痰细胞p53和ras基因突变检测诊断价值的研究 被引量：1

1

作者 张贺龙 王文亮 崔大祥 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第4期299-301,共3页

肺癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤，其发病率逐年增加，临床上所诊断的肺癌的８０％属晚期，失去了手术治疗的机会，５年生存率很低。寻找能诊断尤其是早期诊断肺癌的方法十分必要。分子生物学技术的发展为肺癌的基因诊断提供了可... 肺癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤，其发病率逐年增加，临床上所诊断的肺癌的８０％属晚期，失去了手术治疗的机会，５年生存率很低。寻找能诊断尤其是早期诊断肺癌的方法十分必要。分子生物学技术的发展为肺癌的基因诊断提供了可能。作者应用聚合酶链反应－单链构象... 展开更多

关键词 肺肿瘤 痰 P53基因 诊断 RAS基因

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人GLUT4基因的克隆及原核表达的初步实验研究

2

作者 焦凯 张菊 +1 位作者 孙脊峰 刘晓宇 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期108-110,123,共4页

目的　通过反转录聚合酶链方法 ,从人新鲜手术肌肉组织获得人葡萄糖转运子 4 (GLUT4 )cDNA基因 ,并分别克隆入测序载体、表达载体 ,获得具有正确序列的目的基因及其原核表达产物 ,为其进一步的抗体制备、活性鉴定及研究应用奠定物质基... 目的　通过反转录聚合酶链方法 ,从人新鲜手术肌肉组织获得人葡萄糖转运子 4 (GLUT4 )cDNA基因 ,并分别克隆入测序载体、表达载体 ,获得具有正确序列的目的基因及其原核表达产物 ,为其进一步的抗体制备、活性鉴定及研究应用奠定物质基础。方法　经GenBank在线检索 ,设计、确定人GLUT4cDNA基因特异引物 ,采用反转录聚合酶链 (RT PCR)方法从一例手术的人新鲜腹部肌肉组织总RNA模板中 ,获得人GLUT4表达片段cDNA的基因 ,经克隆入测序载体pGEM 3zf(- )测序 ,验证cDNA大小、完整性及序列。再克隆入表达载体 pBV2 2 0 ,经温度诱导 ,在E .coli获得表达。结果　以设计的特异引物 ,从人肌肉组织模板中能得到预期大小完整的人GLUT4cDNA基因 ,并能插入预定的克隆载体中测序 ,所得基因的序列与目的基因的序列相符。所获GLUT4cDNA基因插入原核非融合表达载体pBV2 2 0 ,获得预期大小的重组表达产物。结论　从人肌肉组织中能获得具有正确序列、含完整起始及终止密码的人GLUT4cDNA基因。 展开更多

关键词 GLUT4基因 基因克隆 基因表达 实验 基因序列

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MBL基因突变检测新方法及RRTI患者的突变研究

3

作者 薛丽 赵新 +3 位作者 杨芳 赵锦荣 张文红 白玉杰 《海南医学院学报》 CAS 2010年第10期1248-1252,共5页

目的:建立一种新的MBL基因突变检测方法,并分析反复呼吸道感染儿童中突变频率及发病相关性。方法:PCR扩增MBL基因第一外显子区段,核酸外切酶和碱性磷酸酶降解,清除PCR产物中残余引物和dNTPs,经引物延伸反应荧光素(R110或TAMRA)标记终止... 目的:建立一种新的MBL基因突变检测方法,并分析反复呼吸道感染儿童中突变频率及发病相关性。方法:PCR扩增MBL基因第一外显子区段,核酸外切酶和碱性磷酸酶降解,清除PCR产物中残余引物和dNTPs,经引物延伸反应荧光素(R110或TAMRA)标记终止碱基特异性掺入引物的3′-末端,测定荧光偏振值判断掺入碱基及突变类型。用所建立方法检测46例反复呼吸道感染(RRTI)患儿和50例健康对照的MBL突变。结果:所建立方法检测MBL突变经测序验证完全正确。在临床RRTI患儿及对照组中发现54位密码子G>A突变,健康儿童中野生纯合型(G/G)39例(78.00%)、杂合型(G/A)8例(16.00%)、纯合突变(A/A)3例(6.00%);RRTI患儿中野生纯合型(G/G)18例(39.13%)、杂合型(G/A)22例(47.83%)、纯合突变(A/A)6例(13.04%);RRTI患儿组A等位基因频率显著高于对照组。患儿和对照组均未检测到52和57位密码子突变。结论:MBL 54G>A突变与RRTI发病风险相关,所建立的MBL基因多态性快速检测方法可用于小儿反复呼吸道感染辅助诊断和高风险人群的筛查。 展开更多

