创伤应激大鼠甲状腺肾上腺皮质形态学研究 被引量：7

1

作者 肖桃元 可金星 +3 位作者 艾国平 陶忠芬 黄文琪 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1130-1132,共3页

目的　探讨创伤应激情况下应激器官甲状腺和肾上腺的形态与功能变化。方法　对大鼠爆炸伤后不同时相点的肾上腺和甲状腺进行光、电镜观察。结果　爆炸损伤后引起动物强烈应激反应 ,应激器官肾上腺和甲状腺发生一系列病理变化 ,病理过程... 目的　探讨创伤应激情况下应激器官甲状腺和肾上腺的形态与功能变化。方法　对大鼠爆炸伤后不同时相点的肾上腺和甲状腺进行光、电镜观察。结果　爆炸损伤后引起动物强烈应激反应 ,应激器官肾上腺和甲状腺发生一系列病理变化 ,病理过程表现为 3期 :伤后早期 (第 1～ 3天 )为过度应激期 ,表现为细胞内颗粒大量排空 ,甚至引起细胞破裂 ,皮质激素和甲状腺素过度释放 ;继之 (第 7天 )为功能衰竭期 ,滤泡塌陷、细胞退变和萎缩 ;以后 (第 2 0～ 2 6天 )出现修复改变。结论　爆炸伤后引起动物过度应激反应 ,创伤后应激性疾病 (PTSD) 展开更多

关键词 爆炸伤 应激 肾上腺 甲状腺 超微结构

在线阅读 下载PDF 职称材料

电离辐射对皮肤创伤愈合的实验研究

2

作者 冉新泽 林远 +3 位作者 程天民 屈纪富 徐辉 阎国和 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期70-70,共1页

关键词 电离辐射 皮肤创伤愈合 实验

在线阅读 下载PDF 职称材料

安定-氯胺酮麻醉对烧伤小鼠早期三种炎性细胞因子影响 被引量：11

3

作者 李军 粟永萍 +4 位作者 刘合年 楼淑芬 黄跃生 蒋建新 王军平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期98-100,共3页

目的　研究安定 氯胺酮麻醉对烧伤小鼠早期炎性细胞因子的影响 ,初步探讨其对创伤应激早期炎症反应的调节作用。方法　雄性BALB c小鼠 ,随机分为正常对照组、烧伤对照组、麻醉对照组、预处理组 (麻醉后 15min烧伤 )及后处理组 (烧伤后 ... 目的　研究安定 氯胺酮麻醉对烧伤小鼠早期炎性细胞因子的影响 ,初步探讨其对创伤应激早期炎症反应的调节作用。方法　雄性BALB c小鼠 ,随机分为正常对照组、烧伤对照组、麻醉对照组、预处理组 (麻醉后 15min烧伤 )及后处理组 (烧伤后 15min麻醉 )。麻醉采用安定 氯胺酮麻醉 ,背部 15 %～ 2 0 %Ⅲ度烧伤。烧伤后 4h测定血清TNF α、IL 1β、IL 10浓度。结果　烧伤后血清TNF α、IL 1β、IL 10水平均比正常对照组显著增高 ;预处理组与后处理组血清TNF α、IL 1β、IL 10的浓度明显低于烧伤对照组 ;预处理组除IL 10明显高于正常对照组以外 ,其余均与正常对照组相差不明显 ,而后处理组只有TNF α水平与正常对照组相差不显著 ,其余都显著高于正常对照组 ;血清中IL 1β后处理组明显高于预处理组 ,而TNF α、IL 10的水平两组相差不显著。结论　安定 氯胺酮麻醉对严重创伤后炎性细胞因子的表达和释放有一定抑制作用 。 展开更多

关键词 烧伤 炎性细胞因子 安定 氯胺酮

在线阅读 下载PDF 职称材料

真皮来源成体多能干细胞体外自发恶性转化现象及机制研究 被引量：8

4

作者 史春梦 麦跃 +6 位作者 程天民 粟永萍 徐辉 郑怀恩 王军平 黄跃生 蒋建新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期71-73,共3页

