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甲醛和戊二醛应用于神经系统免疫组织化学组织固定的特性分析 被引量：4
1
作者 张遐 鞠躬 董光皎 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期249-256,共8页
七十年代以来,免疫组织化学技术已成为识别神经元化学特性及其纤维联系的重要方法,近年来并被迅速地引入到神经递质受体的定位研究、原位杂交组化技术、神经元第二信使系统和第三信使—c-fos癌基因(张遐,鞠躬,待发表)的显示之中。在免... 七十年代以来,免疫组织化学技术已成为识别神经元化学特性及其纤维联系的重要方法,近年来并被迅速地引入到神经递质受体的定位研究、原位杂交组化技术、神经元第二信使系统和第三信使—c-fos癌基因(张遐,鞠躬,待发表)的显示之中。在免疫组化染色过程中,有许多因素影响其结果,组织固定就是主要因素之一。非固定或固定不佳的组织其结构将在免疫组化的抗体孵育等过程中受到不同程度的损害,同时组织中的抗原也将从其原位弥散。而各种形式的组织固定虽然可使组织结构得到不同程度的保存,但所研究的抗原的特性。 展开更多
关键词 甲醛 戊二醛 神经系统 组织固定
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艾滋病毒-env26肽基因的化学合成及克隆
2
作者 项秉懿 杨静华 +2 位作者 陈南春 沈利群 苏成芝 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第3期229-234,共6页
选用HTLV-Ⅲ前病毒核酸序列中的6333—6410作为合成HIV-env26肽结构基因,加上必要序列及接头共104bp,分成8个寡核苷酸片段,使结构基因能自身连接成多重串联体。用DNA合成仪合成。组装后与高效表达质粒pRC23重组,转化TAP106。经筛选、鉴... 选用HTLV-Ⅲ前病毒核酸序列中的6333—6410作为合成HIV-env26肽结构基因,加上必要序列及接头共104bp,分成8个寡核苷酸片段,使结构基因能自身连接成多重串联体。用DNA合成仪合成。组装后与高效表达质粒pRC23重组,转化TAP106。经筛选、鉴定及DNA序列分析,得到一株含有HIV-env26肽基因4重串联体的重组菌,命名为pXY104。 展开更多
关键词 HIV 肽基因 合成 分子克隆
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自由基与细胞凋亡 被引量：68
3
作者 惠宏襄 赵小宁 +2 位作者 金明 王成济 莫简 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1996年第1期12-16,共5页
细胞凋亡是指细胞在生理和病理情况下的一种死亡模式，广泛涉及到肿瘤、衰老和退行性病变等一系列疾病．最近有实验表明自由基与细胞凋亡有密切的关系．
关键词 细胞凋亡 自由基 病理化学
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补硒与锌对梭曼中毒大鼠乙酰胆碱酯酶活力和抗氧化力的影响 被引量：12
4
作者 杨兴斌 杨会宣 +3 位作者 蒋宁 赵燕 谷小刚 海春旭 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期117-120,共4页
目的　探讨抗氧化剂硒 (Se)和锌 (Zn)预防梭曼中毒的可能性。方法　雄性大鼠 4 0只 ,按体重随机分为正常对照组、染毒组、硒治疗组、锌治疗组。正常对照组和染毒组每日 5mL·kg- 1的生理盐水(NS)ig ;硒治疗组每日 1mg·kg- 1Na2... 目的　探讨抗氧化剂硒 (Se)和锌 (Zn)预防梭曼中毒的可能性。方法　雄性大鼠 4 0只 ,按体重随机分为正常对照组、染毒组、硒治疗组、锌治疗组。正常对照组和染毒组每日 5mL·kg- 1的生理盐水(NS)ig ;硒治疗组每日 1mg·kg- 1Na2 Se0 3的NS液ig和锌治疗组每日 4mg·kg- 1Zn(C6 H11O7) 2 的NS液ig ,共ig 9d。d 10除正常对照组外其余各组大鼠均sc 0 .9LD50 梭曼 ,2h后断头处死并取样 ,测定大鼠全血乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性及血清、大脑、肝脏的超氧化物歧化酶 (SOD)活性、总抗氧化力 (T AOC)和一氧化氮合酶 (NOS)活性。结果　梭曼中毒大鼠后 ,染毒组大鼠全血AChE活性被明显抑制 ,血清、大脑、肝脏的SOD活性、T AOC显著下降 ,NOS含量明显升高 ,而硒和锌预防组大鼠对梭曼引起的AChE、SOD、NOS活性和T AOC变化明显减轻。 展开更多
