特异性转移因子对肺癌的免疫治疗 被引量：5

1

作者 沈丽英 张霞 +6 位作者 崔学青 承逸平 吴承骞 孙淑萍 苏成芝 万芷芳 许卫民 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期198-200,共3页

报告应用特异性肺癌转移因子(SPTF)对肺癌患者进行免疫治疗的效果观察。肺癌患者50例分为两组,一组化疗加用SPTF(35例),一组单纯化疗作为对照(15例)。结果化疗反应SPTF组比对照组明显减轻。用OKT单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群,发现... 报告应用特异性肺癌转移因子(SPTF)对肺癌患者进行免疫治疗的效果观察。肺癌患者50例分为两组,一组化疗加用SPTF(35例),一组单纯化疗作为对照(15例)。结果化疗反应SPTF组比对照组明显减轻。用OKT单克隆抗体检测外周血T淋巴细胞亚群,发现SPTF组治疗前后OKT_4、OKT_8、OKT_4/OKT_8比值差别非常显著(P<0.001),对照组治疗前后差别不显著(P≥0.05)。以上结果提示SPTF能提高肺癌患者的免疫功能,对肺癌的转归发生良好作用。本组采用的SPTF具有取材来源充足,有抗原特异活性及无毒副作用等优点。 展开更多

关键词 肺癌 转移因子 免疫疗法

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p38信号途径与胃癌细胞阿霉素耐药相关 被引量：3

2

作者 王雨田 胡家露 +4 位作者 药立波 王吉村 张忠兵 樊代明 王少东 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期24-26,共3页

研究 p38MAPK信号转导途径在胃癌耐药机制中的意义。用免疫共沉淀法及Westernboltting实验分别研究阿霉素处理胃癌细胞SGC790 1及胃癌多药耐药SGC790 1/VCR细胞后 ,p38激酶活性及量的变化。结果显示 ,阿霉素处理胃癌多药耐药SGC790 1/VC... 研究 p38MAPK信号转导途径在胃癌耐药机制中的意义。用免疫共沉淀法及Westernboltting实验分别研究阿霉素处理胃癌细胞SGC790 1及胃癌多药耐药SGC790 1/VCR细胞后 ,p38激酶活性及量的变化。结果显示 ,阿霉素处理胃癌多药耐药SGC790 1/VCR细胞 15min后 ,p38MAPK活性明显降低 ,且发现 p38MAPK量也明显下降。与之不同 ,阿霉素处理SGC790 1细胞后 ,p38MAPK活性增强 ,呈时间依赖性 ,而 p38MAPK量无明显变化。提示肿瘤化疗药物阿霉素可诱导肿瘤耐药细胞 p38激酶活性降低 ,且可诱导非耐药细胞p38激酶活性增强。 展开更多

关键词 P38MAPK 信号转导 胃癌 多药耐药性 阿霉素 免疫共沉淀法

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甲胎蛋白对肝癌细胞生长的影响 Ⅰ.人AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞RNA合成的促进作用 被引量：8

3

作者 王易伦 杨静华 +1 位作者 何开跃 王国华 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1989年第5期290-293,297,共5页

用亲和层析法从3-5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP。体外用~3H-UR参入的方法,从转录水平观察AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞生长的影响。结果表明,人AFP能显著地直接促进该肿瘤细胞RNA的合成;人血白蛋白和去除AFP后胎儿肌肉匀浆液等对... 用亲和层析法从3-5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP。体外用~3H-UR参入的方法,从转录水平观察AFP对小鼠H_(22)腹水型肝癌细胞生长的影响。结果表明,人AFP能显著地直接促进该肿瘤细胞RNA的合成;人血白蛋白和去除AFP后胎儿肌肉匀浆液等对照均无显著作用;AFP抗血清能显著地清除AFP的这种促进作用。用小鼠S_(180)乳腺肉瘤细胞作为对照表明,AFP促肿瘤生长无严格的组织特异性。 展开更多

关键词 肝癌 细胞生长 甲胎蛋白

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特异性转移因子对人胃癌细胞RNA合成及H—ras癌基因表达的影响 被引量：6

