H3N2亚型猪流感病毒HA基因序列测定及抗原性分析 被引量：10

1

作者 刘大飞 杨涛 +3 位作者 刘明 刘春国 桑学波 刘大程 《动物医学进展》 CSCD 2008年第3期5-9,共5页

采用RT～PCR技术对4株H3N2亚型猪流感病毒的HA基因进行了扩增，将获得的PCR产物分别与pMD18-T克隆载体连接，进行序列测定。测序结果显示，4个毒株均含有完整的开放阅读框，并且均未发现核苷酸插入或缺失现象；分离毒株间核苷酸同源性... 采用RT～PCR技术对4株H3N2亚型猪流感病毒的HA基因进行了扩增，将获得的PCR产物分别与pMD18-T克隆载体连接，进行序列测定。测序结果显示，4个毒株均含有完整的开放阅读框，并且均未发现核苷酸插入或缺失现象；分离毒株间核苷酸同源性为99．4％～99．7％，氨基酸同源性为98．2％～99．3％。同源性分析表明，4个毒株与2003年的猪流感病毒广东分离株有很高同源性（均在99％以上），说明近段时间我国H3N2亚型的猪流感病毒变异不大，重组的频率不是很高，同时又与人流感病毒香港分离株有较高的同源性（均为99．4％）。交叉血凝抑制试验显示，S3株与其他3毒株抗原性差异明显。鉴于猪在流感病毒传播与复制间的特殊地位，应密切监测猪流感。 展开更多

关键词 猪流感病毒 HA基因 克隆 抗原性分析

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犬细小病毒黑龙江株(CPV-YN)的分离、鉴定及致弱的研究 被引量：5

2

作者 刘大飞 王牟平 +9 位作者 司微 曲连东 高艳 刘立奎 柴洪亮 林欢 刘春国 刘大程 华育平 张洪英 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期875-878,共4页

为研制犬细小病毒(CPV)致弱疫苗,本研究通过将犬的组织样品接种CRFK细胞进行病毒分离,并对分离毒株进行了一系列鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在CRFK细胞上可产生明显的细胞病变(CPE),并且电镜下可以观察到典型的细小病毒粒子;HA效价... 为研制犬细小病毒(CPV)致弱疫苗,本研究通过将犬的组织样品接种CRFK细胞进行病毒分离,并对分离毒株进行了一系列鉴定。鉴定结果显示,分离的病毒在CRFK细胞上可产生明显的细胞病变(CPE),并且电镜下可以观察到典型的细小病毒粒子;HA效价可达到1∶256。回归动物试验显示该分离株可导致犬出现明显的CPV感染症状,PCR鉴定也进一步确定所分离的病毒为CPV(命名为CPV-YN株)。将CPV-YN株接种CRFK细胞连续传代至110代,在传代过程中,病毒的滴度逐渐提高,由初始的105.5 TCID50/0.1 mL逐渐增加到107.1 TCID50/0.1 mL。同时,CPV对犬的致病力逐渐降低。免疫效力试验结果表明,CPV-YNR可以对用同源强毒攻击的犬提供免疫保护作用,可作为理想的疫苗候选病毒株。 展开更多

关键词 犬细小病毒 分离与鉴定 致弱

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环形泰勒焦虫对奶牛免疫水平的影响 被引量：2

3

作者 李明祯 毕可东 +2 位作者 赵忠玲 王立景 刘高升 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第7期141-142,共2页

本试验选择5头感染环形泰勒焦虫的奶牛和5头健康奶牛,在第0天、第5天、第10天、第15天、第20天分别进行红细胞C3b受体花环率试验、红细胞免疫复合物花环试验、T淋巴细胞EA花环率试验和淋巴细胞转化率的测定。结果表明,感染环形泰勒焦虫... 本试验选择5头感染环形泰勒焦虫的奶牛和5头健康奶牛,在第0天、第5天、第10天、第15天、第20天分别进行红细胞C3b受体花环率试验、红细胞免疫复合物花环试验、T淋巴细胞EA花环率试验和淋巴细胞转化率的测定。结果表明,感染环形泰勒焦虫的奶牛其红细胞免疫复合物花环、红细胞C3b受体花环率和淋巴细胞转化率明显低于健康奶牛,差异极显著。这说明环形泰勒焦虫对奶牛的免疫水平有明显的抑制作用。且随着检测时间的变化,免疫水平逐渐降低。 展开更多

