利用精子介导法向蚕卵导入外源基因的研究 被引量：23

1

作者 郭秀洋 周泽扬 +3 位作者 冯丽春 汪琳 鲁成 向仲怀 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第3期423-425,共3页

为建立家蚕转基因中切实可行、操作简便的外源基因导入方法 ,进行了精子介导法探索 ,以精子介导法的三种方式向家蚕导入所构建质粒 pFbGFP ,并通过PCR扩增和DNA印迹等手段 ,已连续两代从基因组DNA检测到导入外源基因GFP的存在 ,其中的... 为建立家蚕转基因中切实可行、操作简便的外源基因导入方法 ,进行了精子介导法探索 ,以精子介导法的三种方式向家蚕导入所构建质粒 pFbGFP ,并通过PCR扩增和DNA印迹等手段 ,已连续两代从基因组DNA检测到导入外源基因GFP的存在 ,其中的一种导入方式到第二代阳性率约 30 % .结果表明该法可有效进行家蚕转基因的外源基因导入 . 展开更多

关键词 转基因 家蚕 精子介导 蚕卵

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基于RAPD分析的中国野桑蚕和家蚕遗传多样性和系统发育关系研究 被引量：24

2

作者 鲁成 余红仕 向仲怀 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期198-203,共6页

对具代表性的中国 11个地区的野桑蚕Bombyxmandarina进行了随机引物扩增多态性DNA (RAPD)分析 ,结果表明 :不同地区的野桑蚕的遗传距离较大 ,最大为 0 46 5 (安康 镇江 ) ,最小的也有 0 2 0 9(武汉 合肥 ) ;同一地区不同个体野桑蚕... 对具代表性的中国 11个地区的野桑蚕Bombyxmandarina进行了随机引物扩增多态性DNA (RAPD)分析 ,结果表明 :不同地区的野桑蚕的遗传距离较大 ,最大为 0 46 5 (安康 镇江 ) ,最小的也有 0 2 0 9(武汉 合肥 ) ;同一地区不同个体野桑蚕的遗传距离也较大 ,最大为 0 318,最小的为 0 144。它们均远大于家蚕B .mori品种内个体间的遗传距离 (最大为0 0 6 8、最小为 0 0 15 ) ,甚至超过了家蚕品种间的遗传距离 (最大为 0 2 5 8、最小为 0 197)。这表明中国野桑蚕是一个十分混杂的、遗传多样性非常丰富的群体。另外 ,在大多数情况下野桑蚕的遗传距离表现出与空间距离正相关。遗传距离和系统发育分析结果显示陕西一带的野桑蚕成分复杂 ,有重要的演化意义。 展开更多

关键词 RAPD分析 中国野桑蚕 家蚕 系统发育 RAPD分析 分子系统树 遗传距离 遗传多样性

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家蚕转基因载体pBacA3EG的构建及其表达 被引量：7

3

作者 徐汉福 夏庆友 +4 位作者 刘春 吴雪峰 杨远萍 赵萍 向仲怀 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期799-803,共5页

以家蚕Bombyxmori肌动蛋白A3(actin3)启动子、增强性绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因及SV40的多聚腺苷酸识别序列为元件,经多次克隆,将其插入到piggyBac转座载体中。经PCR、酶切鉴定及测序表明各元件已按正确... 以家蚕Bombyxmori肌动蛋白A3(actin3)启动子、增强性绿色荧光蛋白(enhancedgreenfluorescentprotein,EGFP)基因及SV40的多聚腺苷酸识别序列为元件,经多次克隆,将其插入到piggyBac转座载体中。经PCR、酶切鉴定及测序表明各元件已按正确的方式插入到piggyBac载体中。将构建好的piggyBac表达载体显微注射到胚盘形成前期的蚕卵中,在胚胎早期发育的第3天,通过体视荧光显微镜检测到蚕卵内发出较强的绿色荧光。结果表明该载体构建正确且能在蚕卵中进行表达。家蚕转基因载体的体外瞬时表达不但是成功进行家蚕转基因所必需的第一步,而且其自身也可以应用于基因的功能研究,为家蚕后基因组研究奠定了基础。 展开更多

关键词 家蚕 转基因 A3启动子 PIGGYBAC 绿色荧光蛋白

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几丁质酶抑制化合物产生菌的筛选初探 被引量：6

4

作者 谢洁 周泽扬 +2 位作者 张新军 蓝希钳 胡军华 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期39-41,共3页

从采自全国的200多份土样中分离出1350多株菌,利用平板透明圈法和铁氰化钾方法,以家蚕中肠几丁质酶作为靶标,从这些菌株中筛选出家蚕几丁质酶抑制化合物的产生菌1237#,经初步鉴定该菌株为假单胞菌。本文主要介绍几丁质酶抑制化合物筛选... 从采自全国的200多份土样中分离出1350多株菌,利用平板透明圈法和铁氰化钾方法,以家蚕中肠几丁质酶作为靶标,从这些菌株中筛选出家蚕几丁质酶抑制化合物的产生菌1237#,经初步鉴定该菌株为假单胞菌。本文主要介绍几丁质酶抑制化合物筛选体系的建立、活性物质性质的初步探索及目的菌株的鉴定。 展开更多