目的　研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制。方法　对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养 ,观察其生长性状的改变 ,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化 ;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表... 目的　研究真皮来源成体多能干细胞体外恶性转化现象及其相关机制。方法　对分离的真皮多能干细胞克隆体外进行连续传代培养 ,观察其生长性状的改变 ,通过裸鼠皮下接种实验观察其是否恶性转化 ;应用基因芯片技术比较转化前后细胞基因表达谱的改变。结果　经过长期体外连续传代培养后 ,真皮多能干细胞可发生恶性转化 ,在裸鼠体内形成肉瘤样组织 ;基因芯片技术检测显示 ,转化后细胞仍表达多种类型细胞特异性基因的转录子 ,提示其仍具有多向分化的潜能 ;但转化后细胞多种增殖相关基因的表达升高 ,代谢反应酶类基因表达升高 ,生长因子和受体的表达下调 ,符合肿瘤细胞的特征 ;c ki ras基因及其相关信号分子的表达上调可能在转化过程中起重要作用 ;初步筛选鉴定了一个与干细胞增殖调控相关的候选基因。结论　体外长期连续传代培养可诱发真皮多能干细胞的恶性转化 。 展开更多

关键词 干细胞 恶性转化 皮肤

在线阅读 下载PDF 职称材料

发卡样NF-κB特异性RNA干扰表达载体的构建及体外效应研究 被引量：2

5

作者 王明海 王锋超 +4 位作者 陆建华 麦跃 刘晓宏 程天民 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期655-657,共3页

目的　采用RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)技术 ,通过构建人NF κBp65基因的特异性siRNA真核表达载体 ,体外观察对NF κB基因的沉默作用 ,以及对内毒素 (LPS)刺激后NF κB活性的调控作用。方法　采用基因克隆技术 ,将合成的发卡样特异... 目的　采用RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)技术 ,通过构建人NF κBp65基因的特异性siRNA真核表达载体 ,体外观察对NF κB基因的沉默作用 ,以及对内毒素 (LPS)刺激后NF κB活性的调控作用。方法　采用基因克隆技术 ,将合成的发卡样特异性p65RNA干扰寡核苷酸序列插入真核表达载体 (pPUR U6) ,构建p65siRNA的表达载体 ,转染体外ECV 3 0 4细胞 ,48h后观测胞内NF κBp65亚单位蛋白水平 (Westernblotting)、及对LPS ( 10 μg ml)刺激后NF κB活化的抑制作用。结果　①成功构建发卡样p65siRNA(smallinterfereRNA)真核表达载体 (pPUR U6 p65siRNA) ;②pPUR U6 p65siRNA转染 (脂质体法 )ECV 3 0 4细胞 ,48h后明显下调胞内P65蛋白水平 ;③转染pPUR U6 p65siRNA的细胞 ,明显抑制LPS ( 10μg ml)刺激后NF κB的活化。 结论　该RNA干扰真核表达载体能明显干扰p65蛋白的表达、释放 ,进而抑制NF κB的活化 ,可望进一步抑制细胞的过度炎症反应 ,减轻创伤组织的受损程度 。 展开更多

关键词 NF-ΚB RNA干扰 ECV-304 LPS

在线阅读 下载PDF 职称材料

贫铀对人肾小管上皮细胞的毒性作用 被引量：9

6

作者 李蓉 艾国平 +6 位作者 徐辉 楼淑芬 程天民 粟永萍 郑怀恩 蒋建新 黄跃生 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期185-188,共4页

目的　阐明贫铀 (depleteduranium ,DU)对人肾小管上皮细胞 (humankidneycell,HKC)的急性毒性作用及损伤部位 ,为救治提供依据。方法　将 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml的DU溶液作用于HKC ,研究细胞超微结构、存活率的变化 ,多种酶含量的改变... 目的　阐明贫铀 (depleteduranium ,DU)对人肾小管上皮细胞 (humankidneycell,HKC)的急性毒性作用及损伤部位 ,为救治提供依据。方法　将 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml的DU溶液作用于HKC ,研究细胞超微结构、存活率的变化 ,多种酶含量的改变及HGPRT基因突变的频率。结果　 0 0 63～ 0 5 0 0mg ml浓度的DU可引起HKC细胞结构改变 ,存活率显著下降 ;溶酶体酶NAG含量随DU浓度的增加而增加 ;其他酶含量也发生变化 ;HGPRT基因突变的发生率显著高于正常对照组 ,并呈二项式相关关系。加入苯乙酸、亚硒酸钠使上述指标变化不大。结论　DU可引起细胞活力降低 ,损伤细胞膜、线粒体、溶酶体等 ,使细胞抗氧化能力下降 ;HGPRT基因突变率与DU浓度之间呈相关关系 ;加入恶性转化的抑制剂亚硒酸钠和苯乙酸 。 展开更多

