参与风心病房颤的可能机制。方法 36例风心病患者根据是否存在房颤,分为房颤组(AF组)和窦性心律组(SR组),术前均进行心脏彩超、心电图检测,术中取右心耳组织,应用荧光定量PCR技术检测miR-1及靶基因HCN4的表达,免疫组化、Western Blot方法检测HCN4蛋白表达,应用膜片钳技术检测右心耳心肌细胞起搏电流(If)。结果 AF组miR-1基因表达小于SR组[(0.005 0±0.000 7)vs.(0.009 4±0.002 5),P <0.05];而HCN4基因表达水平AF组高于SR组[(0.255 2±0.019 4)vs.(0.159 2±0.013 1),P <0.05];免疫组化AF组HCN4蛋白表达较窦性心律组增强;Western Blot检测HCN4蛋白表达水平AF组高于SR组[(1.170 2±0.055 98)vs.(0.360 6±0.017 78),P <0.05];右心耳心肌细胞起搏电流改变,AF组半稳态激活电压(V1/2)为(-88±5.9)mV,稳态激活曲线斜率(K)为(8.2±1.8);SR组V1/2为(-97±4.5)mV,K为(11.4±2.6)。结论风心病房颤患者miR-1表达降低,调控HCN4基因、蛋白表达增高,导致房颤心肌细胞起搏电流的改变,可能参与风心病房颤的发生。 展开更多

关键词 心血管病学 风湿性心脏病 窦性心律 心房颤动 MIR-1 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道-4 起搏电流

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转化生长因子-β1受体依赖的心肌纤维化伴随大电导钙激活钾通道的表达和功能下调 被引量：5

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作者 李磊 董亚辉 +4 位作者 杨探 李秋芳 聂永梅 李光 于风旭 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2021年第6期612-618,共7页

目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)是否参与转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌纤维化过程,以及在这一过程中的作用机制。方法:分离培养乳大鼠心室成纤维细胞,并根据TGF-β1的不同浓度(5 ng/ml组、10 ng/ml组),以及在10 ng/ml TGF-β... 目的:探讨大电导钙激活钾通道(BKCa)是否参与转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的心肌纤维化过程,以及在这一过程中的作用机制。方法:分离培养乳大鼠心室成纤维细胞,并根据TGF-β1的不同浓度(5 ng/ml组、10 ng/ml组),以及在10 ng/ml TGF-β1基础上加入不同浓度TGF-β1受体特异阻断剂SB431542(0.1μmol/L组、1μmol/L组、10μmol/L组)进行分组,处理后提取蛋白及RNA,应用蛋白免疫印迹(Western blot)和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组TGF-β1受体蛋白,α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(CollagenⅢ)、BKCa蛋白和信使RNA(mRNA)的表达情况。单通道及全细胞膜片钳技术记录TGF-β1作用24 h前后的BKCa电流特点及其变化情况。结果:TGF-β15 ng/ml组和10 ng/ml组均上调TGF-β1受体蛋白,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白和mRNA的表达,10 ng/ml组TGF-β1下调BKCa蛋白和mRNA的表达。与TGF-β110 ng/ml组相比,在10 ng/ml TGF-β1基础上加入SB4315421μmol/L组、10μmol/L组下调TGF-β1受体蛋白,α-SMA、CollagenⅠ、CollagenⅢ蛋白和mRNA的表达,加入SB43154210μmol/L组上调BKCa蛋白和mRNA的表达,差异均具有统计学意义。此外,单通道及全细胞膜片钳技术记录结果表明TGF-β1预处理24 h后可明显抑制成纤维细胞上BKCa电流。结论:BKCa可能参与了TGF-β1诱导乳大鼠心室成纤维细胞纤维化通路,其机制可能是TGF-β1抑制了成纤维细胞上BKCa的电流。这提示BKCa可能是防治心肌纤维化的潜在靶点。 展开更多

关键词 心肌纤维化 转化生长因子Β1 转化生长因子β1受体阻断剂SB431542 大电导钙激活钾通道 乳大鼠心室成纤维细胞

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老龄大鼠行心肺转流术建立长期术后认知功能障碍模型 被引量：3

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作者 袁雪梅 张英 +3 位作者 陈齐 李妙龄 袁建蓉 刘庆 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1204-1207,共4页

