β-桶外膜蛋白质生成机制的活细胞探究

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作者 王妍 昌增益 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期36-51,共16页

β-桶外膜蛋白是革兰氏阴性菌外膜以及真核细胞线粒体和叶绿体外膜上广泛存在的一类膜整合蛋白质。细菌β-桶外膜蛋白质的体内生成是一个十分复杂的过程,包括多肽链在细胞质内的合成,跨内膜转运,穿过亲水的膜间质空间最后到达外膜,完成... β-桶外膜蛋白是革兰氏阴性菌外膜以及真核细胞线粒体和叶绿体外膜上广泛存在的一类膜整合蛋白质。细菌β-桶外膜蛋白质的体内生成是一个十分复杂的过程,包括多肽链在细胞质内的合成,跨内膜转运,穿过亲水的膜间质空间最后到达外膜,完成最后的折叠。在β-桶外膜蛋白生成过程中,膜间质中的质量控制因子SurA、Skp和DegP等通过何种机制帮助β-桶外膜蛋白在亲水的膜间质环境中完成运输和折叠,以及内膜上的SecYEG-SecDF-YidC复合体和外膜上的BAM复合体以何种形式与膜间质质量控制因子相互作用,并共同完成β-桶外膜蛋白的体内合成,是一直以来亟待回答的科学问题。本文就革兰氏阴性菌β-桶外膜蛋白生成机制的研究进展,以及各种新技术尤其是非天然氨基酸体内光交联技术,及高通量聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)技术在研究β-桶外膜蛋白折叠中间体的应用进行介绍,为外膜蛋白生成机制的研究提供新的思路。 展开更多

关键词 β-桶外膜蛋白 膜蛋白生成 非天然氨基酸 体内蛋白质光交联 蛋白质超级复合体

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微生物合成β-胡萝卜素的研究进展

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作者 陈卯森 王育焜 +1 位作者 钟洁 祁峰 《食品与发酵工业》 北大核心 2025年第2期356-364,共9页

β-胡萝卜素是一种常见的类胡萝卜素,具有抗氧化、抗癌和预防心血管疾病等作用,广泛应用于食品、医药和化妆品等行业。β-胡萝卜素主要从植物、藻类等生物中提取,这种提取方法具有环境污染严重和生产成本高等缺点。随着合成生物学技术... β-胡萝卜素是一种常见的类胡萝卜素,具有抗氧化、抗癌和预防心血管疾病等作用,广泛应用于食品、医药和化妆品等行业。β-胡萝卜素主要从植物、藻类等生物中提取,这种提取方法具有环境污染严重和生产成本高等缺点。随着合成生物学技术的发展和代谢工程策略的创新,利用大肠杆菌、酿酒酵母、解脂耶氏酵母等微生物构建细胞工厂来异源生产β-胡萝卜素已取得一定成果,生物合成方法具有环境污染小、生产成本低、效率高等优点,发展前景广阔。文章阐述了β-胡萝卜素的理化性质、生物学价值及其生物合成途径,总结了微生物合成β-胡萝卜素的相关研究,并归纳了目前用以提高β-胡萝卜素产量的常用代谢工程策略。最后该文对β-胡萝卜素生物合成所面临的挑战和未来研究方向进行了探讨,以期为获得更高产量的β-胡萝卜素提供借鉴。 展开更多

关键词 Β-胡萝卜素 代谢工程 大肠杆菌 解脂耶氏酵母 酿酒酵母

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大肠杆菌lysR基因敲除和表达对氨基糖苷类抗生素耐受性分析

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作者 陆诗妍 严沛文 +2 位作者 王悦 蔡雅雯 王妍 《福建农业科技》 2025年第3期45-50,共6页

为了解决抗生素滥用造成的细菌耐药问题,寻找抗生素作用的新靶点,检测了野生型菌株BW25113(WT)、lysR基因敲除菌株(ΔlysR)对氨基糖苷类抗生素(庆大霉素、妥布霉素、链霉素)、喹诺酮类抗生素、β-内酰胺类抗生素的杀菌表型差异,并进一... 为了解决抗生素滥用造成的细菌耐药问题,寻找抗生素作用的新靶点,检测了野生型菌株BW25113(WT)、lysR基因敲除菌株(ΔlysR)对氨基糖苷类抗生素(庆大霉素、妥布霉素、链霉素)、喹诺酮类抗生素、β-内酰胺类抗生素的杀菌表型差异,并进一步测试庆大霉素对过表达菌株BW25113-pCA24N和BW25113-pCA24N(lysR)的杀菌表型,最后通过外源添加赖氨酸检测庆大霉素对野生型菌株BW25113(WT)、lysR基因敲除菌株(ΔlysR)的杀菌表型,以此确定lysR基因对细菌耐药的重要性。结果表明:与野生型菌株BW25113(WT)相比,lysR基因敲除菌株(ΔlysR)对氨基糖苷类抗生素具有耐受性,对喹诺酮类抗生素、β-内酰胺类抗生素不具有耐受性,且过表达菌株BW25113-pCA24N(lysR)可以恢复对庆大霉素的敏感性,外源添加赖氨酸可以使lysR基因敲除菌株(ΔlysR)对庆大霉素的耐受表型得到缓解。以上结果证实了lysR基因对大肠杆菌耐受氨基糖苷类有显著影响,可能存在独特的耐药机制,可作为新的抗生素作用靶点。 展开更多

