组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞 被引量：13

1

作者 王雪萍 徐德忠 +2 位作者 李远贵 闫永平 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期57-59,共3页

目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养，胰蛋白酶消化法行传代培养，免 疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果６ｄ时，细胞开始由组织块边缘向外生长；１５ｄ时，即可进行传代。角蛋白染色示细 胞纯度达９... 目的培养符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。方法用组织块法行原代培养，胰蛋白酶消化法行传代培养，免 疫组织化学染色进行细胞鉴定。结果６ｄ时，细胞开始由组织块边缘向外生长；１５ｄ时，即可进行传代。角蛋白染色示细 胞纯度达９５％以上。结论组织块法培养人绒毛膜滋养层细胞简便易行，可获得符合实验要求的人绒毛膜滋养层细胞。 展开更多

关键词 滋养层细胞 绒毛膜 细胞培养 组织块法

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经转染人骨形态发生蛋白7基因后骨髓间充质干细胞mRNA的表达 被引量：7

2

作者 金丹 曾位森 +4 位作者 裴国献 齐凤菊 魏宽海 王珂 陈滨 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期222-225,共4页

目的构建人骨形态发生蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,hBMP-7)逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转染的兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSCs)mRNA的表达。方法构建hBMP-7逆转录病毒载体后利... 目的构建人骨形态发生蛋白7(humanbonemorphogeneticprotein7,hBMP-7)逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转染的兔骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcell,MSCs)mRNA的表达。方法构建hBMP-7逆转录病毒载体后利用脂质体介导的基因转移技术转染包装细胞PT67,制备含目的基因的重组逆转录病毒液并感染兔骨髓间充质干细胞,采用原位杂交、RT-PCR检测hBMP-7mRNA在MSCs中的表达。结果成功构建了hBMP-7逆转录病毒载体,经hBMP-7基因转染的MSCs可表达外源性BMP-7mRNA。结论采用逆转录病毒介导的方法可以将hBMP-7转染至MSCs中并表达外源性基因。 展开更多

关键词 骨形态发生蛋白 骨髓间充质干细胞 基因表达 组织工程 mRNA HBMP-7 基因转染

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三氧化二砷诱导人类恶性淋巴瘤细胞凋亡及机制探讨(英文) 被引量：9

3

作者 陆地 白晓春 +4 位作者 桂莉 李明 曾位森 韩西群 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第10期997-1001,1108,共6页

目的研究三氧化二砷(As2O3)在体外对人类伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法分别采用来源于人类伯基特氏淋巴瘤的EB病毒阳性细胞Raji和EB病毒阴性细胞BJAB为模型,利用细胞形态学检测、DNA凝胶电泳和蛋白质Western blo... 目的研究三氧化二砷(As2O3)在体外对人类伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法分别采用来源于人类伯基特氏淋巴瘤的EB病毒阳性细胞Raji和EB病毒阴性细胞BJAB为模型,利用细胞形态学检测、DNA凝胶电泳和蛋白质Western blotting分析等方法,从细胞形态、DNA水平和蛋白质水平探讨As2O3诱导恶性淋巴瘤凋亡及作用机制。结果分别采用2, 5和10 mol/L的As2O3与Raji和BJAB细胞作用24 h后,DNA凝胶电泳证实As2O3通过诱导细胞凋亡而抑制细胞的增殖。BJAB和Raji细胞对应于上述浓度As2O3的凋亡率分别47.6%±4.8% (Mean±SD, n=3), 66.4%±5.1% , 87.0%±7.3% 和35.5%±3.8%, 51.5%±6.2%, 62.2%±7.9,BJAB细胞对As2O3的敏感性要高于Raji细胞(P<0.05)。Western blotting蛋白质检测表明,As2O3通过下调抗凋亡蛋白Bcl-xL的表达和激活凋亡分子caspase-3诱导细胞凋亡。结论As2O3通过下调Bcl-xL蛋白的表达和激活caspase-3诱导人类恶性淋巴瘤细胞的凋亡;本研究可望为临床应用砷剂治疗恶性淋巴瘤提供实验依据。 展开更多

