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HSP90β在细胞中的表达水平与化疗敏感性的相关研究 被引量:1
1
作者 刘宪玲 俞召才 +5 位作者 徐立 赵燕秋 樊代明 郭建成 肖冰 赵青川 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2000年第10期725-728,共4页
目的了解胃癌细胞SGC7901及其耐药细胞SGC7901/VCR中HSP90β蛋白的表达,与化疗药物敏感性的关系及降低细胞HSP90β蛋白的表达是否影响化疗药物的敏感性。方法用免疫组化法检测胃癌细胞SGC7901... 目的了解胃癌细胞SGC7901及其耐药细胞SGC7901/VCR中HSP90β蛋白的表达,与化疗药物敏感性的关系及降低细胞HSP90β蛋白的表达是否影响化疗药物的敏感性。方法用免疫组化法检测胃癌细胞SGC7901及其耐药细胞SGC7901/VCR中HSP90β蛋白的表达。MTT法测定SGC7901、SGC7901/VCR细胞及其相应的HSP90β蛋白低表达细胞AH-SGC7901和AH-SGC7901/VCR对化疗药物的敏感性,流式细胞仪测定细胞内药物含量。结果SGC7901/VCR细胞HSP90β蛋白的表达高于SGC7901细胞。SGC7901/VCR细胞对ADM、VCR、MMC和CTX的IC50分别为0.398、1.25、0.199和3 981.07μg/ml。SGC7901对ADM、VCR、MMC及CTX的IC50分别为1.58×10-6、1.99×10-3、3.1×10-2及630μg/ml。SGC7901/VCR相对于SGC7901细胞对ADM、VCR、MMC和CTX的耐药指数分别为2.52×105、6.28×102、6.42和6.32。 展开更多
关键词 多药耐药性 药敏试验 胃癌 HSP90β
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肿瘤抗原研究的启示 被引量:2
2
作者 徐立 樊代明 金伯泉 《医学与哲学》 2000年第3期39-40,共2页
本世纪初Ehrlich根据在动物个体间进行肿瘤移植时,移植瘤能自行萎缩消退的现象,提出了肿瘤抗原及肿瘤免疫概念。近一个世纪以来肿瘤抗原的研究一直居肿瘤免疫学研究的中心地位。回顾其研究历程,不难得到许多有益的哲学启示。1 ... 本世纪初Ehrlich根据在动物个体间进行肿瘤移植时,移植瘤能自行萎缩消退的现象,提出了肿瘤抗原及肿瘤免疫概念。近一个世纪以来肿瘤抗原的研究一直居肿瘤免疫学研究的中心地位。回顾其研究历程,不难得到许多有益的哲学启示。1 正确结论得益于方法选择肿瘤细胞是否... 展开更多
关键词 肿瘤抗原 研究
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胃癌特异性纳米疫苗的制备及其生物学活性的研究 被引量:1
3
作者 师瑞 吴开春 +3 位作者 吴道澄 宁晓暄 林涛 樊代明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2005年第1期9-12,共4页
目的:以胃癌特异性多肽抗原MG7为靶点研制胃癌特异性纳米疫苗,并观察其对小鼠的免疫效能。方法:人工合成胃癌MG7-Ag的模拟表位多肽,用磁力超声法将其包封于纳米乳剂中,通过透析纯化,HPLC检测其包封效率。用包封有MG7抗原肽的纳米疫苗免... 目的:以胃癌特异性多肽抗原MG7为靶点研制胃癌特异性纳米疫苗,并观察其对小鼠的免疫效能。方法:人工合成胃癌MG7-Ag的模拟表位多肽,用磁力超声法将其包封于纳米乳剂中,通过透析纯化,HPLC检测其包封效率。用包封有MG7抗原肽的纳米疫苗免疫健康Balb/c小鼠,以空白纳米疫苗和PBS作为对照,测定其免疫活性,通过ELISA测定血清中抗MG7抗体的效价;ELISPOT测定小鼠脾CTL活性。同时,用表达MG7-Ag的小鼠艾氏腹水瘤细胞进行肿瘤攻击2周,观察疫苗对小鼠的保护作用。结果:成功制备了胃癌MG7-Ag的纳米疫苗,并具有较好的包封率和较好的稳定性,小鼠产生MG7抗体,ELISPOT检测包封组与对照组相比分泌IFN-γ的活性淋巴细胞数量明显增高。疫苗免疫组8只小鼠中有2只未见肿瘤形成,而对照组8只小鼠则全部成瘤。结论:胃癌MG7-Ag表位纳米疫苗具有免疫原性,可以诱导小鼠产生抗肿瘤免疫。 展开更多
关键词 胃癌MG-7抗原肽 纳米乳剂 纳米疫苗
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Rho GTPases对肿瘤血管生成相关分子的作用 被引量:18
4
作者 薛妍 毕锋 +3 位作者 刘娜 潘阳林 时永全 张学庸 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期664-669,共6页