关键词 细菌耐药 庆大霉素 lysR基因 赖氨酸缺乏

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利用细菌表面展示技术强化细胞固定化生产吲哚-3-乙酸

4

作者 苏愉 刘晴浩 +2 位作者 包心茹 黄建忠 祁峰 《福建农业科技》 CAS 2022年第8期14-22,共9页

目的利用细菌表面展示技术,以冰晶核蛋白INaA、INaK为锚定蛋白,将负电荷的氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)锚定在大肠杆菌表面(Escherichia coli),增加细胞膜表面携带的负电荷,与改性后带正电荷的生物炭吸附以强化生物炭固定化细胞的功能。利... 目的利用细菌表面展示技术,以冰晶核蛋白INaA、INaK为锚定蛋白,将负电荷的氨基酸(天冬氨酸、谷氨酸)锚定在大肠杆菌表面(Escherichia coli),增加细胞膜表面携带的负电荷,与改性后带正电荷的生物炭吸附以强化生物炭固定化细胞的功能。利用2 mol·L^(-1)的FeCl_(3)改性玉米秸秆生物炭使其呈正电性,将改性生物炭与细胞表面负电荷增加的重组菌株进行静电吸附,重组菌株EPA03与对照菌株相比吸附率提高31.75%。将此策略应用在固定化细胞高效生产IAA的菌株中,在全细胞催化连续循环中,菌株EPA03连续循环中能连续反应6个循环,IAA积累量比对照菌株提高了42.85%。 展开更多

关键词 生物炭 固定化细胞 细菌表面展示技术 大肠杆菌 吲哚-3-乙酸

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细胞穿透肽增强氨基糖苷类抗生素杀菌作用的方法 被引量：4

5

作者 石舒婷 王妍 《福建农业科技》 CAS 2022年第1期12-17,共6页

为验证细胞穿透肽能否增强氨基糖苷类抗生素杀菌作用,选用具代表性的3种氨基糖苷类抗生素(妥布霉素、卡那霉素及链霉素)处理平台期大肠杆菌。在特定抗生素处理浓度和处理时间下,进行平台期大肠杆菌杀伤效果组间比较,用ANOVA算法分析试... 为验证细胞穿透肽能否增强氨基糖苷类抗生素杀菌作用,选用具代表性的3种氨基糖苷类抗生素(妥布霉素、卡那霉素及链霉素)处理平台期大肠杆菌。在特定抗生素处理浓度和处理时间下,进行平台期大肠杆菌杀伤效果组间比较,用ANOVA算法分析试验结果差异性;并使用NPN染色法探究细胞穿透肽增强氨基糖苷类抗生素杀菌作用机制。结果表明:细胞穿透肽预处理可以极显著增强妥布霉素、卡那霉素及链霉素杀灭平台期大肠杆菌,且细胞穿透肽对大肠杆菌细胞外膜造成轻微破坏。 展开更多

关键词 氨基糖苷类抗生素 多肽 耐药

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鱼蛋白水溶氨基酸肥的制备及其对植物生长发育的影响 被引量：1

