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糖皮质激素受体β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响 被引量:5
1
作者 刘宇健 宋亮年 +1 位作者 陈玉霞 卢建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期1187-1191,共5页
目的 :通过研究糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响 ,探讨糖皮质激素受体β存在的生物学意义。 方法 :将糖皮质激素受体α的报告基因CAT和糖皮质激素受体 β共转染入人骨肉瘤细胞系HOS - 86 0 3,激素处理后 ,用ELIS... 目的 :通过研究糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α转录激活功能的影响 ,探讨糖皮质激素受体β存在的生物学意义。 方法 :将糖皮质激素受体α的报告基因CAT和糖皮质激素受体 β共转染入人骨肉瘤细胞系HOS - 86 0 3,激素处理后 ,用ELISA方法检测CAT活性 ;用定量RT -PCR方法检测糖皮质激素受体 β的稳定过度表达对糖皮质激素诱导p2 1mRNA表达的影响。结果 :糖皮质激素受体 β抑制报告基因CAT的表达 ,随着糖皮质激素受体 β转染量的增加 ,抑制效果越明显 ;糖皮质激素受体β同样可以抑制糖皮质激素对糖皮质激素受体α内源性靶基因p2 1mRNA的诱导。结论 :糖皮质激素受体 β对糖皮质激素受体α的转录激活功能有抑制作用 ,糖皮质激素受体 β可能是糖皮质激素受体α的内源性抑制因子。 展开更多
关键词 肾上腺皮质激素类 转染 骨肉瘤 糖皮质激素受体Β 糖皮质激素受体Α 激活功能 影响
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人参皂甙单体Rb1对人急性早幼粒白血病细胞系增殖及糖皮质激素受体α表达的影响 被引量:8
2
作者 李勇 朱晓燕 凌昌全 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期1572-1575,共4页
目的观察人参皂甙(GS)Rb1对人急性早幼粒白血病细胞(HL60)糖皮质激素受体α(GRα)mRNA及受体蛋白表达的调节作用和对细胞生长的影响。方法以四唑盐比色法(MTT法)观察细胞生长,用蛋白印迹法(Westernblot)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分... 目的观察人参皂甙(GS)Rb1对人急性早幼粒白血病细胞(HL60)糖皮质激素受体α(GRα)mRNA及受体蛋白表达的调节作用和对细胞生长的影响。方法以四唑盐比色法(MTT法)观察细胞生长,用蛋白印迹法(Westernblot)和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)分析G-Rb1对细胞的GR蛋白和GRαmRNA的改变。结果G-Rb1能够抑制HL60细胞的生长,呈时间和剂量依赖性;经G-Rb1作用后RT-PCR和Westernblot分析,细胞内GRαmRNA以及GR蛋白表达增加。结论G-Rb1可上调HL60细胞GRαmRNA及GR蛋白的表达并抑制细胞生长。 展开更多
关键词 皂甙类 糖皮质激素类 白血病 早幼粒细胞 急性
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维生素D受体在1,25(OH)_2D_3调节人骨肉瘤细胞系HOS-8603增殖中的作用 被引量:4
3
作者 陈玉霞 刘宇健 宋亮年 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期979-982,T001,共5页
目的 :研究维生素D3受体 (VDR)在 1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用RT -PCR和免疫组织化学技术分别在mRNA和蛋白水平上明确HOS - 860 3细胞中是否有VDR表达 ;瞬时转染VDR报告基因技术观察... 目的 :研究维生素D3受体 (VDR)在 1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用RT -PCR和免疫组织化学技术分别在mRNA和蛋白水平上明确HOS - 860 3细胞中是否有VDR表达 ;瞬时转染VDR报告基因技术观察HOS - 860 3细胞中VDR的功能活性 ;并进一步利用稳定表达VDR反义mRNA的细胞株VDRas3细胞研究VDR被阻断后细胞增殖以及基因转录的变化。结果 :HOS - 860 3细胞有VDR表达 ,此内源性VDR具有激素依赖性的转录激活活性。在内源性VDR被阻断后 ,1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物对细胞增殖的抑制作用以及对VDR的靶基因p2 1mRNA表达的诱导作用均明显减弱。结论 :1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物对HOS -860 3细胞增殖抑制作用是由VDR介导的。 展开更多