探讨RhoGTPases的 3个主要分子RhoA、Rac1和Cdc4 2对肿瘤血管生成相关分子的作用 .构建负显性RhoA、Rac1和Cdc4 2的真核表达质粒 ,在Lipofectamine2 0 0 0 介导下转染胃癌细胞AGS ,应用ELISA检测细胞培养上清中VEGF的含量 ,应用Western... 探讨RhoGTPases的 3个主要分子RhoA、Rac1和Cdc4 2对肿瘤血管生成相关分子的作用 .构建负显性RhoA、Rac1和Cdc4 2的真核表达质粒 ,在Lipofectamine2 0 0 0 介导下转染胃癌细胞AGS ,应用ELISA检测细胞培养上清中VEGF的含量 ,应用Western印迹检测肿瘤血管生成相关分子HIF 1α、P5 3和PTEN的表达水平 .成功地构建了负显性RhoA、Rac1和Cdc4 2的真核表达质粒 ,转染胃癌细胞AGS并经G4 18筛选出单克隆 .ELISA表明转染细胞培养上清中VEGF的含量可被明显抑制 ;Western印迹表明 ,负显性RhoGTPases在蛋白水平上可下调HIF 1α表达水平 ,上调P5 3的表达水平 .结果表明 ,Rho家族的 3个主要分子可能通过调节血管生成相关分子的表达来促进肿瘤血管生成 . 展开更多
关键词 RHO GTPASES 肿瘤 血管生成
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利用聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化的微量蛋白制备抗血清 被引量:9
5
作者 时永全 韩者艺 +4 位作者 王新 张宇梅 宁晓暄 翟惠虹 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第6期621-623,共3页
目的 以SDS PAGE纯化的微量蛋白制备抗人层粘连蛋白受体前体蛋白 (LRP)的血清。方法 以SDS PAGE分离纯化原核表达的人LRP与 6×组氨酸的融合蛋白 ,切下并粉碎融合蛋白所在凝胶块。将含 10 μg融合蛋白的凝胶颗粒与弗氏佐剂混匀后 ... 目的 以SDS PAGE纯化的微量蛋白制备抗人层粘连蛋白受体前体蛋白 (LRP)的血清。方法 以SDS PAGE分离纯化原核表达的人LRP与 6×组氨酸的融合蛋白 ,切下并粉碎融合蛋白所在凝胶块。将含 10 μg融合蛋白的凝胶颗粒与弗氏佐剂混匀后 ,免疫BALB/c小鼠。以Westernblot检测所获抗血清的滴度和特异性。结果 以胃癌细胞总蛋白为靶抗原时 ,Westernblot显示 ,所获抗血清仅识别 1条Mr 约 4 2 0 0 0的蛋白带 ,将抗血清做 1∶2 0 0 0稀释后 ,仍能清晰地显示其靶抗原所在位置。结论 以聚丙烯酰胺凝胶颗粒为载体 。 展开更多
关键词 聚丙烯酰胺凝胶电泳 纯化 微量蛋白 抗血清 人层粘连蛋白受体前体蛋白
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一步法从人血浆中制备天然血管生成抑制素 被引量:10
6
作者 李福洋 何鹏 +5 位作者 刘新平 张英起 杨静华 樊代明 药立波 fmmu.edu.cn 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第3期325-327,共3页
血管生成抑制素 (angiostatin)能特异地抑制新生血管生成 ,有潜在的临床应用价值 .利用亲和层析从人血浆中纯化纤溶酶原 ,并在原位进行弹性蛋白酶有限消化产生angiostatin片段 ,经过洗涤 ,然后用 0 2mol/L 6 氨基己酸溶液将angiostati... 血管生成抑制素 (angiostatin)能特异地抑制新生血管生成 ,有潜在的临床应用价值 .利用亲和层析从人血浆中纯化纤溶酶原 ,并在原位进行弹性蛋白酶有限消化产生angiostatin片段 ,经过洗涤 ,然后用 0 2mol/L 6 氨基己酸溶液将angiostatin特异性洗脱 .此改进使整个制备过程变得简单、快速和高效 . 展开更多
关键词 血管生成抑制素 抗肿瘤转移 一步亲和层析 血浆
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噬菌体抗体库技术筛选结肠癌单抗MC3的抗独特型抗体 被引量:5
7
作者 何凤田 乔太东 +4 位作者 陈宝军 韩者艺 聂勇战 宋保华 樊代明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第7期358-360,362,共4页
