基因芯片与生物信息学 被引量：1

1

作者 赵忠良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 2000年第5期370-371,共2页

关键词 生物信息学 基因芯片 遗传信息

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全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU-145凋亡的分子机理 被引量：1

2

作者 邵晨 邵国兴 +4 位作者 王禾 陈宝琦 贺大林 朱峰 赵忠良 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 2000年第3期247-250,共4页

目的　克隆全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系 DU- 1 45细胞产生凋亡的相关基因。探讨维甲酸诱导前列腺癌细胞产生凋亡的分子机理。方法　应用全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU- 1 45细胞凋亡 ,采用基于 PCR的改良消减杂交技术克隆与凋... 目的　克隆全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系 DU- 1 45细胞产生凋亡的相关基因。探讨维甲酸诱导前列腺癌细胞产生凋亡的分子机理。方法　应用全反式维甲酸诱导前列腺癌细胞系DU- 1 45细胞凋亡 ,采用基于 PCR的改良消减杂交技术克隆与凋亡相关的基因。结果　在前列腺癌 DU- 1 45细胞凋亡过程中 ,有大量肿瘤坏死因子 (TNF)的表达 ,同时 ,克隆出 c- erb B- 2基因。结论　TNF及 c- erb B- 2基因在由全反式维甲酸诱导的前列腺癌细胞系 DU- 1 展开更多

关键词 前列腺癌 全反式维甲酸 TNF DU-145细胞

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抗人CD_3单链抗体基因的构建及序列分析 被引量：12

3

作者 白玉杰 杨安钢 +3 位作者 苏成芝 王国华 王方 茹小荣 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1996年第3期6-11,共6页

本文在已克隆抗人ＣＤ３抗体ＶＨ和Ｖｋ基因的基础上，设计并合成了ＰＣＲ引物。两个外侧引物分别含有ＥｃｏＲＩ和ＳａｌＩ酶切位点及起始码和终止码序列，４个内侧引物各含部分连接肽基因序列。用加端ＰＣＲ分别在ＶＨ基因３＇端和Ｖ... 本文在已克隆抗人ＣＤ３抗体ＶＨ和Ｖｋ基因的基础上，设计并合成了ＰＣＲ引物。两个外侧引物分别含有ＥｃｏＲＩ和ＳａｌＩ酶切位点及起始码和终止码序列，４个内侧引物各含部分连接肽基因序列。用加端ＰＣＲ分别在ＶＨ基因３＇端和Ｖｋ基因５＇端延伸部分连接肽基因序列，回收后混合运火；应用重叠延伸拼接法，将ＶＨ和Ｖｋ基因通过Ｌｉｎｋｅｒ序列串联为单链抗体基因；利用ＰＣＲ产物两端预先设计的ＳａｌＩ和ＥｃｏＲＩ酶切位点，将其克隆到ｐＵＣ１９质粒中，筛选到阳性克隆。经双脱氧终止法序列测定：ＶＨ和ＶＫ基因及Ｌｉｎｋｅｒ序列均正确，为用基因工程技术生产单链抗体奠定了基础。 展开更多

关键词 单链 抗体 基因 聚合酶链反应 CD3 构建

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一种双顺反子表达载体的构建及应用的研究 被引量：8

4

作者 刘新平 陈苏民 +4 位作者 陈南春 赵忠良 柴玉波 崔有宏 薛泳涛 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第2期156-159,共4页

将表达载体ｐＥＣ３４中的一段寡核苷酸序列，其中包括翻译增强子序列、ＳＤ序列、终止码、起始码及两端的限制性内切酶位点，插入ＧＳＴ基因后，构建成双顺反子的表达载体．利用此载体表达了非融合的人骨形成蛋白２Ａ（ｈＢＭＰ２Ａ）... 将表达载体ｐＥＣ３４中的一段寡核苷酸序列，其中包括翻译增强子序列、ＳＤ序列、终止码、起始码及两端的限制性内切酶位点，插入ＧＳＴ基因后，构建成双顺反子的表达载体．利用此载体表达了非融合的人骨形成蛋白２Ａ（ｈＢＭＰ２Ａ）和人骨形成蛋白３（ｈＢＭＰ３）Ｃ端肽段，将第一顺反子基因（ＧＳＴ基因）切小到原来的１／３时，则位于下游的第二顺反子基因编码的蛋白质在大肠杆菌中的表达量增加一倍。 展开更多

关键词 双顺反子 基因表达 表达载体

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EphB2胞外不同结构域在酵母双杂交系统中自激活作用的检测 被引量：4

5

作者 张晓光 韩月恒 +3 位作者 韩景田 杨敏 药立波 刘新平 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期137-137,共1页

关键词 EPHB2 酵母双杂交系统 pGBT9 配体 自激活作用

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酪氨酸激酶受体Eph亚族的研究进展 被引量：3

6

作者 张晓光 药立波 苏成芝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1999年第1期15-19,共5页