目的通过在老龄大鼠行脾切除术或心肺转流（CPB）术建立术后认知功能障碍（postoperative cognitive dysfunction,POCD）模型。方法健康雄性SPF级SD大鼠60只,18月龄,随机分为脾切除术组（A组）、CPB术组（B组）及空白对照组（C组）,每... 目的通过在老龄大鼠行脾切除术或心肺转流（CPB）术建立术后认知功能障碍（postoperative cognitive dysfunction,POCD）模型。方法健康雄性SPF级SD大鼠60只,18月龄,随机分为脾切除术组（A组）、CPB术组（B组）及空白对照组（C组）,每组20只,术后第31~35天进行Morris水迷宫、穿梭箱实验及旷场实验,评估大鼠认知功能。结果与C组比较,B组穿越原平台次数明显减少[（5.2±2.2）次vs.（8.6±3.2）次],主动回避反应次数明显减少[（12.3±2.7）次vs.（15.2±1.8）次],主动回避反应潜伏期明显延长[（9.50±2.31）s vs.（5.14±1.43）s],修饰次数[（13.8±2.6）次vs.（19.5±2.2）次]、直立次数明显减少[（6.8±1.5）次vs.（10.2±1.7）次],中央格停留时间明显延长[（7.78±1.51）s vs.（5.34±0.72）s],术后第33~35天逃避潜伏期明显延长（P〈0.05）;与A组比较,B组中央格停留时间明显延长[（7.78±1.51）s vs.（6.06±1.67）s,P〈0.05]。结论行心肺转流术的老龄大鼠术后长期认知功能损害明显,可作为心血管麻醉后长期术后认知功能障碍研究的动物模型。 展开更多

关键词 术后认知功能障碍 术后并发症 模型 心肺转流 老龄大鼠

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重组小鼠白细胞介素11致小鼠心肌纤维化的实验探究 被引量：3

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作者 陈雨露 汪新宇 +5 位作者 郑舒展 杜延飞 叶强 李家富 范忠才 李光 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期1531-1536,共6页

目的:观察皮下注射重组小鼠白细胞介素11(rmIL-11)对小鼠心脏结构功能的影响并明确其促进心肌纤维化的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为实验组和溶媒对照组,实验组小鼠背部皮下注射rmIL-11,100μg·kg-1·d-1,连续注射3周;而... 目的:观察皮下注射重组小鼠白细胞介素11(rmIL-11)对小鼠心脏结构功能的影响并明确其促进心肌纤维化的作用。方法:将C57BL/6小鼠随机分为实验组和溶媒对照组,实验组小鼠背部皮下注射rmIL-11,100μg·kg-1·d-1,连续注射3周;而对照组同法皮下注射等量的生理盐水。实验结束后,超声心动图测定小鼠心功能参数;取心脏称重,计算心重指数(CWI);HE染色和Masson染色分别观察小鼠心肌组织病理变化及纤维化程度,并计算心肌胶原容积分数(CVF);Western blot技术检测2组小鼠心肌组织中细胞外基质组分Ⅰ型、Ⅲ型胶原及纤连蛋白等蛋白表达的变化。结果:超声心电图结果显示实验组小鼠左室射血分数和短轴缩短率均明显降低(P<0.01),而左室舒张末期内径和收缩末期内径均明显增大(P<0.05)。与对照组比较,实验组小鼠CWI明显增大(P<0.01),心肌排列紊乱,肌细胞坏死增多,且细胞间可见大量胶原纤维沉积,相应地,CVF和左室Ⅰ型、Ⅲ型胶原及纤连蛋白表达水平明显增加(P<0.05)。结论:皮下注射rmIL-11能诱导小鼠心肌纤维化发生,揭示IL-11可能是一种新的促纤维化因子。 展开更多

关键词 白细胞介素11 心肌纤维化 心功能 细胞外基质

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补骨脂酚启动自噬减轻β-GP诱导的小鼠主动脉中膜钙化 被引量：2

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作者 何虎强 朱俊龙 +5 位作者 李勤 罗泽恩 代江红 胥雄飞 曾宏 刘勇 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期784-792,共9页

目的:在选定的36种中药单体中筛选能够启动细胞自噬的药物;探究补骨脂酚对小鼠血管平滑肌细胞自噬的影响以及对血管平滑肌细胞钙化的影响。方法:从中草药中提取的黄酮类化合物以不同浓度处理人脑胶质瘤细胞(human glioma cells,U87)72 h... 目的:在选定的36种中药单体中筛选能够启动细胞自噬的药物;探究补骨脂酚对小鼠血管平滑肌细胞自噬的影响以及对血管平滑肌细胞钙化的影响。方法:从中草药中提取的黄酮类化合物以不同浓度处理人脑胶质瘤细胞(human glioma cells,U87)72 h,用MTT法得到药物对U87细胞的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50)),并以小于IC_(50)浓度的条件下以不同浓度梯度处理U87细胞,观察U87细胞GFP-LC3微管相关蛋白1轻链3(Microtubule-associated protein light chain 3,LC3)的荧光信号和Western blot检测自噬指标LC3从而观察细胞自噬活动激活情况,以筛选出能够启动自噬的药物。后续选取补骨脂酚进行进一步实验,探究药物启动自噬后对血管平滑肌细胞钙化的影响。使用β-GP构建小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)钙化模型,分为对照组(C-CTR组)和钙化组(C-CAL组),并通过Western blot检测Runx2、BMP2及LC3的表达。使用补骨脂酚干预后,分为对照组(C-CTR组)、钙化组(C-CAL组)、钙化+补骨脂酚组(C-CAL+Administration组)、对照+补骨脂酚组(C-CTR+Administration组)4组,分别用Western blot检测LC3、Runx2和BMP2,用茜素红染色观察细胞钙化结节的形成。在动物实验中使用高脂饮食同时在腹腔注射维生素D的方式构建小鼠主动脉钙化模型,使用腹腔注射补骨脂酚的方式对小鼠进行干预,分为对照组(CTR组)、钙化组(CAL组)、钙化+补骨脂酚组(CAL+Administration组)、对照+补骨脂酚组(CTR+Administration组)4组。通过冯库萨染色观察主动脉中膜钙沉积情况,使用HE染色法观察小鼠主动脉中膜的厚度。结果:观察LC3的荧光强度和Western blot提示:细辛脂素(Asarinim)、补骨脂甲素(Bavachin)、灯心草酚(Juncusol)、桑黄酮(Mullberrin)、地榆皂苷2(Ziyuglycoside 2)、补骨脂酚(Bakuchiol)、补骨乙素(Corylifolinin)、五味子甲素(Schisandrin A)、五味子乙素(Schisandrin B)可以显著增加自噬小体的表达(P<0.05)。Western blot结果提示,在钙化的血管平滑肌细胞中,BMP2、Runx2以及LC3的表达显著增加(P<0.05)。使用补骨脂酚干预后Western blot结果提示BMP2和Runx2表达降低(P<0.05),LC3-Ⅱ表达显增加(P<0.05)。茜素红结果显示钙结节沉积也显著降低(P<0.05)。动物实验中,补骨脂酚干预后HE结果显示中膜厚度较钙化组显著增厚,冯库萨染色结果提示补骨脂酚可以显著减轻钙沉积。结论:补骨脂酚可以激活VSMCs的自噬,并减缓小鼠主动脉钙化的进程。 展开更多