4

作者 邓健蓓 钱微 苏成芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第3期161-163,共3页

七十年代以来,转移因子(Transfer factor,简称TF)作为一种细胞免疫调节剂应用于多种恶性肿瘤的临床辅助治疗,取得了一定的疗效。有文献报道,TF对小鼠H_(22)腹水癌细胞具有一定抑制作用,提示TF对肿瘤细胞很可能还具有直接效应。但由于腹... 七十年代以来,转移因子(Transfer factor,简称TF)作为一种细胞免疫调节剂应用于多种恶性肿瘤的临床辅助治疗,取得了一定的疗效。有文献报道,TF对小鼠H_(22)腹水癌细胞具有一定抑制作用,提示TF对肿瘤细胞很可能还具有直接效应。但由于腹水中细胞成分复杂,这种抑制作用尚不能完全确认为对肿瘤的直接效应.因此进一步观察TF对肿瘤细胞的直接效应并探讨其机制。 展开更多

关键词 胃癌 RNA合成 癌基因表达 TF

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阳离子脂质体介导NT-3基因转染豚鼠耳蜗的实验研究 被引量：4

5

作者 邓志宏 王锦玲 +3 位作者 邱建华 刘顺利 王成济 杨安钢 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2004年第3期182-184,203,T002,共5页

目的　探讨阳离子脂质体介导的NT - 3基因转染对豚鼠耳蜗形态及功能的影响。方法　克隆人NT- 3cDNA基因 ,构建携带绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的重组质粒pIRES2 -EGFP -NT3。采用脂质体介导的方法 ,将重组质粒转染豚鼠耳蜗 ,分别于术... 目的　探讨阳离子脂质体介导的NT - 3基因转染对豚鼠耳蜗形态及功能的影响。方法　克隆人NT- 3cDNA基因 ,构建携带绿色荧光蛋白 (EGFP)报告基因的重组质粒pIRES2 -EGFP -NT3。采用脂质体介导的方法 ,将重组质粒转染豚鼠耳蜗 ,分别于术后 1天、2周、4周观察转染基因在耳蜗及脑干等部位的表达和分布情况。同时进行耳声发射及ABR测试 ,了解基因转染对豚鼠耳蜗听功能的影响。结果　成功克隆人NT - 3cDNA基因并构建重组质粒pIRES2 -EGFP -NT3。重组质粒转染豚鼠耳蜗后 ,荧光显微镜下观察发现耳蜗螺旋神经节、神经纤维、Corti器、血管纹等均可见绿色荧光 ,但 4周时荧光蛋白的表达强度较 1天时明显减弱。而CY3标记的NT - 3免疫荧光染色结果基本与EGFP的表达情况一致。此外 ,对侧耳蜗及第四脑室脉络膜处亦可见较强的绿色荧光。耳蜗基底膜铺片见内外毛细胞结构完整。转染前后豚鼠耳声发射及ABR阈值均无明显改变。结论　阳离子脂质体介导的NT - 3基因转染对豚鼠耳蜗形态及功能无明显影响 ;外源性NT - 展开更多

关键词 神经营养素-3 基因克隆 真核表达载体 脂质体 耳蜗

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兔抗人Bit1抗血清的制备及其纯化 被引量：8

6

作者 邢小红 吴元明 黄高昇 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期764-764,768,共2页

目的 :利用大肠杆菌中表达的人Bit1(hBit1)蛋白 ,制备兔抗人Bit1抗血清并对其进行纯化。方法 :在大肠杆菌中诱导表达人Bit1融合蛋白。以其免疫家兔 ,制备兔抗人Bit1抗血清 ,用非特异性去除法纯化抗体 ,并以Westernblot对所纯化的兔抗人B... 目的 :利用大肠杆菌中表达的人Bit1(hBit1)蛋白 ,制备兔抗人Bit1抗血清并对其进行纯化。方法 :在大肠杆菌中诱导表达人Bit1融合蛋白。以其免疫家兔 ,制备兔抗人Bit1抗血清 ,用非特异性去除法纯化抗体 ,并以Westernblot对所纯化的兔抗人Bit1抗血清进行鉴定。结果 :大肠杆菌中表达的人Bit1蛋白占菌体总蛋白的 4 0 %。用纯化的抗血清可特异地检出大肠杆菌表达的人Bit融合蛋白。结论 :人Bit1融合蛋白在大肠杆菌中得到高效表达 。 展开更多

