高等院校实验动物教学中动物实验体系的改革和构建 被引量：2

1

作者 李维国 赵勇 师长宏 《山西农经》 2015年第5期124-125,共2页

实验动物学主要包括实验动物和动物实验两大部分。实验动物学是高等院校一门重要的专业基础课。但由于课时和条件的限制,目前各高校的实验动物教学主要偏重实验动物的理论教学,对其关键的动物实验教学占比较低。所以,以培养学生技能为指... 实验动物学主要包括实验动物和动物实验两大部分。实验动物学是高等院校一门重要的专业基础课。但由于课时和条件的限制,目前各高校的实验动物教学主要偏重实验动物的理论教学,对其关键的动物实验教学占比较低。所以,以培养学生技能为指导,对实验动物学实验教学进行改革,主要是为了在实验动物学实验教学中能充分发挥学生主观能动性,激发学生兴趣,培养学生综合实验和分析能力。本文对动物实验教学中发现的问题进行了剖析,强调提高医学生动物实验操作技能的重要性和紧迫性,并进行有益的探讨。 展开更多

关键词 教学 改革 实验动物

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动物病毒疫苗研制及其产品的电镜检测 被引量：2

2

作者 李六金 李秦 +3 位作者 姜焕宏 李成 王新建 李宏 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期215-218,共4页

应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞 ,并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化... 应用电镜技术检查了某些原代和传代细胞 ,并且跟踪检查了疱疹病毒、痘病毒、腺病毒、细小病毒、冠病毒、RNA反录病毒、呼肠病毒、动脉炎病毒、小RNA病毒、弹状病毒、杯状病毒、黄病毒、双RNA病毒、正粘病毒、副粘病毒等某些成员的驯化、培育及筛选的目的毒。结果发现了部分培养细胞有支原体污染 ,有的还有细菌污染 ;同时在某些培养的原毒、基础种毒、生产种毒及其产品中也发现了一些病毒的污染和联苗中互相感染现象。如此证明了电镜技术能够及时发现问题 ,及时解决问题 ,使之科研少走弯路 。 展开更多

关键词 电镜技术 生物样品 细胞培养物 污染物 电子显微镜 疫苗研制 动物病毒 电镜检测

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动物转基因与核移植技术的新进展 被引量：3

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作者 严泉剑 李六金 《动物医学进展》 CSCD 2002年第3期24-29,共6页

本文就动物转基因与核移植技术进行文献回顾。原核注射是一种可靠、使用广泛的动物转基因方法。但该方法存在花费时间长、整合效率低及不能定点整合的问题。所以近年来出现了一些新的转基因方法 ,包括精子介导、反转录病毒介导、携带外... 本文就动物转基因与核移植技术进行文献回顾。原核注射是一种可靠、使用广泛的动物转基因方法。但该方法存在花费时间长、整合效率低及不能定点整合的问题。所以近年来出现了一些新的转基因方法 ,包括精子介导、反转录病毒介导、携带外源基因体细胞的核移植、ES细胞基因打靶技术等。这些方法中动物核移植技术贡献较大 ,很有前途。核移植技术解决了同源重组在大动物上的限制。可以应用于生物制药动物保种、预防遗传病、辅助生殖及治疗性克隆。 展开更多

关键词 动物 核移植技术 转基因技术 显微注射

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四种动物传代细胞染色体遗传变异率分析 被引量：1

4

作者 李六金 李秦 +5 位作者 施新猷 张海 赵世君 师长宏 金昌德 胡春雷 《动物医学进展》 CSCD 2000年第2期63-65,共3页

本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二... 本文的目的分析制苗用传代细胞染色体的变异稳定性 ,以判定其质量。方法采用直接法制取传代细胞染色体标本 ,用常规Giemsa染色 ,10 0 0倍光学显微镜下计数中期分裂相染色体数目 ,求出染色体变异率( %) ,并进行核型分析。结果 F81为亚二倍体细胞系 ,染色体众数为 30 ;Vero是超二倍体细胞系 ,染色体众数为 73～ 75 ;MDCK属于亚四倍体细胞系 ,染色体众数为 12 5～135。BHK2 1为亚二倍体或亚四倍体细胞系 ,亚二倍体众数为 42 ,亚四倍体细胞众数为 72～ 74。四种细胞系的染色体畸变率为 0 %～6 %,均较低。结论是四种传代细胞遗传学特性相对稳定 ,各代次之间无本质差异 。 展开更多