关键词 环形泰勒焦虫 免疫水平 奶牛

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4株不同亚型流感病毒NP基因的原核表达 被引量：2

4

作者 刘大飞 杨涛 +4 位作者 刘明 刘春国 何利昆 桑学波 刘大程 《动物医学进展》 CSCD 2007年第12期12-18,共7页

为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用,采用RT-PCR技术分别扩增H1N1、H3N2、H5N1、H9N2等4株不同亚型流感病毒的NP基因,分别将其克隆到原核表达载体pET30(a)上,在大肠埃希菌中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot检... 为了进一步研究A型流感病毒核蛋白功能及在诊断中的应用,采用RT-PCR技术分别扩增H1N1、H3N2、H5N1、H9N2等4株不同亚型流感病毒的NP基因,分别将其克隆到原核表达载体pET30(a)上,在大肠埃希菌中进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blot检测结果表明,H1N1亚型流感病毒NP蛋白得到表达,并且能分别与H1N1和H5N1亚型流感病毒的鼠高免血清发生特异性反应,具有良好的反应活性;而H3N2、H5N1、H9N2亚型流感病毒的重组NP蛋白未获得表达。本研究结果表明,不同毒株的NP蛋白在大肠埃希菌中的表达具有一定差异性,为把NP蛋白作为诊断抗原的开发、ELISA诊断方法的建立以及蛋白功能的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 流感病毒 NP基因 原核表达

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Ⅱ型圆环病毒山东泰安株的分离鉴定及系统进化分析

5

作者 娄忠子 王天户 +1 位作者 董李民 刘思当 《山东农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2007年第4期509-514,共6页

采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免... 采用双抗体夹心ELISA方法和PCR技术对来自山东泰安的病猪组织病料进行猪Ⅱ型圆环病毒（PCV2）检测。将检测为阳性的病料悬液接种无PCV1污染的PK-15细胞进行病毒分离,获得一株PCV2,命名为猪Ⅱ型圆环病毒山东泰安株（PCV2 sdt）。间接免疫荧光试验（IFA）检测可见接种病毒细胞中散在特异性荧光。提取全基因组为模板,进行病毒基因组1号开放阅读框（ORF1）、2号开放阅读框（ORF2）和全基因组序列扩增,得到长度分别约为999bp、749bp和1767bp左右的产物条带。将产物克隆到pMD18-T载体上,构建重组质粒pMD18-T-ORF1、pMD18-T-ORF2和pMD18-T-PCV2。测序结果显示,所分离病毒的ORF1、ORF2和全基因组序列长度分别为945bp、702bp和1767bp。DNAStar生物学软件分析发现,PCV2分离毒株与参考株的全基因组同源性介于95.4%-98.8%之间,ORF1的同源性介于97.0%-98.8%,ORF2的同源性略低,介于91.9%-98.4%之间。 展开更多

关键词 猪Ⅱ型圆环病毒 双抗体夹心ELISA PCR 病毒分离 间接免疫荧光试验

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流感病毒反向遗传学技术研究进展

6

作者 刘大飞 刘春国 +1 位作者 刘明 刘大程 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第8期867-874,共8页

流感病毒亚型众多,且极易发生变异,给防控带来很大困难,所以当务之急应加强其在致病机理、传播机制等方面的研究和加快新型流感疫苗的开发.近年来,反向遗传学技术的发展为流感病毒基因功能研究和疫苗制备方面开辟了新思路.

关键词 流感病毒 反向遗传学技术 功能研究 标记疫苗

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艾维茵父母代种鸡念珠菌病的诊治

7

作者 贾世斋 马端忠 +3 位作者 宋竹玲 刘日才 吴景秋 徐孟章 《中国畜禽传染病》 CSCD 1996年第2期40-41,共2页

某种鸡场饲养艾维茵父母代种鸡5000只,2周龄前自由采食,3～6周龄每日限饲,7 ～12周龄隔日限饲,13周龄隔2天限饲1天,14～20周龄实行五、二限饲,以控制体重。平地散养,垫料采用碎花生壳,一般5天更换一次。饲养至19周龄时鸡群零星发病,每... 某种鸡场饲养艾维茵父母代种鸡5000只,2周龄前自由采食,3～6周龄每日限饲,7 ～12周龄隔日限饲,13周龄隔2天限饲1天,14～20周龄实行五、二限饲,以控制体重。平地散养,垫料采用碎花生壳,一般5天更换一次。饲养至19周龄时鸡群零星发病,每日发病2～3只。依据临床症状、剖解、实验室检查和动物试验诊断为鸡白色念珠菌病。 展开更多