关键词 人Bit蛋白 抗血清 表达

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毛细管气相色谱法测定紫苏提取液中紫苏醇含量 被引量：3

7

作者 程司堃 王茹 +2 位作者 李晓晔 张晓楠 孙晓莉 《医药导报》 CAS 2005年第6期522-523,共2页

目的建立紫苏提取液中紫苏醇的含量测定方法。方法采用毛细管气相色谱法,BP5石英毛细管柱(15m×0.53mm),检测器温度260℃,柱温220℃,载气流速10mL·min1,氢离子火焰检测器(FID)。结果紫苏醇的浓度在0.008～1.300mg·mL1与... 目的建立紫苏提取液中紫苏醇的含量测定方法。方法采用毛细管气相色谱法,BP5石英毛细管柱(15m×0.53mm),检测器温度260℃,柱温220℃,载气流速10mL·min1,氢离子火焰检测器(FID)。结果紫苏醇的浓度在0.008～1.300mg·mL1与测得的色谱峰面积成良好线性关系,其线性回归方程为Y=40532X-792,相关系数(r)0.9995。最低检测限0.002mg·mL1,日内精密度0.52%,日间精密度0.98%,平均回收率102.7%。结论该实验方法快速、简便,灵敏度高,值得推广和应用。 展开更多

关键词 紫苏 紫苏醇 气相色谱法

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微波在蛋白质电泳染色和脱色中的应用 被引量：3

8

作者 张延凤 张晓楠 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期158-158,共1页

关键词 微波 蛋白质 凝胶电泳 染色 脱色 应用

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一种快速微量的双温PCR法 被引量：3

9

作者 阎小君 苏成芝 吉昌华 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第6期480-481,共2页

PCR技术能特异,直接和高效的扩增各种对象的基因.本文建立了一种快速,微量的双温度点法PCR,并探讨了该PCR法的最适条件.旨在使PCR技术常规化. 1 PCR方法 PCR特异引物为HIV-IPr和HIV-IPr_2,模板为pARV-2/7A质粒(内含HIV-1全长cDNA).反应... PCR技术能特异,直接和高效的扩增各种对象的基因.本文建立了一种快速,微量的双温度点法PCR,并探讨了该PCR法的最适条件.旨在使PCR技术常规化. 1 PCR方法 PCR特异引物为HIV-IPr和HIV-IPr_2,模板为pARV-2/7A质粒(内含HIV-1全长cDNA).反应总体积分别为10,20,50,100μ1,其中主要含有HIV-lPr_1和HIV-lPr_2各50pmol/L。 展开更多

关键词 双温PCR 聚合酶链反应

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抗人肝癌单克隆抗体重链可变区基因克隆和序列测定 被引量：1

10

作者 杨萍 刘彦仿 +6 位作者 胡川闽 陈志南 隋延仿 陈苏民 高磊 陈南春 杨安钢 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期10-12,共3页

应用反转录ＰＣＲ方法从分泌抗人肝癌单克隆抗体鼠杂交瘤细胞系ＨＡｂ２７中成功地克隆了单抗重链可变区基因，将此基因重组入Ｍ１３噬菌体中，双脱氧链终止法测定了核苷酸序列。经计算机分析，基因全长４０８ｂｐ，编码１３６个氨基酸... 应用反转录ＰＣＲ方法从分泌抗人肝癌单克隆抗体鼠杂交瘤细胞系ＨＡｂ２７中成功地克隆了单抗重链可变区基因，将此基因重组入Ｍ１３噬菌体中，双脱氧链终止法测定了核苷酸序列。经计算机分析，基因全长４０８ｂｐ，编码１３６个氨基酸，并进行了基因同源性分析。结果表明获得的重链可变区基因是具有功能性的，两端引物自带起始码和终止码，可直接插入原核载体中进行表达。 展开更多

关键词 单克隆抗体 可变区基因 癌 肝肿瘤 克隆 序列

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膜上斑点洁显示人红细胞b_5还原酶活性 被引量：1

11

作者 兰风华 唐玉钗 +1 位作者 朱忠勇 吴玉水 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第4期379-380,共2页

人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类，其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症．目前，主要通过分光光度法测定ｂ５还原酶活性．我们将ｂ５还原酶抗体点于硝酸纤维膜上，以此捕获并富集红细胞胞浆ｂ５还... 人红细胞ＮＡＤＨ－细胞色素ｂ５还原酶是使高铁血红蛋白还原的主要酶类，其缺陷将导致遗传性高铁血红蛋白血症．目前，主要通过分光光度法测定ｂ５还原酶活性．我们将ｂ５还原酶抗体点于硝酸纤维膜上，以此捕获并富集红细胞胞浆ｂ５还原酶．有ｂ５还原酶活性的斑点用噻唑蓝染色．此法简单直观，可用于ｂ５还原酶的定性和半定量测定，为遗传性高铁血红蛋白血症的诊断提供了一种新的实验手段． 展开更多

