氨基酸分析仪快速测定尿中3-甲基组氨酸含量 被引量：5

1

作者 周成贵 孙玮 +3 位作者 崔应瑞 董燕麟 陈东升 杨家驹 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期50-52,共3页

目前尿中3-methylhistidi(?)e(3-MH)含量的测定方法,主要是采用高效液相色谱法和化学比色法测定。但以上两种方法在不同程度上仍存在某些缺陷,前者虽然分析时间短,但分析效果差,且柱前衍生操作繁杂。后者对样品预处理要求较高,测定易受... 目前尿中3-methylhistidi(?)e(3-MH)含量的测定方法,主要是采用高效液相色谱法和化学比色法测定。但以上两种方法在不同程度上仍存在某些缺陷,前者虽然分析时间短,但分析效果差,且柱前衍生操作繁杂。后者对样品预处理要求较高,测定易受外界条件影响,结果不够稳定。本文采用氨基酸分析仪在原程序的基础上加以改进,使分析时间由过去的210ml(?)缩短到56mi(?)。 展开更多

关键词 氨基酸分析仪 3-甲基组氨酸 尿

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人乳腺珠蛋白基因亚型的原核表达及纯化 被引量：2

2

作者 刘秀娜 潘自铁 +3 位作者 王仙园 周娟 赵力军 胡川闽 《医学研究生学报》 CAS 2006年第2期107-110,共4页

目的:克隆人乳珠蛋白(hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法:自乳腺癌组织及乳腺癌细胞株MD-MB453提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAM cD-NA,构建pQE40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌M15中表达... 目的:克隆人乳珠蛋白(hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础。方法:自乳腺癌组织及乳腺癌细胞株MD-MB453提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAM cD-NA,构建pQE40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌M15中表达,利用镍-亚硝胺乙酸组氨酸(N i-NTA-H is)亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果:乳腺癌组织和乳腺癌细胞株中发现两种hMAM cDNA亚型,即hMAM和hMAM(Isoform),长度分别为279和270 bp,两者相差9个连续碱基,其翻译产物相差3个连续氨基酸残基;表达的融合蛋白以不溶性包涵体形式存在,纯化后得到纯度为97%的目的蛋白。结论:获得hMAM cDNA并发现一个新的hMAM突变体;融合蛋白的表达及纯化成功。 展开更多

关键词 乳腺癌 人乳腺珠蛋白 原核表达系统 蛋白纯化

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严重烫伤早期外源性β-羟丁酸钠、胰岛素对大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响 被引量：2

3

作者 杨青 董燕麟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1989年第1期5-9,共5页

本文就外源性β-羟丁酸钠(β-HOBNa)、胰岛素(Ⅰ)对37％体表严重烫伤大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响进行了研究。结果为伤后第4天血清乙酰乙酸(AcAc)无明显变化,游离脂肪酸(FFA)下降,尿3-甲基组氨酸(3-MH)和伤肢比目鱼肌蛋白质分解率明显... 本文就外源性β-羟丁酸钠(β-HOBNa)、胰岛素(Ⅰ)对37％体表严重烫伤大鼠骨骼肌蛋白质代谢的影响进行了研究。结果为伤后第4天血清乙酰乙酸(AcAc)无明显变化,游离脂肪酸(FFA)下降,尿3-甲基组氨酸(3-MH)和伤肢比目鱼肌蛋白质分解率明显增加。伤后连续三天注入β-HOBNa可降低尿3-MH和比目鱼肌蛋白质的分解率,但对其合成无明显影响。联合注入β-HOBNa和Ⅰ未见二者有明显的协同抗蛋白质分解的效应。 展开更多

关键词 烧伤 羟丁酸钠 胰岛素 蛋白

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乳腺珠蛋白基因在大肠杆菌中的诱导表达及纯化研究 被引量：2