关键词 鸡病 艾维茵种鸡 念珠菌病 诊断 治疗

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不同蛋白能量水平对五龙鹅产蛋性能影响的研究(初报)

8

作者 王宝维 高英美 +4 位作者 张庭荣 赵君国 张绪建 赵忠玲 刘国安 《山东家禽》 1990年第4期14-17,共4页

引言五龙鹅(又称豁眼鹅)原产于山东省莱阳市五龙河流域,莱西、海阳、栖霞等地也有分布,是我国体型最小的白羽蛋鹅良种之一,以产蛋量高而闻名于世。以往五龙鹅的饲养主要以放牧为主,补饲为辅,对其营养水平缺乏全面系统的研究,为了使养鹅... 引言五龙鹅(又称豁眼鹅)原产于山东省莱阳市五龙河流域,莱西、海阳、栖霞等地也有分布,是我国体型最小的白羽蛋鹅良种之一,以产蛋量高而闻名于世。以往五龙鹅的饲养主要以放牧为主,补饲为辅,对其营养水平缺乏全面系统的研究,为了使养鹅生产更趋向科学化,为规模集约化饲养提供营养水平的理论依据,笔者于1990年4—6月份对五龙鹅产蛋期进行了不同能量蛋白质水平的饲养对比试验,现将结果汇总如下: 展开更多

关键词 五龙鹅 产蛋量 蛋白 性能 饲料

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卡介苗不同用药途径对猪瘟弱毒疫苗调节作用的研究

9

作者 王金宝 王作忠 +6 位作者 张振邦 李庆怀 甘孟侯 卢正兴 袁振国 潘永杰 贾瑞武 《山东畜牧兽医》 1994年第2期11-13,共3页

将30头20日龄法国大白仔猪，随机分为山。A-2、A-3、B-1、B-2、C六个组．每组5头．以研究活或灭话卡介苗（BC）对猪瘟弱难疫苗的调节作用，结果表明：皮内、皮下注射活或灭活BCG均可显著地提高猪瘟弱毒酶联单克隆抗体水平．

关键词 猪瘟 卡介苗 弱毒疫苗 调节

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免疫增强剂的研究进展 被引量：4

10

作者 王全宝 孙月萍 +1 位作者 李庆怀 张振邦 《莱阳农学院学报》 1994年第1期54-59,80,共7页

免疫增强剂的研究进展王全宝，孙月萍，李庆怀，张振邦（莱阳农学院牧医系，山东莱阳２６５２００）（北京农业大学动物医学院）（莱阳市兽医站）免疫系统被公认以后，即被视为独立存在的自我调节系统，各种复杂的免疫应答，在免疫系统... 免疫增强剂的研究进展王全宝，孙月萍，李庆怀，张振邦（莱阳农学院牧医系，山东莱阳２６５２００）（北京农业大学动物医学院）（莱阳市兽医站）免疫系统被公认以后，即被视为独立存在的自我调节系统，各种复杂的免疫应答，在免疫系统内发生、发展、消退。Ｊｅｒｎｅ的基... 展开更多

关键词 兽药 免疫增强剂 研究进展

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鸡传染性鼻炎的病原诊断与防治 被引量：5

11

作者 史雪萍 周国政 +1 位作者 马凤龙 贾晓晖 《莱阳农学院学报》 2005年第3期213-215,共3页

从莱阳市某3鸡场4个鸡群中具有典型症状的发病鸡采集病料,进行病原分离培养、因子需要试验、血凝试验、药敏试验以及血清学试验等研究,结果表明获得的5株分离菌株为副鸡嗜血杆菌。确定病原体分离鸡群为A型或A/C型副嗜血杆菌感染所引起... 从莱阳市某3鸡场4个鸡群中具有典型症状的发病鸡采集病料,进行病原分离培养、因子需要试验、血凝试验、药敏试验以及血清学试验等研究,结果表明获得的5株分离菌株为副鸡嗜血杆菌。确定病原体分离鸡群为A型或A/C型副嗜血杆菌感染所引起的传染性鼻炎。对发病鸡群和临近鸡群根据药敏试验结果,进行综合防治,取得了明显效果。 展开更多

