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口腔扁平苔藓发病相关基因cDNA消减文库的建立
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作者 刘青 金岩 +2 位作者 吴织芬 邢向辉 轩东英 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2005年第2期166-168,共3页
目的:建立口腔扁平苔藓差异表达基因的cDNA文库。方法:采用改良消减杂交技术,以口腔扁平苔藓病变组织总mRNA为实验组, 采用改良的SMARTPCRcDNA合成技术进行反转录,正常黏膜组织总mRNA为驱动组,进行扣除杂交,筛选出两组差异表达的cDNA,与... 目的:建立口腔扁平苔藓差异表达基因的cDNA文库。方法:采用改良消减杂交技术,以口腔扁平苔藓病变组织总mRNA为实验组, 采用改良的SMARTPCRcDNA合成技术进行反转录,正常黏膜组织总mRNA为驱动组,进行扣除杂交,筛选出两组差异表达的cDNA,与T载体进行T/A连接构建文库,然后转化高效感受态大肠杆菌DH5а进行文库扩增,随机挑取阳性克隆进行酶切鉴定。结果:扩增消减cDNA文库获得200余个白色阳性克隆,随机挑取的100个阳性克隆酶切后,含500bp以上插入片段的克隆64个,占64%。结论:用改良消减杂交技术成功构建了口腔扁平苔藓差异表达基因的消减cDNA文库,该文库的建立为进一步筛选、克隆口腔扁平苔藓相关基因奠定了基础。 展开更多
关键词 改良消减杂交技术 口腔扁平苔藓 差异表达基因
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人牙龈间充质干细胞与牙周膜干细胞的性能比较 被引量:6
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作者 杨昊 高丽娜 +3 位作者 安莹 周峻 陈发明 金岩 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2013年第4期326-330,共5页
目的:比较人牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)和牙周膜干细胞(periodontalligament stem cells,PDLSCs)的增殖及分化能力。方法:取同一个体的牙龈组织及牙周膜组织进行干细胞的分离培养和鉴定,并对其干细胞基... 目的:比较人牙龈间充质干细胞(gingival mesenchymal stem cells,GMSCs)和牙周膜干细胞(periodontalligament stem cells,PDLSCs)的增殖及分化能力。方法:取同一个体的牙龈组织及牙周膜组织进行干细胞的分离培养和鉴定,并对其干细胞基本性能与增殖、分化能力进行对比分析。结果:GMSCs和PDLSCs均具有良好的间充质干细胞的特性,但其增殖及分化能力存在一定的差异。GMSCs原代细胞培养的成功率较PDLSCs高,增殖能力强,差异具有统计学意义(P<0.05);而分化能力检测结果显示,GMSCs成骨能力明显弱于PDLSCs(P<0.05),成脂能力两组细胞无显著性差异。结论:GMSCs能否代替PDLSCs用于牙周组织再生治疗,尚需要进一步研究。 展开更多
关键词 人类 牙龈间充质干细胞 牙周膜干细胞 增殖 分化
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黄芩苷对人牙周膜细胞RANKL-OPG表达的影响及其作用机制 被引量:4
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作者 陈悦 吴织芬 杨连甲 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期492-497,共6页
目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默... 目的研究黄芩苷对人牙周膜细胞核因子-κB受体激活物配基和骨保护素(RANKL-OPG)表达的影响及其作用机制。方法首先构建转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡR)靶向siRNA真核表达载体,转染正常人外周血T细胞,使T细胞表面的TGF-βⅡR基因沉默,继而将转染与未转染靶向性TGF-βⅡR基因沉默的T细胞和正常人牙周膜成纤维细胞置于加有黄芩苷和内毒素的培养基中,分为6组:①正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞+黄芩苷;②正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+转染siRNA1的T细胞;③正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞+黄芩苷;④正常牙周膜成纤维细胞+内毒素+正常T细胞;⑤正常牙周膜成纤维细胞+黄芩苷;⑥正常牙周膜成纤维细胞。共培养48h,RT-PCR检测牙周膜细胞RANKL和OPG的表达,计算RANKL/OPG比值。结果①酶切鉴定正确的克隆测序结果与设计的目的序列完全一致;②转染siRNA1的T细胞组的TGF-βⅡRmRNA的表达被明显抑制;③RANKL/OPG的比值在各组间的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功构建了TGF-βⅡR靶向siRNA真核表达载体并成功转染T细胞;黄芩苷可以降低牙周膜细胞表面RANKL/OPG比值;TGF-β的信号传导在黄芩苷影响牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG表达过程中起着重要作用;黄芩苷并非只通过TGF-β信号传导通路,而是亦通过其他通路对牙周膜成纤维细胞表面的RANKL/OPG进行调控。 展开更多
关键词 转化生长因子βⅡ型受体 小干扰RNA 核因子-κB受体激活物配基 骨保护素 牙周膜成纤维细胞
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釉基质蛋白对体外培养的兔骨髓基质细胞生物学功能的影响 被引量:7