关键词 三氧化二砷 人类 恶性淋巴瘤 细胞凋亡 EB病毒

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SD大鼠乳鼠胰岛细胞体外培养方法探讨 被引量：8

4

作者 姜一真 薛耀明 +3 位作者 程宝鸾 朱姿英 沈洁 周琳 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第8期820-822,共3页

目的探讨一种获得足量、纯度高和功能良好的大鼠胰岛细胞的体外培养方法.方法采用胶原酶对胰腺组织进行分次短时间消化;细胞接种18 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况;将细胞转入新的培养板培养,定期收集培养液上清.分别检测胰岛素、淀... 目的探讨一种获得足量、纯度高和功能良好的大鼠胰岛细胞的体外培养方法.方法采用胶原酶对胰腺组织进行分次短时间消化;细胞接种18 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况;将细胞转入新的培养板培养,定期收集培养液上清.分别检测胰岛素、淀粉酶含量及葡萄糖刺激下的胰岛素分泌水平.结果SD大鼠乳鼠原代培养的胰岛细胞中成纤维细胞明显减少,双硫腙可染率85%～90%,锥虫兰染色细胞活力90%以上,培养7～11d的细胞分泌功能正常.结论用胶原酶反复短时间消化胰腺组织,细胞接种后及时转板的方法可获得纯度较高、生长良好、适合实验研究的胰岛单层细胞. 展开更多

关键词 胰岛细胞 细胞培养

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dsRNA阻断大鼠骨髓源性神经干细胞Hes5表达的实验研究 被引量：3

5

作者 王海燕 徐如祥 +1 位作者 姜晓丹 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期35-38,41,共5页

目的 观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率，并对其影响因素进行初步探讨。方法 将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞，通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞，应用人工合成的dsRNA于不同浓... 目的 观察外源性短双链RNA(dsRNA)在转录后水平即mRNA水平降低基因表达的效率，并对其影响因素进行初步探讨。方法 将体外分离培养的大鼠骨髓基质细胞，通过由本实验室配制的特殊培养基诱导成神经干细胞，应用人工合成的dsRNA于不同浓度转染神经干细胞，Western bloting检测dsRNA是否能阻断转录因子Hes5的表达，0．5％锥虫蓝法测定各浓度组中培养细胞活力。结果 200、300nmol／L浓度的dsRNA能特异有效地阻断Hes5的表达，而50～200nmol／L浓度的dsRNA有利于干细胞存活。结论 dsRNA能在神经干细胞内启动RNA干扰作用，适宜浓度的dsRNA能在特异有效地阻断内源性基因的表达的同时，最大限度地保持细胞活力。 展开更多

关键词 DSRNA 大鼠 骨髓源性神经干细胞 Hes5 实验 外源性短双链RNA 基因表达

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人绒毛膜滋养层细胞的培养 被引量：4

6

作者 孔令红 刘忠 +2 位作者 陈士岭 彭彩娥 徐静萍 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第1期10-11,共2页

取妊娠 ６～１０周的人妊娠早期绒毛膜，用胰酶／ＤＮＡ酶消化，换瓶纯化处理，经光镜和电镜检测证实，我们建立了稳定的人绒毛膜滋养层细胞培养体系。

关键词 绒毛膜 滋养层细胞 胰酶 DNA酶 细胞培养

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过氧化氢抑制三氧化二砷诱导的伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡 被引量：2

7

作者 陆地 白晓春 +5 位作者 刘斌 李秀梅 邓凡 李明 程宝鸾 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第4期375-378,共4页