关键词 甘露聚糖结合凝集素 基因突变 反复呼吸道感染 荧光偏振

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caspase-6基因诱导成骨肉瘤细胞凋亡 被引量：5

4

作者 丁勇 范清宇 +2 位作者 崔大祥 张殿忠 殷剑宁 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第4期261-264,共4页

目的:探讨caspase-6对成骨肉瘤细胞株的凋亡诱导作用。方法:应用RT-PCR方法检测成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中caspase-6基因的表达水平。以腺病毒adv5作载体,构建含caspase-6基因的转基因载体,用脂质体包裹法转染SOSP-9607细胞株,用RT-PCR... 目的:探讨caspase-6对成骨肉瘤细胞株的凋亡诱导作用。方法:应用RT-PCR方法检测成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中caspase-6基因的表达水平。以腺病毒adv5作载体,构建含caspase-6基因的转基因载体,用脂质体包裹法转染SOSP-9607细胞株,用RT-PCR方法检测转染后SOSP-9607细胞中caspase-6基因的表达。用MTF法检测转染caspase-6对SOSP-9607细胞株生长的影响。结果:成骨肉瘤细胞株SOSP-9607中未检出caspase-6表达。RT-PCR法证实转染。caspase-6后SOSP-9607中caspase-6表达显著增强,MTT检测显示对SOSP-9607细胞的生长有抑制作用,形态学观察及DNA电泳证实转染后的细胞株存在细胞凋亡特征。结论:caspase-6对成骨肉瘤细胞的生长有抑制作用,并可诱导成骨肉瘤细胞凋亡。 展开更多

关键词 成骨肉瘤细胞 细胞凋亡 基因转染 caspase-6基因

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人胃癌细胞一种高表达基因的克隆及序列测定 被引量：2

5

作者 赵锦荣 阎小君 +4 位作者 韩锋产 崔大祥 侯瑜 严泉剑 苏成芝 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第1期99-102,共4页

采用DDRT PCR法 ,以人胃上皮细胞GES 1为对照 ,从人胃癌细胞SGC 790 1中克隆高表达基因 ,并对所克隆的基因进行斑点杂交分析 ,序列测定 ,序列相似性分析及开放读框分析 .斑点杂交分析结果表明所获克隆YA6 1为人胃癌细胞SGC 790 1中高表... 采用DDRT PCR法 ,以人胃上皮细胞GES 1为对照 ,从人胃癌细胞SGC 790 1中克隆高表达基因 ,并对所克隆的基因进行斑点杂交分析 ,序列测定 ,序列相似性分析及开放读框分析 .斑点杂交分析结果表明所获克隆YA6 1为人胃癌细胞SGC 790 1中高表达基因 .序列相似性分析结果表明该基因序列为一新基因序列 .GenBank收录号为AF2 2 0 415 .开放读框分析结果表明该基因序列有一完全开放读框 . 展开更多

关键词 胃上皮细胞 胃癌 差异表达基因 序列测定

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宫颈癌患者人乳头瘤病毒16型E6基因的克隆及序列分析 被引量：3

6

作者 高艳娥 张菊 +2 位作者 阎小君 宋天保 李丁 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期17-19,共3页

目的　分析中国陕西地区宫颈癌患者人乳头瘤病毒 16型 (HPV16型 )E6基因的结构特点。方法　采用PCR技术扩增了 1例HPV16阳性宫颈癌患者癌组织中HPV16E6基因 ,并对其进行了克隆及全序列分析。结果　成功地克隆了HPV16E6基因 ,与GenBank... 目的　分析中国陕西地区宫颈癌患者人乳头瘤病毒 16型 (HPV16型 )E6基因的结构特点。方法　采用PCR技术扩增了 1例HPV16阳性宫颈癌患者癌组织中HPV16E6基因 ,并对其进行了克隆及全序列分析。结果　成功地克隆了HPV16E6基因 ,与GenBank收录的原型相比 ,E6基因中有 2个碱基发生突变 ,推导其编码的氨基酸有 1个发生了变化。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒16型 E6基因 宫颈癌 序列分析

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TNFα基因-863位点单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系 被引量：3

7

作者 尉春艳 吴静 +2 位作者 张熙 张菊 高艳娥 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期225-228,243,共5页

