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艾滋病毒-env26肽基因的化学合成及克隆
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作者 项秉懿 杨静华 +2 位作者 陈南春 沈利群 苏成芝 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第3期229-234,共6页
选用HTLV-Ⅲ前病毒核酸序列中的6333—6410作为合成HIV-env26肽结构基因,加上必要序列及接头共104bp,分成8个寡核苷酸片段,使结构基因能自身连接成多重串联体。用DNA合成仪合成。组装后与高效表达质粒pRC23重组,转化TAP106。经筛选、鉴... 选用HTLV-Ⅲ前病毒核酸序列中的6333—6410作为合成HIV-env26肽结构基因,加上必要序列及接头共104bp,分成8个寡核苷酸片段,使结构基因能自身连接成多重串联体。用DNA合成仪合成。组装后与高效表达质粒pRC23重组,转化TAP106。经筛选、鉴定及DNA序列分析,得到一株含有HIV-env26肽基因4重串联体的重组菌,命名为pXY104。 展开更多
关键词 HIV 肽基因 合成 分子克隆
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微生物表面呈现技术及应用 被引量:1
2
作者 王雨田 胡家露 +1 位作者 陈苏民 杨胜利 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第5期422-426,共5页
微生物表面呈现技术以其广泛的应用前景 ,日益引起关注 .
关键词 微生物 表面呈现 方法技术
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自由基与细胞凋亡 被引量:68
3
作者 惠宏襄 赵小宁 +2 位作者 金明 王成济 莫简 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期12-16,共5页
细胞凋亡是指细胞在生理和病理情况下的一种死亡模式,广泛涉及到肿瘤、衰老和退行性病变等一系列疾病.最近有实验表明自由基与细胞凋亡有密切的关系.
关键词 细胞凋亡 自由基 病理化学
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紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡 被引量:15
4
作者 彭玮丹 张杰 +3 位作者 曹云新 惠宏襄 金明 王成济 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期402-406,共5页
目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0/G1期及G2/M期并诱导其... 目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0/G1期及G2/M期并诱导其凋亡,凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征,流式细胞仪检测有凋亡峰出现,琼脂糖凝胶电泳显示3nmol·L-1紫杉醇作用72h便可见明显的DNA梯带。100nmol·L-1和1000nmol·L-1浓度的紫杉醇作用于细胞,在形态变化与细胞周期变化上有很大差别。紫杉醇作用短时间(<2h)去除后再培养比持续性作用更早促使细胞凋亡。结论紫杉醇不仅可以阻断食管癌细胞的分裂,而且对于间期细胞也有很大作用。细胞周期阻断并不直接诱导细胞凋亡,甚至可能抑制细胞凋亡的进程。食管癌细胞中存在多条凋亡途径。 展开更多
关键词 紫杉醇 细胞周期阻断 细胞凋亡 食管癌细胞
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一株人源性抗HBsAg抗体Fab片段的筛选及序列分析 被引量:9
5
作者 高辉 高磊 +7 位作者 纪宗玲 路凡 陈南春 陈苏民 余宙耀 张宜俊 尤玉琴 粟宽源 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期155-157,共3页