关键词 几丁质酶 抑制化合物 产生菌

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家蚕微孢子虫N.bombycis分离纯化方法的优化 被引量：15

5

作者 周成 潘国庆 +1 位作者 万永继 周泽扬 《蚕学通讯》 2002年第1期7-9,共3页

对家蚕微孢子虫的分离纯化条件进行了探索。微孢子虫的分离 ,采用差速离心法或自然沉降法的效果均可。蔗糖平衡密度离心法的较优条件为 5 0 %～ 6 0 %的蔗糖连续梯度、2 30 0 0rpm离心 30min ,而Percoll法的最佳条件为 2 5 %、5 0 %、7... 对家蚕微孢子虫的分离纯化条件进行了探索。微孢子虫的分离 ,采用差速离心法或自然沉降法的效果均可。蔗糖平衡密度离心法的较优条件为 5 0 %～ 6 0 %的蔗糖连续梯度、2 30 0 0rpm离心 30min ,而Percoll法的最佳条件为 2 5 %、5 0 %、75 %和 10 0 %的Percoll不连续梯度、175 0 0rpm离心 2 0min ;两种纯化方法相比较 。 展开更多

关键词 优化 家蚕 微孢子虫 分离 纯化 微粒子病

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提取家蚕肠道微生物总DNA的2种方法的比较研究 被引量：6

6

作者 蓝希钳 袁志辉 +2 位作者 唐婧 张建华 周泽扬 《蚕学通讯》 2005年第1期5-8,共4页

为寻找提取家蚕中肠道微生物总DNA的方法,比较研究了2种方法:①直接提取家蚕中肠道内容物的总DNA ,再选择性研究其中来源于微生物的DNA ;②先分离家蚕中肠道的微生物,再提取其总DNA。结果表明,方法②所得到的DNA数量较少,但纯度较高;方... 为寻找提取家蚕中肠道微生物总DNA的方法,比较研究了2种方法:①直接提取家蚕中肠道内容物的总DNA ,再选择性研究其中来源于微生物的DNA ;②先分离家蚕中肠道的微生物,再提取其总DNA。结果表明,方法②所得到的DNA数量较少,但纯度较高;方法①的数量多,种类齐,但杂质多。 展开更多

关键词 肠道微生物 总DNA 比较研究 家蚕 直接提取 研究目的 内容物 再选择

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昆虫抗菌肽基因表达调控机理 被引量：10

7

作者 程廷才 王根洪 +1 位作者 李娟 夏庆友 《蚕学通讯》 2004年第3期20-26,共7页

昆虫先天免疫应答主要通过模式识别受体识别入侵微生物 ,激活Toll和Imd信号途径 ,通过NF -κB样转录因子调控抗微生物肽基因的表达 ,合成高效广谱的抗微生物多肽 ,杀灭外源微生物。本文以果蝇的两个信号途径为例 ,通过与哺乳动物的TLR (... 昆虫先天免疫应答主要通过模式识别受体识别入侵微生物 ,激活Toll和Imd信号途径 ,通过NF -κB样转录因子调控抗微生物肽基因的表达 ,合成高效广谱的抗微生物多肽 ,杀灭外源微生物。本文以果蝇的两个信号途径为例 ,通过与哺乳动物的TLR (Toll-likereceptor)和TNFR (tu mour-necrosisfactorreceptor)信号途径的比较 ,我们综述了昆虫免疫应答的激活机理的新近研究成果 ,并讨论了Toll和Imd信号途径的进化关系和昆虫模式识别受体的功能分类。 展开更多

关键词 昆虫 抗菌肽基因 基因表达 调控机理

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一种适用于双向电泳的家蚕微孢子虫总蛋白的制备方法 被引量：7

8

作者 刘加彬 潘国庆 +1 位作者 周泽扬 夏庆友 《蚕学通讯》 2002年第2期8-10,共3页

本文对适用于双向电泳的微孢子虫总蛋白提取方法进行了探讨。研究表明 ,采用液氮多次冻融结合手工研磨 。

关键词 双向电泳 制备方法 家蚕微孢子虫 总蛋白 提取方法

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桑树试管苗生根因素研究 被引量：6

9

作者 杨金富 余茂德 +1 位作者 徐立 鲁成 《蚕学通讯》 2002年第3期1-5,共5页

提高试管苗生根率是桑树快速繁殖的关键因素。本实验调查桑子叶试管苗在各种不同条件下的生根情况 ,探索桑树试管苗的最佳生根条件。实验表明 ,以 1/2MS +IBA1或 1/4MS +IBA1为基本培养基 ,肌醇浓度为 0 .15～ 0 .3g/l,在光照强度 2 0 0... 提高试管苗生根率是桑树快速繁殖的关键因素。本实验调查桑子叶试管苗在各种不同条件下的生根情况 ,探索桑树试管苗的最佳生根条件。实验表明 ,以 1/2MS +IBA1或 1/4MS +IBA1为基本培养基 ,肌醇浓度为 0 .15～ 0 .3g/l,在光照强度 2 0 0 0LX ,光照时间 12小时 ,培养温度2 8℃的培养条件下 ,桑试管苗平均生根率可达 98% ,驯化后移栽的成活率在 96 %以上。 展开更多