关键词 贫铀 毒性 人肾小管上皮细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

L-carnitine对缺氧/复氧新生大鼠心肌细胞能量生成及CPT-Ⅱ mRNA表达的影响 被引量：5

7

作者 朱光旭 谢燕 +3 位作者 王小华 周舟 楼淑芬 余争平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期201-204,共4页

目的　探讨L 肉毒碱 (L carnitine ,L Car)对缺氧 复氧培养新生大鼠心肌细胞能量生成的影响及其机制。方法　以原代培养新生大鼠心肌细胞建立缺氧 复氧损伤模型 ,高效液相色谱检测单纯缺氧 复氧以及L Car预处理缺氧 复氧心肌细胞ATP... 目的　探讨L 肉毒碱 (L carnitine ,L Car)对缺氧 复氧培养新生大鼠心肌细胞能量生成的影响及其机制。方法　以原代培养新生大鼠心肌细胞建立缺氧 复氧损伤模型 ,高效液相色谱检测单纯缺氧 复氧以及L Car预处理缺氧 复氧心肌细胞ATP、ADP、AMP生成改变 ;RT PCR方法检测心肌细胞肉毒碱脂酰基转移酶 Ⅱ (carnitinepalmitoyltransferase Ⅱ ,CPT Ⅱ )mRNA表达。结果　与正常对照组比较 ,培养心肌细胞缺氧 2 4h复氧 0、2、4、8h后 ,心肌细胞ATP、ADP均明显下降。与单纯缺氧 复氧组比较 ,L Car预处理组心肌细胞缺氧 复氧后ATP含量明显增高 ;培养心肌细胞缺氧 2 4h后 ,CPT ⅡmRNA表达除复氧 2h有所上升外 ,复氧 4、8h表达渐次降低。L Car预处理使缺氧 2 4h复氧 4h心肌细胞CPT ⅡmRNA表达呈浓度依赖性增高 ,5 0nmol L处理组CPT ⅡmRNA表达显著高于 0nmol L处理组。结论　心肌细胞缺氧 复氧过程中能量生成明显降低 ,其损伤可能与三羧酸循环中呼吸酶CPT Ⅱ表达降低有关 ;L Car对培养仔鼠心肌细胞缺氧复氧损伤具有显著保护作用 ,其机制可能是与L Car从转录调控水平改善CPT Ⅱ合成有关。 展开更多

关键词 缺氧/复氧 L-camitine 能量代谢 CPT-Ⅱ 心肌细胞 新生大鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

Genistein对人乳腺癌移植瘤抑瘤效果的几种主要影响因素分析 被引量：2

8

作者 杨峥嵘 何飞 +2 位作者 郭朝华 粟永萍 程天民 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期179-179,共1页

关键词 GENISTEIN 抑瘤效应 放疗 乳腺癌 造血

在线阅读 下载PDF 职称材料

需钙蛋白酶抑制剂I对LPS攻击的RAW264.7细胞中iκBα表达和细胞因子分泌的影响 被引量：2

9

作者 程晓刚 粟永萍 +1 位作者 罗成基 刘晓宏 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期720-722,共3页

目的:探讨需钙蛋白酶抑制剂I(CI-I)对LPS攻击RAW264.7细胞后iκBα表达和细胞因子分泌的影响。方法:用CI-I预处理RAW264.7细胞1h后,再用LPS攻击,分别用Westernblot和ELISA检测RAW264.7细胞iκBα蛋白表达和TNF-α、IL-6的分泌。结果:CI-... 目的:探讨需钙蛋白酶抑制剂I(CI-I)对LPS攻击RAW264.7细胞后iκBα表达和细胞因子分泌的影响。方法:用CI-I预处理RAW264.7细胞1h后,再用LPS攻击,分别用Westernblot和ELISA检测RAW264.7细胞iκBα蛋白表达和TNF-α、IL-6的分泌。结果:CI-I预处理RAW264.7细胞后,可抑制LPS导致的iκBα表达降低。LPS攻击RAW264.7细胞后4h和8h,TNF-α和IL-6的分泌均增加,CI-I和地塞米松(DEX)可抑制该效应,并具有协同抑制作用。结论:CI-I和DEX可抑制LPS攻击后RAW264.7细胞中iκBα表达和炎性细胞因子分泌,从而有助于减轻细胞损伤。 展开更多