关键词 补骨脂酚 自噬 血管平滑肌细胞 动脉中膜钙化

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机械敏感性离子通道Piezo对干细胞增殖、迁移、分化的影响 被引量：1

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作者 谢诚 李鹏云 程俊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1095-1102,共8页

在细胞外的物理刺激如声、光、温度和机械力等转化为胞内生物信号反应的过程中,例如听力、疼痛、触摸、本体感觉、血压调节等,机械敏感性离子通道都在其中发挥了关键性作用。近年来,瞬时受体电位通道家族、机械活化双孔钾通道家族、上... 在细胞外的物理刺激如声、光、温度和机械力等转化为胞内生物信号反应的过程中,例如听力、疼痛、触摸、本体感觉、血压调节等,机械敏感性离子通道都在其中发挥了关键性作用。近年来,瞬时受体电位通道家族、机械活化双孔钾通道家族、上皮钠通道家族。 展开更多

关键词 Piezo蛋白 机械转导 钙离子 干细胞

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光学标测技术评价异丙肾上腺素诱导的应激性心肌病小鼠心脏电活动

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作者 叶珂君 羊军 +6 位作者 刘竹 陈唐葶 周小琳 张瑞 谭晓秋 雷鸣 欧贤红 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2022年第4期412-417,共6页

目的 筛选异丙肾上腺素(ISO)诱导应激性心肌病(SIC)模型小鼠的最佳方案,建立光学标测技术评价SIC对小鼠心脏电活动影响的方法。方法 选择6~8月龄雌性C57BL/6J小鼠60只,分为对照组10只,其余50只根据ISO剂量不同分为给药1组,给药2组,给药3... 目的 筛选异丙肾上腺素(ISO)诱导应激性心肌病(SIC)模型小鼠的最佳方案,建立光学标测技术评价SIC对小鼠心脏电活动影响的方法。方法 选择6~8月龄雌性C57BL/6J小鼠60只,分为对照组10只,其余50只根据ISO剂量不同分为给药1组,给药2组,给药3组,给药4组,给药5组,每组10只;另取C57BL/6J小鼠20只,腹腔注射300 mg/kg ISO模型成功的10只作为SIC组。比较各组不同给药时间(6、12 h)对SIC模型小鼠心功能的影响,包括左心室短轴缩短率(LVFS)、LVEF、左心室前壁厚度、左心室后壁厚度、左心室内径。采用光学标测技术检测小鼠心脏动作电位时程复极80%时间(APD80)、传导速度、100%组织激动时间(AT100)评价心脏电活动。结果 给药3组、给药4组ISO诱导SIC模型成功率为60%~70%,明显高于给药1组、给药2组。对照组和SIC组心尖部LVEF和LVFS明显高于心底部,差异有统计学意义(P<0.01);SIC组心尖部和心底部LVEF和LVFS明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。SIC组电刺激时心尖部和心底部APD80较对照组明显延长,差异有统计学意义(P<0.01)。SIC组电刺激时心尖部传导速度明显低于心底部,AT100明显大于心底部,差异有统计学意义(P<0.01);SIC组ISO+电刺激时心尖部传导速度明显低于心底部[(67.84±7.30)ms vs(115.30±5.98)ms,P<0.01],AT100明显大于心底部[(6.67±1.54)ms vs(4.17±0.66)ms,P<0.01]。结论 SIC导致小鼠心底部和心尖部LVEF、LVFS、APD80、传导速度及AT100不均一变化可能是SIC发病机制之一。 展开更多

关键词 异丙肾上腺素 Takotsubo心肌病 动作电位 电刺激 小鼠

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