6

作者 林湘雪 何咏梅 +3 位作者 辛恺达 张婷 李欣 田宝玉 《福建农业科技》 CAS 2024年第10期21-28,共8页

水溶性氨基酸肥料是一种新型的植物功能性有机肥料。为探究水溶氨基酸肥对植物生长的影响,本文以鱼产品下脚料为原料,通过合理优化料水比、蛋白酶种类和酶量以及水解条件制备水溶性氨基酸肥料。进而通过水培试验以不同稀释倍数的鱼蛋白... 水溶性氨基酸肥料是一种新型的植物功能性有机肥料。为探究水溶氨基酸肥对植物生长的影响,本文以鱼产品下脚料为原料,通过合理优化料水比、蛋白酶种类和酶量以及水解条件制备水溶性氨基酸肥料。进而通过水培试验以不同稀释倍数的鱼蛋白水溶肥对小麦百农矮抗58进行施肥,确定最适稀释倍数,并分别采取喷施与浇施两种方法对番茄新中蔬四号进行施肥,研究水溶性氨基酸肥不同施肥处理对农作物生长发育的影响。结果表明:以1∶3料液比、添加0.1%碱性蛋白酶、50℃酶解4 h条件下,利用鱼蛋白下脚料可以制备可溶氨基酸总量为16.925 mg·g^(-1),且植物易利用氨基酸比例高(约50%)的鱼蛋白水溶肥。水培试验表明鱼蛋白氨基酸水溶肥的最适施用浓度为稀释100倍(DB100)。DB100显著提高了小麦种子萌发率和种子活力指数,促进了小麦幼苗的根长和根冠比(P<0.05)。以DB100作为稀释标准,盆栽番茄喷施氨基酸肥显著提高了番茄幼苗的株高(22.9%)、叶面积(38%)和叶片叶绿素含量(33.3%)(P<0.05),且降低了番茄叶片丙二醛含量(26.7%,P<0.05)。而水溶肥浇施与对照CK相比无显著差异(P>0.05)。盆栽试验说明叶面喷施水溶肥能够直接为植物提供营养物质,植物易吸收和利用,从而促进番茄的生长发育,增强植物叶光合作用效率,提高植物抗氧化能力。综上所述,合理使用水溶氨基酸肥可以显著促进植物种子萌发和幼苗生长,而叶面喷施水溶氨基酸肥显著促进了植物叶片的光合效率和植株的生长。 展开更多

关键词 鱼产品加工下脚料 水溶氨基酸肥制备 稀释倍数 施肥方式 促进植物生长

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辅酶Q0增强氨基糖苷类和喹诺酮类抗生素杀灭大肠杆菌的效果分析

7

作者 李映红 李嘉宸霃 +2 位作者 王子涵 赵航宇 陈雅娟 《福建农业科技》 CAS 2024年第9期30-35,共6页

寻找新型的抗生素佐剂以提高现有抗生素的杀菌效率,实现快速高效杀灭病原菌是降低细菌耐药风险的重要手段。通过外源添加辅酶Q0(CoQ0)联合氨基糖苷类或喹诺酮类抗生素对大肠杆菌进行杀灭效果测试。结果表明:辅酶Q0能够显著增强氨基糖苷... 寻找新型的抗生素佐剂以提高现有抗生素的杀菌效率,实现快速高效杀灭病原菌是降低细菌耐药风险的重要手段。通过外源添加辅酶Q0(CoQ0)联合氨基糖苷类或喹诺酮类抗生素对大肠杆菌进行杀灭效果测试。结果表明:辅酶Q0能够显著增强氨基糖苷类和喹诺酮类抗生素对大肠杆菌BW25113及8株临床耐药大肠杆菌的杀灭效果。浓度梯度测试和时间依赖性试验结果显示辅酶Q0增强氨基糖苷、喹诺酮类抗生素杀菌具有浓度依赖性和时间依赖性。辅酶Q0最适浓度为30µg·mL-1,其中辅酶Q0辅助庆大霉素的最佳作用时间为5 h、辅助氧氟沙星的最佳作用时间为8 h。研究结果为开发辅酶Q0作为新型氨基糖苷类或喹诺酮类抗生素佐剂提供了数据支撑。 展开更多

关键词 辅酶Q0 氨基糖苷类 喹诺酮类 抗生素 细菌耐药 大肠杆菌

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D-海藻糖增强氨基糖苷类抗生素杀灭大肠杆菌的机制探究

8

作者 黄炜雅 钟洁亚 +3 位作者 赖泽迎 陈慧君 赵航宇 陈雅娟 《福建农业科技》 CAS 2024年第9期36-43,共8页

寻找高效的抗生素佐剂并研究其增效杀菌机制是目前应对细菌耐药问题的有效策略之一。为探究D-海藻糖(D-trehalose)增强氨基糖苷类抗生素杀灭大肠杆菌的机制,以大肠杆菌BW25113为研究对象,测定D-trehalose联合氨基糖苷类抗生素作用前后的... 寻找高效的抗生素佐剂并研究其增效杀菌机制是目前应对细菌耐药问题的有效策略之一。为探究D-海藻糖(D-trehalose)增强氨基糖苷类抗生素杀灭大肠杆菌的机制,以大肠杆菌BW25113为研究对象,测定D-trehalose联合氨基糖苷类抗生素作用前后的ATP、NADH含量以及质子动力势(PMF),分析菌体内能量代谢和膜电位水平的变化,并通过抑菌圈实验检测对抗生素摄取的影响。结果提示:D-trehalose联合妥布霉素或庆大霉素双处理后,D-trehalose能够通过升高大肠杆菌PMF水平增加ATP合成,提高NADH水平,促进抗生素摄取,由此显著增强抗生素的杀菌效果。研究结果为开发D-海藻糖作为新型氨基糖苷类抗生素佐剂提供依据。 展开更多

