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IL-12诱导T细胞凋亡对Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响 被引量:6
1
作者 刘元生 范洪涛 +5 位作者 郭秋野 郭秀枝 谭广销 陈鹏 周涛 陈孝银 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期517-521,共5页
目的 :探讨白介素 12 (IL - 12 )诱导T细胞凋亡过程中对T细胞的Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响作用。方法 :dUTP缺口末端标记法和AnnexinV法 ;用FITC标记TNFR1,PE标记CD95 ,生物素标记FasL ,流式细胞仪检测 3种T细胞 (人淋巴瘤T细胞株H... 目的 :探讨白介素 12 (IL - 12 )诱导T细胞凋亡过程中对T细胞的Fas/FasL和TNFR/TNFα表达的影响作用。方法 :dUTP缺口末端标记法和AnnexinV法 ;用FITC标记TNFR1,PE标记CD95 ,生物素标记FasL ,流式细胞仪检测 3种T细胞 (人淋巴瘤T细胞株HTB176、人急性白血病T细胞株TIB15 2和正常人T细胞 )的百分率 ;用半定量PCR的方法检测FasL和TNFα的mRNA的表达作用。结果 :HTB176和TIB15 2的细胞在IL - 12处理 1h ,生物素标记FasL百分率和FasL的mRNA表达率开始增加 ,2 4h达到高峰 ,但正常T细胞在 2 4h后才有反应 ;正常T细胞经IL -12处理 1h内细胞FasL百分率和FasL的mRNA表达率开始增加 ,在以后的试验期 6、12、2 4h始终保持恒定水平 ;但 3种T细胞在IL - 12作用下不促进细胞CD95和TNFR1及TNFα的表达。结论 :IL - 12诱导T细胞凋亡中有许多调节因子的协调作用 。 展开更多
关键词 IL-12 T细胞 FAS/FASL TNFR/TNFα 白血病 膜联蛋白V 细胞凋亡 MRNA
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云芝多糖在NO诱导的巨噬细胞凋亡中的分子基础 被引量:6
2
作者 王瑾雯 陈瑗 王珣章 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期68-71,共4页
在应用云芝多糖的基础上 ,用NO诱导巨噬细胞凋亡 ,发现云芝多糖可加强NO诱导的细胞凋亡 ;通过RT PCR观察诱生性一氧化氮合酶基因的表达情况 ,结果表明云芝多糖能诱导一氧化氮合酶基因表达 ,并可增强γ干扰素和脂多糖的诱导作用 ,提示云... 在应用云芝多糖的基础上 ,用NO诱导巨噬细胞凋亡 ,发现云芝多糖可加强NO诱导的细胞凋亡 ;通过RT PCR观察诱生性一氧化氮合酶基因的表达情况 ,结果表明云芝多糖能诱导一氧化氮合酶基因表达 ,并可增强γ干扰素和脂多糖的诱导作用 ,提示云芝多糖在动脉粥样硬化中的防治作用是通过诱导诱生性一氧化氮合酶表达而实现的 . 展开更多
关键词 云芝多糖 细胞凋亡 诱生性-氧化氮合酶 动脉粥样硬化 巨噬细胞 诱导 分子基础
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失血性休克家兔血浆中分子物质及血糖含量的动态变化 被引量:6
3
作者 陈世民 潘正甫 +5 位作者 谢协驹 莫燕娜 王英 潘海玲 王铁丹 肖应庆 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期180-183,共4页
用改进的紫外吸收法及葡萄糖氧化酶法分别测定了家兔失血性休克前后不同时间动脉和静脉血浆中分子物质(MMS)及血糖含量的动态变化。结果表明,在家兔失血性休克后30min,动、静脉血浆MMS含量比休克前显著降低;血糖含量则... 用改进的紫外吸收法及葡萄糖氧化酶法分别测定了家兔失血性休克前后不同时间动脉和静脉血浆中分子物质(MMS)及血糖含量的动态变化。结果表明,在家兔失血性休克后30min,动、静脉血浆MMS含量比休克前显著降低;血糖含量则显著升高。随着休克发展,MMS含量逐渐回升,在动物临终前呈显著升高,并且静脉血浆含量显著高于动脉血浆含量,血糖浓度则随休克发展不断升高。输血组在休克30min后将血液回输,血压恢复,MMS含量则持续保持低水平状态,血糖含量逐渐回降。MMS与血糖含量的变化之间没有显著性相关。 展开更多