关键词 需钙蛋白酶抑制剂I IΚBΑ 地寨米松 TNF—α IL-6

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同取片方式对植入贫铀片大鼠组织铀浓度的影响 被引量：2

10

作者 李蓉 艾国平 +7 位作者 徐辉 任洄 楼淑芬 程天民 粟永萍 郑怀恩 黄跃生 蒋建新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期569-572,共4页

目的　取出嵌入的贫铀弹片后 ,其周围组织中仍有高浓度的贫铀污染 ,研究何种取片方法能最低限度减轻这种污染 ,对减轻机体损伤有重要意义。方法　动物麻醉状态下手术植入贫铀片 ,10d后以各种不同的方法取出 ,分为常规手术组、术前 4%碳... 目的　取出嵌入的贫铀弹片后 ,其周围组织中仍有高浓度的贫铀污染 ,研究何种取片方法能最低限度减轻这种污染 ,对减轻机体损伤有重要意义。方法　动物麻醉状态下手术植入贫铀片 ,10d后以各种不同的方法取出 ,分为常规手术组、术前 4%碳酸氢钠去污组、创口去污组、更换手术器械组、剪去周围组织组和综合法组 ,在取片后第 7、14、2 1天收集组织样本 ,测定铀含量。结果　以常规手术组组织铀含量最高 ,术前去污组、切口去污组和更换器械组次之 ,剪去周围组织铀含量下降较大 ,综合组最低。结论　综合应用各种方法实行手术 ,即术前 4%碳酸氢钠去污 +切口去污 +更换器械 +剪去周围组织效果最好 。 展开更多

关键词 贫铀 弹片 浓度

在线阅读 下载PDF 职称材料

Red/ET同源重组介导细菌人工染色体的快速修饰 被引量：4

11

作者 王军平 张友明 粟永萍 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第5期468-473,共6页

随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,已成为功能基因组学研究的一个重要环节.应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSC101-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL... 随着基因组测序工程的实施与完成,如何对包含完整基因信息的特定细菌人工染色体(BAC)进行有目的修饰,已成为功能基因组学研究的一个重要环节.应用新近优化的Red/ET同源重组技术对目标BAC进行修饰,以pSC101-BAD-gbaA为依托质粒,采用rpsL鄄neo为正/反向筛选系统,可以快速、高效地对BAC进行剪切、插入、替换等操作,其中能够进行抗性筛选的一步BAC修饰只需一周时间,以插入非抗性标记基因Cre为代表的两步BAC修饰在两周内即可完成.通过阿拉伯多糖诱导调控和简单地变化培养温度,能使pSC101-BAD-gbaA依托质粒在发挥完Red/ET同源重组作用后自然消失,最终获得完整而纯净的修饰后BAC,为加快功能基因组学研究提供了一个可靠的实验平台. 展开更多

关键词 Red/ET同源重组 BAC修饰 功能基因组

在线阅读 下载PDF 职称材料

大剂量辐射诱导IEC-6细胞差异表达基因消减cDNA文库的构建 被引量：1

12

作者 王锋超 高京生 +9 位作者 粟永萍 徐辉 王军平 艾国平 苑晓燕 楼淑芬 刘晓宏 章波 黄跃生 蒋建新 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期10-14,共5页

目的　克隆和鉴定大剂量辐射前后大鼠空肠上皮细胞IEC 6差异表达基因 ,为探索肠上皮细胞辐射损伤修复的分子机制提供线索。方法　IEC 6细胞经 3 5Gyγ射线照射后由抑制性消减杂交 (SSH)方法和T/A克隆技术进行差异表达基因消减cDNA文库... 目的　克隆和鉴定大剂量辐射前后大鼠空肠上皮细胞IEC 6差异表达基因 ,为探索肠上皮细胞辐射损伤修复的分子机制提供线索。方法　IEC 6细胞经 3 5Gyγ射线照射后由抑制性消减杂交 (SSH)方法和T/A克隆技术进行差异表达基因消减cDNA文库的构建 ,用反向Northern杂交法对库中的EST序列进行筛选 ,挑取阳性克隆测序 ,和GenBank比对后挑选有限克隆进行正向Northern杂交进行验证。结果　扩增消减杂交cDNA文库得到约 2 0 0 0个克隆 ,随机选取 96个白色克隆进行PCR扩增 ,用反向Northern杂交法对库中的EST片段进行筛选得到 15个阳性克隆 ,代表 12个基因的转录产物 ,部分基因功能已经明确 ,涉及细胞骨架、细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面 ,另外还获得一新的cDNA序列。结论　SSH法建立了IEC 6细胞差异表达基因消减cDNA文库 ,一次获得多条差异显示EST片段 ,基因种类涉及细胞骨架 ,细胞应激、细胞周期、信号转导等多方面 。 展开更多