目的探讨TNFα基因-863位点的单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系。方法采用模板介导的染料终止物掺入一荧光偏振检测（TDI-FP）的方法对59例宫颈癌以及22例对照进行TNFα基因一863位点的单核苷酸多态性检测。结果宫颈癌组的TNF... 目的探讨TNFα基因-863位点的单核苷酸多态性与宫颈癌以及HPV感染的关系。方法采用模板介导的染料终止物掺入一荧光偏振检测（TDI-FP）的方法对59例宫颈癌以及22例对照进行TNFα基因一863位点的单核苷酸多态性检测。结果宫颈癌组的TNFα基因-863位点A等位基因频率（39．0％）较对照组（14．6％）明显升高（P〈0．01，OR=2．673，95％CI：1．300～5．497）；AA基因型在宫颈癌组和对照组中分别为15．3％和0，差异显著（P〈0．05）；CA基因型在两组中分别为47．5％和29．2％，差异显著（P〈O．05）；A等位基因频率在HPV阳性者与HPV阴性者之间没有显著性差异（P〉0．05，OR：1．950，95％CI：0．840～4．527），但是在HPV阳性者中具有增高趋势（37．5％），高于HPV阴性者（19．2％）。结论TNFα基因863位点A等位基因以及CA、AA基因型与宫颈癌的危险性升高有关，与HPV感染危险性无关。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子Α 宫颈肿瘤 人乳头瘤病毒 单核苷酸多态性 荧光偏振

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L1抗原冲击的树突细胞治疗尖锐湿疣的初步研究 被引量：2

8

作者 张菊 阎小君 +3 位作者 尹国武 何玉宪 段杰 苏成芝 《实用医学杂志》 CAS 2002年第2期129-131,共3页

目的 :观察体外表达的HPV6 ,11L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗 ,对人乳头状瘤病毒感染致反复复发生殖器尖锐湿疣的免疫及病理学作用及疗效。方法 :2 0 9例反复复发 3次以上 ,顽固型尖锐湿疣患者 ,按知情同意原则 ,分别予常规或L1抗... 目的 :观察体外表达的HPV6 ,11L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗 ,对人乳头状瘤病毒感染致反复复发生殖器尖锐湿疣的免疫及病理学作用及疗效。方法 :2 0 9例反复复发 3次以上 ,顽固型尖锐湿疣患者 ,按知情同意原则 ,分别予常规或L1抗原冲击的树突细胞免疫治疗。全体患者随访 6个月 ,疗程前后取疣体 ,分别行PCR ,HE及免疫组化染色观察。结果 :L1抗原冲击的自身树突细胞免疫治疗后 ,患者细胞免疫功能较常规疗法有显著改善 ,病灶处组织中大量免疫细胞浸润 ,空泡细胞减少 ,病毒感染清除或减轻。结论 :L1抗原冲击的树突细胞免疫对于改善反复复发、顽固型人乳头状瘤病毒感染的生殖器尖锐湿疣患者的细胞免疫功能 ,及病变局部免疫状态有显著作用。 展开更多

关键词 树突细胞 治疗 尖锐湿疣 研究 L1抗原冲击 乳头状瘤病毒

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幽门螺杆菌vac A基因毒性相关片段原核表达载体的构建和表达 被引量：1

9

作者 江红 阎小君 +3 位作者 韩锋产 冯永强 侯瑜 苏成芝 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期237-240,共4页

目的构建幽门螺杆菌(Hp)vacA基因片段原核表达载体并进行表达。方法采用PCR技术,扩增HpvacA基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSE-TA-B。结果经过转化E.coliBL21DE3(plysS)后... 目的构建幽门螺杆菌(Hp)vacA基因片段原核表达载体并进行表达。方法采用PCR技术,扩增HpvacA基因的1个片段B,并克隆入pGEM-3Zf(-)质粒。测序正确后,再克隆入质粒pRSETA中,构建重组表达载体pRSE-TA-B。结果经过转化E.coliBL21DE3(plysS)后,诱导表达出相对分子质量(Mr)为33000的蛋白。SDS-PAGE分析显示,表达量占全菌总蛋白质的47.8%,上清中目的蛋白占全菌总蛋白的10.9%。ELISA和Westernblot分析表明,表达蛋白能与兔抗VacA多抗结合。结论成功地构建原核表达载体pRSETA-B,为进一步探讨该片段的生物学活性,以及临床上通过检测患者血清预测Hp的感染提供了实验依据。 展开更多