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作者 杜岩 吴织芬 +2 位作者 董广英 万玲 侯锐 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2004年第5期457-461,共5页
目的 :观察釉基质蛋白对兔骨髓基质细胞增殖、碱性磷酸酶活性、总蛋白合成等一般生物学功能的影响。方法 :MTT法检测细胞增殖能力 ,酶动力法检测细胞碱性磷酸酶活性 ,利用Biophotometer生物检测仪检测细胞总蛋白合成能力。结果 :釉基质... 目的 :观察釉基质蛋白对兔骨髓基质细胞增殖、碱性磷酸酶活性、总蛋白合成等一般生物学功能的影响。方法 :MTT法检测细胞增殖能力 ,酶动力法检测细胞碱性磷酸酶活性 ,利用Biophotometer生物检测仪检测细胞总蛋白合成能力。结果 :釉基质蛋白可以促进骨髓基质细胞的增殖、提高细胞的碱性磷酸酶活性和总蛋白合成能力 ,以 10 0mg/L釉基质蛋白的促进作用最明显。釉基质蛋白促进细胞增殖、提高细胞碱性磷酸酶活性、促进细胞总蛋白合成的作用分别在 12 0h、72h、16 8h时最明显。结论 :釉基质蛋白对兔骨髓基质细胞增殖、碱性磷酸酶活性。 展开更多
关键词 釉基质蛋白 骨髓基质细胞 增殖 碱性磷酸酶 总蛋白
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氯化锂对人颌骨来源的骨髓间充质干细胞增殖及骨向分化能力的影响 被引量:8
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作者 高丽娜 安莹 +2 位作者 杨昊 陈发明 金岩 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期203-208,共6页
目的:探讨氯化锂(LiCl)对颌骨来源的骨髓间充质干细胞(OF-BMMSCs)增殖及骨性分化的影响。方法:采用有限稀释法克隆化培养人颌骨来源的骨髓间充质干细胞;正常培养基中加入不同浓度LiCl(5、10、20、40 mmol/L),同时设立对照组(0 mmol/L);... 目的:探讨氯化锂(LiCl)对颌骨来源的骨髓间充质干细胞(OF-BMMSCs)增殖及骨性分化的影响。方法:采用有限稀释法克隆化培养人颌骨来源的骨髓间充质干细胞;正常培养基中加入不同浓度LiCl(5、10、20、40 mmol/L),同时设立对照组(0 mmol/L);运用MTT法分析不同浓度LiCl对人OF-BMMSCs增殖活性的影响;采用组织化学染色法、RT-PCR法测定不同浓度LiCl处理人OF-BMMSCs后的ALP活性及相关骨向分化基因(ALP,Runx-2,OCN)的表达。结果:5 mmol/L LiCl促进OF-BMMSCs增殖,对ALP、Runx-2、OCN表达的影响作用不明显(P>0.05),20和40 mmol/L LiCl抑制细胞增殖(P<0.05),促进ALP、Runx-2、OCN基因表达(P<0.05)。结论:LiCl能够促进人OF-BMMSCs的骨向分化。 展开更多
关键词 氯化锂 颌骨骨髓间充质干细胞 增殖 骨向分化
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rhBMP_2缓释微球对牙龈成纤维细胞的生物学作用 被引量:1
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作者 陈发明 吴织芬 +4 位作者 金岩 王勤涛 姜玲 杜岩 王国芳 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2005年第3期236-239,共4页
目的:观察甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA)载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP2)缓释微球(MPs)对体外培养的人牙龈成纤维细胞(GFCs)的生物学作用。方法:采用体外细胞培养技术,将rhBMP2缓释微球和GFCs一起培养,采用MTT法检测其对GFC... 目的:观察甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA)载重组人骨形态发生蛋白-2(rhBMP2)缓释微球(MPs)对体外培养的人牙龈成纤维细胞(GFCs)的生物学作用。方法:采用体外细胞培养技术,将rhBMP2缓释微球和GFCs一起培养,采用MTT法检测其对GFCs的增殖状况的影响;碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测细胞ALP活性以反映rhBMP2缓释微球对其分化状况的影响,并与单纯rhBMP2的作用进行比较。结果:rhBMP2缓释微球具有良好的生物学活性,能显著促进的GFCs增殖及分化,并维持10d以上,其效应高于单纯施加rhBMP2的效应。结论:所制备的rhBMP2微球比单纯rhBMP2对GFCs有更为明显的生物学效应,可以达到对生长因子的有效缓释。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白类 微球体 缓释 牙龈成纤维细胞
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颅颌面组织再生面临的机遇与挑战
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作者 陈发明 周永胜 +1 位作者 林云锋 张玉峰 《国际口腔医学杂志》 CAS 2013年第5期565-567,共3页
临床上,颅颌面组织缺损十分常见,严重影响了患者的各种功能和生存质量,颅颌面组织缺损的修复重建日益受到人们的重视。近年来,组织工程技术的蓬勃发展为复杂组织与器官的再生带来了希望,成为了研究者们关注的热点。本期争鸣栏目特别邀请... 临床上,颅颌面组织缺损十分常见,严重影响了患者的各种功能和生存质量,颅颌面组织缺损的修复重建日益受到人们的重视。近年来,组织工程技术的蓬勃发展为复杂组织与器官的再生带来了希望,成为了研究者们关注的热点。本期争鸣栏目特别邀请了4位颅颌面组织工程领域的知名专家就组织再生面临的机遇与挑战进行探讨,以期能为临床及研究工作带来些许启示。 展开更多
关键词 颌面组织 生面 组织工程技术 组织缺损 颅颌面 生存质量 修复重建 临床
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