关键词 基因表达 骨化三醇 骨肉瘤 细胞培养 HOS-8603 细胞增殖 维生素D受体 1 25(OH)2D3
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Salusins及其心血管效应 被引量:6
4
作者 任安经 林丽 +1 位作者 严晓红 袁文俊 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期164-168,共5页
Salusins是一类新发现的心血管活性肽,包括由28个氨基酸组成的salusin-α和20个氨基酸组成的salusin-β。Salusins广泛分布于人和大鼠的多种组织和器官,具有降低血压、减慢心率、抑制心肌收缩、减轻心脏缺血损伤、促进心肌细胞肥大和血... Salusins是一类新发现的心血管活性肽,包括由28个氨基酸组成的salusin-α和20个氨基酸组成的salusin-β。Salusins广泛分布于人和大鼠的多种组织和器官,具有降低血压、减慢心率、抑制心肌收缩、减轻心脏缺血损伤、促进心肌细胞肥大和血管平滑肌细胞增殖等一系列心血管效应。值得注意的是,作为由同一前体产生的两种多肽,salusin-α和salusin-β在动脉粥样硬化的发生发展中具有相反的作用。 展开更多
关键词 salusins 心脏 血管 动脉粥样硬化
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白细胞与内皮细胞粘附分子的调节 被引量:8
5
作者 严鸣 龚肖崎 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第2期372-375,235,共5页
<正> 白细胞与内皮细胞(endothelial cell,EC)粘附是白细胞趋化、游走和吞噬活动的基础。在炎症反应开始时即可出现白细胞与EC的粘附增强,表明白细胞与EC的粘附在炎症过程中具有重要作用。近年来。
关键词 白细胞 内皮细胞 粘附 调节
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LPS致敏巨噬细胞产生O_2~及其信号机制 被引量:2
6
作者 刘辉 朱晓燕 +2 位作者 季海锋 孙卫民 徐仁宝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期881-884,共4页
目的 :探讨LPS诱导的巨噬细胞 (MΦ)致敏及其信号机制。方法 :巨噬细胞样细胞株RAW 2 6 4 .7以10 μg/LLPS预处理 1h后洗去 ,再以 1mg/LPMA、1μmmol/LfMLP、10 0 μg/LLPS、1g/LZyms和 15mg/LMDP攻击 1h ,检测上清中超氧阴离子 (O 2 )... 目的 :探讨LPS诱导的巨噬细胞 (MΦ)致敏及其信号机制。方法 :巨噬细胞样细胞株RAW 2 6 4 .7以10 μg/LLPS预处理 1h后洗去 ,再以 1mg/LPMA、1μmmol/LfMLP、10 0 μg/LLPS、1g/LZyms和 15mg/LMDP攻击 1h ,检测上清中超氧阴离子 (O 2 )的产生 ,并用荧光显微成像系统检测细胞内游离钙离子浓度 ( [Ca2 +]i) ,探讨 [Ca2 +]i与LPS致敏MΦ产生O 2 的关系。结果 :LPS预处理后以上述刺激剂攻击 1h均能不同程度致敏O 2 的产生 ,且致敏程度在一定范围内与LPS剂量和作用时间相关 ;细胞内静息态 [Ca2 +]i也呈LPS剂量和时间依赖性升高 ,均显著相关。且LPS预处理后用PMA攻击 ,细胞内瞬时 [Ca2 +]i升高幅度明显高于LPS未处理组。用A2 3187使细胞内 [Ca2 +]i升高可代替LPS致敏O 2 的产生 ,而预先用BAPTA和EGTA降低细胞内 [Ca2 +]i则可阻断LPS致敏O 2 的作用。结论 :LPS可致敏MΦ产生O 2 ;LPS预处理后细胞内静态 [Ca2 +]i的升高是LPS诱导O 2 致敏的重要原因。 展开更多
关键词 脂多糖类 巨噬细胞 超氧化物类
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Hedgehog信号通路与肿瘤 被引量:5
7
作者 黄高翔 卢建 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期493-497,共5页
Hedgehog(Hh)信号通路可以调控细胞的增殖、迁移和分化等许多过程,并且在胚胎发育时期起重要作用。根据Hh信号通路激活后是否依赖Gli蛋白发挥生物学效应,可分为经典的Hh/Gli信号通路和非经典的Hh信号通路。其中,非经典的Hh信号通路可通... Hedgehog(Hh)信号通路可以调控细胞的增殖、迁移和分化等许多过程,并且在胚胎发育时期起重要作用。根据Hh信号通路激活后是否依赖Gli蛋白发挥生物学效应,可分为经典的Hh/Gli信号通路和非经典的Hh信号通路。其中,非经典的Hh信号通路可通过小G蛋白Rho家族信号和钙离子依赖的信号通路调控细胞骨架形态、细胞增殖、凋亡及迁移;经典与非经典的Hh信号通路形成相互联系的信号通路网络介导Hh信号的功能。Hh信号通路的异常持续的激活是许多肿瘤发生、发展的原因之一,Hh信号通路还与肿瘤干细胞的调控、肿瘤血管形成和肿瘤的侵袭转移密切相关,对Hh信号通路的深入研究有利于以Hh信号通路蛋白为靶点的抗肿瘤药物的研发与应用。 展开更多