关键词 幽门螺杆菌 VAC A基因 原核表达载体 活性测定 构建 表达 胃疾病

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HPV58 E6的基因克隆及HLA-DQB1*03限制性T细胞表位分析 被引量：2

10

作者 陈凌 沈柱 +3 位作者 伍津津 张菊 周杨 范雪莉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1004-1006,共3页

目的:克隆HPV58E6的基因,并对其HLA-DQB1*03限制性T细胞表位进行分析。方法:从宫颈癌组织中提取基因组DNA,通过PCR方法扩增HPV58E6基因,常规方法将目的基因插入pGEM-TEasy载体中。酶切和测序鉴定后,利用位置特异性分数矩阵(PSSM)理论、... 目的:克隆HPV58E6的基因,并对其HLA-DQB1*03限制性T细胞表位进行分析。方法:从宫颈癌组织中提取基因组DNA,通过PCR方法扩增HPV58E6基因,常规方法将目的基因插入pGEM-TEasy载体中。酶切和测序鉴定后,利用位置特异性分数矩阵(PSSM)理论、支持向量机(SVM)理论和蛋白酶体酶切位点预测算法分析HPV58E6的HLA-DQB1*03限制性T细胞表位。结果:成功克隆了1株HPV58E6基因(GenBank EF060239),表位47FADLRIAY-RDGNPFA和表位102RCIICQRPLCPQEKK理论上是其HLA-DQB1*03限制性T细胞表位。结论:这两个表位可望作为后续相关实验中表位筛选、鉴定和多肽疫苗研制的候选对象。 展开更多

关键词 HPV58 E6 基因克隆 T细胞表位

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心肌成纤维细胞在血管紧张素Ⅱ刺激下表达下调基因的分离和鉴定

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作者 王新凤 高广道 +7 位作者 刘健 林元喜 国荣 楚雍烈 苏兴利 韩锋产 张文红 白玉杰 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期31-34,共4页

目的:对成年大鼠心肌成纤维细胞(CF)受血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后下调基因表达谱进行筛选及分析。方法:以受AngⅡ刺激CF为驱动方,未刺激CF为实验方,进行抑制消减杂交(SSH)建立消减cDNA文库。经斑点杂交筛选文库后将部分阳性克隆测序及... 目的:对成年大鼠心肌成纤维细胞(CF)受血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激后下调基因表达谱进行筛选及分析。方法:以受AngⅡ刺激CF为驱动方,未刺激CF为实验方,进行抑制消减杂交(SSH)建立消减cDNA文库。经斑点杂交筛选文库后将部分阳性克隆测序及进行同源性分析。结果:共获得17条下调表达基因,分别与胞内信号转导、转录抑制、纤维沉积和细胞骨架重构相关,并克隆到4条新基因表达序列标签(EST)。结论:SSH有效地克隆了成年大鼠CF受AngⅡ刺激后下调表达基因,对这些基因的研究将有助于阐明心肌改建的分子机制。 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ 心肌 成纤维细胞 抑制性消减杂交 基因表达 表达下调基因

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人类乳头瘤病毒16型早期基因178位(T→G)突变分析

12

作者 樊江波 吴静 +3 位作者 高艳娥 张菊 张格林 曲群 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期773-777,共5页

目的检测宫颈癌患者高危型人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型阳性标本中早期基因(E6基因)178位(T→G)点突变情况。方法应用模板指导的染料终止子掺入-荧光偏振检测技术(TDI-FP)方法检测宫颈癌患者高危HPV16型E6基因178位点... 目的检测宫颈癌患者高危型人类乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16型阳性标本中早期基因(E6基因)178位(T→G)点突变情况。方法应用模板指导的染料终止子掺入-荧光偏振检测技术(TDI-FP)方法检测宫颈癌患者高危HPV16型E6基因178位点突变情况,以进一步明确此基因位点突变与宫颈癌变的相关性。结果应用TDI-FP法检测宫颈癌组织中高危HPV16型E6基因178位突变率为32.5%,与癌前病变及慢性宫颈炎患者相比,差异具有统计学意义(χ2=20.623,P<0.01)。结论宫颈癌患者HPV16型E6基因178位(T→G)突变率较高,可能是HPV致癌的一个高危因素。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 宫颈癌 荧光偏振 基因突变

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A组轮状病毒一步法RT-PCR检测技术的建立和应用研究

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作者 王信隆 闫小君 +1 位作者 梁未丽 王莹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期450-451,共2页