关键词 高铁血红蛋白 血症 b5还原酶 红细胞 膜上斑点法

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特异性转移因子对人AFP抑制鼠脾淋巴细胞生长的拮抗效应 被引量：1

12

作者 许卫民 牛立国 +3 位作者 王易伦 柴玉波 金明 苏成芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期235-237,共3页

用亲和层析法从胎儿肌肉组织中提纯AFP,用纯化AFP免疫小鼠制备AFP抗原特异转移因子(简称SP-TF),体外用[~3H]-UR,[~3H]-leu参入鼠脾淋巴细胞的方法,从转录、翻译两个水平观察SP-TF对AFP抑制鼠脾淋巴细胞生长的拮抗效应。结果表明SP-TF和... 用亲和层析法从胎儿肌肉组织中提纯AFP,用纯化AFP免疫小鼠制备AFP抗原特异转移因子(简称SP-TF),体外用[~3H]-UR,[~3H]-leu参入鼠脾淋巴细胞的方法,从转录、翻译两个水平观察SP-TF对AFP抑制鼠脾淋巴细胞生长的拮抗效应。结果表明SP-TF和AFP抗体均能非常显著地拮抗AFP抑制鼠脾淋巴细胞RNA和蛋白质合成作用,SP-TF和AFP抗体对AFP上述两个水平的拮抗效应均无显著差异。 展开更多

关键词 转移因子 AFP 拮抗效应 淋巴细胞

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抗人AFP抗体噬菌体呈现文库的构建筛选及基因序列测定 被引量：3

13

作者 邓健蓓 韩骅 +1 位作者 苏成芝 陈常庆 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第6期648-653,共6页

从人ＡＦＰ免疫小鼠脾细胞ｍＲＮＡ中扩增出全套抗体Ｖ区基因并随机拼接为ＳｃＦｖ基因，构建全套ＳｃＦｖ基因噬菌体呈现文库，经两轮ｐａｎｎｉｎｇ筛选富集，一次从９４个单个重组噬菌体克隆中筛选到１４个具有ＡＦＰ结合活性的克隆... 从人ＡＦＰ免疫小鼠脾细胞ｍＲＮＡ中扩增出全套抗体Ｖ区基因并随机拼接为ＳｃＦｖ基因，构建全套ＳｃＦｖ基因噬菌体呈现文库，经两轮ｐａｎｎｉｎｇ筛选富集，一次从９４个单个重组噬菌体克隆中筛选到１４个具有ＡＦＰ结合活性的克隆，测定两个阳性克隆中ＳｃＦｖ基因的核苷酸序列，获得一个Ｖ＿Ｈ基因和两个Ｖ＿Ｋ基因，其基因序列分别与鼠ＩｇＶ＿ＨＪ５５８、Ｖ＿ｋ－ＯＸ１和Ｖ＿ｋ４／５家族同源性最高；推导出的氨基酸序列中均含有抗体Ｖ区特征性的两个恒定的半胱氨酸残基、具有明确的三个ＣＤＲ和四个ＦＲ序列，表明这三个基因均系新发现的功能性鼠抗体Ｖ区基因序列。 展开更多

关键词 甲胎蛋白 抗体 噬菌体 核苷酸序列

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特异性转移因子对人AFP促进小鼠H22腹水肝癌细胞RNA合成的拮抗效应 被引量：1

14

作者 许卫民 李树凯 +3 位作者 王易伦 赵忠良 王国华 苏成芝 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1993年第12期897-900,共4页

用亲和层析法从3～5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP.用纯化AFP免疫小鼠,取其脾脏按匀浆透析法制备AFP特异转移因子(SP-TF),取正常未免疫鼠脾脏制备非特异转移因子(N—TF),从预接种小鼠腹水中分离Hz2腹水肝癌细胞(H22细胞),体外用[3H]—U... 用亲和层析法从3～5月龄引产胎儿肌肉组织中提纯AFP.用纯化AFP免疫小鼠,取其脾脏按匀浆透析法制备AFP特异转移因子(SP-TF),取正常未免疫鼠脾脏制备非特异转移因子(N—TF),从预接种小鼠腹水中分离Hz2腹水肝癌细胞(H22细胞),体外用[3H]—UR参入方法,从转录水平观察SP—TF对AFP促进小鼠H22细胞生长的拮抗效应。结果表明:SP—TF对AFP促进H22细胞RNA合成具有非常显著的拮抗效应。此效应具有抗原特异性和供体依赖性。 展开更多