一株人源性抗HBsAg抗体Fab片段的筛选及序列分析高辉高磊纪宗玲路凡陈南春陈苏民余宙耀张宜俊尤玉琴粟宽源(第四军医大学生物化学教研室,西安710031空军广州医院全军肝病中心)乙型肝炎是我国常见的传染性疾... 一株人源性抗HBsAg抗体Fab片段的筛选及序列分析高辉高磊纪宗玲路凡陈南春陈苏民余宙耀张宜俊尤玉琴粟宽源(第四军医大学生物化学教研室,西安710031空军广州医院全军肝病中心)乙型肝炎是我国常见的传染性疾病,目前尚无特效的治疗手段。研究发... 展开更多
关键词 乙型肝炎 抗HBsAg抗体 FAB片段 筛选 序列分析
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抗人CD8单抗κ轻链可变区基因的克隆和序列测定 被引量:8
6
作者 杨安钢 吉昌华 +4 位作者 韩骅 杨立宏 苏成芝 许辉 金伯泉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第4期286-286,共1页
OK T8杂交瘤细胞株从American typecuhure collection(ATCC)获得,产生抗人CD8分子的单克隆抗体IgG2a(γ2a,κ),为了对这一鼠源性单抗进行基因工程改造,我们首先克隆了该单抗的κ轻链可变区基因,并测定了其碱基序列,现将结果报道如下: ... OK T8杂交瘤细胞株从American typecuhure collection(ATCC)获得,产生抗人CD8分子的单克隆抗体IgG2a(γ2a,κ),为了对这一鼠源性单抗进行基因工程改造,我们首先克隆了该单抗的κ轻链可变区基因,并测定了其碱基序列,现将结果报道如下: 通过计算机查找并分析了已发表的几十株抗体的轻链可变区基因序列,经比较其5’端保守序列和J区序列,设计了一对DNA引物:GTGAATTCATGGACATCCAGATGACCCA- 展开更多
关键词 基因 单克隆抗体 免疫球蛋白
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人羧肽酶A的cDNA克隆和原核表达 被引量:5
7
作者 武国军 郝晓柯 +4 位作者 白玉杰 张盈华 药立波 季少平 王吉村 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期165-166,169,共3页
目的:获得人羧肽酶A基因,为进一步构建、表达抗人精浆蛋白单链抗体/羧肽酶A融合蛋白,用于前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法:从人正常肺组织中提取总RNA,经反转录PCR分离人羧肽酶A基因,并克隆入pUC19质粒中,用全自动荧... 目的:获得人羧肽酶A基因,为进一步构建、表达抗人精浆蛋白单链抗体/羧肽酶A融合蛋白,用于前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法:从人正常肺组织中提取总RNA,经反转录PCR分离人羧肽酶A基因,并克隆入pUC19质粒中,用全自动荧光测序仪测定其序列。将该目的基因插入pBV220载体,并转入大肠杆菌DH5α中,经热诱导表达重组蛋白。结果:获得了人羧肽酶A基因(由1251bp组成,可编码417个氨基酸),与国外发表的人羧肽酶AcDNA序列一致。表达的重组蛋白以SDSPAGE分析,在Mr为49000左右处出现1条新生蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的17%。结论:成功地克隆人羧肽酶A基因,为构建表达抗人精浆蛋白/羧肽酶A的双功能抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 羧肽酶A 基因克隆 测序 前列腺肿瘤 CDNA
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人纤溶酶原饼环区5基因的原核表达及活性测定 被引量:6
8
作者 范彬 张英起 +4 位作者 颜真 赵宁 陈长生 药立波 苏成芝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期710-714,共5页