目的设计A组轮状病毒RV特异性引物,应用Tth酶,建立一步法RT-PCR扩增方案,检测西安地区腹泻幼儿196份粪便标本,并与本室研制建立的反向间接血凝法RPHA,聚丙烯酰胺凝胶电泳,市售ELISA试剂盒平行检测对比分析。方法设计并合成第九基因序列... 目的设计A组轮状病毒RV特异性引物,应用Tth酶,建立一步法RT-PCR扩增方案,检测西安地区腹泻幼儿196份粪便标本,并与本室研制建立的反向间接血凝法RPHA,聚丙烯酰胺凝胶电泳,市售ELISA试剂盒平行检测对比分析。方法设计并合成第九基因序列保守区互补的特异性引物,在经典法RT-PCR试验成功的基础上,建立合理的一步法RT-PCR。结果四种检测结果阳性率分别为33.16%,23.47%,21.94%和25%,X2检验表明,RT-PCR最为敏感。结论反转录和PCR由Tth酶一步完成,克服了经典法中AMV、RNasin等试剂昂贵,操作繁锁等缺点,很适合临检需要。 展开更多

关键词 轮状病毒 逆转录一聚合酶链反应 反向间接血凝试验

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新型Taq Man-MGB探针在结核分枝杆菌实时PCR检测中的应用 被引量：11

14

作者 赵锦荣 白玉杰 +4 位作者 罗明 张庆华 郭晏海 张菊1 阎小君 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期807-810,共4页

为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立... 为建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的结核分枝杆菌DNA定性定量检测方法 ,以TaqMan探针技术为基础 ,运用TaqMan MGB探针 ,实时检测临床标本中的结核分枝杆菌DNA .用来自临床标本的DNA及克隆于载体的IS6 1 1 0序列检测所建立方法的有效性 .结果显示 ,所建立方法的最低检测限度为 1个基因拷贝 反应 ,在每反应 1 0 0 ～ 1 0 8拷贝范围内 ,Ct 值同DNA量的对数呈线性关系 .同一模板不同时间或同一时间不同管内扩增 ,所得Ct 值恒定 .用该方法检测 37例结核分枝杆菌培养阳性的痰液标本 ,敏感度为 1 0 0 % ;用该方法检测 1 6例TB系列阴性参考品 ,特异性为1 0 0 % .结果表明 。 展开更多

关键词 结核分枝杆菌 聚合酶链式反应 荧光定量PCR TAQMAN-MGB探针

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新型MGB探针在沙眼衣原体实时PCR检测中的应用 被引量：7

15

作者 赵锦荣 白玉杰 +4 位作者 王胜春 郭晏海 张庆华 张菊 阎小君 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期466-470,共5页

为建立基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值 ,用PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG44 0 2 464～ 2 980nt段 ,并克隆入 pMD18 T载体用作参比模板 ,设计一对引物和一个TaqMan MGB探针 ,优化反应条... 为建立基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测方法 ,探讨其临床应用价值 ,用PCR法扩增沙眼衣原体隐蔽质粒pLVG44 0 2 464～ 2 980nt段 ,并克隆入 pMD18 T载体用作参比模板 ,设计一对引物和一个TaqMan MGB探针 ,优化反应条件 ,建立沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统 ,并运用该系统同时应用连接酶链式反应 (LCR)法对临床标本进行检测 .结果显示所建立的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统 ,最低检测限度为 1DNA拷贝每反应 ;在 10 0 ～ 10 9DNA拷贝每反应范围内 ,Ct 值 (每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数 )和DNA拷贝数呈线性关系 (r >0 990 ) ;对临床标本检测结果同LCR分析结果吻合率为 10 0 % .以上结果表明 ,所建立的基于TaqMan MGB探针的沙眼衣原体DNA荧光定量PCR检测系统具有敏感性高、特异性强和线性检测范围广等特点 。 展开更多

关键词 MGB探针 沙眼衣原体 PCR检测 聚合酶链反应 荧光定量

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Centrobin与BRCA2蛋白间相互作用及其细胞定位 被引量：5

16

作者 薛丽 杨芳 +3 位作者 张贺龙 赵锦荣 张文红 白玉杰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第11期1017-1023,共7页