关键词 HEDGEHOG GLI 信号通路 肿瘤
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Mac-1-FP融合表达载体的构建、Mac-1-FP的表达与活性鉴定 被引量:1
8
作者 严鸣 毛积芳 +2 位作者 杨生生 钟纪根 徐仁宝 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期763-768,共6页
分别构建表达BFP与CD1 1b的C末端、YFP与CD1 8的N末端相连接的融合蛋白的表达载体 ,并将二者转染至既无内源性Mac 1的表达同时又具有某些炎症反应信号转导系统的CHO细胞株进行表达Mac 1 FP .通过荧光显微镜观察到共转染后的CHO细胞可... 分别构建表达BFP与CD1 1b的C末端、YFP与CD1 8的N末端相连接的融合蛋白的表达载体 ,并将二者转染至既无内源性Mac 1的表达同时又具有某些炎症反应信号转导系统的CHO细胞株进行表达Mac 1 FP .通过荧光显微镜观察到共转染后的CHO细胞可发出蓝色荧光和黄色荧光 ,应用Western印迹方法确定CD1 1b BFP与YFP CD1 8能够形成二聚体 ,采用流式细胞术检测确定PMA刺激Mac 1 FP可由胞浆内转位至膜上 ,测定PMA刺激前后的转染CHO细胞与其配基ICAM 1粘附活性的变化 ,证明转染CHO中的Mac 1 FP表达成功并具有野生型Mac 1的形成二聚体、膜转位、和配基ICAM 1相结合等功能 ,为进一步研究白细胞表面粘附分子Mac 1的α亚基CD1 1b、β亚基CD1 展开更多
关键词 Mac-1-FP 融合表达载体 构建 表达 活性鉴定 融合蛋白
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内皮细胞骨架在血管通透性调节中的作用 被引量:5
9
作者 丁自强 李少华 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1991年第3期212-216,共5页
内皮细胞骨架在维持细胞形态、粘附和细胞连接中起重要作用。炎症介质作用于内皮细胞膜受体,引起细胞骨架蛋白含量、分布和功能的变化,导致内皮回缩,细胞连接间裂隙形成,是血管通透性增加的主要机制。稳定细胞骨架可能成为抗通透性水肿... 内皮细胞骨架在维持细胞形态、粘附和细胞连接中起重要作用。炎症介质作用于内皮细胞膜受体,引起细胞骨架蛋白含量、分布和功能的变化,导致内皮回缩,细胞连接间裂隙形成,是血管通透性增加的主要机制。稳定细胞骨架可能成为抗通透性水肿治疗的新方法。 展开更多
关键词 内皮细胞骨架 血管通透性
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融合蛋白Kininogen D5_(60-148)-TRAIL_(114-281)的表达及其抑制血管新生和诱导细胞凋亡的作用 被引量:1
10
作者 宗英 王梁华 +4 位作者 孙铭娟 董晓毅 王燕 陆国才 焦炳华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期336-341,共6页
目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL... 目的:采用原核表达系统表达人Kininogen D560-148-TRAIL114-281融合蛋白,并对其生物学活性进行研究。方法:PCR技术扩增Kininogen D560-148和TRAIL114-281的编码序列,分别构建原核表达载体pMAL-Kininogen D560-148(pMAL-KD5)、pMAL-TRAIL114-281(pMAL-TRAIL)和pMAL-Kininogen D560-148-TRAIL114-281(pMAL-KT),重组质粒分别转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT,并经亲和层析纯化。MTT法检测细胞的增殖,管状形成实验检测内皮细胞血管形成,流式细胞仪和电镜检测细胞凋亡。结果:成功构建原核表达载体pMAL-KD5、pMAL-TRAIL和pMAL-KT,并获得纯化的融合蛋白MBP-KD5、MBP-TRAIL和MBP-KT。融合蛋白MBP-KT与MBP-KD5、MBP-TRAIL相比可显著抑制内皮细胞ECV304和胰腺癌细胞SW1990的增殖、明显抑制ECV304细胞体外管腔的形成,同时,MBP-KT剂量依赖性地诱导SW1990细胞凋亡。结论:融合蛋白Kininogen D560-148-TRAIL114-281既能诱导肿瘤细胞凋亡又能抑制血管生成,为进一步开发靶向性抗肿瘤药物奠定了基础。 展开更多
关键词 高分子量激肽原 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 血管生成抑制因子 胰腺肿瘤细胞