关键词 传代细胞 染色体 变异率 疫苗 核型分析

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关中驴对6株动物病毒抗原的免疫应答试验

5

作者 李六金 朱德生 +4 位作者 贾满民 陈慧茹 吴耀南 赵永康 押宗保 《动物医学进展》 CSCD 2003年第3期104-108,共5页

以关中驴为试验动物 ,用猪瘟病毒(HCV )、犬细小病毒 (CPV )、兔瘟病毒(RHDV)、鸡新城疫病毒 (NDV)、伪狂犬病毒(PRV)等病毒进行免疫 ,检测所产生的抗体效价 ,并与猪、鸡、兔、犬、及猫等动物进行比较。试验结果表明 ,关中驴与对照动物... 以关中驴为试验动物 ,用猪瘟病毒(HCV )、犬细小病毒 (CPV )、兔瘟病毒(RHDV)、鸡新城疫病毒 (NDV)、伪狂犬病毒(PRV)等病毒进行免疫 ,检测所产生的抗体效价 ,并与猪、鸡、兔、犬、及猫等动物进行比较。试验结果表明 ,关中驴与对照动物产生的抗体效价一致 。 展开更多

关键词 关中驴 动物 病毒抗原 免疫应答 试验

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狂犬病研究动态 被引量：13

6

作者 唐婕 李六金 陈铁桥 《动物医学进展》 CSCD 2006年第7期100-104,共5页

狂犬病是一种急性传染性疾病,狂犬病病毒属于弹状病毒科,可感染所有温血动物,其主要临床特征表现为恐水怕惊、咽肌痉挛、持续性或阵发性抽搐等症状。世界各地均有狂犬病的发生,其主要传染源是犬科和猫科动物。中国近十年来狂犬病发病率... 狂犬病是一种急性传染性疾病,狂犬病病毒属于弹状病毒科,可感染所有温血动物,其主要临床特征表现为恐水怕惊、咽肌痉挛、持续性或阵发性抽搐等症状。世界各地均有狂犬病的发生,其主要传染源是犬科和猫科动物。中国近十年来狂犬病发病率有所上升,主要原因是养犬数量剧增、免疫接种比率下降。目前,狂犬病的发病机制还不是很清楚,期望在阐明发病机理的基础上研制出特效药物。目前惟一能够控制狂犬病的方法是进行狂犬病疫苗的有效预防接种,文章就有关狂犬病疫苗的研制进展进行了分析与述评。 展开更多

关键词 狂犬病 疫苗 流行病学 防控

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规模化制备驴抗犬细小病毒免疫球蛋白(CPV-Ig)最佳《免疫程序》的试验报告 被引量：2

7

作者 李六金 贾满民 +3 位作者 陈慧茹 押宗保 吴耀南 赵永康 《中国动物检疫》 CAS 2003年第5期26-28,共3页

关键词 犬 细小病毒 免疫球蛋白 CPV-Ig 《免疫程序》 试验 制备技术

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KM和BALB/c小鼠痘病毒感染的诊断 被引量：2

8

作者 师长宏 李六金 +1 位作者 李成 李宏 《动物医学进展》 CSCD 2002年第3期72-73,共2页

20只外购的 KM和 BAL B/ c小鼠发生了酷似鼠脱脚病的典型症状 ,取病鼠的肝、脾、肾、淋巴结和脑作组织学检查 ,发现其病理变化呈痘病毒感染的特征性改变 ,组织匀浆液接种传代的 BHK细胞 ,可发生明显的 CPE变化 ,经电镜超薄切片及负染检... 20只外购的 KM和 BAL B/ c小鼠发生了酷似鼠脱脚病的典型症状 ,取病鼠的肝、脾、肾、淋巴结和脑作组织学检查 ,发现其病理变化呈痘病毒感染的特征性改变 ,组织匀浆液接种传代的 BHK细胞 ,可发生明显的 CPE变化 ,经电镜超薄切片及负染检查发现大量的痘病毒颗粒 ,粒子的中心为 DNA核酸和蛋白质组成的拟核 ,在衣壳的外面有囊膜包裹 ,对鸡红细胞均呈阳性凝集反应 ( HA为 1 :1 6) ,用小鼠痘病毒EL ISA试剂盒检测病鼠血清呈阳性反应 ,用病毒悬液免疫接种 KM和 BAL B/ C小鼠后 ,发现前者感染性强 ,发病快 ,症状典型 ,以急性为主 ,并迅速出现死亡。后者对鼠痘抵抗力强 ,一般呈隐性感染 ,特征性症状出现较缓慢 ,但后者一旦施加实验因素动物则出现症状 ,也可迅速死亡。实验证明 ,该群小鼠患的传染病病原为鼠痘病毒。 展开更多