关键词 出血性 血糖 输血 出血性休克
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改良EC液低温灌注犬肺离体组织中一氧化氮与氧自由基变化的研究 被引量:6
4
作者 孟辉 陈钢 +3 位作者 谭军 杨锡耀 穆峰 蔡瑞君 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第7期498-500,共3页
目的 探讨改良型EC液低温灌注犬肺离体组织内一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和湿干重比值(W/D)的变化,旨在为实验动物供肺保存研究提供分子水平的观察依据。方法 4 ℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺并离体低... 目的 探讨改良型EC液低温灌注犬肺离体组织内一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量和湿干重比值(W/D)的变化,旨在为实验动物供肺保存研究提供分子水平的观察依据。方法 4 ℃改进型EC液灌注6只健康成年杂种犬肺并离体低温保存,30、60、120、180、240 min后取材测定不同时间NO、MDA、SOD含量和W/D,以灌注前为对照组。结果 不同时间点NO、SOD和MDA含量及W/D实验组与对照组之间无显著性差异(P>0.05);随时间延长NO、SOD均有下降趋势,MDA、W/D轻度上升。结论 改良EC液具有增加渗透压和清除氧自由基的作用;灌注前肺动脉内注射PGE1及增加代谢底物均有助于抑制供体肺保存期间氧自由基的产生。 展开更多
关键词 EuroCollins液 氧自由基 一氧化氮 肺保存 肺移植
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远节指骨的解剖学观察及其临床意义 被引量:3
5
作者 王兴海 王建中 +3 位作者 王雪莲 刘畅 丁自海 肖应庆 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2004年第1期74-75,共2页
目的 :为人工肌腱修复指深屈肌腱或拇长屈肌腱固定方法和固定止点提供解剖学依据。方法 :采用常规固定的 16具成人手指标本 (男、女各 80个手指 )。观察各指远节指骨长度 ,底和粗隆的宽度及厚度。结果 :男性拇、示和中指远节指骨底的宽... 目的 :为人工肌腱修复指深屈肌腱或拇长屈肌腱固定方法和固定止点提供解剖学依据。方法 :采用常规固定的 16具成人手指标本 (男、女各 80个手指 )。观察各指远节指骨长度 ,底和粗隆的宽度及厚度。结果 :男性拇、示和中指远节指骨底的宽度为 15 .3、10 .2、10 .5mm ,厚度分别为 8.8、6.5、7.1mm。女性宽度分别为 12 .9、9.1、9.6mm ,厚度分别为 7.8、5 .9、6.6mm。男性拇、示和中指远节指骨粗隆宽度为 9.4、6.6、7.4mm ,厚度分别为 3 .6、3 .2、3 .6mm。女性宽度分别为 8.0、5 .8、6.2mm ,厚度分别为3 .0、2 .7、3 .1mm。结论 :用人工肌腱修复指深屈肌腱或拇长屈肌腱时 ,在远节指骨的底部可行螺丝固定 ,在粗隆可行钻孔固定。 展开更多
关键词 远节指骨 人工肌腱 肌腱固定 应用解剖学
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抗HPV11 E2核酶的计算机设计 被引量:2
6
作者 侯化 杨光彩 +2 位作者 王曙 黄扬中 刘德忠 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期766-771,共6页