4

作者 刘秀娜 王仙园 +3 位作者 周娟 潘自铁 赵力军 胡川闽 《解放军护理杂志》 2005年第11期7-9,44,共4页

目的克隆乳腺珠蛋白(hum an m amm aglob in,hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础,从而为早期发现乳腺癌提供科学的监测方法。方法自乳腺癌组织提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAM cDNA,构建pQ... 目的克隆乳腺珠蛋白(hum an m amm aglob in,hMAM)编码全长cDNA,原核表达并纯化蛋白产物,为后期研制乳腺癌早期诊断试剂盒奠定基础,从而为早期发现乳腺癌提供科学的监测方法。方法自乳腺癌组织提取总RNA,通过RT-PCR克隆hMAM cDNA,构建pQE40-hMAM表达质粒,在大肠杆菌M15中表达,利用镍-亚硝胺乙酸组氨酸(N i-NTA-H is)亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果表达的融合蛋白以不溶性包涵体形式存在,纯化后得到纯度为97%的目的蛋白。结论成功地纯化出hMAM重组蛋白。 展开更多

关键词 乳腺癌 人乳腺珠蛋白 原核表达系统 蛋白纯化

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抑瘤素M的研究进展 被引量：4

5

作者 金晓琳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第A02期31-33,共3页

抑瘤素Ｍ（ＯＳＭ）是与ＩＬ－６、ＩＬ－１１、白血病抑制因子（ＬＩＦ）、睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）及心肌营养因子－１（ＣＴ－１）同为一个家族的细胞因子。

关键词 抑瘤素M 受体 信号传导 结构特征 生物学活性

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载脂蛋白B的分子生物学基础 被引量：6

6

作者 许霖水 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第1期26-29,共4页

载脂蛋白B(apoB)是富含甘油三酯和胆固醇的脂蛋白(CM、VLDL和LDL)特有的蛋白质成分。apoB_(100)是LDL受体的专一性配基,介导血中LDL-胆固醇(LDL-Ch)被外周组织细胞摄取和清除。载脂蛋白B基因遗传变异和apoB异常,血中LDL-Ch堆积,导致动... 载脂蛋白B(apoB)是富含甘油三酯和胆固醇的脂蛋白(CM、VLDL和LDL)特有的蛋白质成分。apoB_(100)是LDL受体的专一性配基,介导血中LDL-胆固醇(LDL-Ch)被外周组织细胞摄取和清除。载脂蛋白B基因遗传变异和apoB异常,血中LDL-Ch堆积,导致动脉粥样硬化发生是冠心病危险因素。 展开更多

关键词 载脂蛋白B 分子生物学

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大鼠大脑皮层细胞核体外转录模型 被引量：3

7

作者 邱平 易禄康 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1990年第1期45-49,共5页

本文用改良的 Giuffrida法分离纯化大鼠大脑皮层细胞核,产率为41—52％,具有很高的体外转录活性。参照Blatti硫酸铵浓度法建立了大鼠大脑皮层细胞核体外转录模型,能分别测定真核基因三类 RNA聚合酶转录活性,并对有关问题进行了讨论,指... 本文用改良的 Giuffrida法分离纯化大鼠大脑皮层细胞核,产率为41—52％,具有很高的体外转录活性。参照Blatti硫酸铵浓度法建立了大鼠大脑皮层细胞核体外转录模型,能分别测定真核基因三类 RNA聚合酶转录活性,并对有关问题进行了讨论,指出本系统具有操作简便、省时、省实验材料等优点,适用于大脑皮层细胞核体外转录调控的研究。 展开更多