关键词 大肠杆菌 D-海藻糖 妥布霉素 庆大霉素 质子动力势

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大肠杆菌过表达WcaB对氨基糖苷类抗生素敏感性的影响

9

作者 俞丹丹 张裕丹 +1 位作者 翁丽红 高媛媛 《福建农业科技》 CAS 2024年第9期23-29,共7页

为寻找新的靶点以加速解决由于抗生素滥用而引发的细菌耐药问题,通过利用pCA24N表达载体构建大肠杆菌BW25113过表达乙酰基转移酶WcaB菌株,在对数期进行氨基糖苷类抗生素杀伤效果测试,并进一步测定大肠杆菌BW25113过表达WcaB对氨基糖苷... 为寻找新的靶点以加速解决由于抗生素滥用而引发的细菌耐药问题,通过利用pCA24N表达载体构建大肠杆菌BW25113过表达乙酰基转移酶WcaB菌株,在对数期进行氨基糖苷类抗生素杀伤效果测试,并进一步测定大肠杆菌BW25113过表达WcaB对氨基糖苷类抗生素的最小抑菌浓度(MIC)和生长曲线。结果表明:WcaB过表达后会抑制细菌生长,氨基糖苷类抗生素对WcaB过表达株的MIC没有明显变化,WcaB过表达使细菌在庆大霉素或卡那霉素处理下的存活率降低,证明WcaB过表达提高了大肠杆菌对氨基糖苷类抗生素的敏感性。研究结果显示乙酰基转移酶在增强抗生素对大肠杆菌产敏感性方面具有重要的作用,该酶有望成为大肠杆菌新的药理靶点。 展开更多

关键词 乙酰基转移酶 氨基糖苷类抗生素 大肠杆菌

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香芹酚辅助庆大霉素杀灭铜绿假单胞菌效果分析

10

作者 王玉婵 陈稼骏 +2 位作者 陈丹妍 刘俊辉 王妍 《福建农业科技》 2024年第12期53-59,共7页

铜绿假单胞菌是一种能引起禽类、畜类多种疾病的多重耐药菌,其外膜通透性远低于其他杆菌科细菌,是造成其耐药性和临床治疗失败的重要原因。通过测试不同浓度的香芹酚与庆大霉素在不同处理条件(包括浓度、时间及介质)下,对铜绿假单胞菌... 铜绿假单胞菌是一种能引起禽类、畜类多种疾病的多重耐药菌,其外膜通透性远低于其他杆菌科细菌,是造成其耐药性和临床治疗失败的重要原因。通过测试不同浓度的香芹酚与庆大霉素在不同处理条件(包括浓度、时间及介质)下,对铜绿假单胞菌的杀伤作用,并评估对铜绿假单胞菌细胞膜破坏的程度,进一步探究香芹酚作为佐剂辅助庆大霉素对铜绿假单胞菌PAO1的杀伤作用。结果表明:在0.01%香芹酚的辅助下,庆大霉素的用量可降低百倍,在1 h内即可显著增强对铜绿假单胞菌的杀菌效果。辅助效果于不同介质中具有适应性,在不同抗生素下也具有一定的广谱性,并且能够提高庆大霉素对临床铜绿假单胞菌杀伤效果。研究结果为香芹酚作为抗菌佐剂在降低铜绿假单胞菌耐药性方面的应用提供了有力的数据支持。 展开更多

关键词 细菌耐药 铜绿假单胞菌 佐剂 香芹酚 辅助

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五种植被覆盖下红壤的细菌群落结构组成及其特征 被引量：6

11

作者 黎烨 雷少楠 +6 位作者 程志强 张婷 金玲月 舒琳 林春梅 赵珂 田宝玉 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2020年第2期231-239,共9页

采用16S rDNA扩增子测序方法探究了5种植被[艾草(Artemisia argyi)、一年蓬(Erigeron annuus)、马唐(Digitaria sanguinalis)、鬼针草(Bidens pilosa)和飞扬草(Euphorbia hirta)]根际的微生物群落.结果表明,变形杆菌(37.8%±2.1%)... 采用16S rDNA扩增子测序方法探究了5种植被[艾草(Artemisia argyi)、一年蓬(Erigeron annuus)、马唐(Digitaria sanguinalis)、鬼针草(Bidens pilosa)和飞扬草(Euphorbia hirta)]根际的微生物群落.结果表明,变形杆菌(37.8%±2.1%)、酸杆菌门(17.7%±3.8%)和拟杆菌门(16.5%±6.15%)为此片红壤的主要优势菌群.植被类型在一定程度上影响了根际土壤细菌群落丰度及多样性.在门水平,鬼针草土样中的拟杆菌门和硝化螺旋菌门、一年蓬土样中的放线菌门相对富集;在目水平,假单胞菌目和噬纤维菌目分别在艾草土样和鬼针草土样中相对富集.样本共有的OTUs数目约占各个样本OTUs总数的50%,各样品特有的OTUs占比1%~4%.不同植被覆盖下土样细菌的α-多样性指数无显著性差异,飞扬草土样的物种丰度(Chao1=2388)和多样性指数(H′=9.508)略高于其它样品,艾草土样的物种丰度(Chao1=2154)和多样性指数最低(H′=8.964).PCoA与OTU聚类分析显示,鬼针草土样与飞扬草土样的群落组成最为相似,马唐土样与前二者差异最大.结果表明,不同植被下红壤细菌菌群物种组成和多样性相对稳定,但不同植被条件会造成土壤中细菌种群在丰度和个别物种上的差异,表现出各自独特的物种特征. 展开更多