人纤溶酶原饼环区 5 (hPgnK5 )是新的血管生成抑制因子 .PCR法改造hPgnK5基因 ,所得hPgnK5基因包括编码人纤溶酶原C4 62 到P54 4共 83个氨基酸残基 ,而且在 5′ ,3′分别引入了EcoRⅠ和BamHⅠ位点 .以pThiohisA构建hPgnK5基因原核表达载... 人纤溶酶原饼环区 5 (hPgnK5 )是新的血管生成抑制因子 .PCR法改造hPgnK5基因 ,所得hPgnK5基因包括编码人纤溶酶原C4 62 到P54 4共 83个氨基酸残基 ,而且在 5′ ,3′分别引入了EcoRⅠ和BamHⅠ位点 .以pThiohisA构建hPgnK5基因原核表达载体 ,在大肠杆菌TOP10中表达该蛋白 .通过柱层析法获得hPgnK5纯化蛋白 .免疫印迹反应表明该蛋白具有hPgnK5免疫活性 .体外实验表明 ,该蛋白具有抑制血管内皮细胞增殖活性 . 展开更多
关键词 人纤溶酶原饼环区5 血管生成抑制因子 生物活性 基因表达
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克隆MCF-7细胞凋亡差异表达基因的一种方法 被引量:4
9
作者 晏伟 朱峰 +6 位作者 赵忠良 柴玉波 岳文 邵晨 路凡 李青 王成济 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期35-37,共3页
目的克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因,分析验证所用方法的特点。方法采用基于PCR的消减杂交技术,在已建立的全反式维甲酸诱导人乳腺癌MCF-7细胞的凋亡模型中,克隆MCF-7细胞凋亡的相关基因。结果从13个克隆中... 目的克隆人乳腺癌MCF-7细胞凋亡相关基因,分析验证所用方法的特点。方法采用基于PCR的消减杂交技术,在已建立的全反式维甲酸诱导人乳腺癌MCF-7细胞的凋亡模型中,克隆MCF-7细胞凋亡的相关基因。结果从13个克隆中,共筛选出5个表达的基因。其中4个为已知基因,1个为新基因。新基因命名为apmcf-1,Genbank登录号为AF141882。4个已知基因中3个与凋亡关系密切。结论这种改良的基于PCR的消减杂交技术,为克隆差异表达基因提供了一种新的方法和思路。 展开更多
关键词 MCF-7细胞 细胞凋亡 基因表达 聚合酶链反应
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人源性抗HBsAg抗体Fab段噬菌体呈现文库的构建、筛选及阳性克隆核苷酸序列测定 被引量:6
10
作者 高辉 杨安钢 +2 位作者 高磊 任向荣 余宙耀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期308-311,共4页
目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩... 目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物克隆进载体pComb3H相应的位点 ,构建成噬菌体呈现库 ,并以HBsAg包被的 96孔板对抗体库进行 3轮淘筛 ,将所获克隆分别与HBsAg进行ELISA反应 ,挑取显色大于对照 2 0倍以上的阳性克隆进行DNA测序。结果 :lgG1的Fd段和κ轻链cDNA得到扩增 ,构建了一实际库容量为 1 8× 10 5 的噬菌体呈现文库。通过特异性淘筛 ,获得与HBsAg有较高新合力的 3株Fab抗体并测定其编码序列。DNA序列测定结果表明 ,3株抗体中两株的Fd段完全一样 ,且 3株的轻链完全一样。结论 :成功构建了一个经HBsAg抗原免疫的人源抗体Fab段噬菌体抗体库 ,筛选得到了 3株特异性抗体的Fab片段。 展开更多
关键词 乙型肝炎抗原 抗体 分子克隆 DNA 噬菌体呈现文库
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负载肝癌排斥抗原肽的树突状细胞瘤苗活化T细胞的应用 被引量:3
11
作者 曲萍 曹云新 +2 位作者 隋延仿 张立红 张秀敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期389-392,共4页