目的探讨过氧化氢(H2O2)对三氧化二砷(As2O3)诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡的影响及双染法荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用。方法应用As2O3诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞株BJAB细胞凋亡,采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)核染料双染... 目的探讨过氧化氢(H2O2)对三氧化二砷(As2O3)诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞凋亡的影响及双染法荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用。方法应用As2O3诱导人类伯基特氏淋巴瘤细胞株BJAB细胞凋亡,采用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)核染料双染法荧光显微镜和透射电镜对细胞死亡进行观察及定量分析。结果BJAB细胞经As2O3处理后,荧光显微镜下可见大多数细胞出现细胞染色质凝集、核边集、核碎裂等凋亡的特征性改变;在低剂量(200 μmol/L)H2O2的影响下,抑制了As2O3诱导的细胞凋亡,降低细胞的死亡率;细胞的死亡方式由凋亡转变为核固缩性坏死,表现为既无凋亡的特征性改变,又非典型的细胞坏死,死亡细胞的细胞核呈固缩状态而非肿胀。结论低浓度(200 μmol/L)H2O2可抑制临床治疗浓度的As2O3诱导的人类伯基特氏淋巴瘤BJAB细胞凋亡;双染法荧光显微镜技术不但可明确区分细胞凋亡及坏死,还可判断早期凋亡细胞和晚期凋亡细胞,并可进行定量分析,是一种良好的细胞凋亡检测方法。 展开更多

关键词 过氧化氢 三氧化二砷 诱导 伯基特氏淋巴瘤细胞 细胞凋亡

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降落式PCR和SSCP检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体γ基因重排

8

作者 韩西群 齐宗利 +2 位作者 贺莉 陆地 赵彤 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第2期188-191,共4页

目的以降落式PCR和单链构型多态性(SSCP)方法检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体(TCR)γ基因重排,探讨其在淋巴细胞白血病诊断中的价值。方法盐析法提取淋巴细胞白血病患者外周血白细胞DNA,TCR-γ基因重排通用引物和降落式PCR扩增基因... 目的以降落式PCR和单链构型多态性(SSCP)方法检测淋巴细胞白血病单克隆T细胞受体(TCR)γ基因重排,探讨其在淋巴细胞白血病诊断中的价值。方法盐析法提取淋巴细胞白血病患者外周血白细胞DNA,TCR-γ基因重排通用引物和降落式PCR扩增基因重排。分别采用琼脂糖凝胶电泳、SSCP和DNA直接测序方法检测PCR扩增产物。阳性细胞系DNA模板与反应增生性淋巴组织DNA按不同比例混合后扩增,检测降落式PCR的灵敏度。结果琼脂糖电泳中,18例T淋巴细胞白血病中有15例、4例B淋巴细胞白血病中有2例为阳性,阳性标本经SSCP进一步分析,呈不连续条带。DNA直接测序证实扩增产物为TCR-γ基因重排。阳性对照模板占1%以上时可得到阳性扩增结果。结论TCR-γ基因重排通用引物结合降落式PCR可有效扩增T淋巴细胞白血病基因重排,可用于T淋巴细胞白血病的辅助诊断。 展开更多

关键词 降落式PCR SSCP 检测 淋巴细胞白血病 单克隆T细胞受体γ 基因重排 单链构型多态性 聚合酶链反应 检测

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EGFR反义RNA的转染对人类鼻咽癌CNE-2细胞EGFR的表达下调及恶性表型的抑制(英文)

9

作者 邓凡 王瑜 +5 位作者 曾方银 邹志鹏 白晓春 陆地 柯志勇 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第9期877-881,共5页