关键词 KM小鼠 BALB/C小鼠 痘病毒感染 诊断

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猫泛白细胞减少症弱毒冻干疫苗研制与探索最佳冻干曲线的研究 被引量：2

9

作者 李六金 贾满民 +3 位作者 陈慧茹 李成 押宗保 李文义 《中国动物检疫》 CAS 2002年第7期23-25,共3页

生物制品进行冷冻干燥过程中 ,或多或少会损失一定的效价 ,可直接影响产品效力和免疫原性。本文为研制出高效价和保持期长的猪泛白细脆减少症弱毒冻干疫苗 ,为降低效价损失 ,选择出最佳冷冻干燥曲线 ,使冻干后的产品效价损失减少到最低... 生物制品进行冷冻干燥过程中 ,或多或少会损失一定的效价 ,可直接影响产品效力和免疫原性。本文为研制出高效价和保持期长的猪泛白细脆减少症弱毒冻干疫苗 ,为降低效价损失 ,选择出最佳冷冻干燥曲线 ,使冻干后的产品效价损失减少到最低水平。试验结果选用全程为17h的冻干曲线是科学的。 展开更多

关键词 猫泛白细胞减少症 冻干疫苗 冻干曲线 细胞培养 病毒增殖 弱毒疫苗 成品检测

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应用电镜技术和血凝试验检测犬细小病毒和犬腺病毒 被引量：4

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作者 李六金 押宗保 +6 位作者 李成 姜焕宏 陈慧茹 刘建荣 马伟辉 王新建 李宏 《中国兽药杂志》 2002年第7期33-35,共3页

电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污... 电镜技术和血凝试验是检测犬细小病毒和犬腺病毒快速而简便的方法。本试验结果表明,两种方法检验结果大部分相符,但各具特色。电镜技术的优势在于能够直观地显示目标病毒的生长发育、粒子的完整性以及有无非目标病毒、细菌、支原体等污染情况,这对于动物病毒疫苗种毒质量的检测是十分重要的。 展开更多

关键词 电镜技术 血凝试验 检测 犬细小病毒 犬腺病毒

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抗犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白(Ig)的精制试验与检测结果 被引量：13

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作者 李六金 贾满民 +1 位作者 陈慧茹 押宗保 《中国兽药杂志》 2002年第1期12-15,共4页

随着国民经济的发展 ,我国养犬业也得到了大力发展 ,但犬细小病毒性肠炎 (血痢 )是犬群中最常见的传染病之一 ,其发病率和死亡率高达 5 0 %～ 10 0 % ,严重影响军犬、警犬、珍稀犬、名贵犬及家犬和肉犬的生命安全。目前仅采用疫苗预防该... 随着国民经济的发展 ,我国养犬业也得到了大力发展 ,但犬细小病毒性肠炎 (血痢 )是犬群中最常见的传染病之一 ,其发病率和死亡率高达 5 0 %～ 10 0 % ,严重影响军犬、警犬、珍稀犬、名贵犬及家犬和肉犬的生命安全。目前仅采用疫苗预防该病 ,但因诸多原因 ,免疫接种失败时有发生 ,病犬仍然受到生命安全威胁。选用陕西关中富有的特产大型毛驴作为免疫动物 ,研制用于预防和治疗犬细小病毒性肠炎的有效药物 抗犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白 (Ig)生物制剂获得成功。按照农业部有关规定和要求 ,经在全国 31个省、市、区试用后 ,治疗病犬 10万余只 ,应急预防 5万余只 ,治愈率高达 92 %。 展开更多

关键词 犬 细小病毒性肠炎 抗细小病毒性肠炎免疫球蛋白 CPV-XN1株抗原 检测技术

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猕猴腹泻症“轮状病毒病”油剂灭活疫苗研制与免疫效果观察报告 被引量：1