关键词 鸡传染性鼻炎 副鸡嗜血杆菌 分离鉴定

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早期断乳仔猪饲养管理技术要点 被引量：3

12

作者 崔剑波 《养殖与饲料》 2016年第9期18-19,共2页

仔猪生长发育快,物质代谢旺盛,但是存在消化器官不发达、先天性免疫力差、体温调节能力差等缺陷,需要选择适宜的断奶日龄和断奶方式,对仔猪做好保温工作、过好出生关、保证仔猪吃足初乳,并做好仔猪的寄养和并窝等饲养管理工作。

关键词 仔猪 饲养管理 技术要点

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鸡球虫病免疫技术要点 被引量：1

13

作者 王兆芬 《农业知识（科学养殖）》 2009年第11期20-20,共1页

在鸡的各种传染病中，球虫病是发生率最高的，尤其是集约化养鸡场更易暴发球虫病。由于球虫病造成的死亡和生产能力下降，以及治疗过程中产生的药残等问题，给我国养鸡业带来了巨大损失。采用免疫方法减少球虫病的发生，是减少损失的有... 在鸡的各种传染病中，球虫病是发生率最高的，尤其是集约化养鸡场更易暴发球虫病。由于球虫病造成的死亡和生产能力下降，以及治疗过程中产生的药残等问题，给我国养鸡业带来了巨大损失。采用免疫方法减少球虫病的发生，是减少损失的有效措施。 展开更多

关键词 鸡球虫病 免疫技术 集约化养鸡场 生产能力 免疫方法 传染病 发生率 养鸡业

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犬瘟热病毒病原学和诊断技术研究进展 被引量：1

14

作者 孙礼 王妍慧 《山东畜牧兽医》 2014年第8期96-99,共4页

犬瘟热病毒（Canine distemper virus, CDV）是引起犬科、鼬科及一部分浣熊科或其它食肉目动物犬瘟热（Canine distemper, CD）的病原[1]。幼龄未免疫动物感染CDV后多表现为急性致死性经过，临床上以双相热型、结膜炎、严重的呼吸系统... 犬瘟热病毒（Canine distemper virus, CDV）是引起犬科、鼬科及一部分浣熊科或其它食肉目动物犬瘟热（Canine distemper, CD）的病原[1]。幼龄未免疫动物感染CDV后多表现为急性致死性经过，临床上以双相热型、结膜炎、严重的呼吸系统和消化系统炎症，以及后期出现神经症状为主要特征，成年动物可耐过或呈慢性持续性感染。目前CDV在世界范围内呈广泛性流行，感染宿主的范围不断扩大，多种动物都能感染和传播该病原[2]。 展开更多

关键词 犬瘟热病毒 病原学 诊断技术 动物感染 VIRUS 持续性感染 消化系统 呼吸系统

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奶牛乳房炎病原菌的分离鉴定及药敏试验 被引量：1

15

作者 王妍慧 孙礼 《山东畜牧兽医》 2014年第9期19-20,共2页

本文对一奶牛乳房炎病例的鲜奶样品进行了病原菌的分离鉴定,并对鉴定出的细菌进行了药物敏感试验。结果分离到金黄色葡萄球菌与无乳链球菌2种病原菌,并且金黄色葡萄球菌对头孢喹诺、头孢氨苄、左诺氟沙星、氨苄西林、强力霉素高度敏感,... 本文对一奶牛乳房炎病例的鲜奶样品进行了病原菌的分离鉴定,并对鉴定出的细菌进行了药物敏感试验。结果分离到金黄色葡萄球菌与无乳链球菌2种病原菌,并且金黄色葡萄球菌对头孢喹诺、头孢氨苄、左诺氟沙星、氨苄西林、强力霉素高度敏感,无乳链球菌对头孢喹诺、头孢氨苄、左氧氟沙星高度敏感。 展开更多