关键词 桑树 试管苗 生根因素 组织培养

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家蚕部分数量性状的遗传效应分析 被引量：2

10

作者 陈萍 朱勇 鲁成 《蚕学通讯》 1999年第2期4-8,共5页

本文以二化性品种为材料,采用不完全双列杂交法分析家蚕部分数量性状的遗传效应.分析得知:家蚕的幼虫生命率、虫蛹率、万蚕收茧量、全茧量、茧层量等性状具有显性效应,无上位性效应;茧层率性状既具有显性效应又具有上位性效应.系统间遗... 本文以二化性品种为材料,采用不完全双列杂交法分析家蚕部分数量性状的遗传效应.分析得知:家蚕的幼虫生命率、虫蛹率、万蚕收茧量、全茧量、茧层量等性状具有显性效应,无上位性效应;茧层率性状既具有显性效应又具有上位性效应.系统间遗传分量和基因频率有的性状较一致,有的性状差异较大. 展开更多

关键词 家蚕 数量性状 遗传效应

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mRNA差异显示技术及其在家蚕研究上的应用

11

作者 卢忠燕 李关荣 +1 位作者 夏庆友 鲁成 《蚕学通讯》 2002年第1期20-23,共4页

mRNA差异显示技术是近年发展起来的研究基因表达差异的有效方法。本文简述了mRNA差异显示技术的基本原理、技术改进以及此技术在家蚕研究中的应用。

关键词 MRNA差异显示技术 家蚕 应用 基因表达差异 基本原理 技术改进

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黑腹果蝇的性别控制 被引量：7

12

作者 王慧超 朱勇 夏庆友 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期97-101,共5页

性别的形成包括两个过程,即性别决定和性别分化。果蝇的性别控制研究包括性别决定、性别分化、性别鉴定、性别诱导和性别控制5个方面。性别决定是在两种不同发育途径之间的选择,它提供了一个研究基因调控的模式系统。果蝇的性别决定问... 性别的形成包括两个过程,即性别决定和性别分化。果蝇的性别控制研究包括性别决定、性别分化、性别鉴定、性别诱导和性别控制5个方面。性别决定是在两种不同发育途径之间的选择,它提供了一个研究基因调控的模式系统。果蝇的性别决定问题已经研究得相当详细[1。性别分化是使胚胎向着雌性或雄性发育的过程,决定了性别表型。果蝇的性别分化也取得了不少研究成果。近年来,许多重要的性别调控基因已被克隆和鉴定。随着果蝇基因组全序列测定的完成,果蝇的性别控制研究将会更为深入而完善。本文对与黑腹果蝇性别决定和性别分化相关的一些问题进行综述。 展开更多

关键词 黑腹果蝇 性别控制 性别决定 基因调控

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转GFP基因蚕和neo^r蚕的继代分析 被引量：1

13

作者 魏玲 周泽扬 +2 位作者 郭秀洋 鲁成 向仲怀 《西南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2002年第3期281-282,285,共3页

利用PCR技术对该室采用精子介导法构建的转绿色荧光蛋白基因 (GFP)蚕及基因枪法构建的新霉素抗性基因(neor)蚕进行了继代分析检测 ,结果在转GFP蚕的G 2和G 3代 ,转neor蚕的G 1及G 2代 ,均检测到了阳性个体。

关键词 GFP 蚕 neo^r蚕 继代分析 转基因 PCR 精子介导法 转绿色荧光蛋白基因 阳性个体 遗传性

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新疆家蚕种质资源RAPD多态性研究 被引量：5

14

作者 吴丽莉 买买提依明 +4 位作者 郭洪荣 贠新平 刘春 李斌 鲁成 《蚕学通讯》 2003年第2期6-9,共4页

以家蚕卵为材料 ,选用重复性较好的 12种随机引物 ,对 15份新疆家蚕种质资源材料进行了DNA多态性扩增 (RAPD)研究 ,研究结果表明 ,新疆家蚕种质资源材料的DNA多态性较为丰富 ,共获得 15 3个RAPD标记 ,系统聚类分析表明新疆家蚕种质资源... 以家蚕卵为材料 ,选用重复性较好的 12种随机引物 ,对 15份新疆家蚕种质资源材料进行了DNA多态性扩增 (RAPD)研究 ,研究结果表明 ,新疆家蚕种质资源材料的DNA多态性较为丰富 ,共获得 15 3个RAPD标记 ,系统聚类分析表明新疆家蚕种质资源材料的亲缘关系较近、在相似系数 0 .8的水平下聚为一类 ,遗传距离最大为 0 .3985 ,最小为 0 .12 96。 展开更多

关键词 新疆 家蚕 种质资源 RAPD多态性 随机引物 RAPD标记 聚类分析 亲缘关系 遗传距离

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