借助计算机软件分析 ,设计出能特异性切割HPV11型 6 4 4ntE2mRNA的核酶 (ribozyme) .遵循Symon′s锤头状核酶结构和GUX剪切位点原则 ,靶序列存在 32个这样的剪切位点 .通过计算机软件分析出核酶的最佳剪切位点 ,并对底物及核酶的二级结... 借助计算机软件分析 ,设计出能特异性切割HPV11型 6 4 4ntE2mRNA的核酶 (ribozyme) .遵循Symon′s锤头状核酶结构和GUX剪切位点原则 ,靶序列存在 32个这样的剪切位点 .通过计算机软件分析出核酶的最佳剪切位点 ,并对底物及核酶的二级结构进行预测及进行相应基因生物学功能和基因同源性分析 ,筛选出 2个锤头结构核酶 .针对这两位点设计的核酶分别命名为RZ2 777和RZ32 81.计算机分析显示 ,两核酶与底物切点两翼碱基形成锤头状结构 ,切点所在基因序列具有相对松弛的二级结构 ,位于该基因重要生物功能区内 ,是核酶的理想攻击区域 .通过基因库检索 ,在已知人类基因排除了与上述两核酶切点两翼碱基有基因同源性序列的可能性 .将两核酶用于体外剪切实验取得了良好的实验结果 。 展开更多
关键词 核酶 计算机设计 HPV11 E2 尖锐湿疣
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在体组织工程新概念(英文) 被引量:5
7
作者 董为人 肖应庆 +1 位作者 朴英杰 陈英华 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第9期969-974,共6页
基于对人发角蛋白(HHK)人工腱长达10余年的实验和临床应用研究的结果,我们提出了在体组织工程化肌腱的概念,即HHK人工腱及其降解产物能诱导周围组织内的成腱干细胞增殖、分化为腱细胞并刺激其他细胞分泌某些细胞因子参与调节,最终形成... 基于对人发角蛋白(HHK)人工腱长达10余年的实验和临床应用研究的结果,我们提出了在体组织工程化肌腱的概念,即HHK人工腱及其降解产物能诱导周围组织内的成腱干细胞增殖、分化为腱细胞并刺激其他细胞分泌某些细胞因子参与调节,最终形成自体腱。我们在实验中还发现,HHK植入损伤骨组织、神经组织和肌组织后在原位构建出相应的组织。从而进一步提出“在体组织工程”新的理论体系。它是指可吸收性生物支架材料植入体内后,通过材料本身及其降解产物激活周围组织自身的成体干细胞分裂、增殖、分化,并在体内生理条件下与基质材料达到最佳的有机融合,并最终完成替代基质材料形成在解剖、组织学意义上与自体组织几乎完全一致的结构,从而在体内完成构建完整的组织工程化组织或器官的过程。在体组织工程不仅利用体内微环境和体内精细的调节机制“在体培养”种子细胞,消除了现行组织工程化组织或器官(传统组织工程)中种子细胞的排斥反应、变异和功能退化及复杂的保存、运输和高额费用等问题,最重要的是更贴近临床需要。不仅有巨大的临床应用潜能,而且尚具有重要的理论价值。 展开更多
关键词 组织工程 人发角蛋白 人工腱
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p15^(INK4B)基因甲基化在急性粒细胞白血病和慢性粒细胞白血病中的研究 被引量:2
8
作者 郭秀枝 范洪涛 +8 位作者 吴穷 周涛 郭秋野 陈鹏 许敏华 张学莉 罗更新 肖扬 梁实 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2000年第4期266-270,共5页
为探索 p15 INK4B基因在CpG岛高甲基化对白血病发病机制的重要作用 ,应用敏感的甲基化特异的MSP PCR的测定方法 ,测定了 p15 INK4B基因在急性粒细胞白血病 (AML)和慢性粒细胞白血病 (CML)中甲基化的表达变化。研究结果表明 ,p15 INK4B... 为探索 p15 INK4B基因在CpG岛高甲基化对白血病发病机制的重要作用 ,应用敏感的甲基化特异的MSP PCR的测定方法 ,测定了 p15 INK4B基因在急性粒细胞白血病 (AML)和慢性粒细胞白血病 (CML)中甲基化的表达变化。研究结果表明 ,p15 INK4B基因操纵区在AML和CML中的甲基化发生率分别为 83.9% (2 6/ 31)和 0 % (0 / 2 8)。结论提示 :甲基化是p15 INK4B基因在AML中主要的失活方式之一 ,并可在病程进展中出现甲基化 ,使病情加重 ;在CML中无甲基化的发生 ,说明p15 展开更多
关键词 p15^INK4B基因 甲基化 急性 粒细胞白血病 慢性