关键词 红壤 土壤微生物 宏基因组学 群落结构 物种多样性

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产IAA根内生菌的分离鉴定及对小麦促生效果 被引量：14

12

作者 林国钦 张婷 +3 位作者 左杰 何锦欣 蓝灿华 田宝玉 《福建农业科技》 CAS 2022年第4期10-17,共8页

生长素在植物生长和发育中扮演着至关重要的作用。吲哚乙酸(IAA)的合成普遍被认为是植物根际细菌和根内生菌促进植物生长最为重要的机制之一。通过对番茄根产IAA内生菌菌株进行分离鉴定并进行促生效果研究,以期为开发生物肥料提供参考... 生长素在植物生长和发育中扮演着至关重要的作用。吲哚乙酸(IAA)的合成普遍被认为是植物根际细菌和根内生菌促进植物生长最为重要的机制之一。通过对番茄根产IAA内生菌菌株进行分离鉴定并进行促生效果研究,以期为开发生物肥料提供参考依据。采用组织研磨培养法,以TSA培养基为分离培养基,从番茄根分离纯化得到12株番茄根内生菌,并利用16S rDNA序列分析对菌株进行种属鉴定;随机选择3株内生菌菌株mr7、mr31及B21,进一步研究其产IAA能力以及对小麦的促生效果。结果表明:经16S rDNA序列分析鉴定,mr7、mr89为大肠杆菌属Enterobacter,mr31、mr58、B21、GG1、M2、M3、r11、F127、F165、F170为芽孢杆菌属Bacillus;其中mr7、mr31及B21分别为阴沟肠杆菌Enterobacter cloacae、蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium。菌株mr7、mr31和B21都具有直接利用色氨酸合成IAA的能力;其中,菌株mr7的IAA产量为67.79 mg·L^(-1)、菌株mr31的IAA产量为86.00 mg·L^(-1)、菌株B21的IAA产量为15.48 mg·L^(-1)。平板试验结果表明,菌株mr7及菌株B21处理后的效果比菌株mr31好,但各菌株处理后小麦的根长及株高均低于对照,菌液不同组分及不同浓度处理后对小麦的促生效果无显著差异;盆栽试验结果表明,3株菌株处理后小麦的叶长、根长及株高均有一定的提高,并且主要促进小麦根的生长,其中以菌株B21的促生效果最佳,同一菌株使用7种不同接种方法处理后各方法间无显著差异。 展开更多

关键词 番茄根内生菌 IAA合成 促生效果 微生物菌肥

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油菜根内生菌分离、鉴定及其植物益生作用筛选 被引量：5

13

作者 张沁怡 杨美雪 +7 位作者 张婷 程林洁 黎烨 张羽杉 李景虹 蓝灿华 田宝玉 李欣 《福建农业科技》 CAS 2021年第11期33-43,共11页

从油菜中分离鉴定根内生细菌菌株,检测评估其促生、抑菌潜力和机制,为开发具有植物促生和病害防控的微生物肥料提供依据。以油菜为研究对象,通过分离纯化和16S rRNA基因扩增分离和鉴定油菜根内生细菌,并进一步通过平板法、酶活法以及抑... 从油菜中分离鉴定根内生细菌菌株,检测评估其促生、抑菌潜力和机制,为开发具有植物促生和病害防控的微生物肥料提供依据。以油菜为研究对象,通过分离纯化和16S rRNA基因扩增分离和鉴定油菜根内生细菌,并进一步通过平板法、酶活法以及抑菌试验等分析分离其木制纤维素降解能力、促生作用以及抑菌活性等益生特性及其机理。结果表明:根据细菌菌落形态、颜色和大小,挑取纯化得到14株油菜根内生细菌菌株。经16S rRNA基因测序和鉴定分析,分别为假单胞菌、肠杆菌、芽孢杆菌、葡萄球菌和莱略特菌。在分离纯化的14株内生菌株中,除菌株Y-7、Y-8外都具有明显的木聚糖酶活性,除菌株Y-1、Y-7、Y-8、Y-9、Y-10外都具有纤维素分解能力,进一步对14株内生菌株的植物益生作用进行初步筛选和评价,得到产铁载体菌株Y-2、Y-4、Y-6、Y-10、Y-11、Y-13、Y-14,具有稳定固氮能力的固氮菌株Y-1、Y-2、Y-10、Y-13、Y-14。在拮抗内生菌筛选中,得到拮抗大肠杆菌菌株Y-1、Y-6、Y-7、Y-8、Y-12,拮抗金黄色葡萄球菌菌株Y-3、Y-4,拮抗枯草芽孢杆菌菌株Y-1以及拮抗黑曲霉菌株Y-3、Y-4、Y-6、Y-9、Y-10、Y-14。大多数分离的油菜根内生菌具有一定的木质纤维素降解能力。分离的油菜根内生菌具有广泛而多样性的植物益生特性,如促生长和抑菌活性,这些益生特性可能与其具有的产铁载体、产IAA以及固氮能力有关。结果表明油菜根内生菌可以作为筛选和开发具有植物促生和病害防控作用的微生物菌剂的重要来源。 展开更多