目的 探讨负载肝癌排斥抗原肽SLIVHLNEV(C met突变肽 ) [1 ] 的树突状细胞瘤苗活化的T细胞在体外及裸鼠肝癌模型体内诱导的特异性抗肿瘤免疫。方法 用肝癌排斥抗原肽SLIVHLNEV致敏从脾脏中分离培养的树突状细胞 ,再与同源T淋巴细胞混... 目的 探讨负载肝癌排斥抗原肽SLIVHLNEV(C met突变肽 ) [1 ] 的树突状细胞瘤苗活化的T细胞在体外及裸鼠肝癌模型体内诱导的特异性抗肿瘤免疫。方法 用肝癌排斥抗原肽SLIVHLNEV致敏从脾脏中分离培养的树突状细胞 ,再与同源T淋巴细胞混合培养。乳酸脱氢酶 (LDH)释放法检测细胞毒作用。同时建立荷人肝癌细胞系HHCC的裸鼠移植瘤模型 ,观察DC瘤苗活化的T细胞预防移植瘤发生和抑制移植瘤生长的作用。结果 在体外实验中 ,DC瘤苗诱导的CTLs能够特异性杀伤HHCC肝癌细胞。在裸鼠模型中 ,CTLs不但能预防裸鼠移植瘤的发生 ,而且抑制裸鼠移植瘤生长。 展开更多
关键词 肿瘤排斥抗原肽 肝细胞 树突细胞 瘤苗
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不同培养条件对骨骼肌细胞增殖及分化的影响 被引量:7
12
作者 秦瑞峰 顾晓明 张浩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期14-16,共3页
目的:研究不同培养条件对骨骼肌细胞增殖及分化的影响。方法:以体外培养小鼠肌母细胞C2C12为研究模型,对照组用含φ=10%胎牛血清液培养,实验组培养基改变为φ=2%胎牛血清的DMEM液,分别于更换培养液后24、48、72h,观察细胞形态变化。结果... 目的:研究不同培养条件对骨骼肌细胞增殖及分化的影响。方法:以体外培养小鼠肌母细胞C2C12为研究模型,对照组用含φ=10%胎牛血清液培养,实验组培养基改变为φ=2%胎牛血清的DMEM液,分别于更换培养液后24、48、72h,观察细胞形态变化。结果:对照组细胞形态实验前后无变化,实验组24、48h时部分细胞出现死亡,72h存活细胞开始融合,肌管形成。结论:胎牛血清含量为φ=2%的DMEM液有促进肌母细胞分化,从而进一步形成肌管的作用;含φ=10%的DMEM不能使之分化。 展开更多
关键词 骨髓肌 肌细胞 分化 细胞增殖
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5-羟色胺对心肌细胞增殖及蛋白激酶C活性的影响 被引量:3
13
作者 招明高 张延凤 +3 位作者 贾敏 张晓楠 梅其炳 赵德化 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第12期1537-1538,1551,共3页
目的 :观察 5 -羟色胺 (5 -HT)对新生大鼠心肌细胞增殖及蛋白激酶C(PKC)活性的影响 ,探讨 5 -HT在心肌肥大发病中的作用。方法 :培养乳鼠心肌细胞 ,应用BCA法测定细胞总蛋白 ;流式细胞仪测定DNA含量 ;同位素底物掺入检测PKC活性。结果 :... 目的 :观察 5 -羟色胺 (5 -HT)对新生大鼠心肌细胞增殖及蛋白激酶C(PKC)活性的影响 ,探讨 5 -HT在心肌肥大发病中的作用。方法 :培养乳鼠心肌细胞 ,应用BCA法测定细胞总蛋白 ;流式细胞仪测定DNA含量 ;同位素底物掺入检测PKC活性。结果 :5 -HT在 1 μmol·L- 1 、1 0 μmol·L- 1 和 1 0 0 μmol·L- 1 时均显著促进心肌细胞蛋白质和DNA合成 ,以 1 0 μmol·L- 1 剂量时作用最强。 5 -HT在 1 μmol·L- 1 和 1 0mol·L- 1 剂量时可加强心肌细胞PKC活性 ,并促使PKC从胞浆移位到细胞膜 ,5 -HT2 受体拮抗剂mianserin可逆转此作用。结论 :5 -HT可促进新生大鼠心肌细胞总蛋白和DNA合成 ,并通过心肌细胞 5 -HT2 受体激活PKC活性 ,促使PKC从胞浆移位到细胞膜 ,提示 5 展开更多
关键词 5-羟色胺 心肌细胞增殖 蛋白激酶C 心肌肥大 血清素
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抗细菌硫氧化还原蛋白Thioredoxin单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用 被引量:3
14
作者 刘飞 刘崟 +3 位作者 金伯泉 董帮权 刘惠萍 朱勇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期221-221,224,共2页