目的利用反义RNA 抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应。方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选... 目的利用反义RNA 抑制靶基因表达的策略,下调EGFR的表达而探讨对人类低分化鼻咽癌CNE-2细胞的恶性表型的抑制性效应。方法将人EGFR的N-端1.35kb片段反向构建入逆转录病毒表达载体pLXSN中,并用脂质体介导转染人鼻咽癌CNE-2细胞,G418筛选并分离阳性克隆,将两个EGFR 反义cDNA转染的克隆细胞命名为CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8,而空载体转染的细胞命名为CNE-2/pLXSN。125I-EGF配体结合分析细胞膜上EGFR的表达,台盼蓝染色法测定细胞生长的改变,并用软琼脂集落形成实验检测细胞转化,最后,将筛选的各组阳性克隆细胞分别注射入裸鼠皮下,不同时间观察肿瘤生长的抑制改变及肿瘤的转移状况。结果配体结合实验结果显示,两个选择的克隆CNE-2/AS4 和CNE-2/AS8细胞表面EGFR的数量分别较未转染细胞CNE-2下降18%、45%,表明EGFR反义RNA的表达下调了细胞膜上EGFR的表达;同时,EGFR反义RNA表达的CNE-2细胞生长速率和软琼脂生长能力也较对照组细胞明显降低。注射入裸鼠皮下后,EGFR反义RNA表达的阳性克隆细胞表现出肿瘤生长减慢,淋巴结和肺转移能力也明显降低。结论这些实验结果提示EGFR 反义cDNA转染的CNE-2细胞能下调EGFR的过量表达并部分抑制鼻咽癌的恶性表型,这为进一步阐明EGFR在鼻咽癌的发生。 展开更多

关键词 鼻咽癌 CNE-2细胞 EGFR 反义RNA 基因表达 表皮生长因子受体

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PLCγ1在胰腺腺泡细胞分布的电镜免疫细胞化学研究

10

作者 李明 罗深秋 路艳蒙 《电子显微学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期209-213,共5页

采用电镜免疫细胞化学的方法研究PLCγ1在小鼠胰腺腺泡细胞中的表达状况。发现其主要表达在腺泡细胞的酶原颗粒及粗面内质网内,其次线粒体、高尔基复合体及核内也有一定程度的表达。结果表明PLCγ1与胰腺分泌功能紧密相关,还可能参与了... 采用电镜免疫细胞化学的方法研究PLCγ1在小鼠胰腺腺泡细胞中的表达状况。发现其主要表达在腺泡细胞的酶原颗粒及粗面内质网内,其次线粒体、高尔基复合体及核内也有一定程度的表达。结果表明PLCγ1与胰腺分泌功能紧密相关,还可能参与了蛋白质合成、细胞能量代谢、DNA合成、细胞有丝分裂及增殖过程。 展开更多

关键词 磷脂酶C 胰腺 免疫细胞化学 电镜分析 腺泡细胞分布

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NO含量和NOS活性在兔软骨终板退变过程中的变化 被引量：17

11

作者 刘斌 瞿东滨 +2 位作者 金大地 陆地 谭军 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期278-281,共4页

目的研究一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶( NOS)在软骨终板退变中的作用。方法将24只新西兰白兔分为实验组(n=12)和对照组(n=12),实验组通过切除兔腰椎棘上、棘间韧带,咬除部分关节突关节,分离椎旁肌造成腰椎软骨终板退变模型,分别于术后1... 目的研究一氧化氮(NO)和一氧化氮合成酶( NOS)在软骨终板退变中的作用。方法将24只新西兰白兔分为实验组(n=12)和对照组(n=12),实验组通过切除兔腰椎棘上、棘间韧带,咬除部分关节突关节,分离椎旁肌造成腰椎软骨终板退变模型,分别于术后12、24、36周对腰椎摄X线片,并检测不同时间段的软骨终板中NO含量和NOS活性。结果X线片示软骨终板随时间的延长而逐渐钙化,且实验组较对照组钙化明显;实验组各组的NO含量及NOS活性较对照组增多(P<0.05),而24周与36周实验组间NO含量及NOS活性差异不明显(P>0.05)。结论NO和NOS在软骨终板退变过程中,其含量相应增加,提示NO可能在软骨终板退变的形成和发展中起重要作用。 展开更多

关键词 NO 含量 NOS 活性 软骨疾病 酶学

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广东人AGTR2突变热区的SNPs位点分析 被引量：3

12

作者 张敏 马虹 +1 位作者 王伯松 赵永忠 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期221-224,共4页