关键词 转移因子 RNA 肝肿瘤 癌

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诱导方式对P_L启动子控制下人工合成心钠素28肽基因转录动态变化的影响 被引量：4

15

作者 刘新平 陈南春 陈苏民 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第1期8-12,共5页

本文用含有人工合成28肽心钠素基因质粒的大肠杆菌(TAP106-pYX40),分别进行温度诱导和丝裂霉素C诱导,提取菌体中的总RNA,与γ-^(32)P标记的心钠素基因片段进行RNA打点杂交,并通过测定杂交阳性信号的总灰度值(Totalgray value),建立了人... 本文用含有人工合成28肽心钠素基因质粒的大肠杆菌(TAP106-pYX40),分别进行温度诱导和丝裂霉素C诱导,提取菌体中的总RNA,与γ-^(32)P标记的心钠素基因片段进行RNA打点杂交,并通过测定杂交阳性信号的总灰度值(Totalgray value),建立了人心钠素基因特异mRNA相对定量方法,从而观察到温度诱导对P_L启动子控制下的心钠素基团转录发生得慢,特异的mRAN产量较低,但转录所持续的时间长,而丝裂霉素C诱导对P_L启动子控制下的心钠素基因转录发生得快,特异mRNA产量高,但持续的时间短。 展开更多

关键词 Pl启动子 心钠素基因 基因转录

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NT-3基因转染对庆大霉素耳毒性的拮抗作用 被引量：1

16

作者 邓志宏 王锦玲 +5 位作者 邱建华 刘顺利 黄晓峰 黄梅 王成济 杨安钢 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2006年第4期285-288,T0002,共5页

目的探讨NT-3基因转染对豚鼠庆大霉素耳中毒的保护作用。方法采用阳离子脂质体介导的方法,将携带外源性基因NT-3的重组质粒pIRES2-EGFP-NT-3与阳离子脂质体复合物10μl注入豚鼠左侧耳蜗(设为Ⅰ组),术后3d开始给予庆大霉素肌肉注射(120mg... 目的探讨NT-3基因转染对豚鼠庆大霉素耳中毒的保护作用。方法采用阳离子脂质体介导的方法,将携带外源性基因NT-3的重组质粒pIRES2-EGFP-NT-3与阳离子脂质体复合物10μl注入豚鼠左侧耳蜗(设为Ⅰ组),术后3d开始给予庆大霉素肌肉注射(120mg/kg),连续注射14d,分别于停药后1d、2w进行ABR及DPOAE测试,随即处死动物,耳蜗取材,观察耳蜗毛细胞受损情况,并在透射电镜下观察耳蜗传入神经超微结构改变。实验同时设空载体组(Ⅱ组)及正常对照组(Ⅲ组)。结果庆大霉素停药1d时,与正常对照组相比,空载体组DPOAE幅值显著下降(P<0.05),停药2w时,DPOAE幅值下降更显著,尤其在1、1.4及6kHz处幅值下降明显(P<0.05);NT-3转染组在停药1d时,仅高频DPOAE幅值下降(P<0.05),停药2w时,DPOAE幅值下降减缓(P>0.05);各实验组ABR阈值与DPOAE幅值改变相似;荧光显微镜下见庆大霉素停药1d时,NT-3转染组第一排外毛细胞出现部分缺失,庆大霉素停药2w时,第一排外毛细胞缺失加重,并出现少量第二、三排外毛细胞及个别内毛细胞的缺失;空载体组在庆大霉素停药1d时,即出现第一排外毛细胞严重缺失,少量第二、三排外毛细胞及个别内毛细胞的缺失,停药2w时外毛细胞缺失进一步加重;透射电镜下见庆大霉素停药1d时,空载体对照组Ⅰ型及Ⅱ型神经纤维轴索内微管排列出现紊乱,少量崩解,髓鞘板层结构尚可,Ⅰ、Ⅱ型神经元细胞胞体内偶可见少量髓鞘样结构,停药2w时,传入神经退行性改变明显加重,神经纤维崩解,神经元出现大量空泡化。而NT-3转染组在损伤的早期,传入性神经从末梢到神经元仅出现轻微的改变,在庆大霉素停药2w时,神经退行性改变略加重,但仍显著轻于对照组。结论阳离子脂质体介导的NT-3基因转染可减轻庆大霉素对豚鼠耳蜗外毛细胞、传入神经及螺旋神经节细胞的毒性作用。 展开更多