关键词 梭曼中毒 硒 锌 乙酰胆碱酯酶 超氧化物歧化酶 总抗氧化力 一氧化氮合酶
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1,4-双(9-O-奎宁)-2,3-二氮杂萘的合成及其在烯烃不对称二羟基化反应中的应用 被引量：10
5
作者 孙晓莉 匡永清 +1 位作者 南鹏娟 张生勇 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2003年第7期1216-1218,共3页
通过改进的文献方法制备 1 ,4 -双 (9-O-奎宁 ) -2 ,3-二氮杂萘 [(QN) 2 PHAL].在碱性条件下 ,奎宁与1 ,4 -二氯 -2 ,3-二氮杂萘之间的亲核取代反应以 72 %的化学产率生成 (QN) 2 PHAL.在 4种烯烃的不对称二羟基化反应中 ,(QN) 2 PHAL... 通过改进的文献方法制备 1 ,4 -双 (9-O-奎宁 ) -2 ,3-二氮杂萘 [(QN) 2 PHAL].在碱性条件下 ,奎宁与1 ,4 -二氯 -2 ,3-二氮杂萘之间的亲核取代反应以 72 %的化学产率生成 (QN) 2 PHAL.在 4种烯烃的不对称二羟基化反应中 ,(QN) 2 PHAL表现出很高的对映选择性 (83%～ 92 % e.e.)和催化活性 (产率 83%～ 93% ) . 展开更多
关键词 1 4-双(9-O-奎宁)-2 3-二氮杂萘 合成 烯烃 不对称二羟基化 应用 手性连二醇
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高效毛细管电泳法测定唐古特大黄多糖中单糖的组成 被引量：24
6
作者 赵燕 刘莉 +3 位作者 杨兴斌 李晓晔 孙晓莉 张生勇 《医药导报》 CAS 2005年第11期981-983,共3页
目的测定唐古特大黄多糖中单糖的组成及其物质的量之比。方法将大黄多糖样品用2 mol.L-1的硫酸溶液降解成单糖后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化成单糖,应用毛细管区带电泳法测定各单糖。熔融石英毛细管柱(50μm×70 cm,有效长度... 目的测定唐古特大黄多糖中单糖的组成及其物质的量之比。方法将大黄多糖样品用2 mol.L-1的硫酸溶液降解成单糖后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化成单糖,应用毛细管区带电泳法测定各单糖。熔融石英毛细管柱(50μm×70 cm,有效长度60 cm);二极管阵列检测器;运行缓冲液为硼砂水溶液(浓度为150 mmol.L-1、pH值为10.8);分离电压10 kV;柱温25℃;0.5 Pa压力下进样,进样时间5 s。结果唐古特大黄多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸等8种单糖组成,其物质的量之比为1.00∶23.27∶15.93∶2.95∶1.34∶49.07∶2.62∶4.31。结论该方法具有简单、快速、分离效率高等特点,可用于唐古特大黄多糖中单糖组成的测定。 展开更多
关键词 单糖 唐古特大黄多糖 毛细管电泳法 衍生化
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1,4-双(9-O-奎宁)-2,3-二氮杂萘-OsO_4催化烯烃的不对称氨羟化反应 被引量：8
7
作者 程司堃 匡永清 +2 位作者 路丽华 李晓晔 张生勇 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第4期651-653,共3页
在氧化 -供氮试剂 N -氯代氨基甲酸苄酯存在下 ,1 ,4-双 ( 9-O-奎宁 ) -2 ,3 -二氮杂萘 -Os O4催化剂在 5种烯烃的不对称氨羟化反应中表现出极高的对映选择性 ( 85 %～ 99% e.e.)和区域选择性 ,产率 48%～ 68% .