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应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良 被引量:5
9
作者 刘咏梅 封志纯 方振伟 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第8期731-733,共3页
目的应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良(DMD/BMD)基因缺失和杂合子。方法根据DMD/BMD外显子缺失的多发位点,建立一个多重PCR体系,在不同的PCR条件下对23例DMD/BMD患者及其家系57名可疑女性携带者进行多重缺失的筛选、单链构象多态性(SS... 目的应用PCR技术检测假肥大型肌营养不良(DMD/BMD)基因缺失和杂合子。方法根据DMD/BMD外显子缺失的多发位点,建立一个多重PCR体系,在不同的PCR条件下对23例DMD/BMD患者及其家系57名可疑女性携带者进行多重缺失的筛选、单链构象多态性(SSCP)/异源双链分析、连锁标记分析、限制性片段长度多态性(RFLPs)分析及微卫星分析。结果23例先证者中有14例为基因缺失,2例为基因重复,40例家系中女性亲属为杂合型。结论利用此PCR体系,可准确地检测出DMD/BMD的基因突变,可靠地筛选携带者并对其家系进行正确的分析。 展开更多
关键词 肌营养障碍 分子生物学 基因诊断 PCR技术
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应用十六烷基三甲基溴化铵纯化PCR产物 被引量:2
10
作者 张宝 马文丽 +3 位作者 刘莉扬 吴清华 郭秋野 郑文岭 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期719-720,共2页
目的建立应用十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyltrimethyl ammonium bromide, CTAB)PCR产物纯化的方法。方法应用CTAB对PCR产物进行选择性沉淀。CTAB与DNA形成复合我1.2 mol/L NaCl溶液中溶解,再用乙醇将PCR产物沉淀出来。结果这种方法可... 目的建立应用十六烷基三甲基溴化铵(hexadecyltrimethyl ammonium bromide, CTAB)PCR产物纯化的方法。方法应用CTAB对PCR产物进行选择性沉淀。CTAB与DNA形成复合我1.2 mol/L NaCl溶液中溶解,再用乙醇将PCR产物沉淀出来。结果这种方法可以去除PCR产物中引物和小分子dNTP。虽然纯化的产率占现在市场上的一些试剂盒产率的80%,但其成本比较低,仍不失是一种PCR产物纯化的方法。结论利用十六烷基三甲基溴化铵可以用于PCR产物纯化。 展开更多
关键词 十六烷基三甲基溴化铵 PCR产物 纯化
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血清内中分子物质检测在肝病中的临床意义 被引量:1
11
作者 丁晓红 曹文娥 +3 位作者 杨镇江 赵素艳 王铁丹 肖应庆 《临床肝胆病杂志》 CAS 1990年第2期85-86,共2页
目前国内外对分子量在300~5000Dalton之间的所谓中分子物质(简称中分子,MMS),已进行了大量的临床研究。为此,我们对60例正常人和各种肝病患者113例进行了血清中分子物质检测,并与血清氨基酸支/劳比值进行比较,以探讨中分子物质与血清... 目前国内外对分子量在300~5000Dalton之间的所谓中分子物质(简称中分子,MMS),已进行了大量的临床研究。为此,我们对60例正常人和各种肝病患者113例进行了血清中分子物质检测,并与血清氨基酸支/劳比值进行比较,以探讨中分子物质与血清氨基酸在肝病中的相互关系,了解不同肝脏疾病时中分子变化特点及本质,以作为诊断和判断疾病严重程度的新指标,现将研究结果报告如下: 展开更多
关键词 中分子物质 肝病 血清检测
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人脑源性神经营养因子基因的定点突变 被引量:3
12