为分析乳腺癌易感基因2（breast cancer susceptibility gene2,BRCA2）蛋白与中心体BRCA2相互作用蛋白（centromal BRCA2interacting protein,centrobin）间相互作用及其细胞定位的关系,探讨二者功能上的联系,本研究采用哺乳细胞双杂交... 为分析乳腺癌易感基因2（breast cancer susceptibility gene2,BRCA2）蛋白与中心体BRCA2相互作用蛋白（centromal BRCA2interacting protein,centrobin）间相互作用及其细胞定位的关系,探讨二者功能上的联系,本研究采用哺乳细胞双杂交实验检测体内结合并初步判定BRCA2分子上的结合区域 免疫共沉淀实验进一步验证其体内结合活性,GST-pulldown法检测其体外结合活性,免疫组织化学染色观测BRCA2蛋白的细胞定位及在有丝分裂各期centrobin的细胞定位.结果显示,BRCA2与centrobin间存在体内和体外结合,且BRCA2分子的结合区域主要位于2393-2952氨基酸残基处 外源表达BRCA2定位于中心体,在有丝分裂各时相centrobin均定位于中心体.BRCA2与centrobin在体内形成复合物,并存在直接物理结合作用,二者存在细胞空间定位的一致性.该结果为进一步研究BRCA2在中心体复制中的调控作用提供了线索. 展开更多

关键词 中心体 乳腺癌易感基因2 中心体的BRCA2相互作用蛋白 有丝分裂

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抗原肽冲击Angiostatin修饰淋巴细胞对Siha细胞的体内外作用

17

作者 张菊 阎小君 +3 位作者 程虹 李丁 陈蕤 赵锦荣 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第2期93-93,共1页

抗原呈递不充分导致缺乏免疫应答及局部血管增生及人乳头瘤病毒HPV感染相关癌肿的发生发展。以HPV16抗原肽冲击、重组血管生长抑制因子逆转录病毒pLXSN-An-giostatin转染的淋巴细胞对HPV16阳性宫颈癌Siha细胞作用,可能会提供一种新的生... 抗原呈递不充分导致缺乏免疫应答及局部血管增生及人乳头瘤病毒HPV感染相关癌肿的发生发展。以HPV16抗原肽冲击、重组血管生长抑制因子逆转录病毒pLXSN-An-giostatin转染的淋巴细胞对HPV16阳性宫颈癌Siha细胞作用,可能会提供一种新的生物治疗方法。 pBS-Angiostatin,Siha细胞株由本室保存。PCR引物由上海生工公司合成。HPV16L2抗原肽由美联公司合成。采用分别酶切载体pLXSN,pBS-Angiostatin,回收pLXSN与An-giostatin,构建pLXSN-Angiostatin,转染PA317细胞的方法。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒抗原肽 血管生长抑制因子 淋巴细胞 宫颈癌 SIHA细胞

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TDI-FP法检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16、18型别感染

18

作者 樊江波 吴静 +3 位作者 曲群 高艳娥 张菊 张格林 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期178-180,189,共4页

目的通过模板介导的染料终止子掺入-荧光偏振技术(TDI-FP)检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染情况,以初步探讨本地区HPV流行特点。方法基于TDI-FP的基本原理,以HPV16、18 L1克隆重组质粒为模板,用HPV通用引物GP5+/6+PCR扩增,... 目的通过模板介导的染料终止子掺入-荧光偏振技术(TDI-FP)检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16、18感染情况,以初步探讨本地区HPV流行特点。方法基于TDI-FP的基本原理,以HPV16、18 L1克隆重组质粒为模板,用HPV通用引物GP5+/6+PCR扩增,再通过检测探针杂交后掺入的特异荧光素标记碱基的不同来判断病毒的类型。结果在宫颈癌组织中HPV16和18型阳性率分别为61.8%及32.7%,高危型HPV占宫颈癌HPV的98.1%,宫颈癌组高危型HPV阳性率显著高于癌前病变组和慢性宫颈炎组。结论初步提示宫颈癌患者HPV感染以高危型为主,其中有超过一半的患者以HPV16型感染为主。TDI-FP是一新兴的高通量基因检测技术,快速、可靠、敏感、特异并且操作简便,更适合于大规模临床筛查及在临床上广泛推广应用。 展开更多

关键词 人乳头瘤病毒 基因分型 宫颈癌 荧光偏振

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改良HCV RT-PCR方法及产物的SSCP分析

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作者 郭晏海 赵君庸 +2 位作者 苏成芝 闫小君 肖乐义 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 1997年第2期262-263,共2页

关键词 血清 HCV RT-PCR检测 SSCP分析

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多肽转移电泳时间探讨

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作者 张延凤 张晓楠 刘智广 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期497-498,共2页

关键词 多肽 转移电泳 时间

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