酪氨酸激酶受体（ＲＴＫ）参与细胞生长、分化、胚胎发育及细胞内信号传递等过程，具有相当重要的生理功能．目前已发现５０多种ＲＴＫ基因分属于１４种亚族，Ｅｐｈ亚族是其中最大的家族，由１４个基因组成，一些基因主要在脑的发育中... 酪氨酸激酶受体（ＲＴＫ）参与细胞生长、分化、胚胎发育及细胞内信号传递等过程，具有相当重要的生理功能．目前已发现５０多种ＲＴＫ基因分属于１４种亚族，Ｅｐｈ亚族是其中最大的家族，由１４个基因组成，一些基因主要在脑的发育中表达，另一些则在各种组织中广泛表达．最近该亚族胞外配体的发现为深入研究其生理功能打下基础．综述了Ｅｐｈ亚族成员的来源、表达及其配体的研究概况． 展开更多

关键词 酪氨酸激酶 受体 Eph亚族 配体

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抗人CD3单链抗体的表达及其分离纯化 被引量：3

7

作者 白玉杰 苏成芝 杨安钢 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期201-203,共3页

本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的... 本研究将构建的抗人ＣＤ３单链抗体基因，克隆到融合蛋白表达载体ｐＧＥＸ－４Ｔ－１中，用ＩＰＴＧ诱导表达ＧＳＴ－ＳｃＦｖ融合蛋白，并以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析，在Ｍｒ为５２０００左右出现一条新生蛋白带，表达量约占菌体总蛋白的４０％。经初步纯化和复性后，用ＧＳＴ亲和色谱纯化，再经凝血酶水解获得抗人ＣＤ３ＳｃＦｖ，竞争结合抑制实验证明。 展开更多

关键词 单链抗体 表达 纯化 分离 CD3单链抗体

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抗人黑色素瘤单链抗体基因的克隆和分泌型表达 被引量：1

8

作者 王字玲 邓健蓓 +3 位作者 韩骅 陈萍 药立波 苏成芝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期58-62,共5页

应用ＲＴ－ＰＣＲ技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＢ８７６０中克隆了抗体轻、重链可变区基因，然后用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因将ＶＨ、ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行了序列测定．计算机分析表明ＶＨ，ＶＬ均... 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术从分泌抗人黑色素瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞ＨＢ８７６０中克隆了抗体轻、重链可变区基因，然后用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因将ＶＨ、ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行了序列测定．计算机分析表明ＶＨ，ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因．ＶＨ、ＶＬ、ｌｉｎｋｅｒ拼接正确．ＳｃＦｖ基因全长７２９ｂｐ，其中ＶＨ基因长３６０ｂｐ，编码１２０个氨基酸，ＶＬ基因长３２４ｂｐ，编码１０８个氨基酸．在噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ中表达了可溶性的ＳｃＦｖ蛋白，表达产物经流式细胞仪检测可特异地与黑色素瘤细胞结合，不与肝癌。 展开更多

关键词 单链抗体 基因克隆 基因表达 黑色素瘤

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抗人肝癌单链抗体的基因克隆和分泌型表达 被引量：1

9

作者 牛利国 陈志南 +4 位作者 苏成芝 药立波 刘新平 王国华 杨敏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期102-104,109,共4页

应用ＲＴＰＣＲ技术，从分泌抗人肝癌单克隆抗体（ｍＡｂ）的杂交瘤细胞ＨＡｂ１８中，扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ基因，并测序。计算机分析表明，ＶＨ和ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因。用（Ｇｌｙ４Ｓｅ... 应用ＲＴＰＣＲ技术，从分泌抗人肝癌单克隆抗体（ｍＡｂ）的杂交瘤细胞ＨＡｂ１８中，扩增出抗体ＶＨ和ＶＬ基因，并测序。计算机分析表明，ＶＨ和ＶＬ均符合小鼠抗体可变区的特征，为功能性重排的抗体可变区基因。用（Ｇｌｙ４Ｓｅｒ）３连接肽基因，将ＶＨ和ＶＬ连接成ＳｃＦｖ基因，并进行序列测定，结果表明，ＶＨ，ＶＬ，ｌｉｎｋｅｒ拼接正确，基因全长为７２６ｂｐ。用噬菌粒表达载体ｐＣＡＮＴＡＢ５Ｅ在大肠杆菌中表达了可溶性的ＳｃＦｖ融合蛋白，经流式细胞仪分析表达产物可特异地与肝癌细胞结合。 展开更多

关键词 单链抗体 克隆 表达 噬菌粒载体 肝肿瘤

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鼠抗hTNF-α单克隆抗体重链基因片段的克隆和cDNA序列测定 被引量：1