关键词 RNA聚合酶 转录 大脑皮层 细胞核

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大鼠老化过程大脑皮层细胞核、染色质转录研究 被引量：8

8

作者 邱平 易禄康 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第4期339-344,共6页

本实验对不同鼠龄(4—,16—17—,33—34—和99—103周)大鼠老化动物模型进行脑细胞核、染色质体外转录研究,结果表明:(1)大脑皮层细胞核、染色质转录活性在老化过程中呈下降趋势,其中RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ活性与染色质模板效率变化一致,说明... 本实验对不同鼠龄(4—,16—17—,33—34—和99—103周)大鼠老化动物模型进行脑细胞核、染色质体外转录研究,结果表明:(1)大脑皮层细胞核、染色质转录活性在老化过程中呈下降趋势,其中RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ活性与染色质模板效率变化一致,说明染色质模板活性降低是导致细胞核转录功能减退的原因之一。(2)幼年鼠染色质RNA和NHCP含量高于老年鼠,提示染色质结合蛋白及RNA可能参与不同生理时期脑神经元染色质结构和功能的调节。(3)老年鼠脑染色质DNA抗DN-aseⅠ酶解能力增强,提示衰老导致转录活性染色质区域减少。 展开更多

关键词 大脑皮层 老化 细胞核 染色质 转录

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大鼠老化过程大脑皮层及小脑神经元染色质构象分析 被引量：2

9

作者 邱平 易禄康 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第5期417-422,共6页

本文在前文~[2]的基础上进一步以MCN和DNaseⅠ为探针研究大鼠脑神经元终末分化后不同生理时期染色质构象,结果表明:<l>MCN酶解DNA产物PAGE显示脑老化过程大脑皮层及小脑神经元染色质核小体单体DNA分别保持在176bp和215bp水平,核... 本文在前文~[2]的基础上进一步以MCN和DNaseⅠ为探针研究大鼠脑神经元终末分化后不同生理时期染色质构象,结果表明:<l>MCN酶解DNA产物PAGE显示脑老化过程大脑皮层及小脑神经元染色质核小体单体DNA分别保持在176bp和215bp水平,核小体连接DNA长度存在组织差异,但不受老化影响;<2>DNaseⅠ酶解DNA产物PAGE显示各年龄组大脑皮层及小脑神经元染色质DNA存在10bp间隔重复结构和相同的泳动区带分布特征,提示脑老化中染色质具有稳定的B型双螺旋结构和一致的螺线管卷曲形式。染色质DNaseⅠ降解率随年龄增加而降低,提示老化导致活性染色质区域减少,老化过程脑神经元染色质构象改变成为其转录功能减退的结构基础。 展开更多

关键词 染色质构象 大脑皮层 小脑 老化

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固化瘤苗类PHA与类IL-2作用的发现

10

作者 黄皎琳 张哉根 +3 位作者 肖桃元 叶治家 曹廷兵 王世明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1995年第4期319-320,共2页

关于肿瘤是否存在特异性抗原(TSA)的探索近100年。究其主要原因与人类癌细胞的特异性弱抗原和多克隆性相关抗原混合粗制瘤苗产生的“免疫二重性”使临床应用陷入疑惑而被废用。固化瘤苗的基础研究，得到国内外有关学术界承认后，由研究... 关于肿瘤是否存在特异性抗原(TSA)的探索近100年。究其主要原因与人类癌细胞的特异性弱抗原和多克隆性相关抗原混合粗制瘤苗产生的“免疫二重性”使临床应用陷入疑惑而被废用。固化瘤苗的基础研究，得到国内外有关学术界承认后，由研究所+提供首创性研究实现了固化瘤苗(STV)的精制。 展开更多

关键词 瘤苗 肿瘤 IL-2 临床应用 相关抗原 类癌 克隆性 固化 PHA 精制

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γ线全身照射对大鼠肝癌细胞核RNA合成的影响及其机制的研究 被引量：1