关键词 NT-3 基因转染 耳蜗 庆大霉素 传入神经

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人胃癌组织cDNA文库的建立 被引量：2

17

作者 王易伦 孙仑泉 +1 位作者 万芷芳 苏成芝 《生物化学杂志》 CSCD 1991年第6期686-690,共5页

本文直接从一例人低分化胃腺癌组织中提取RNA和分离poly(A)^+RNA,进而合成双链cDNA。再以λgt10作为克隆载体和大肠杆菌C600hfl作为受体菌,构建了人胃癌cDNA文库。该文库中含有1.10×10~5重组子,重组率约为68.8％,克隆效率为2.21... 本文直接从一例人低分化胃腺癌组织中提取RNA和分离poly(A)^+RNA,进而合成双链cDNA。再以λgt10作为克隆载体和大肠杆菌C600hfl作为受体菌,构建了人胃癌cDNA文库。该文库中含有1.10×10~5重组子,重组率约为68.8％,克隆效率为2.21×10~6克隆/μgcDNA。 展开更多

关键词 胃肿瘤 CDNA文库 分子克隆

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小鼠白细胞介素4基因的化学合成、克隆与表达 被引量：1

18

作者 任力强 陈南春 +2 位作者 陈苏民 苏成芝 金伯泉 《生物化学杂志》 CSCD 1992年第5期529-534,共6页

利用381A型DNA合成仪,分29个寡聚核苷酸片段化学合成了小鼠IL-4全基因,共442bp。以pUC12质粒作为载体,将所有合成片段分前后两组进行磷酸化、退火、连接和克隆,经过菌落原位杂交、酶切鉴定和质粒DNA序列分析,分别得到了含有小鼠IL-4前... 利用381A型DNA合成仪,分29个寡聚核苷酸片段化学合成了小鼠IL-4全基因,共442bp。以pUC12质粒作为载体,将所有合成片段分前后两组进行磷酸化、退火、连接和克隆,经过菌落原位杂交、酶切鉴定和质粒DNA序列分析,分别得到了含有小鼠IL-4前后两半基因片段的两种重组质粒,回收前半基因片段,插入到含有后半基因重组质粒的EcoRI和PstI酶切位点之间,成功地得到了含有小鼠IL-4全基因的重组质粒pFR101。将全合成基因插入到质粒pSM53中,得表达质粒pFR105,转化大肠杆菌TAP106,根据IL-4对CTLL细胞的作用,肯定了TAP106(pFR105)细菌中有小鼠IL-4活性蛋白的表达。 展开更多

关键词 白细胞介素 基因 合成 克隆 表达

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从分子水平认识生与死的统一 被引量：1

19

作者 彭玮丹 王成济 《医学与哲学》 1999年第6期48-49,共2页

关键词 细胞生长 细胞凋亡 医学 哲学

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用PCR技术检测牙龈炎组织中IL－Iα的表达

20

作者 王字玲 韩骅 +3 位作者 宋红 邓健蓓 药立波 苏成芝 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期229-231,共3页

为了检测牙龈炎组织中ＩＬ－１的表达，设计合成了扩增人ＩＬ－Ｉａ基因的引物，用ＲＴ－ＰＣＲ技术从牙龈炎组织ＲＮＡ中扩增了ＩＬ－Ｉα基因，而正常牙龈中扩增不到该产物。将扩增片段克隆后进行了部分序列的测定，结果表明ＰＣＲ方... 为了检测牙龈炎组织中ＩＬ－１的表达，设计合成了扩增人ＩＬ－Ｉａ基因的引物，用ＲＴ－ＰＣＲ技术从牙龈炎组织ＲＮＡ中扩增了ＩＬ－Ｉα基因，而正常牙龈中扩增不到该产物。将扩增片段克隆后进行了部分序列的测定，结果表明ＰＣＲ方法可以简便，快速，特异，灵敏地检出炎症组织中ＩＬ－１的表达，这对于牙龈炎发病机理及治疗的研究具有重要意义。 展开更多

关键词 聚合酶链反应 牙龈炎 白细胞介素1Α

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