关键词 油菜根内生菌 16S rRNA基因 分子鉴定 植物益生作用

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接种2种不同促生菌对番茄根菌群结构及多样性的影响 被引量：2

14

作者 冯燕辉 熊娟 +6 位作者 黎烨 张婷 程林洁 金玲月 张沁怡 蓝灿华 田宝玉 《福建农业科技》 CAS 2021年第6期6-14,共9页

为了解析具有不同IAA分泌特性的促生菌在植物体内的存在模式及其促生机制。以不可产IAA的植物促生菌Lysinibacillus xylanilyticus CZ29和可产IAA的植物促生菌Rhizobium radiobacter GF12为材料,分别接种于盆栽新中蔬四号番茄幼苗根部,... 为了解析具有不同IAA分泌特性的促生菌在植物体内的存在模式及其促生机制。以不可产IAA的植物促生菌Lysinibacillus xylanilyticus CZ29和可产IAA的植物促生菌Rhizobium radiobacter GF12为材料,分别接种于盆栽新中蔬四号番茄幼苗根部,以不接种菌株为对照,采用基于细菌16S rRNA基因V5~V7可变区高通量测序的方法,分析2种不同促生菌在植物根内定植情况及其对生长得到促进的植物根内生菌菌群结构和多样性的影响。结果显示:接种2株促生细菌之后,这2株促生菌在生长得到促进的植物根内的定植量无显著变化,说明促生菌接种的促生长作用并非是通过接种促生菌的定植量增加而实现。且经2种不同促生菌分别接种处理后生长得到促进的番茄根内生菌物种丰富度(Chao1指数)以及细菌多样性(Shannon指数)相对于对照以及相互之间均没有显著差异性(P>0.05),表明这2株促生菌的促生长作用与内生菌菌群丰富度和多样性没有直接联系。基于OTU水平的层次聚类和PLS-DA等分析表明,2株促生菌接种均可显著影响番茄根内生菌菌群结构组成,导致原有的内生菌菌群平衡被打破但其具体的影响不同。其中,接种不可产IAA的植物促生菌L.xylanilyticus CZ29的组别中Roseateles、Sphingobium和Rhizobium益生菌受到显著富集;Myroides、Chryseobacterium、Achromobacter及Strenotrophomonas致害菌被显著抑制(P<0.05)。接种可产IAA的植物促生菌R.radiobacter GF12的组别中各菌属菌群平均丰度与对照相比波动都不明显,菌群结构与对照更为相似并表现出内生菌菌群结构组成更加稳定的特点。因此推测,不可产IAA的植物促生菌L.xylanilyticus CZ29是通过富集益生菌抑制有害菌从而促进植物生长。可产IAA的植物促生菌R.radiobacte GF12则是通过同时上调植物内生菌各主要菌群的丰度从而构建更加稳定的内生菌群增大植物的抗刺激能力及分泌IAA而促进植物生长。 展开更多

关键词 植物促生菌 接种 内生菌 菌群结构 高通量测序

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患根结线虫病番茄根内生固氮菌的筛选、鉴定和系统发育分析 被引量：6

15

作者 金玲月 路晶晶 +6 位作者 冯燕辉 张沁怡 吴寒 李容丹 黄薇 蓝灿华 田宝玉 《福建农业科技》 2020年第12期46-51,共6页

植物内生固氮菌能通过自身的固氮作用,把空气中的氮气转化为植物可利用的氨态氮,促进植物生长以及提高作物产量。以患根结线虫病的番茄根组织为材料,采用梯度稀释和划线法分离纯化番茄根内生菌,通过无氮固体培养基连续培养筛选固氮菌,... 植物内生固氮菌能通过自身的固氮作用,把空气中的氮气转化为植物可利用的氨态氮,促进植物生长以及提高作物产量。以患根结线虫病的番茄根组织为材料,采用梯度稀释和划线法分离纯化番茄根内生菌,通过无氮固体培养基连续培养筛选固氮菌,并扩增固氮细菌的16S rRNA基因序列进行鉴定和系统发育分析,初步了解患根结线虫病的番茄根内菌的种类和分布。结果表明,在挑选和分离纯化得到的33株番茄根内生菌中,经过在无氮培养基平板上连续的传代培养,最终得到3株具有稳定固氮能力的内生菌株。分子鉴定和序列分析表明筛选出的内生固氮菌菌株中包括8株芽孢杆菌、1株黄单胞菌和1株根瘤菌。与先前发表的番茄根内生菌优势OTU的聚类分析结果表明,根瘤菌是患根结线虫病番茄根中优势的内生固氮菌种群。 展开更多