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大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体的纯化 被引量:3
11
作者 傅红 郭佐 +1 位作者 徐仁宝 陈宜张 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第1期99-103,共5页
本文利用抗大鼠肝细胞内糖皮质激素受体的单克隆抗体制备的免疫亲和层析柱,将大鼠脑突触质膜糖皮质激素受体纯化了约1150倍,SDS聚丙烯酰胺簿层梯度凝胶电泳显示,在约67kD处有一较明显的染色条带。
关键词 突触质膜 糖皮质激素 受体
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肺泡Ⅱ型上皮细胞的分离培养及其应用 被引量:3
12
作者 丁自强 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1990年第1期45-48,共4页
肺泡Ⅱ型上皮细胞有很多功能,国外对分离培养的Ⅱ型细胞研究已较多,但因细胞的分离培养技术有一定困难,国内尚无报道。本文综述了酶消化分离肺组织细胞,制备单细胞悬液,以及对Ⅱ型细胞进行纯化的方法,还介绍了Ⅱ型细胞的培养特性和应用。
关键词 分离培养 细胞生长 细胞研究 密度梯度离心 单细胞悬液 肺组织细胞 细胞贴壁 巨噬细胞 体外培养条件 条件培养基
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成人呼吸窘迫综合征和肺表面活性物质替代治疗 被引量:3
13
作者 丁自强 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期141-144,共4页
肺表面活性物质(PS)系统的损伤在成人呼吸窘迫综合征(ARDS)的发病过程中起重要作用。临床上ARDS病人的PS替代治疗刚刚起步,但已取得一些令人鼓舞的效果。用外源性PS替代治疗可以补充被消耗或破坏的内源性PS,阻止内源性PS被大量破坏,中... 肺表面活性物质(PS)系统的损伤在成人呼吸窘迫综合征(ARDS)的发病过程中起重要作用。临床上ARDS病人的PS替代治疗刚刚起步,但已取得一些令人鼓舞的效果。用外源性PS替代治疗可以补充被消耗或破坏的内源性PS,阻止内源性PS被大量破坏,中和PS功能抑制物,增强肺泡表面活性物质层的功能。 展开更多
关键词 呼吸窘迫 综合征 肺表面活性剂
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维生素D_3的生物效应及其作用的分子机制 被引量:2
14
作者 宋亮年 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1991年第2期147-152,共6页
除调节钙磷代谢外,1,25(OH)_2D_3对细胞生长分化、免疫系统功能及中枢神经系统功能也都有重要调节作用。这为用维生素D_3制剂治疗某些皮肤疾患、肿瘤、免疫系统功能障碍和神经内分泌系统功能紊乱提供了理论依据和潜在可能性。1,25(OH)_2... 除调节钙磷代谢外,1,25(OH)_2D_3对细胞生长分化、免疫系统功能及中枢神经系统功能也都有重要调节作用。这为用维生素D_3制剂治疗某些皮肤疾患、肿瘤、免疫系统功能障碍和神经内分泌系统功能紊乱提供了理论依据和潜在可能性。1,25(OH)_2D_3受体(VDR)cDNA的克隆成功,又为进一步阐明受体结构与功能的关系以及维生素D_3作用的分子机制创造了条件。 展开更多
关键词 维生素D3 生物效应 代谢 调节
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中枢神经系统中受体亚型的多样性及其生物学意义 被引量:2
15
作者 宋亮年 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期13-17,共5页
在中枢神经系统中,神经递质受体和离子通道具有功能不同的亚型。利用不同的技术已成功地克隆出这些受体亚型的cDNA。并证明,受体各亚型是由不同基因编码的。中枢神经系统中受体亚型多样性的生物学意义在于提高神经元的信息处理能力,加... 在中枢神经系统中,神经递质受体和离子通道具有功能不同的亚型。利用不同的技术已成功地克隆出这些受体亚型的cDNA。并证明,受体各亚型是由不同基因编码的。中枢神经系统中受体亚型多样性的生物学意义在于提高神经元的信息处理能力,加强中枢神经系统对外界环境的适应力。 展开更多
关键词 中枢神经系统 受体亚型
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糖皮质激素受体阻断导致巨噬细胞易感化及其机制初探
16
作者 朱晓燕 刘宇健 +1 位作者 卢建 徐仁宝 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1541-1541,共1页
关键词 糖皮质激素受体 巨噬细胞 易感化 大鼠 游离钙离子 蛋白激酶C 信号转导分子