目的 :获得结肠癌单抗MC3的噬菌体呈现型抗独特型抗体 (anti Id)。方法 :分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA ,经RT PCR分别扩增抗体VH和VLDNA ,进而连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获... 目的 :获得结肠癌单抗MC3的噬菌体呈现型抗独特型抗体 (anti Id)。方法 :分离经单抗免疫鼠脾脏的mRNA ,经RT PCR分别扩增抗体VH和VLDNA ,进而连接形成ScFvDNA。将ScFvDNA与载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7挽救后获得噬菌体呈现型ScFv文库。以MC3对文库进行四轮筛选后 ,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现anti IdScFv的噬菌体单克隆。结果 :VH、VL和ScFvDNA分别约为 34 0、32 0和 75 0bp。抗体ScFv文库经四轮筛选后 ,在随机筛检的 5 0个克隆中得到 15个呈现anti IdScFv的噬菌体单克隆。结论 :用噬菌体抗体库技术成功地获得了单抗MC3的anti IdScFv,从而为进行结肠癌重组anti 展开更多
关键词 结肠癌 抗独特型抗体 抗体库 噬菌体
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血管特异结合短肽GNSNPKS受体在胃癌和结肠癌中的差异表达 被引量:5
8
作者 韩宇 洪流 +3 位作者 吴开春 乔泰东 陈峥 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期234-235,共2页
目的:探讨血管特异结合短肽GNSNPKS受体(GNSNPKSR)在胃癌和结肠癌中的表达及与肿瘤分化程度的关系。方法:采用免疫组化SP法检测GNSNPKSR在胃癌和结肠癌中的表达及其分化程度。结果:GNSNPKSR在高、中、低度分化胃癌的血管中表达率依次为1... 目的:探讨血管特异结合短肽GNSNPKS受体(GNSNPKSR)在胃癌和结肠癌中的表达及与肿瘤分化程度的关系。方法:采用免疫组化SP法检测GNSNPKSR在胃癌和结肠癌中的表达及其分化程度。结果:GNSNPKSR在高、中、低度分化胃癌的血管中表达率依次为12/18(67%)、17/23(74%)、22/24(92%);在高、中、低度分化结肠癌的血管中的表达率依次为3/16(19%)、5/21(24%)和7/23(30%)。GNSNPKSR在胃癌组织中的表达明显高于结肠癌组织(P<0.05),在低分化胃癌组织中的表达明显高于高分化和中分化胃癌组织(P<0.05)。结论:GNSNPKS与胃癌的血管特异结合,可作为肿瘤血管抑制治疗的靶向载体。 展开更多
关键词 GNSNPKS 胃癌 结肠癌 免疫组化
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HSP90反义RNA真核表达载体pcDNA-HSP90的构建与鉴定 被引量:3
9
作者 刘宪玲 肖冰 +3 位作者 俞召才 郭建成 时永权 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期207-207,220,共2页
在热诱导下生物体能合成一组高度保守的蛋白质,称为热休克蛋白(heatshockprotein,HSP),这一现象被称为热休克应答。热休克应答普遍存在于从细菌到高等真核生物的整个生物界,不仅能为热损伤所诱导,而且可为许多其他... 在热诱导下生物体能合成一组高度保守的蛋白质,称为热休克蛋白(heatshockprotein,HSP),这一现象被称为热休克应答。热休克应答普遍存在于从细菌到高等真核生物的整个生物界,不仅能为热损伤所诱导,而且可为许多其他损伤因素及应激刺激,包括物理化学因素... 展开更多
关键词 HSP90 反义RNA 真核表达载体 pcDNA-HSP90 构建
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Glypican-3在多种肿瘤中的表达 被引量:4
10
作者 袁东红 孟存英 +4 位作者 谢华红 王燕 杨利萍 宋久刚 刘杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期512-513,519,共3页