关键词 奶牛乳房炎 细菌 分离鉴定 药敏试验

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提高肉鸭成活率的关键措施

16

作者 王兆芬 《农业知识（科学养殖）》 2009年第12期39-40,共2页

鸭发病的原因比较复杂,卫生、饲养、防疫任一环节出现漏洞,都能让细菌、病毒乘机而入,给养鸭户带来经济损失。

关键词 养鸭场 科学选址 消毒池 饲养管理 育雏期 免疫程序 饲养密度 育成期 抗体监测 药物预防

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蛋鸭产蛋中后期的饲养管理

17

作者 王兆芬 《农业知识（科学养殖）》 2008年第11期35-35,共1页

产蛋中期的饲养管理 产蛋中期（301～400日龄），重点是确保蛋鸭高产，力争使产蛋高峰期维持到400日龄以后。为此，日粮营养浓度应比产蛋前期略高，每只鸭每天添加鱼粉，或饲喂蛋白质含量为20％的配合料，每日每只采食150克，还要适当... 产蛋中期的饲养管理 产蛋中期（301～400日龄），重点是确保蛋鸭高产，力争使产蛋高峰期维持到400日龄以后。为此，日粮营养浓度应比产蛋前期略高，每只鸭每天添加鱼粉，或饲喂蛋白质含量为20％的配合料，每日每只采食150克，还要适当多喂些青饲料和钙。每天光照稳定在16小时。合温维持在5～10℃，如超过或低于这个标准，应进行调整。日常操作程序保持稳定。 展开更多

关键词 饲养管理 产蛋中后期 蛋鸭 日粮营养浓度 产蛋中期 产蛋高峰期 蛋白质含量 产蛋前期

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养鸡场生产中的生物安全要点

18

作者 王兆芬 《农业知识（科学养殖）》 2009年第9期7-7,共1页

一、发挥鸡舍的隔离功能 通过良好的建筑及设施配备，防止鸡舍外的有害病原进入鸡群是生物安全的重要组成部分。

关键词 生物安全 安全要点 养鸡场 生产 设施配备 组成部分 鸡舍 鸡群

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蛋鸡开产前的饲养管理技术

19

作者 王兆芬 《农业知识（科学养殖）》 2009年第8期24-25,共2页

开产前几个星期是母鸡从生长期进入产蛋期的过渡阶段。这段时间母鸡生理变化剧烈，敏感、适应力较弱、抗病力较差，如果饲养管理不当，极易影响产蛋性能。蛋鸡开产前的饲养管理应注意如下几方面。准备工作 鸡台和设备对产蛋鸡的健康和... 开产前几个星期是母鸡从生长期进入产蛋期的过渡阶段。这段时间母鸡生理变化剧烈，敏感、适应力较弱、抗病力较差，如果饲养管理不当，极易影响产蛋性能。蛋鸡开产前的饲养管理应注意如下几方面。准备工作 鸡台和设备对产蛋鸡的健康和生产有较大影响。 展开更多

关键词 饲养管理技术 产蛋鸡 开产前 生理变化 产蛋性能 产蛋期 生长期 适应力

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蛋鸡各阶段饲养管理要点

20

作者 王兆芬 《农业知识（科学养殖）》 2009年第3期29-30,共2页

0～41日龄 该阶段是雏鸡各系统发育最重要的时期。由于雏鸡各组织器官功能的不健全，对应激抵抗力很差，易受到环境的影响而出现病理现象甚至死亡。因此，要注意做好控制育雏鸡合的温度、湿度及通风换气工作，让雏鸡有一个良好的生活环... 0～41日龄 该阶段是雏鸡各系统发育最重要的时期。由于雏鸡各组织器官功能的不健全，对应激抵抗力很差，易受到环境的影响而出现病理现象甚至死亡。因此，要注意做好控制育雏鸡合的温度、湿度及通风换气工作，让雏鸡有一个良好的生活环境。由于轻型鸡体重不易达标，胆小怕惊，易产生啄癖，所以，在7日龄内应保证日粮质量，提高饲料中蛋白质和维生素的含量。注意预防球虫病及慢性呼吸道病的发生。 展开更多

关键词 管理要点 阶段饲养 蛋鸡 慢性呼吸道病 生活环境 育雏鸡 系统发育 器官功能

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