【目的】 研究广东汉族人群中血管紧张素Ⅱ 2型受体基因(AGTR2)是否存在特有的SNPs位点?【方法】 收集121例祖籍广东的汉族人?取外周静脉血以酚/氯仿法分离白细胞提取基因组DNA,根据AGTR2基因已知的SNPs的位点分布特点设计两对引物,PCR... 【目的】 研究广东汉族人群中血管紧张素Ⅱ 2型受体基因(AGTR2)是否存在特有的SNPs位点?【方法】 收集121例祖籍广东的汉族人?取外周静脉血以酚/氯仿法分离白细胞提取基因组DNA,根据AGTR2基因已知的SNPs的位点分布特点设计两对引物,PCR扩增目的片段?对PCR产物进行SSCP分析,银染显色?根据染色结果,随机抽取部分带型不同的PCR产物直接测序,对测序结果通过BlASTn软件和ClustalW软件在线分析?【结果】 发现5个SNPs位点:G300663A,A300672T,A300818T,G301404T和A301410G,除A301410G与Gen-Bank dbSNP数据库中的位点(rs5194)相同外,其余4个位点为新发现的SNPs位点?【结论】 AGTR2是一个高突变的基因,广东人AGTR2的SNPs位点多,与其他人群显著不同? 展开更多

关键词 血管紧张素Ⅱ2型受体 基因多态性 单核苷酸 广东人 引物设计 DNA提取 生物信息学

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冷冻保存对人类附睾精子功能的影响 被引量：4

13

作者 朱伟杰 姚汝华 +1 位作者 梁蔚波 罗琛 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 1999年第6期115-118,共4页

目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后，每例冷冻标本均见活动精子，但精子活动率显著降低，精子活动能力减弱。精子膜完... 目的：了解人类附睾精子经历冷冻保存后的精子功能变化。方法：应用精子功能检测方法。结果：１１ 例先天性双侧输精管缺如患者附睾精子标本冷冻保存后，每例冷冻标本均见活动精子，但精子活动率显著降低，精子活动能力减弱。精子膜完整率显著下降，头膜损伤－ 尾膜完整的精子率（ Ⅲ型精子） 显著升高，精子体外存活时间显著缩短。精子顶体蛋白酶活性降低。去透明带地鼠卵穿透试验检验精子体外授精能力失败的标本，采用显微注射技术可使精子辅助授精。结论：（１） 冷冻保存对附睾精子功能有显著的影响，造成精子功能减弱；（２） 冷冻精子仅用单一尾膜肿胀试验筛选，有可能拾取到的是尾膜完整，但头膜损伤的精子；（３） 建立显微授精技术可有效地对冷冻附睾精子辅助受精。 展开更多

关键词 附睾精子 冷冻保存 不育症 精子功能检测

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表皮生长因子受体介导的PLC-g1水解PIP_2的数学建模 被引量：1

14

作者 苏永春 邓凡 +5 位作者 陆地 白晓春 谭小丹 董爱荣 罗深秋 邓亲恺 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第1期18-20,23,共4页

目的探讨表皮生长因子刺激下磷脂酶C-g1(PLC-g1)水解细胞膜上PIP2(PIP2)的动力学特性。方法根据质量作用定律,利用微分方程对PIP2的代谢途径进行数学建模。结果建立了PIP2水解过程中关键产物浓度的微分方程,分析了各个参数对这些水解产... 目的探讨表皮生长因子刺激下磷脂酶C-g1(PLC-g1)水解细胞膜上PIP2(PIP2)的动力学特性。方法根据质量作用定律,利用微分方程对PIP2的代谢途径进行数学建模。结果建立了PIP2水解过程中关键产物浓度的微分方程,分析了各个参数对这些水解产物的影响。结论这个数学模型为进一步描述PIP2代谢循环的生物学特征和主要产物间浓度依赖关系的动态变化奠定了基础。 展开更多

关键词 表皮生长因子受体 PLC-g1 水解 PIP2 数学建模 磷脂酶C-g1 动力学特性

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MTHFR基因C677T点突变的PCR-TGGE检测技术的建立

15

作者 莫雪华 李月琴 +3 位作者 谢卫兵 王彤歌 吴军民 周天鸿 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2002年第1期99-103,共5页