关键词 1 4-双(9-O-奎宁)-2 3-二氮杂萘-OsO4 烯烃 不对称氨羟化反应 催化剂 手性Β-氨基醇
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新型手性膦-硼烷配合物的合成及其在不对称催化氢化反应中的应用 被引量：6
8
作者 姜茹 南鹏娟 +2 位作者 柳巍 李晓晔 张生勇 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2001年第6期936-938,共3页
以苯乙烯为原料 ,通过 Sharpless不对称二羟基化反应合成高对映体纯的苯基乙二醇 ,经酯化、亲核取代反应转化为手性膦 -硼烷配合物 .后者克服了有机膦配体易氧化的缺点 ,其制备过程简单 ,易于提纯 ,在空气中可长期保存 .该手性膦 -硼烷... 以苯乙烯为原料 ,通过 Sharpless不对称二羟基化反应合成高对映体纯的苯基乙二醇 ,经酯化、亲核取代反应转化为手性膦 -硼烷配合物 .后者克服了有机膦配体易氧化的缺点 ,其制备过程简单 ,易于提纯 ,在空气中可长期保存 .该手性膦 -硼烷配合物在四氟硼酸 -甲醚的存在下解络 ,生成的自由膦不经分离直接与[Rh( COD) Cl]2 作用生成手性膦 -铑原位催化剂 .在 α-乙酰氨基肉桂酸甲酯的不对称氢化反应中 ,转化率为1 0 0 % ,对映选择性 88% e.e. 展开更多
关键词 手性膦-硼烷配合物 合成 不对称二羟基化 不对称氢化 不对称合成 α-乙酰氨基肉桂酸甲酯
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冠心病患者含速效救心丸后体内冰片药动学变化 被引量：12
9
作者 孟华 黄熙 +3 位作者 郭军 王骊丽 张莉 李晓晔 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期379-382,共4页
目的 :观察速效救心丸中冰片在冠心病稳定性心绞痛患者体内的药代动力学特征。方法 :选取冠心病稳定性心绞痛患者 6例 ,测定患者在含服速效救心丸后不同时间点的血浆样本中冰片的浓度。结果 :冠心病稳定性心绞痛患者含服速效救心丸后体... 目的 :观察速效救心丸中冰片在冠心病稳定性心绞痛患者体内的药代动力学特征。方法 :选取冠心病稳定性心绞痛患者 6例 ,测定患者在含服速效救心丸后不同时间点的血浆样本中冰片的浓度。结果 :冠心病稳定性心绞痛患者含服速效救心丸后体内冰片的血药浓度 时间曲线符合一室开放模型 ,冰片于 16min左右即达血药浓度高峰。结论 :明确冰片在冠心病稳定性心绞痛患者体内的药代动力学特征 ,为临床用药提供直接的定量化依据。 展开更多
关键词 冰片 速效救心丸 药代动力学 冠心病
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紫杉醇诱导食管癌细胞的细胞周期阻断与细胞凋亡 被引量：15
10
作者 彭玮丹 张杰 +3 位作者 曹云新 惠宏襄 金明 王成济 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第5期402-406,共5页
目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0／G1期及G2／M期并诱导其... 目的研究紫杉醇对食管癌细胞的细胞周期阻断及诱导凋亡的作用。方法应用形态学观察、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术等方法对紫杉醇诱导的食管癌细胞系Eca109进行了检测和观察。结果紫杉醇可将食管癌细胞阻断于G0／G1期及G2／M期并诱导其凋亡，凋亡细胞具有典型的凋亡形态特征，流式细胞仪检测有凋亡峰出现，琼脂糖凝胶电泳显示3nmol·L-1紫杉醇作用72h便可见明显的DNA梯带。100nmol·L-1和1000nmol·L-1浓度的紫杉醇作用于细胞，在形态变化与细胞周期变化上有很大差别。紫杉醇作用短时间（＜2h）去除后再培养比持续性作用更早促使细胞凋亡。结论紫杉醇不仅可以阻断食管癌细胞的分裂，而且对于间期细胞也有很大作用。细胞周期阻断并不直接诱导细胞凋亡，甚至可能抑制细胞凋亡的进程。食管癌细胞中存在多条凋亡途径。 展开更多
关键词 紫杉醇 细胞周期阻断 细胞凋亡 食管癌细胞
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一株人源性抗HBsAg抗体Fab片段的筛选及序列分析 被引量：9
11