12

作者 李六金 贾满民 +4 位作者 陈慧茹 押宗保 李成 赵永康 李宝山 《中国动物检疫》 CAS 2002年第9期23-25,共3页

供第四军医大学科研、教学、医疗用的实验用猕猴群中 ,分别有3只猕猴患腹泻 (带有红、白粪便 ) ,经治疗和抢救无效死亡。剖检发现肠粘膜呈浆液性脱落 ,肠壁散在性出血点。电镜负染与真染切片观察确诊为典型轮状病毒粒子时 ,拟作为制苗抗... 供第四军医大学科研、教学、医疗用的实验用猕猴群中 ,分别有3只猕猴患腹泻 (带有红、白粪便 ) ,经治疗和抢救无效死亡。剖检发现肠粘膜呈浆液性脱落 ,肠壁散在性出血点。电镜负染与真染切片观察确诊为典型轮状病毒粒子时 ,拟作为制苗抗原 ,试制猕猴“轮状病毒病”油佐剂灭活疫苗 。 展开更多

关键词 猕猴 腹泻症 “轮状病毒病” 油剂灭活疫 研制 免疫效果

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应用电镜技术快速检测培养细胞中的支原体污染 被引量：1

13

作者 李六金 姜焕宏 +3 位作者 李成 刘建荣 马伟辉 李宏 《中国兽药杂志》 2002年第6期31-33,共3页

应用电镜技术可快速准确地检测培养细胞中的支原体污染。通过高速离心浓缩样品,负染色后电镜观察,可在30min内做出判定,方法快速、简便、准确。

关键词 电镜技术 快速检测 培养细胞 支原体污染

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鱼类链球菌病的诊断与防治技术 被引量：2

14

作者 白冰 《科学养鱼》 北大核心 2009年第12期83-83,共1页

链球菌属（Streptococcus）是一个具有庞大种群的属，该属已发现至少有60多个菌种和亚种，在水产动物中致病性链球菌属病原菌种群种类并不多，已报道的我国致病性链球菌主要有海豚链球菌（Streptococcus iniae）、无乳链球菌（Streptoco... 链球菌属（Streptococcus）是一个具有庞大种群的属，该属已发现至少有60多个菌种和亚种，在水产动物中致病性链球菌属病原菌种群种类并不多，已报道的我国致病性链球菌主要有海豚链球菌（Streptococcus iniae）、无乳链球菌（Streptococcus agslactiae），常引起虹鳟、罗非鱼、牙鲆、黄颡鱼、尖吻鲈、花鲈、石斑鱼、斑点叉尾鲴等多种海、淡水鱼类发病， 展开更多

关键词 链球菌病 淡水鱼类 防治技术 诊断 链球菌属 无乳链球菌 斑点叉尾鲴 菌种群

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抗猫泛白细胞减少症免疫球蛋白的制备工艺研究及质量监控 被引量：1

15

作者 李六金 贾满民 +4 位作者 李成 陈慧茹 押宗保 吴耀南 赵永康 《动物科学与动物医学》 2002年第6期29-31,共3页

猫泛白细胞减少症病毒 (Feline pauleukopinia virus,FPV)同义名为猫细小病毒 ,猫传染性肠炎病毒 ,猫瘟病毒 [1 ]。以下简称“猫瘟病毒”。该病是猫的一种急性 /致死性白细胞减少。我国许多省市区均有发生本病流行的的报道。 1985年南... 猫泛白细胞减少症病毒 (Feline pauleukopinia virus,FPV)同义名为猫细小病毒 ,猫传染性肠炎病毒 ,猫瘟病毒 [1 ]。以下简称“猫瘟病毒”。该病是猫的一种急性 /致死性白细胞减少。我国许多省市区均有发生本病流行的的报道。 1985年南京农业大学兽医系从病体内分离病毒成功 [3]。在自然条件下 ,猫瘟病毒除感染猫外 ,还侵害虎、豹、狮、熊猫、鼬等动物 ,发病和死亡率较高 [1、6 ]。在疫苗接种方面 ,对本病能产生一定效果 ,但由于诸多原因 ,该病发生和流行仍呈上升势头 ,迄今国内外尚未见到较理想的有效治疗药物。有鉴于此 ,我们因地制宜 ,选用陕西关中富有的特产大型毛驴作为免疫动物 [5] ,研制出用于预防和治疗猫瘟病毒性肠炎的有效药物—抗猫瘟免疫球蛋白 (Ig G)生物制剂 ,经过五年反复试验 。 展开更多