关键词 根结线虫 番茄根 内生固氮菌 筛选 分子鉴定

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1,2-丁二醇辅助氨基糖苷类抗生素杀灭大肠杆菌效果分析 被引量：6

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作者 冯荆城 庄彬彬 +3 位作者 李中燕 马月龙 李心想 陈雅娟 《福建农业科技》 CAS 2022年第7期27-34,共8页

细菌耐药已成为21世纪影响全球公共卫生健康的热点问题,正严重影响临床治疗效果以及农业畜牧养殖业的发展。由于开发新型抗生素的速度远低于耐药细菌的进化速度,因此,增强传统抗生素的杀菌效果是解决细菌耐药这一复杂难题的重要途径。... 细菌耐药已成为21世纪影响全球公共卫生健康的热点问题,正严重影响临床治疗效果以及农业畜牧养殖业的发展。由于开发新型抗生素的速度远低于耐药细菌的进化速度,因此,增强传统抗生素的杀菌效果是解决细菌耐药这一复杂难题的重要途径。通过外源添加醇类与妥布霉素对大肠杆菌-BW25113进行杀灭测试,结果表明:筛选所得1,2-丁二醇能够显著增强氨基糖苷类抗生素对BW25113及临床耐药大肠杆菌的杀灭效果。通过妥布霉素摄取试验证实1,2-丁二醇能够促进大肠杆菌摄取妥布霉素到胞内,引起胞内抗生素增多进而导致细菌死亡,提示可由此实现其辅助杀菌的作用。 展开更多

关键词 1 2-丁二醇 妥布霉素 大肠杆菌

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番茄根内生细菌的促生及其优势种群的筛选和分析 被引量：4

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作者 黎烨 熊娟 +3 位作者 张婷 金玲月 桂楚伊 田宝玉 《福建农业科技》 2019年第11期17-24,共8页

以从番茄植株分离出的46株内生细菌为研究对象,采用番茄根内生细菌单独侵染番茄种子,并研究其对番茄植株生长的影响,进一步利用测试内生细菌的16S rDNA序列结合之前公开番茄根内核心OTU(Operational Taxonomic Unit)序列构建系统发育树... 以从番茄植株分离出的46株内生细菌为研究对象,采用番茄根内生细菌单独侵染番茄种子,并研究其对番茄植株生长的影响,进一步利用测试内生细菌的16S rDNA序列结合之前公开番茄根内核心OTU(Operational Taxonomic Unit)序列构建系统发育树,分析主要促生长内生细菌的种类与丰度。促生试验表明,测试内生细菌均对番茄植株鲜重均有促进作用,其中芽孢杆菌(3株)、假单胞菌(2株)、黄单胞菌(1株)以及根瘤菌(2株)对番茄植株的鲜重具有显著性促进(P<0.05),而GF12与对照相比对鲜重的促进最为显著(P<0.01),GF12内生细菌对番茄植株鲜重的增加为对照的1.69倍;对株高具有显著性促进的内生菌株共有9株,分属芽孢杆菌(5株)、假单胞菌(2株)、黄单胞菌(1株)以及根瘤菌(1株),与对照相比CZ29在促进株高伸长极显著(P<0.01),CZ29侵染后番茄株高为对照组的1.46倍;此外,测试内生细菌中8株促进番茄根的伸长,其中MR56、GF12和CZ29侵染后的番茄根长比对照组根长超出15%以上。对46株内生细菌16S rDNA序列与番茄根内生细菌前100核心OTU序列进行系统发育分析结果表明,测试内生细菌聚类到假单胞菌目、肠杆菌目、根瘤菌目、伯克氏菌目、芽孢杆菌目、黄单胞菌目以及黄杆菌目。此外聚类到假单胞菌目和根瘤菌目的内生细菌分别与番茄根内高丰度的OTU_3(Pseudomonas)和OTU_23(Rhizobium)聚在一起,表明测试假单胞菌以及根瘤菌是番茄根内主要促生效果的核心类微生物。分离到的具有促生的芽孢杆菌种类最多,但假单胞菌和根瘤菌在根内丰度较高,作为健康番茄根内生微生物组中最主要的群体,因此芽孢杆菌、假单胞菌以及根瘤菌具有巨大促生潜力,可以作为生物菌肥探索为宿主提供营养,并合理开发利用微生物资源以更好发展农业。 展开更多