关键词 IEC-6 大剂量辐射 抑制性消减杂交 基因文库

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠全身照射后血中造血祖细胞水平变化 被引量：1

13

作者 宫立众 孙士红 +3 位作者 程天民 粟永萍 罗成基 郭朝华 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期363-364,共2页

关键词 辐射损伤 粒细胞巨噬细胞集落形成单位 早期红系祖细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

造影剂诱导肾小球内皮细胞凋亡的caspase-3机制 被引量：1

14

作者 赵景宏 黄岚 +6 位作者 晋军 王军平 黄云剑 武晓静 方玉强 陈剑飞 赵晓辉 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第9期1111-1114,共4页

目的研究半胱氨酸蛋白水解酶caspase-3在非离子型低渗造影剂诱导肾小球内皮细胞凋亡中的作用,探讨非离子型低渗造影剂诱导肾小球内皮细胞凋亡的可能机制。方法DNA凝胶电泳分析不同浓度的非离子型低渗造影剂碘佛醇(ioversol)诱导肾小球... 目的研究半胱氨酸蛋白水解酶caspase-3在非离子型低渗造影剂诱导肾小球内皮细胞凋亡中的作用,探讨非离子型低渗造影剂诱导肾小球内皮细胞凋亡的可能机制。方法DNA凝胶电泳分析不同浓度的非离子型低渗造影剂碘佛醇(ioversol)诱导肾小球内皮细胞凋亡情况,Westernblot分析caspase-3活化片段蛋白的表达变化,AnnexinV荧光染色和流式细胞检测caspase-3特异性阻断剂对细胞凋亡的抑制作用。结果高浓度的碘佛醇作用24h后,DNA凝胶电泳呈现典型的凋亡梯状条带,肾小球内皮细胞caspase-3活化片段蛋白表达明显升高,其升高幅度与碘佛醇浓度密切相关;AnnexinV荧光标记染色发现,caspase-3特异性阻断剂可以明显减轻碘佛醇诱导的肾小球内皮细胞凋亡。结论非离子型低渗造影剂诱导肾小球内皮细胞凋亡与caspase-3的活化有关,肾小球内皮细胞凋亡可能参与了造影剂肾病的发生。 展开更多

关键词 造影剂 肾小球内皮细胞 细胞凋亡 CASPASE-3

在线阅读 下载PDF 职称材料

人P56蛋白及其各种缺失突变体酵母表达质粒的构建及鉴定 被引量：3

15

作者 邓正阳 李淑蓉 +6 位作者 王蒙 王军平 廖兰 徐建明 蒋建新 黄跃生 粟永萍 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期561-564,共4页

目的　构建干扰素诱导蛋白P5 6及其各种缺失突变体的酵母表达质粒。方法　干扰素诱导HT10 80 ,提取mRNA、RT -PCR获取P5 6全长及各种缺失突变体的cDNA ,以酵母表达质粒pGADT7为载体 ,构建重组质粒。结果　诱导的HT10 80中抽提出P5 6的m... 目的　构建干扰素诱导蛋白P5 6及其各种缺失突变体的酵母表达质粒。方法　干扰素诱导HT10 80 ,提取mRNA、RT -PCR获取P5 6全长及各种缺失突变体的cDNA ,以酵母表达质粒pGADT7为载体 ,构建重组质粒。结果　诱导的HT10 80中抽提出P5 6的mRNA、RT -PCR扩增出P5 6全长cDNA片段 ,大小与预期值一致约 15 0 0bp ,以P5 6全长cDNA为模板PCR获得P5 6各种缺失突变体并插入pGADT7;正确构建了各种pGADT7 P5 6酵母表达重组质粒。这些质粒DNA测序结果与理论值一致。结论　P5 6全长及各种缺失突变体酵母表达质粒的成功构建 ,为进一步研究P5 展开更多

关键词 干扰素 P156 RT-PCR 重组质粒

在线阅读 下载PDF 职称材料

某教研室天然外照射和表面沾染情况调查

16

作者 卢雪涛 张国庆 +8 位作者 李涛 柏杨 丁艳凯 薛春洪 蔡同建 孙斌 王伟华 郭朝华 李蓉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期134-134,138,共2页

关键词 天然外照射 空气吸收剂量率 β表面沾染

在线阅读 下载PDF 职称材料