11

作者 柳君泽 易祿康 《生物化学杂志》 CSCD 1993年第6期697-702,共6页

作者观察了8Gy γ线全身照射正常和DEN诱发的肝癌大鼠其肝(癌)细胞核RNA合成的辐射生物效应,发现:<1>正常大鼠在受照射后4h出现一过性的RNA合成增高期,而后表现为抑制,出现双相效应;而肝癌大鼠在受照后4和18h均表现为強烈抑制;<... 作者观察了8Gy γ线全身照射正常和DEN诱发的肝癌大鼠其肝(癌)细胞核RNA合成的辐射生物效应,发现:<1>正常大鼠在受照射后4h出现一过性的RNA合成增高期,而后表现为抑制,出现双相效应;而肝癌大鼠在受照后4和18h均表现为強烈抑制;<2>在抑制了内源性染色质模板后,转录外源模板的游离型RNA聚合酶出现与染色质结合型酶相似的辐射效应,提示射线可直接影响RNA聚合酶;<3>在照射后4和18h,RNA聚合酶Ⅱ的活性变化率显著高于酶Ⅰ,提示酶Ⅱ及其复合体成分对射线更敏感;<4>肝癌大鼠在受照射后其核RNA合成的抑制与转录活性RNA聚合酶分子数目的减少以及酶的催化效率(延长速度)减低有关,而正常大鼠则是通过不同的机制实现。 展开更多

关键词 RNA 聚合酶 转录 辐照 肝肿瘤

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内毒素在烫伤早期大鼠骨骼肌蛋白分解代谢的研究

12

作者 周长保 杨春 +1 位作者 董燕麟 陈敏 《肠外与肠内营养》 CAS 1994年第1期4-6,共3页

为了探讨严重烫伤早期负氮平衡发生机理中感染所起的作用，本文以３７％体表皮肤全层烫伤的大鼠模型，观察内毒素注射后伤肢与未伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率的变化，以及血液中和伤肢、未伤肢比目鱼肌中ＴＮＦ产生的情况。伤后７２... 为了探讨严重烫伤早期负氮平衡发生机理中感染所起的作用，本文以３７％体表皮肤全层烫伤的大鼠模型，观察内毒素注射后伤肢与未伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率的变化，以及血液中和伤肢、未伤肢比目鱼肌中ＴＮＦ产生的情况。伤后７２ｈ结果表明，①烫伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率明显加快，而未伤肢与对照组比目鱼肌蛋白质分解差异不明显；②内毒素注射后伤肢和未伤肢比目鱼肌蛋白质分解代谢速率均加快，且血浆中可检测到ＴＮＦ；③内毒素注射前后的伤肢比目鱼肌中ＴＮＦ浓度均明显高于未伤肢。 展开更多

关键词 内毒素 肿瘤坏死因子 烫伤 骨骼肌蛋白 分解

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严重体表烫伤后大鼠比目鱼肌蛋白质代谢变化与TNF作用机理的探讨

13

作者 杨春 董燕麟 +1 位作者 周长保 陈敏 《肠外与肠内营养》 CAS 1995年第1期15-18,共4页

为探讨重度烧（烫）伤早期局部和远隔部位骨骼肌蛋白质代谢变化不一致的机理，本研究以包括一侧后肢的３７％体表皮肤全层严重烫伤大鼠为模型，观察伤后第三天双后肢比目鱼肌蛋白质代谢变化及肿瘤坏死因子的作用。结果表明，烫伤局部骨... 为探讨重度烧（烫）伤早期局部和远隔部位骨骼肌蛋白质代谢变化不一致的机理，本研究以包括一侧后肢的３７％体表皮肤全层严重烫伤大鼠为模型，观察伤后第三天双后肢比目鱼肌蛋白质代谢变化及肿瘤坏死因子的作用。结果表明，烫伤局部骨骼肌蛋白质分解速率与ＴＮＦ浓度明显高于未伤肢；并证实ＴＮＦ可以增强在体骨骼肌蛋白质的分解代谢；而ＴＮＦ单抗可以使伤肢比目鱼肌增高了的蛋白质分解代谢有明显的减轻作用。由此说明，肿瘤坏死因子在创伤早期局部骨骼肌蛋白质分解速率中起着重要作用。 展开更多