作者 高辉 高磊 +7 位作者 纪宗玲 路凡 陈南春 陈苏民 余宙耀 张宜俊 尤玉琴 粟宽源 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第2期155-157,共3页
一株人源性抗ＨＢｓＡｇ抗体Ｆａｂ片段的筛选及序列分析高辉高磊纪宗玲路凡陈南春陈苏民余宙耀张宜俊尤玉琴粟宽源（第四军医大学生物化学教研室，西安７１００３１空军广州医院全军肝病中心）乙型肝炎是我国常见的传染性疾... 一株人源性抗ＨＢｓＡｇ抗体Ｆａｂ片段的筛选及序列分析高辉高磊纪宗玲路凡陈南春陈苏民余宙耀张宜俊尤玉琴粟宽源（第四军医大学生物化学教研室，西安７１００３１空军广州医院全军肝病中心）乙型肝炎是我国常见的传染性疾病，目前尚无特效的治疗手段。研究发... 展开更多
关键词 乙型肝炎 抗HBsAg抗体 FAB片段 筛选 序列分析
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肿瘤特异性抗原纳米乳剂的制备及抗肿瘤免疫效应 被引量：11
12
作者 孙玉静 隋延仿 +3 位作者 吴道澄 葛伟 叶菁 张秀敏 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期288-291,共4页
目的制备包裹基因工程MAGE1HSP70的纳米乳剂,研究其生物学特性及抗肿瘤免疫效应。方法采用界面聚合法,制备包裹MAGE1HSP70的纳米乳剂(NEMAGE1HSP70),于电镜下观察其形态并测量其粒径,凝胶层析法检测纳米乳剂包裹率、载药量、稳定性及体... 目的制备包裹基因工程MAGE1HSP70的纳米乳剂,研究其生物学特性及抗肿瘤免疫效应。方法采用界面聚合法,制备包裹MAGE1HSP70的纳米乳剂(NEMAGE1HSP70),于电镜下观察其形态并测量其粒径,凝胶层析法检测纳米乳剂包裹率、载药量、稳定性及体外释药特性。用NEMAGE1HSP70免疫小鼠,运用酶联免疫斑点法(ELISPOT)和细胞毒性杀伤实验(LDH)检测了NEMAGE1HSP70激活机体细胞免疫反应的状况。结果成功地制备出粒径为(25±10)nm的纳米乳剂,包裹率为91%,载药量0091g·L-1,4℃放置6mon后性质稳定。体外释药特性显示有70%的蛋白释放在24h内完成。ELISPOT和LDH显示NEMAGE1HSP70可以激活机体免疫反应产生针对MAGE1的CTL,特异性杀伤表达MAGE1的肿瘤细胞。结论NEMAGE1HSP70具有良好的包裹率和载药量,性质稳定且具有缓释作用,可以有效激活机体免疫反应产生针对特异性抗原MAGE1的CTL,是一种很有希望的新型抗肿瘤疫苗。 展开更多
关键词 纳米乳剂 肿瘤特异性抗原 肿瘤疫苗
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芦荟茶中微量元素锰及其氨基酸含量的测定分析 被引量：8
13
作者 董顺福 刘洁 +2 位作者 孙晓莉 韩丽琴 赵文秀 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第6期1170-1172,共3页
采用原子吸收分光光度法测定了芦荟保健茶中微量元素锰的含量,氨基酸分析仪测定了17种氨基酸的含量,结果显示芦荟保健茶中含有较高的锰元素和丰富的氨基酸。红茶中锰的含量高于绿茶,其中锰元素在热水中的总溶出率可达50%以上,一次浸泡... 采用原子吸收分光光度法测定了芦荟保健茶中微量元素锰的含量,氨基酸分析仪测定了17种氨基酸的含量,结果显示芦荟保健茶中含有较高的锰元素和丰富的氨基酸。红茶中锰的含量高于绿茶,其中锰元素在热水中的总溶出率可达50%以上,一次浸泡溶出率>二次浸泡溶出率>三次浸泡溶出率。茶中含有7种人体必需的氨基酸,其中较多的是天冬氨酸、谷氨酸、亮氨酸。高锰是该系列保健茶的显著特点。实验结果为探讨芦荟保健系列茶中微量元素和氨基酸与保健功能之间的关系提供了有用的数据。 展开更多
关键词 芦荟保健茶 锰 氨基酸
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气相色谱法测定恶性血液病患者血浆中游离脂肪酸的含量 被引量：6
14
作者 许自超 李晓晔 +3 位作者 蒋静霞 尹浔 沈素芸 杨建中 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期268-269,共2页
应用气相色谱法测定了恶性血液病患者（急性淋巴细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、淋巴瘤）血浆中主要游离脂肪酸（Ｃ＿（１６：０），Ｃ＿（ｌ８：０），Ｃ＿（１８：１），Ｃ＿（ｌ８：２））的浓度。所有恶性血液病患者血浆中几个... 应用气相色谱法测定了恶性血液病患者（急性淋巴细胞性白血病、急性粒细胞性白血病、淋巴瘤）血浆中主要游离脂肪酸（Ｃ＿（１６：０），Ｃ＿（ｌ８：０），Ｃ＿（１８：１），Ｃ＿（ｌ８：２））的浓度。所有恶性血液病患者血浆中几个主要的游离脂肪酸浓度，大多数比正常值显著降低（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。 展开更多