硫氧化还原蛋白Thioredoxin(Trx)是一类存在于细菌、植物及动物等多种生物体内的耐热蛋白[1],含有保守的WCGPC序列。还原态的Trx具有很强的蛋白二硫键氧化还原酶活性,作为核酸还原酶的供氢体在DNA的合成与复... 硫氧化还原蛋白Thioredoxin(Trx)是一类存在于细菌、植物及动物等多种生物体内的耐热蛋白[1],含有保守的WCGPC序列。还原态的Trx具有很强的蛋白二硫键氧化还原酶活性,作为核酸还原酶的供氢体在DNA的合成与复制中起重要作用。大肠杆菌Trx蛋白... 展开更多
关键词 硫氧化还原蛋白 THIOREDOXIN 单克隆抗体 制备
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用消减杂交技术克隆人成骨样细胞机械牵张力敏感基因的研究 被引量:2
15
作者 冯雪 丁寅 +3 位作者 段银钟 林珠 欧阳为明 蒲勤 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期278-280,共3页
目的 对人成骨样细胞机械牵张力敏感基因进行克隆研究。方法 对人成骨样细胞Saos_2进行二维方向上的加载 ,变形幅度为 12 % ,牵拉频率为 6周期 分钟 ,加载 12h后分别提取牵张力作用后Saos_2细胞及未作处理的正常Saos_2对照细胞的mRN... 目的 对人成骨样细胞机械牵张力敏感基因进行克隆研究。方法 对人成骨样细胞Saos_2进行二维方向上的加载 ,变形幅度为 12 % ,牵拉频率为 6周期 分钟 ,加载 12h后分别提取牵张力作用后Saos_2细胞及未作处理的正常Saos_2对照细胞的mRNA ,反转录制备cDNA ,将cDNA进行消减杂交 ,构建加载细胞与未加载细胞的差异表达基因的扣除cDNA文库 ,克隆后进行序列测定。结果 克隆到的基因片段中 ,功能已知基因片段 15个 ,功能未知基因片段 2个 ,其中牵张力敏感基因 1(SSG1)位于 9号染色体上 ,功能未知 ;牵张力敏感基因 2 (SSG2 )位于 18号染色体上 ,与转录因子 2 ,4高度同源。结论 用消减杂交技术可以对人成骨细胞样机械牵张力敏感基因进行有效的克隆研究。 展开更多
关键词 消减杂交 基因克隆 成骨细胞 机械牵张力 敏感基因
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核酶对bcl-2mRNA的体外切割 被引量:4
16
作者 赵永同 惠宏襄 +2 位作者 刘爱平 王刚 王成济 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第1期1-5,共5页
通过微机对bcl-2RNA二级结构的分析,设计针对bcl-2片段5'CGCGACCCGGUCGCCAGGACCUCG3'的“锤头状”(Hammerhead)核酶(Ribozyme,RD)基因,平端连接于pGEM-3Z... 通过微机对bcl-2RNA二级结构的分析,设计针对bcl-2片段5'CGCGACCCGGUCGCCAGGACCUCG3'的“锤头状”(Hammerhead)核酶(Ribozyme,RD)基因,平端连接于pGEM-3Zf(-)HincⅡ位点,克隆后经测序表明序列正确,bcl-2和Ribozyme基因经体外转录,50℃作用2h,从1656-1657(C-G)位之间切断bcl-2RNA片段. 展开更多
关键词 核酶 MRNA BCL-2 切割活性 MRNA
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高浓度聚丙烯酰胺凝胶的简易干燥法 被引量:3
17
作者 张延凤 张晓楠 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期526-526,共1页
关键词 聚丙烯酰胺凝胶 干燥法 高浓度凝胶 多肽 药物
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应用锚定消减杂交技术克隆分析大鼠脊髓原代神经元损伤、修复相关基因 被引量:1
18
作者 李欣 阙海萍 +3 位作者 马振莲 柴玉波 刘涛 刘少君 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1072-1075,共4页