关键词 抗猫泛白细胞 减少症 免疫球蛋白 制备工艺 质量监控 家畜免疫 猫细小病毒弱株 免疫关中毛驴 分离血浆提纯

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猕猴核移植研究进展及前景(待续) 被引量：1

16

作者 朱华萍 杨贵忠 万东君 《动物科学与动物医学》 2002年第7期18-20,共3页

本文回顾了猕猴核移植相关简史 ,介绍了猕猴核移植的技术路线 ,对限制猕猴体细胞核移植研究的因素 :核供体的筛选、卵母细胞的获得、超数排卵的影响因素、重构胚的激活及体外培养体系等进行了综述 。

关键词 猕猴 核移植 技术路线 核供体 卵母细胞 超数排卵 体外培养体系 体细胞核移植 动物模型

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关中驴抗猪瘟病毒IgG制备工艺及质量监控研究

17

作者 李六金 朱德生 +4 位作者 贾满民 陈慧茹 押宗保 吴耀南 赵永康 《动物医学进展》 CSCD 2003年第2期100-102,114,共4页

本实验用配有佐剂的猪瘟病毒抗原,按特定基础免疫与强化免疫程序接种关中毛驴,用两次盐析法沉淀提取抗猪瘟病毒IgG,其中对提纯制备工艺所涉及的pH值、温度、硫酸铵浓度等工艺进行探索比较,继之对单位体积内的蛋白浓度、酶标抗体效价和... 本实验用配有佐剂的猪瘟病毒抗原,按特定基础免疫与强化免疫程序接种关中毛驴,用两次盐析法沉淀提取抗猪瘟病毒IgG,其中对提纯制备工艺所涉及的pH值、温度、硫酸铵浓度等工艺进行探索比较,继之对单位体积内的蛋白浓度、酶标抗体效价和稀释度进行了标化,同时对质量监控进行了平行性分析。本实验以陕西关中毛驴作为免疫反应供浆动物;研制用于预防和治疗猪瘟的抗病毒免疫球蛋白(IgG)生物制剂获得理想结果。经6省、市、区试用后,深受用户和兽医防疫部门的一致好评和欢迎。 展开更多

关键词 制备工艺 猪瘟 抗猪瘟病毒免疫球蛋白 关中驴 质量监控

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不同免疫佐剂影响关中驴对犬细小病毒抗原免疫应答的比较

18

作者 李六金 朱德生 +2 位作者 贾满民 陈慧茹 押宗保 《中国兽药杂志》 2003年第2期50-52,共3页

为研制高效价、保质期长的驴抗犬细小病毒性肠炎免疫球蛋白生物制剂 ,本试验用病毒中和检测方法对三种不同类型佐剂进行筛选。结果表明 ,双相油乳剂配制的抗原免疫驴体所产生的血清抗体滴度最高 ,持续时间长 。

关键词 犬细小病毒抗原 佐剂 驴 质量检测

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GMP车间净化系统的设计与检测

19

作者 李六金 贾满民 +3 位作者 候瑞昌 李秦 陈慧茹 押宗保 《中国兽药杂志》 2002年第8期11-13,共3页

本中心对按国家标准改进建成的小动物生物制品GMP净化车间(立体三层全净化)各部分的风速和洁净度(微生物数和尘埃粒子数)进行了检测,其结果均达标,可正式交付使用。

关键词 GMP 车间净化系统 设计 动物 生物制品 立体三层净化系统

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解析"犬四联"弱毒疫苗质量与最佳冷冻干燥曲线的关系

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作者 李六金 朱德生 +3 位作者 贾满民 陈慧茹 押宗保 李文义 《中国兽药杂志》 2003年第4期47-49,52,共4页

　依据4种病毒生化指标设计了3种不同冻干曲线,配制10批"犬四联"弱毒疫苗分别进行冷冻干燥比较试验。结果表明:采用16h和22h冻干曲线冻干后的疫苗效价比冻干前下降1～2个滴度,抗原损失较大;采用20h冻干曲线冻干后的疫苗效价... 　依据4种病毒生化指标设计了3种不同冻干曲线,配制10批"犬四联"弱毒疫苗分别进行冷冻干燥比较试验。结果表明:采用16h和22h冻干曲线冻干后的疫苗效价比冻干前下降1～2个滴度,抗原损失较大;采用20h冻干曲线冻干后的疫苗效价仅降低0.5个滴度,而且CPV和CPIV的血清抗体滴度(SN)也略高于用前两种冻干曲线冻干的制品,其冻干产品外观优于应用前两种冻干曲线的产品。因此选择总冻干时间20h的冻干曲线为"犬四联疫苗"较理想的冻干曲线。 展开更多

关键词 犬 四联弱毒疫苗 疫苗质量 冷冻干燥曲线 效价

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