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丙型肝炎病毒核心蛋白基因重组质粒的构建及其在真核细胞中的表达
被引量：
4
1
作者
冯志华
周永兴
+4 位作者
汪毅
贾战生
连建奇
李谨革
李文波
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1998年第4期244-246,共3页
目的：构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白（Ｃ）基因片段的重组真核表达载体，并在肝细胞癌细胞株７７２１细胞中表达。方法：将从ｐＢＲＴＭＨＣＶ１－３０１１质粒切下的ＨＣＶＣ基因片段插入ｐｃＤＮＡ３质粒的ＣＭＶ启动子下...
目的：构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白（Ｃ）基因片段的重组真核表达载体，并在肝细胞癌细胞株７７２１细胞中表达。方法：将从ｐＢＲＴＭＨＣＶ１－３０１１质粒切下的ＨＣＶＣ基因片段插入ｐｃＤＮＡ３质粒的ＣＭＶ启动子下游，构建真核表达质粒ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ，然后，采用脂质体转染技术，转染７７２１细胞进行瞬时表达，转染细胞裂解煮沸后，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达的核心抗原。结果：用限制性内切酶酶切后，片段大小与计算值相符。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实，表达抗原的Ｍｒ约为２２０００。结论：ＨＣＶＣ基因能够插入ｐｃＤＮＡ３真核表达载体，并使其在真核细胞中表达，为进一步ＨＣＶ基因疫苗的研制和探讨抗ＨＣＶ感染打下了基础。
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关键词
丙型肝炎病毒
核心基因
瞬时表达
质粒
构建
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职称材料
双位点核酶对乙型肝炎病毒C基因体外转录物的剪切作用
被引量：
2
2
作者
连建奇
周永兴
金由辛
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1999年第6期566-569,共4页
为探讨双位点核酶对乙型肝炎病毒Ｃ基因体外转录物的剪切作用， 观察双位点核酶对单一核酶体外剪切的增强作用， 同时比较串联核酶和混合核酶的体外切割作用， 构建了核酶Ｒｚ１ ， Ｒｚ３ ， Ｒｚ１ 和Ｒｚ３ 的串联核酶（Ｒｚ１３） ...
为探讨双位点核酶对乙型肝炎病毒Ｃ基因体外转录物的剪切作用， 观察双位点核酶对单一核酶体外剪切的增强作用， 同时比较串联核酶和混合核酶的体外切割作用， 构建了核酶Ｒｚ１ ， Ｒｚ３ ， Ｒｚ１ 和Ｒｚ３ 的串联核酶（Ｒｚ１３） 体外转录载体， 经体外转录后切割靶ＲＮＡ． 结果表明： 双位点核酶， 无论是串联或混合核酶均可增强单一核酶的体外切割作用， 串联和混合核酶中的单一核酶可独立发挥作用； 当串联和混合数目为２ 个时， 两者的切割效率差别不大（ Ｐ＞ ０－０５） ．
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关键词
乙型肝炎病毒
串联核酶
混合核酶
剪切
基因转录
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职称材料
题名
丙型肝炎病毒核心蛋白基因重组质粒的构建及其在真核细胞中的表达
被引量：
4
1
作者
冯志华
周永兴
汪毅
贾战生
连建奇
李谨革
李文波
机构
第四军医大学唐都感染病院
出处
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1998年第4期244-246,共3页
文摘
目的：构建包含丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）核心蛋白（Ｃ）基因片段的重组真核表达载体，并在肝细胞癌细胞株７７２１细胞中表达。方法：将从ｐＢＲＴＭＨＣＶ１－３０１１质粒切下的ＨＣＶＣ基因片段插入ｐｃＤＮＡ３质粒的ＣＭＶ启动子下游，构建真核表达质粒ｐｃＤＮＡＨＣＶ－Ｃ，然后，采用脂质体转染技术，转染７７２１细胞进行瞬时表达，转染细胞裂解煮沸后，通过ＳＤＳ－ＰＡＧＥ及Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达的核心抗原。结果：用限制性内切酶酶切后，片段大小与计算值相符。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实，表达抗原的Ｍｒ约为２２０００。结论：ＨＣＶＣ基因能够插入ｐｃＤＮＡ３真核表达载体，并使其在真核细胞中表达，为进一步ＨＣＶ基因疫苗的研制和探讨抗ＨＣＶ感染打下了基础。
关键词
丙型肝炎病毒
核心基因
瞬时表达
质粒
构建
Keywords
hepatitis C virus
core gene
transient expression
P22
hepatitis C
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
R512.63 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
双位点核酶对乙型肝炎病毒C基因体外转录物的剪切作用
被引量：
2
2
作者
连建奇
周永兴
金由辛
机构
第四军医大学唐都感染病院
中国科学院上海生物化学研究所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1999年第6期566-569,共4页
基金
国家自然科学基金!(39570652)
文摘
为探讨双位点核酶对乙型肝炎病毒Ｃ基因体外转录物的剪切作用， 观察双位点核酶对单一核酶体外剪切的增强作用， 同时比较串联核酶和混合核酶的体外切割作用， 构建了核酶Ｒｚ１ ， Ｒｚ３ ， Ｒｚ１ 和Ｒｚ３ 的串联核酶（Ｒｚ１３） 体外转录载体， 经体外转录后切割靶ＲＮＡ． 结果表明： 双位点核酶， 无论是串联或混合核酶均可增强单一核酶的体外切割作用， 串联和混合核酶中的单一核酶可独立发挥作用； 当串联和混合数目为２ 个时， 两者的切割效率差别不大（ Ｐ＞ ０－０５） ．
关键词
乙型肝炎病毒
串联核酶
混合核酶
剪切
基因转录
Keywords
hepatitis B virus C gene, connected ribozyme , mixed ribozymes
分类号
R512.620.5 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
丙型肝炎病毒核心蛋白基因重组质粒的构建及其在真核细胞中的表达
冯志华
周永兴
汪毅
贾战生
连建奇
李谨革
李文波
《细胞与分子免疫学杂志》
CAS
CSCD
1998
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
双位点核酶对乙型肝炎病毒C基因体外转录物的剪切作用
连建奇
周永兴
金由辛
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
1999
2
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职称材料
已选择
0
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引证文献
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