目的:研究Glypican-3在多种肿瘤中的表达及意义。方法:免疫组化方法检测Glypican-3在461例多种肿瘤及部分正常组织中的表达。结果:多种肿瘤中:Glypican-3在肝癌中阳性率为74.4%(119/160),大肠癌中Glypican-3阳性率为66.0%(132/200),Glyp... 目的:研究Glypican-3在多种肿瘤中的表达及意义。方法:免疫组化方法检测Glypican-3在461例多种肿瘤及部分正常组织中的表达。结果:多种肿瘤中:Glypican-3在肝癌中阳性率为74.4%(119/160),大肠癌中Glypican-3阳性率为66.0%(132/200),Glypican-3在肝癌及大肠癌组织中表达明显高于癌旁组织(P<0.05);Glypican-3在子宫内膜癌(3/16),肺癌(3/32),乳腺癌(1/15),卵巢癌(1/11),胰腺癌(0/15),食管癌(1/12)等肿瘤中表达较低,Glypican-3在癌组织中的表达与癌旁组织无统计学意义。在正常组织如肾,胎盘,乳腺当中Glypican-3表达为阳性,其他多种正常组织中表达均为阴性。结论:Glypican-3在肝癌、大肠癌、肺癌等中均有不同程度表达,且表达意义不尽相同,Glypican-3可能在多种肿瘤发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 多种肿瘤 Glypiean-3 免疫组织化学
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噬菌体呈现技术制备结肠癌抗独特型抗体 被引量:3
11
作者 何凤田 陈宝军 +4 位作者 乔太东 韩者艺 聂勇战 宋保华 樊代明 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期786-789,共4页
以纯化的鼠抗人结肠癌细胞单克隆抗体 (简称单抗 )MC5与钥孔血蓝素 (KLH)的交联物经腹腔免疫Balb c小鼠 ,取脾分离mRNA .RT PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因片段 (VH 和VLcD NA ,大小分别约为 340bp和 32 0bp) ,二者经linkerDNA连接... 以纯化的鼠抗人结肠癌细胞单克隆抗体 (简称单抗 )MC5与钥孔血蓝素 (KLH)的交联物经腹腔免疫Balb c小鼠 ,取脾分离mRNA .RT PCR分别扩增抗体重、轻链可变区基因片段 (VH 和VLcD NA ,大小分别约为 340bp和 32 0bp) ,二者经linkerDNA连接形成ScFv(singlechainvariablefragment)DNA(约 75 0bp) .将ScFvDNA与噬菌粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经辅助噬菌体M13KO7感染后 ,获得重组噬菌体抗体ScFv文库 .以单抗MC5对ScFv文库进行 4轮亲和筛选后 ,随机挑取 80个克隆经酶联免疫吸附实验 (ELISA)筛选出 2 2个呈现ScFv形式抗独特型抗体(抗 IdScFv)的噬菌体单克隆 .竞争抑制实验表明 ,在 2 2个阳性克隆中有 4个克隆所呈现的抗 IdScFv属β或γ型 .针对单抗MC5的噬菌体呈现型抗 IdScFv的制备 ,为筛选新的结肠癌重组抗 展开更多
关键词 结肠癌 单克隆抗体 抗独特型抗体 噬菌体呈现技术
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白细胞介素-6对大鼠胃酸分泌的中枢作用 被引量:3
12
作者 赵怡 刘秀云 +1 位作者 张学庸 师长虹 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第8期578-580,共3页
为探讨IL 6对大鼠应激性胃粘膜损伤形成的中枢作用以及对胃酸分泌的影响 ,采用侧脑室给药 ,观察溃疡形成情况 ,同时进行胃酸分泌检测。结果显示 ,侧脑室注射IL 6有加重应激性溃疡形成的作用 (P <0 0 1) ,而静脉注射同等剂量的IL 6... 为探讨IL 6对大鼠应激性胃粘膜损伤形成的中枢作用以及对胃酸分泌的影响 ,采用侧脑室给药 ,观察溃疡形成情况 ,同时进行胃酸分泌检测。结果显示 ,侧脑室注射IL 6有加重应激性溃疡形成的作用 (P <0 0 1) ,而静脉注射同等剂量的IL 6并无此效应 ;中枢IL 6可通过兴奋迷走神经释放乙酰胆碱 ,激活HPA轴产生皮质激素 ,促进胃酸的分泌 (P <0 0 1)。表明IL 6的促溃疡机制主要在中枢。 展开更多
关键词 白细胞介素-6 应激性溃疡 胃酸分泌
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打点杂交及RNA酶保护分析法检测反义HSP90基因转染细胞中反义RNA的表达 被引量:2
13
作者 刘宪玲 赵青川 +2 位作者 郭建成 肖冰 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期31-34,共4页