关键词 肿瘤坏死因子 烧伤 骨骼肌 烫伤 蛋白代谢

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c－erbB2／neu扩增诱导人前列腺癌细胞的转移能力

14

作者 周建新 《生物化学杂志》 CSCD 1996年第2期147-152,共6页

用突变的ｃ－ｅｒｂＢ２／ｎｅｕ癌基因转染人类ＰＣ３细胞系，使转化克隆Ｎ３５具有癌转移能力，在接种到裸鼠后能向肺、骨髓等远处转移．各项实验指标证实，外源性的ｎｅｕ基因已整合至人类细胞的染色质ＤＮＡ中，并获得基因扩增和高... 用突变的ｃ－ｅｒｂＢ２／ｎｅｕ癌基因转染人类ＰＣ３细胞系，使转化克隆Ｎ３５具有癌转移能力，在接种到裸鼠后能向肺、骨髓等远处转移．各项实验指标证实，外源性的ｎｅｕ基因已整合至人类细胞的染色质ＤＮＡ中，并获得基因扩增和高表达．结果提示ｎｅｕ癌基因与肿瘤的发展和转移能力的形成有密切的关系． 展开更多

关键词 前列腺肿瘤 癌 C-ERB B2/neu 癌基因 癌转移

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Ubiquitin及其功能的研究进展 被引量：2

15

作者 文耕云 董燕麟 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1992年第2期96-99,共4页

Ubiquitin是广泛存在于真核细胞的热稳定多肽,由76个氨基酸残基组成。Ubiquitin在进化上显示出高度保守性。从酵母、植物到哺乳动物,仅有3个氨基酸残基不同。它在介导细胞内蛋白质降解、转录的调节以及应激反应中发挥重要作用。文中主... Ubiquitin是广泛存在于真核细胞的热稳定多肽,由76个氨基酸残基组成。Ubiquitin在进化上显示出高度保守性。从酵母、植物到哺乳动物,仅有3个氨基酸残基不同。它在介导细胞内蛋白质降解、转录的调节以及应激反应中发挥重要作用。文中主要对近年来在ubiquitin结构、基因及其功能方面的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 热休克反应 蛋白质降解 UBIQUITIN

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大鼠老化过程小脑神经元染色质核小体线性和空间排布特征分析 被引量：1

16

作者 茆象千 彭家和 邱平 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第3期491-494,共4页

阐明真核细胞染色质核小体线性和空间排布特征及其机制是染色质结构和功能研究的核心内容．近年来随着染色质分子生物学研究的深入，人们发现染色质核小体不仅作为真核基因组三维结构的基本结构单元，而且在细胞核内线性和空间排布（ｌ... 阐明真核细胞染色质核小体线性和空间排布特征及其机制是染色质结构和功能研究的核心内容．近年来随着染色质分子生物学研究的深入，人们发现染色质核小体不仅作为真核基因组三维结构的基本结构单元，而且在细胞核内线性和空间排布（ｌｉｎ－ｅａｒａｎｄｓｐａｃｉａｌａ... 展开更多

关键词 大鼠 老化过程 神经元 染色质核小体 空间排布

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蜕皮甾酮对口腔扁平苔藓上皮细胞TLRs/NF-κB信号通路的调节作用 被引量：1