关键词 气相色谱 游离脂肪酸 血液病 血浆
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抗人CD8单抗κ轻链可变区基因的克隆和序列测定 被引量：8
15
作者 杨安钢 吉昌华 +4 位作者 韩骅 杨立宏 苏成芝 许辉 金伯泉 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第4期286-286,共1页
OK T8杂交瘤细胞株从American typecuhure collection(ATCC)获得,产生抗人CD8分子的单克隆抗体IgG2a(γ2a,κ),为了对这一鼠源性单抗进行基因工程改造,我们首先克隆了该单抗的κ轻链可变区基因,并测定了其碱基序列,现将结果报道如下: ... OK T8杂交瘤细胞株从American typecuhure collection(ATCC)获得,产生抗人CD8分子的单克隆抗体IgG2a(γ2a,κ),为了对这一鼠源性单抗进行基因工程改造,我们首先克隆了该单抗的κ轻链可变区基因,并测定了其碱基序列,现将结果报道如下: 通过计算机查找并分析了已发表的几十株抗体的轻链可变区基因序列,经比较其5’端保守序列和J区序列,设计了一对DNA引物:GTGAATTCATGGACATCCAGATGACCCA- 展开更多
关键词 基因 单克隆抗体 免疫球蛋白
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载rhBMP2凝胶微球控释系统的设计与合成实验 被引量：10
16
作者 陈发明 吴织芬 +6 位作者 金岩 王勤涛 吴红 王国芳 杜岩 黄沙 姜瑜 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期174-177,共4页
目的:设计与合成rhBMP2新型控释载体,初步探讨其载药及降解性能.方法:用右旋糖酐(dextran,dex)与甲基丙烯酸缩水甘油酯(glycidyl methacrylate,GMA)合成甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA),测定该凝胶微球溶胀系数Q,并对其载药、降... 目的:设计与合成rhBMP2新型控释载体,初步探讨其载药及降解性能.方法:用右旋糖酐(dextran,dex)与甲基丙烯酸缩水甘油酯(glycidyl methacrylate,GMA)合成甲基丙烯酸缩水甘油酯右旋糖酐(dex-GMA),测定该凝胶微球溶胀系数Q,并对其载药、降解性能进行初步研究.结果:dex-GMA在一定条件下可以成球,粒径与制备工艺密切相关;该凝胶微球溶胀参数10.9±5.3;载药性能良好,在葡聚糖酶的作用下20～40 d内可以完全降解. 结论:右旋糖酐基凝胶微球具有良好的溶胀性能,可生物降解,其粒径可控,作为生长因子载体,有望达到控释给药的目的,其制备工艺及理化性能有待进一步研究. 展开更多
关键词 控释给药系统 溶胀性能 微球 生物降解
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人羧肽酶A的cDNA克隆和原核表达 被引量：5
17
作者 武国军 郝晓柯 +4 位作者 白玉杰 张盈华 药立波 季少平 王吉村 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1999年第3期165-166,169,共3页
目的:获得人羧肽酶A基因,为进一步构建、表达抗人精浆蛋白单链抗体/羧肽酶A融合蛋白,用于前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法:从人正常肺组织中提取总RNA,经反转录PCR分离人羧肽酶A基因,并克隆入pUC19质粒中,用全自动荧... 目的:获得人羧肽酶A基因,为进一步构建、表达抗人精浆蛋白单链抗体/羧肽酶A融合蛋白,用于前列腺癌的抗体导向酶-前体药物疗法奠定基础。方法:从人正常肺组织中提取总RNA,经反转录PCR分离人羧肽酶A基因,并克隆入pUC19质粒中,用全自动荧光测序仪测定其序列。将该目的基因插入pBV220载体,并转入大肠杆菌DH5α中,经热诱导表达重组蛋白。结果:获得了人羧肽酶A基因(由1251bp组成,可编码417个氨基酸),与国外发表的人羧肽酶AcDNA序列一致。表达的重组蛋白以SDSPAGE分析,在Mr为49000左右处出现1条新生蛋白带,表达量约占菌体总蛋白的17%。结论:成功地克隆人羧肽酶A基因,为构建表达抗人精浆蛋白/羧肽酶A的双功能抗体奠定了基础。 展开更多