目的:检测HSP90反义核酸转染细胞后反义RNA的表达。方法:采用打点杂交及RNA酶保护分析法。结果:HSP90反义核酸转染细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109有HSP90反义RNA的表达。结论:HSP90反义RNA在AH-SGC7901... 目的:检测HSP90反义核酸转染细胞后反义RNA的表达。方法:采用打点杂交及RNA酶保护分析法。结果:HSP90反义核酸转染细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109有HSP90反义RNA的表达。结论:HSP90反义RNA在AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109细胞的表达,为进一步研究HSP90在细胞生物学中的作用建立了可靠的细胞模型。 展开更多
关键词 HSP90 反义核酸 酶保护分析法 基因转染
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一种快速单管小量提取质粒方法 被引量:4
14
作者 李永奇 张学庸 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第1期63-63,共1页
关键词 质粒 提取 单管小量提取
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人核糖体蛋白S15a在胃腺癌中的表达 被引量:4
15
作者 孟存英 袁东红 +3 位作者 王映梅 王燕 张欣 刘杰 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期937-938,共2页
目的:研究RPS15a在胃腺癌中的表达及意义。方法:免疫组化方法检测RPS15a在100例胃腺癌及癌旁组织中的表达。结果:胃腺癌中RPS15a蛋白阳性率为78.0%(78/100),癌旁组织中RPS15a蛋白阳性率为44.0%(44/100)。RPS15a蛋白在胃腺癌组织中表达... 目的:研究RPS15a在胃腺癌中的表达及意义。方法:免疫组化方法检测RPS15a在100例胃腺癌及癌旁组织中的表达。结果:胃腺癌中RPS15a蛋白阳性率为78.0%(78/100),癌旁组织中RPS15a蛋白阳性率为44.0%(44/100)。RPS15a蛋白在胃腺癌组织中表达明显高于癌旁组织(P<0.05),且与胃腺癌组织浆膜浸润、淋巴结转移有明显相关性(P<0.05)。结论:RPS15a可能在胃腺癌发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 胃腺癌 核糖体蛋白S15a 免疫组织化学
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观察细胞内药物浓度方法的比较 被引量:3
16
作者 王少东 张杏泉 樊代明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第3期216-217,共2页
关键词 肿瘤 交叉耐药 MDR 细胞内药物浓度
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HSP90β蛋白低调肿瘤细胞系的建立 被引量:1
17
作者 刘宪玲 徐立 +3 位作者 郭建成 肖冰 俞召才 樊代明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第2期102-105,共4页
目的:通过转染HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90于4株人消化系肿瘤细胞系,以建立HSP90β蛋白低调肿瘤细胞系,并研究HSP90β蛋白低调后细胞的生长情况。方法:用Lipofectamine介导将peD... 目的:通过转染HSP90β反义核酸重组子pcDNA-HSP90于4株人消化系肿瘤细胞系,以建立HSP90β蛋白低调肿瘤细胞系,并研究HSP90β蛋白低调后细胞的生长情况。方法:用Lipofectamine介导将peDNA-HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食道癌细胞系Ec109,用G418进行筛选,用RNA酶保护分析法鉴定HSP90β反义核酸的表达,用Western blot法检测HSP90β蛋白的表达。用细胞生长曲线研究基因转染细胞的生长情况。结果:pcDNA-HSP90转染细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109有HSP90β反义RNA表达,这些细胞HSP90β蛋白表达低调。研究还发现这些细胞的生长受到不同程度的抑制,其中AH-SGC7901/VCR及AH-Ec109细胞受抑程度更明显。结论:pcDNA-HSP90转染细胞AH-SGC7901,AH-SGC7901/VCR,AH-HCC7402及AH-Ec109 HSP90β蛋白表达降低,细胞的生长受到不同程度的抑制。 展开更多