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转化生长因子β1信号通路在糖皮质激素抑制人卵巢癌细胞HO-8910增殖中的作用
17
作者 李宗斌 夏冰 卢建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1542-1543,共2页
关键词 转化生长因子Β1 信号通路 糖皮质激素 卵巢癌 癌细胞 HO-8910细胞 细胞增殖
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糖皮质激素对人卵巢癌HO-8910细胞TβR-Ⅱ的上调作用
18
作者 夏冰 卢建 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第1期39-41,共3页
目的 :研究转化生长因子 β1 (transforminggrowthfactor β1 ,TGF β1 )通路是否参与人工合成糖皮质激素地塞米松 (dexamethasone ,Dex)对人卵巢癌细胞系HO 891 0增殖抑制的过程。方法 :分别采用细胞计数和流式细胞分析方法检测细胞增... 目的 :研究转化生长因子 β1 (transforminggrowthfactor β1 ,TGF β1 )通路是否参与人工合成糖皮质激素地塞米松 (dexamethasone ,Dex)对人卵巢癌细胞系HO 891 0增殖抑制的过程。方法 :分别采用细胞计数和流式细胞分析方法检测细胞增殖和细胞周期分布 ;定量RT PCR、ELISA和 (或 )免疫细胞化学检测TGF β1及其受体TβR Ⅰ和TβR Ⅱ的表达水平。 结果 :Dex可引起HO 891 0细胞周期G0 G1 期进展停滞 ,并可明显上调TβR ⅡmRNA的表达 ,且具有浓度依赖性特点 ,Dex处理细胞 8小时作用最强 ,此时 1 0 -7mol L浓度组TβR ⅡmRNA水平比对照组升高约 1 .4倍 (P <0 .0 1 ) ;TβR Ⅱ的蛋白表达水平也增加。糖皮质激素受体 (glucocorticoidreceptor,GR)阻断剂RU486能够逆转这些作用。而Dex对TGFβ1mRNA表达和蛋白分泌、对TβR ⅠmRNA的表达均没有调节作用。 结论 :Dex抑制HO 891 0细胞增殖的机制可能包括上调TβR Ⅱ的表达 。 展开更多
关键词 糖皮质激素 转化生长因子 卵巢癌细胞系 细胞增殖
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甾体激素对神经元的快速膜效应
19
作者 宋亮年 《生理科学进展》 CAS CSCD 北大核心 1992年第3期204-208,共5页
甾体激素对行为、学习以及应濒反应等神经系统功能具有重要调节作用。这种调节作用除了有基因机制参与外,还有作用较快的非基因机制参与,表现为对神经元的快速膜效应。甾体激素对神经元的快速膜效应是由细胞膜受体介导的,参与对离子通... 甾体激素对行为、学习以及应濒反应等神经系统功能具有重要调节作用。这种调节作用除了有基因机制参与外,还有作用较快的非基因机制参与,表现为对神经元的快速膜效应。甾体激素对神经元的快速膜效应是由细胞膜受体介导的,参与对离子通道、神经递质释放以及神经递质受体的调节等。 展开更多
关键词 甾体激素 神经元 膜效应
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抗新型锌指蛋白ZBTB20单克隆抗体的制备和鉴定 被引量:3
20
作者 周光迪 麻献华 +4 位作者 张晔 张海 卢建 谢志芳 章卫平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期617-619,624,共4页
目的:制备新型锌指蛋白ZBTB20的单克隆抗体,建立敏感和特异的ZBTB20免疫学检测方法,为其生物学功能研究提供技术支持。方法:将经ZBTB20多肽免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,用ZBTB20的GST融合蛋白为包被抗原进行ELISA筛选,经4次... 目的:制备新型锌指蛋白ZBTB20的单克隆抗体,建立敏感和特异的ZBTB20免疫学检测方法,为其生物学功能研究提供技术支持。方法:将经ZBTB20多肽免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞进行融合,用ZBTB20的GST融合蛋白为包被抗原进行ELISA筛选,经4次亚克隆后建立稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,制备腹水并纯化抗体,鉴定其在免疫印迹、免疫沉淀和免疫组化中的应用效果。结果:成功制备了8株抗ZBTB20单克隆抗体,在不同的免疫学检测中均得到成功应用,尤其是单克隆抗体9A10具有敏感性高、特异性好和通用性强等优点。结论:首次成功制备了ZBTB20单克隆抗体,可应用于免疫印迹、免疫沉淀和免疫组化等免疫学检测,对ZBTB20的功能研究具有重要意义。 展开更多
关键词 锌指蛋白 转录因子 ZBTB20 单克隆抗体
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