10

作者 邓健蓓 韩骅 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第1期24-27,共4页

采用反转录ＰＣＲ方法，以一对锚ＰＣＲ引物和一对针对鼠ＩｇＶＨ区基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中，分别扩增和克隆了自５′非翻译区至Ｃγ１近３′端的重链基因片段和重链可变区基因片段，并测定... 采用反转录ＰＣＲ方法，以一对锚ＰＣＲ引物和一对针对鼠ＩｇＶＨ区基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中，分别扩增和克隆了自５′非翻译区至Ｃγ１近３′端的重链基因片段和重链可变区基因片段，并测定了其核苷酸序列。计算机分析表明，系重排的鼠Ｉｇ重链基因。 展开更多

关键词 IgVH基因 HTNF-Α 单克隆抗体 核苷酸序列

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鼠抗hTNF－α单克隆抗体轻链可变区基因片段的克隆和cDNA序列测定 被引量：1

11

作者 陈萍 邓建蓓 +2 位作者 王字玲 韩骅 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CSCD 1996年第4期21-26,共6页

目的：获得鼠抗人肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）单克隆抗体轻链可变区基因序列。方法：采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，以一对针对鼠Ｉｇ轻链可变区（ＶＬ）基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞... 目的：获得鼠抗人肿瘤坏死因子－α（ｈＴＮＦ－α）单克隆抗体轻链可变区基因序列。方法：采用反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）方法，以一对针对鼠Ｉｇ轻链可变区（ＶＬ）基因的引物，从分泌鼠抗ｈＴＮＦ－α单克隆抗体的Ｅ６杂交瘤细胞株中扩增和克隆ＶＬ基因片段，用双脱氧链终止法测定其核苷酸序列，并进行计算机分析。结果：此ＶＬ基因长３４２ｂＰ，可编码１１４个氨基酸，为开放读框；有明确的框架区（ＦＲＳ）和抗原互补决定区（ＣＤＲＳ）；含有抗体可变区特征性的两个半胱酸残基。在基因数据库（ＥＭＢＬＧｅｎｅＢａｎｋ１９９５）中，未查见相同序列的基因。结论：此ＶＬ基因系重排的鼠Ｉｇ轻链基因。 展开更多

关键词 hTNF 单克隆抗体 基因 核苷酸 序列 克隆

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抗CD8单抗轻、重链可变区基因的克隆和序列分析

12

作者 陈梅红 王字玲 +1 位作者 邓健蓓 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期11-12,70,共3页

采用反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法，从分泌特异性抗ＣＤ８单抗的杂交瘤细胞中扩增出该抗体轻、重链可变区（ＶＨ，ＶＬ）基因，并测定了其序列，经计算机分析，ＶＨ和ＶＬ基因均为新发现的基因序列，符合功能重排的鼠抗体可变区基... 采用反转录ＰＣＲ（ＲＴＰＣＲ）法，从分泌特异性抗ＣＤ８单抗的杂交瘤细胞中扩增出该抗体轻、重链可变区（ＶＨ，ＶＬ）基因，并测定了其序列，经计算机分析，ＶＨ和ＶＬ基因均为新发现的基因序列，符合功能重排的鼠抗体可变区基因特征。 展开更多

关键词 CD8 单克隆抗体 可变区基因 PCR 克隆 序列分析

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抗人胃癌全套单链抗体基因文库的构建

13

作者 杨丽娟 苏成芝 聂晓燕 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第3期F003-F003,F004,共2页

抗人胃癌全套单链抗体基因文库的构建杨丽娟苏成芝聂晓燕（第四军医大学生物化学及分子生物学教研室，西安７１００３２）胃癌是最常见的恶性肿瘤，占我国癌症死亡的首位［１］。单克隆抗体对胃癌的诊断和治疗有一定意义。但由于鼠源性... 抗人胃癌全套单链抗体基因文库的构建杨丽娟苏成芝聂晓燕（第四军医大学生物化学及分子生物学教研室，西安７１００３２）胃癌是最常见的恶性肿瘤，占我国癌症死亡的首位［１］。单克隆抗体对胃癌的诊断和治疗有一定意义。但由于鼠源性单抗有制备周期长，易产生排斥反应等... 展开更多

关键词 胃肿瘤 全套单链抗体 基因文库 构建

全文增补中

BMP植入后的诱骨活性与免疫应答

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作者 余清 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第A02期17-19,共3页

ＢＭＰ是一类具有诱骨活性的蛋白质。目前，有关ＢＭＰ诱骨性能的研究已取得可喜进展。因此，通过植入ＢＭＰ治疗骨不连及骨缺损已不是梦想。但ＢＭＰ植入体内后引起的免疫应答往往成为其临床应用的障碍。本文综述了植入不同ＢＭＰ后。

关键词 BMP 移植 免疫应答 诱骨活性

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