关键词 HSP90β 基因转染 RNA酶保护 肿瘤细胞
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多药耐药性相关蛋白MRP在胃癌耐药细胞SGC7901中的表达 被引量:1
18
作者 安华章 毕锋 +1 位作者 刘志国 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第2期142-142,共1页
关键词 胃癌 阿霉素 耐药细胞 MRP SGC7901 表达
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胃癌耐药细胞特异表达新基因的部分cDNA克隆 被引量:1
19
作者 李永奇 尤涵 +1 位作者 张学庸 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期182-183,共2页
目的:研究胃癌多药耐药(multipledrgresistance,MDR)相关基因。方法:应用差异显示技术,对人胃癌SGC7901细胞系及其长春新硷耐药细胞(SGC7901VCR)之间的差异表达基因进行了差异显示。结果:得到3个长春新硷耐药细胞特有的差异条带的cDNA克... 目的:研究胃癌多药耐药(multipledrgresistance,MDR)相关基因。方法:应用差异显示技术,对人胃癌SGC7901细胞系及其长春新硷耐药细胞(SGC7901VCR)之间的差异表达基因进行了差异显示。结果:得到3个长春新硷耐药细胞特有的差异条带的cDNA克隆,命名为VRF1,VRF2与VRF3。RNA打点杂交证实,VRF1可在人胃癌SGC7901细胞中的长春新硷耐药细胞中特异表达,而在人胃癌非耐药的SGC7901细胞中不表达,可能与SGC7901肿瘤细胞耐药性产生有一定的关系。VRF2与VRF3为无差异的假阳性条带,本实验未对其做进一步地研究。结论:经序列测定分析,VRF1未在GenBank数据库中发现其同源序列,证实为一种新的基因序列。VRF1为3′端的非编码区序列,并有一个加尾信号AATAA。该序列已被GenBank数据库收录,编号为AI00266。 展开更多
关键词 差异显示技术 多药耐药 基因表达 胃癌细胞
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HSP90β反义核酸载体转染细胞HSP90β蛋白的表达 被引量:1
20
作者 刘宪玲 徐立 +3 位作者 郭建成 肖冰 俞召才 樊代明 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第2期124-127,共4页
目的了解HSP90β 反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达。方法通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。经用G... 目的了解HSP90β 反义核酸转染细胞中HSP90β蛋白的表达。方法通过lipofectamine介导将HSP90β反义核酸重组子pcDNA HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901、人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR、人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109。经用G418进行筛选 ,对筛选出的阳性克隆用Westernblot检测HSP90β蛋白的表达。结果pcDNA HSP90转染人胃癌细胞系SGC7901 ,人胃癌耐药细胞系SGC7901/VCR ,人肝癌细胞系HCC7402及人食管癌细胞系Ec109后 ,用G418筛选出的阳性克隆 ,分别被命名为:AH SGC7901 ,AH SGC7901/VCR ,AH HCC7402及AH Ec109。Westernblot检测结果表明 ,AH SGC7901,AH SGC7901/VCR ,AH HCC7402及AH Ec109表达的HSP90β蛋白低于其亲本细胞。结论HSP90β反义核酸可封闭HSP90βmRNA ,使pcDNA HSP90转染的细胞AH SGC7901 ,AH SGC7901/VCR ,AH HCC7402及AH Ec109表达的HSP90β蛋白减少 ,为研究HSP90下调对肿瘤细胞生物学活性的影响提供了实验材料。 展开更多
关键词 HSP90β 反义核酸载体 基因转染
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