17

作者 曾旖 杨军 +1 位作者 范舒 张从纪 《海南医学院学报》 CAS 2014年第2期145-148,153,共5页

目的:研究Toll样受体/核转录因子-κB(TLRs/NF-κB)信号通路在口腔扁平苔藓(oral lichen plus,OLP)病理过程中的作用,探讨蜕皮甾酮(ecdysterone,EDS)在OLP治疗中的作用效应。方法:(1)脂多糖(LPS)刺激人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)建立体... 目的:研究Toll样受体/核转录因子-κB(TLRs/NF-κB)信号通路在口腔扁平苔藓(oral lichen plus,OLP)病理过程中的作用,探讨蜕皮甾酮(ecdysterone,EDS)在OLP治疗中的作用效应。方法:(1)脂多糖(LPS)刺激人口腔黏膜角质形成细胞(HOK)建立体外OLP炎症模型,采用Real time RTPCR检测NF-κB p65、TLR4和肿瘤坏死因子-a(TNF-α)mRNA在该模型中的表达情况;(2)EDS干预HOK细胞后,RT-PCR检测NF-κB p65、TLR4和TNF-αmRNA的表达情况。结果:体外OLP炎症模型中NF-κB p65、TLR4和TNF-αmRNA表达量上调,且呈LPS浓度及作用时间依赖性,LPS浓度为10μg/mL,作用6h时表达量最高。EDS能够下调NF-κB p65、TLR4和TNF-αmRNA的表达,EDS最佳作用浓度是100μg/mL(P<0.01)。结论:EDS对OLP的抗炎及免疫调节作用与TLRs/NF-κB信号通路密切相关,EDS可能通过抑制TLRs的激活,调控NF-κB的表达,最终抑制OLP炎症介质活化与黏膜损伤。 展开更多

关键词 口腔扁平苔藓(OLP) Toll样受体 核转录因子-kB(TLRs NF- cB) 蜕皮甾酮(EDS)

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γ-射线对大鼠小肠粘膜上皮细胞RNA合成的影响及其机理的研究

18

作者 杨文学 易禄康 《生物化学杂志》 CSCD 1989年第5期406-410,共5页

本文观察了15戈瑞γ-射线全身照射后,大鼠小肠粘膜上皮细胞核体外转录活性,从染色质结合的RNA聚合酶和可溶性RNA聚合酶活性变化探讨辐射对核转录活性的抑制机理。实验结果表明:(1)照后2小时、8小时和24小时,核转录活性分别下降22.7％、2... 本文观察了15戈瑞γ-射线全身照射后,大鼠小肠粘膜上皮细胞核体外转录活性,从染色质结合的RNA聚合酶和可溶性RNA聚合酶活性变化探讨辐射对核转录活性的抑制机理。实验结果表明:(1)照后2小时、8小时和24小时,核转录活性分别下降22.7％、20.8％和28.2％;(2)染色质结合的RNA聚合酶活性变化与细胞核转录活性变化基本平行,提示核转录活性降低与核内染色质损伤有关;(3)照后24小时,核分离的可溶性RNA聚合酶抑制58％,提示辐射至少部分是通过抑制RNA聚合酶而影响细胞核转录活性;(4)在细胞核和分离的RNA聚合酶都观察到RNA聚合酶Ⅱ抑制程度大于RNA聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ,酶活性下降主要表现在RNA聚合酶Ⅱ提示不同类RNA聚合酶对辐射的敏感性不同,酶Ⅱ对辐射更敏感。 展开更多

关键词 电离辐射 RNA合成 粘膜上皮细胞

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怎样认识自由基

19

作者 周仲玲 许霖水 《医学与哲学》 1996年第10期533-533,共1页

怎样认识自由基第三军医大学基础生化教研室研究生（重庆６３００３８）周仲玲导师许霖水一、自由基的非优性１．环境污染与自由基：在地球外层空间的臭氧层，对保护地球上的生物有机体免受过量紫外线和宇宙线的攻击很重要。但在地球下... 怎样认识自由基第三军医大学基础生化教研室研究生（重庆６３００３８）周仲玲导师许霖水一、自由基的非优性１．环境污染与自由基：在地球外层空间的臭氧层，对保护地球上的生物有机体免受过量紫外线和宇宙线的攻击很重要。但在地球下层大气中，天空闪电、植物呼吸、汽车... 展开更多

关键词 自由基 非优性 优异性 医学哲学

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