关键词 番茄 内生细菌 盆栽 促生长 优势种群

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外膜蛋白ompC过表达提高大肠杆菌对庆大霉素敏感性研究 被引量：2

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作者 马月龙 赖泽迎 +2 位作者 冯荆城 林少青 陈雅娟 《福建农业科技》 CAS 2022年第12期21-25,共5页

为了寻找新的药物结合敏感靶点解决致病菌耐药性难题,通过构建大肠杆菌外膜蛋白ompC过表达菌株,利用庆大霉素对其进行杀伤试验并与野生型大肠杆菌进行效果比较,通过免疫印迹法探究ompC蛋白表达量与庆大霉素杀伤效果的关系,并进一步测定... 为了寻找新的药物结合敏感靶点解决致病菌耐药性难题,通过构建大肠杆菌外膜蛋白ompC过表达菌株,利用庆大霉素对其进行杀伤试验并与野生型大肠杆菌进行效果比较,通过免疫印迹法探究ompC蛋白表达量与庆大霉素杀伤效果的关系,并进一步测定过表达菌株MIC,结果表明:过表达ompC能显著增强大肠杆菌对庆大霉素的敏感性,过表达ompC后菌株W3110-pCA24N(ompC)的最小抑菌浓度8 ug·mL^(-1)明显低于W3110-pCA24N(野生型)的16 ug·mL^(-1),庆大霉素更多地被摄入大肠杆菌胞内,增强了庆大霉素的杀菌效果。因此该外膜蛋白有望作为新的候选药敏靶点。 展开更多

关键词 大肠杆菌 外膜蛋白 抗生素 庆大敏素 敏感性

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金黄色葡萄球菌菌落DNA提取方法的筛选与优化 被引量：2

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作者 黄雪冰 陈雅娟 《福建农业科技》 CAS 2022年第12期26-30,共5页

建立能够快速提取金黄色葡萄球菌菌落DNA用于PCR扩增的通用方法,并比较不同提取方法对菌落DNA的提取效果。通过煮沸法、冻融法、微波法处理金黄色葡萄球菌的菌落,提取DNA,观察PCR扩增效果,比较3种方法获得DNA的最短时间以及处理10 s后... 建立能够快速提取金黄色葡萄球菌菌落DNA用于PCR扩增的通用方法,并比较不同提取方法对菌落DNA的提取效果。通过煮沸法、冻融法、微波法处理金黄色葡萄球菌的菌落,提取DNA,观察PCR扩增效果,比较3种方法获得DNA的最短时间以及处理10 s后所提取DNA的浓度。结果表明:这3种方法均能成功地提取金黄色葡萄球菌的菌落DNA,且对常见的金黄色葡萄球菌都是通用的;这3种方法仅需10 s就可以提取出菌落DNA,没有时间依赖;处理10 s后,煮沸法提取的DNA浓度极其显著高于冻融法和微波法。综上,煮沸法、冻融法、微波法对于常见的金黄色葡萄球菌菌落DNA提取都有较好的结果,通过比较,更建议采用煮沸法进行菌落DNA的提取。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 DNA提取方法 菌落PCR 微生物鉴定

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D-海藻糖联合氨基糖苷类抗生素杀菌效果分析 被引量：1

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作者 赖泽迎 吴泽源 +1 位作者 杨晓乐 陈雅娟 《福建农业科技》 CAS 2023年第11期36-43,共8页

目前,开发抗生素佐剂以提高传统抗生素杀菌效果是解决细菌耐药的有效途径之一。为了寻找新的抗生素佐剂,通过外源添加D-海藻糖与三大类杀菌抗生素对大肠杆菌BW25113和金黄色葡萄球菌ATCC25923进行杀灭测试,并通过在D-海藻糖与氨基糖苷... 目前,开发抗生素佐剂以提高传统抗生素杀菌效果是解决细菌耐药的有效途径之一。为了寻找新的抗生素佐剂,通过外源添加D-海藻糖与三大类杀菌抗生素对大肠杆菌BW25113和金黄色葡萄球菌ATCC25923进行杀灭测试,并通过在D-海藻糖与氨基糖苷类抗生素联合使用组中外源添加羰基氰化氯苯腙(CCCP),探究D-海藻糖联合氨基糖苷类抗生素潜在的杀菌机制。结果显示D-海藻糖联合氨基糖苷类抗生素对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的杀灭效果最佳,联合杀菌组中外源添加CCCP后,细菌可恢复耐受表型。表明D-海藻糖有望作为新的抗生素佐剂,提示其联合氨基糖苷类抗生素杀菌的机制与质子动力势有关。 展开更多

关键词 D-海藻糖 氨基糖苷类抗生素 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌

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