目的 :建立检测MTHFRC6 77T点突变的PCR -TGGE技术 .方法 :以中国人群外周血基因组DNA为模板 ,用聚合酶链反应扩增该基因外显子 4 ,用温度梯度凝胶电泳 (TGGE)分析检测PCR产物 ,对电泳结果异常者进行DNA测序 .结果 :垂直型TGGE与平行型T... 目的 :建立检测MTHFRC6 77T点突变的PCR -TGGE技术 .方法 :以中国人群外周血基因组DNA为模板 ,用聚合酶链反应扩增该基因外显子 4 ,用温度梯度凝胶电泳 (TGGE)分析检测PCR产物 ,对电泳结果异常者进行DNA测序 .结果 :垂直型TGGE与平行型TGGE均发现该外显子存在杂合性突变 ,经DNA测序证实为C6 77T点突变 .结论 :该技术具有快速、分辨能力高和重复性好的特点 ,是一种有效的检测核酸序列变异和点突变的技术 . 展开更多

关键词 MTHFR基因 C677T点突变 PCR-TGGE检测技术 温度梯度凝胶电泳 基因突变 分子生物学 中国人

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人全长PLCγ1基因真核表达载体的构建及鉴定(英文) 被引量：1

16

作者 李秀梅 邓凡 +6 位作者 曾位森 华亮 陆地 李明 王宏 刘忠英 罗深秋 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第8期849-853,共5页

目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制。方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1cDNA(3878bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载... 目的构建人全长PLCγ1基因真核表达载体,以便进一步研究PLCγ1的作用及其机制。方法自行设计一对带有HindⅢ和NotⅠ酶切位点的引物,采用RT-PCR技术从MG63细胞中扩增人全长PLCγ1cDNA(3878bp),纯化后,经HindⅢ-NotⅠ酶切,插入真核表达载体pLNCX2中,构建重组质粒pLNCX2/PLCγ1。通过PCR,限制性酶切分析及DNA直接测序对所构建的重组质粒进行鉴定。同时经瞬时转染后,利用RT-PCR及Westernblotting转染后LoVo细胞中PLCγ1的表达。结果RT-PCR产物经琼脂糖电泳分析所得片段大小与预期相符(3878bp)。重组质粒经HindⅢ-NotⅠ酶切后,得到3878bp(PLCγ1基因)及6100bp(载体pLNCX2)两个片段,同时重组质粒经HindⅢ-BglⅡ酶切后,得到约1300bp及约8500bp两个片段,与预期一致。DNA测序也证实了重组质粒的正确。经RT-PCR和Westernblot分析证实转染pLNCX2/PLCγ1的LoVo细胞中PLCγ1的表达均高于转染空质粒pLNCX2的LoVo细胞及未转染的LoVo细胞。结论成功构建了人全长PLCγ1基因真核表达载体pLNCX2/PLCγ1,为进一步研究PLCγ1的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 PLCr1基因 真核表达载体 RT-PCR 构建 鉴定

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表皮生长因子受体家族与肿瘤关系的研究进展 被引量：4

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作者 邓凡 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 1999年第Z1期119-120,123,共3页

细胞膜上具有酪氨酸激酶活性(ｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ)的跨膜蛋白受体在细胞内信号转导中起着较为重要的作用。该激酶活性启动了一系列导致细胞增殖和分化的信号级联(ｓｉｇｎａｌｃａｓｃａｄｅ)反应的发生,而... 细胞膜上具有酪氨酸激酶活性(ｔｙｒｏｓｉｎｅｋｉｎａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ)的跨膜蛋白受体在细胞内信号转导中起着较为重要的作用。该激酶活性启动了一系列导致细胞增殖和分化的信号级联(ｓｉｇｎａｌｃａｓｃａｄｅ)反应的发生,而表皮生长因子(ＥＧＦ)受体家族是涉及?.. 展开更多

关键词 表皮生长因子 受体 肿瘤

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