目的克隆大鼠脊髓原代神经元细胞损伤、修复相关基因,从分子水平探讨中枢神经系统损伤修复的机制。方法建立脊髓原代神经元体外损伤模型,运用改良的锚定消减杂交技术,克隆分析与原代脊髓神经元细胞损伤、修复相关的基因。结果随机挑选11... 目的克隆大鼠脊髓原代神经元细胞损伤、修复相关基因,从分子水平探讨中枢神经系统损伤修复的机制。方法建立脊髓原代神经元体外损伤模型,运用改良的锚定消减杂交技术,克隆分析与原代脊髓神经元细胞损伤、修复相关的基因。结果随机挑选110个消减杂交得到的cDNA克隆,测序分析得到27个有功能线索的差异表达序列,其中23个为已知基因,包括Snc、Clu等与神经系统发育及退行性病变相关基因。结论运用锚定消减杂交技术成功克隆了一批与脊髓神经元损伤、修复相关的基因,为探求中枢神经系统损伤修复的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 神经元 损伤修复 基因 克隆
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5-羟色胺对去甲肾上腺素诱导大鼠心肌肥厚的影响 被引量:1
19
作者 招明高 张延凤 +2 位作者 张晓楠 梅其炳 赵德化 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期98-101,共4页
目的 了解 5 羟色胺 (5 HT)对去甲肾上腺素(NE)所致心肌肥厚有何影响。方法 大鼠分别ip5 HT 2mg·kg- 1,NE 2mg·kg- 1或NE 2mg·kg- 1+ 5 HT 2mg·kg- 1。每日 2次 ,连续给药 15d ,d 16麻醉 ,颈动脉插管 ,观察累... 目的 了解 5 羟色胺 (5 HT)对去甲肾上腺素(NE)所致心肌肥厚有何影响。方法 大鼠分别ip5 HT 2mg·kg- 1,NE 2mg·kg- 1或NE 2mg·kg- 1+ 5 HT 2mg·kg- 1。每日 2次 ,连续给药 15d ,d 16麻醉 ,颈动脉插管 ,观察累积iv不同剂量 5 HT对平均动脉压和心电图的影响 ,之后处死大鼠 ,观察心重与体重之比。结果 累积iv 5 HT ,NE组和NE + 5 HT组大鼠血压明显升高 ,诱发室速和室颤的鼠数明显增加 ,但该两组间无显著差异。NE组心室重与体重之比明显增加 ,NE + 5 HT组较NE组相比进一步增加。结论  5 HT加强NE诱发大鼠心肌肥厚和心律失常的作用。 展开更多
关键词 5-羟色胺 去甲肾上腺素 心肌肥厚 血压 心律失常
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强力霉素对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖抑制及促凋亡作用 被引量:3
20
作者 张彩莲 戚好文 +3 位作者 葛胜利 郭向云 慕德广 张宇飞 《科学技术与工程》 2007年第11期2495-2498,2503,共5页
为研究强力霉素体外对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖及凋亡的影响。应用MTT比色法研究不同浓度强力霉素(2.5,5,10,20,50mg/L)对A549细胞增殖的影响。荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、AnnexinV-PI双标法等多项方法,研究强力霉素对A549细胞... 为研究强力霉素体外对人非小细胞肺癌A549细胞的增殖及凋亡的影响。应用MTT比色法研究不同浓度强力霉素(2.5,5,10,20,50mg/L)对A549细胞增殖的影响。荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳、AnnexinV-PI双标法等多项方法,研究强力霉素对A549细胞的促凋亡作用;采用免疫组化的方法,观察药物作用后bcl-2和bax的表达。强力霉素作用后,A549细胞的吸光度值降低,并出现凋亡特有的细胞核改变DNA梯状条带,早期凋亡的细胞数增加,伴有bcl-2的下调,bax上调。这表明强力霉素可抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡,其诱导凋亡的作用可能与其调节bcl-2/bax的表达有关。 展开更多
关键词 强力霉素 细胞凋亡 非小细胞肺癌bcl-2 BAX
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