作者 李军 舒斯云 +1 位作者 包新民 戚正武 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第3期187-189,共3页
应用寡核苷酸诱导的定点突变和PCR技术对人脑源性神经营养因子基因进行突变,并完成了测序鉴定。
关键词 脑源性 神经营养因子 基因定点突变
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探针的纯化与否对基因芯片重复利用的影响 被引量:1
13
作者 张宝 马文丽 +2 位作者 石嵘 吴清华 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期208-210,共3页
目的观察探针的纯度对基因芯片重复利用的影响。方法将探针分为未纯化、纯化两部分并分别与基因芯片杂交,扫描芯片后,用探针剥脱液洗涤芯片;同等条件成像后,进行下一轮杂交。结果未纯化的探针杂交结果背景高,阳性信号界限不清楚;经探针... 目的观察探针的纯度对基因芯片重复利用的影响。方法将探针分为未纯化、纯化两部分并分别与基因芯片杂交,扫描芯片后,用探针剥脱液洗涤芯片;同等条件成像后,进行下一轮杂交。结果未纯化的探针杂交结果背景高,阳性信号界限不清楚;经探针剥脱液洗涤后,仍留有较高强度的背景和原与靶基因片段杂交的阳性信号,即使洗脱4次后,仍有背景和阳性信号存在。纯化的探针杂交结果显示背景低,一般经2次探针剥脱液洗过后,可以完全去除信号并进行下一轮杂交。结论未纯化的探针与基因芯片杂交后,此芯片不能应用于下一轮的杂交;而纯化的探针杂交后,芯片可以再次利用。由此说明探针的纯化是基因芯片重复利用的前提条件。 展开更多
关键词 基因芯片 探针 纯化 重复利用 影响
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系统性红斑狼疮血液灌流的实验研究 被引量:1
14
作者 余毅 王铁丹 +2 位作者 辛平 杨彦 郭贤权 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 1990年第2期180-183,共4页
用以化学键联结的DNA—VT树脂对大鼠进行全血灌流,观察该树脂的血液相容性,同时测定DNA-VT树脂的理化性质及体外吸附DNA抗体的能力。结果表明,DNA-VT树脂血液相容性良好,能有效清除DNA抗体,可望应用于临床治疗系统性红斑狠疮。
关键词 红斑狼疮 血液灌流 免疫吸附
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精胺和Mg^(2+)对tRNA^(Ile)圆二向色谱的影响 被引量:4
15
作者 彭朝晖 苏成芝 《生物化学杂志》 CSCD 1994年第2期159-163,共5页
由于精胺(spermine)能特异地刺激哺乳动物tRNA^(Ile)的氨基酰化,本文用纯化的牛肝tRNA^(Ile)观察了精胺和Mg(2+)对tRNA^(Ile)CD光谱的影响。结果显示:Mg(2+)可使牛肝tRNA^(... 由于精胺(spermine)能特异地刺激哺乳动物tRNA^(Ile)的氨基酰化,本文用纯化的牛肝tRNA^(Ile)观察了精胺和Mg(2+)对tRNA^(Ile)CD光谱的影响。结果显示:Mg(2+)可使牛肝tRNA^(Ile)CD光谱峰向短波方向偏移2nm,波峰为263nm,峰值被增大约10%,ΔθMg(2+)=2.3×103deg·cm2/dmol;而精胺使牛肝tRNA^(Ile)CD光谱峰减少40%,Δθspermine=1×10(-4)deg·cm2/dmol;精胺和Mg(2+)对肝tRNA^(Ile)-IleRS复合物或IleRS的CD光谱基本无影响。表明Mg(2+)和精胺可影响牛肝tRNA^(Ile)的构象。实验同时以酵母tRNA(Phe)和E·colitRNA^(Ile)作为对照。 展开更多
关键词 TRNA 精胺 圆二向色谱
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人乳头瘤病毒16型 E7蛋白在子宫颈癌细胞内的定位 被引量:1
16
作者 徐钤 齐凤菊 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第2期108-111,共4页