关键词 羧肽酶A 基因克隆 测序 前列腺肿瘤 CDNA
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肌苷毫微粒对成年大鼠视网膜节细胞的保护作用 被引量：4
18
作者 侯冰 吴道澄 +3 位作者 武明媚 焦西英 鞠躬 游思维 《眼科研究》 CSCD 北大核心 2003年第5期457-460,共4页
目的 研究载有肌苷的毫微粒对视神经切断后视网膜节细胞(RGC)存活的影响。方法 制备肌苷毫微粒,体外测定理化性质。将等体积的肌苷毫微粒、空载毫微粒或生理盐水溶液分别注入成年大鼠左眼内,对照组未经任何治疗。1d后于眶内切断所有动... 目的 研究载有肌苷的毫微粒对视神经切断后视网膜节细胞(RGC)存活的影响。方法 制备肌苷毫微粒,体外测定理化性质。将等体积的肌苷毫微粒、空载毫微粒或生理盐水溶液分别注入成年大鼠左眼内,对照组未经任何治疗。1d后于眶内切断所有动物左侧视神经,术后7d取左视网膜,计数荧光金逆行标记的存活RGC。结果 肌苷毫微粒形态规整,具有缓释特点。同对照相比,肌苷毫微粒能显著提高存活RGC的密度,而空载体和生理盐水无此作用;空载毫微粒与生理盐水、对照之间以及空载毫微粒和肌苷毫微粒两组间RGC密度均无显著差异。结论 注入眼球的肌苷毫微粒至少在7d内能有效缓释肌苷,进而对轴突损伤RGC发挥显著的神经保护作用。 展开更多
关键词 肌苷毫微粒 成年大鼠 视网膜节细胞 保护作用 视神经切断
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人源性抗HBsAg抗体Fab段噬菌体呈现文库的构建、筛选及阳性克隆核苷酸序列测定 被引量：6
19
作者 高辉 杨安钢 +2 位作者 高磊 任向荣 余宙耀 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期308-311,共4页
目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩... 目的 :构建一个经HBsAg主动免疫的人lgG1抗体噬菌体展示文库 ,通过特异的淘筛 (panning)获得与HBsAg有较高亲和力的Fab抗体 ,并测定其编码序列。方法 :从一经乙肝疫苗免疫的自愿者的外周血分离淋巴细胞提取RNA ,逆转录合成cDNA。PCR扩增重链Fd和κ轻链cDNA。依次将PCR产物克隆进载体pComb3H相应的位点 ,构建成噬菌体呈现库 ,并以HBsAg包被的 96孔板对抗体库进行 3轮淘筛 ,将所获克隆分别与HBsAg进行ELISA反应 ,挑取显色大于对照 2 0倍以上的阳性克隆进行DNA测序。结果 :lgG1的Fd段和κ轻链cDNA得到扩增 ,构建了一实际库容量为 1 8× 10 5 的噬菌体呈现文库。通过特异性淘筛 ,获得与HBsAg有较高新合力的 3株Fab抗体并测定其编码序列。DNA序列测定结果表明 ,3株抗体中两株的Fd段完全一样 ,且 3株的轻链完全一样。结论 :成功构建了一个经HBsAg抗原免疫的人源抗体Fab段噬菌体抗体库 ,筛选得到了 3株特异性抗体的Fab片段。 展开更多
关键词 乙型肝炎抗原 抗体 分子克隆 DNA 噬菌体呈现文库
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牙髓炎组织超氧化阴离子自由基的测定分析 被引量：5
20
作者 吴补领 史俊南 王多宁 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1990年第S1期228-229,共2页
近年来,已知在机体中,O<sub>2</sub><sup>?</sup>及其派生的活性氧类与炎症有关。活性氧类对机体有机物的合成、分解,对蛋白质、酶的变化等都具有有害作用。但是,到目前为止,在人牙髓炎的病理过程中是否涉及自... 近年来,已知在机体中,O<sub>2</sub><sup>?</sup>及其派生的活性氧类与炎症有关。活性氧类对机体有机物的合成、分解,对蛋白质、酶的变化等都具有有害作用。但是,到目前为止,在人牙髓炎的病理过程中是否涉及自由基和活性氧的作用,国内、外尚未见文献报道。 展开更多
关键词 牙髓炎 自由基 超氧化物岐化酶类 超氧化阴离子
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