应用重组质粒在大肠杆菌中表达人乳头瘤病毒(HPV)16 型 E7 基因.以所产生的 E7 融合蛋白为抗原免疫家兔,制得抗 E7 蛋白抗血清.在子宫颈癌组织切片中用此抗血清作免疫组化染色(胶体金标记染色法)。在光学显微镜下可观察到癌细胞中存在 ... 应用重组质粒在大肠杆菌中表达人乳头瘤病毒(HPV)16 型 E7 基因.以所产生的 E7 融合蛋白为抗原免疫家兔,制得抗 E7 蛋白抗血清.在子宫颈癌组织切片中用此抗血清作免疫组化染色(胶体金标记染色法)。在光学显微镜下可观察到癌细胞中存在 E7 抗原黑色颗粒,位于细胞核内.主要附着于核膜,可证明 E7 基因在 HPV16 感染的子宫颈癌细胞中有强烈表达;提示 E7 基因可能即为 HPV16的癌基因. 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 子宫肿瘤 癌基因
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应用亲和层析分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶的初步研究 被引量:1
17
作者 张兴梅 石玉生 张翰 《第一军医大学学报》 CSCD 1999年第2期165-167,共3页
目的分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶(AChE)。材料和方法采用ConA和民B10亲和层析法纯化人小脑AChE。以纯化的人小脑AChE为免疫原,免疫6只BALB/c小鼠制备小鼠抗人小脑AChE抗血清,并检测其与电鳐AChE... 目的分离纯化人小脑乙酰胆碱酯酶(AChE)。材料和方法采用ConA和民B10亲和层析法纯化人小脑AChE。以纯化的人小脑AChE为免疫原,免疫6只BALB/c小鼠制备小鼠抗人小脑AChE抗血清,并检测其与电鳐AChE和人红细胞膜AChE。E的交叉免疫反应性。结果SDS-PAGE还原状态下呈一条主带,相对分子质量为67000,比活性为373U/mg。结论免疫亲和层析法操作简单,可快速纯化人小脑AChE。 展开更多
关键词 免疫亲和层析 小脑 乙酰胆碱酯酶 交叉免疫反应性
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弱激光静脉内照射治疗戒断综合征临床进展 被引量:1
18
作者 董为人 肖应庆 +1 位作者 程洁銮 李传印 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第1期77-77,共1页
关键词 辐射效应 海洛因 戒断综合征 激光疗法
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人乙酰胆碱酯酶表位的预测 被引量:1
19
作者 张兴梅 石玉生 孙曼霁 《第一军医大学学报》 CSCD 1998年第4期299-300,共2页
应用“Goldkey”软件,预测出人乙酰胆碱酯酶的8个抗原决定簇位点,可用于指导抗原多肽的合成或PCR引物设计。
关键词 人乙酰胆碱酯酶 表位预测 水解酶
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大鼠肝tRNA^(Ile)基因的克隆与体外转录 被引量:1
20
作者 张璐 钟雄霖 +1 位作者 彭朝晖 徐钤 《生物化学杂志》 CSCD 1997年第1期19-23,共5页
采用PCR扩增出大鼠肝tRNAIle基因,构建了重组质粒pGWIW,并用T7RNA聚合酶/启动子系统对其进行了体外表达.经过对转录产物片段大小及运用Northernblot鉴定,证明获得了不含修饰核苷酸的大鼠肝tRNAIle生物学活性检测显示:合成基因体... 采用PCR扩增出大鼠肝tRNAIle基因,构建了重组质粒pGWIW,并用T7RNA聚合酶/启动子系统对其进行了体外表达.经过对转录产物片段大小及运用Northernblot鉴定,证明获得了不含修饰核苷酸的大鼠肝tRNAIle生物学活性检测显示:合成基因体外转录产物氨基酰化活性是天然tRNA的40%。 展开更多
关键词 tRNA^Ile基因 体外转录 基因克隆
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