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高温高湿环境下犬肢体火器伤后血清组织释放酶含量变化的实验研究 被引量:7
1
作者 张洪涛 裴国献 +3 位作者 张敬良 郑晓勇 罗炳德 林励军 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期300-301,共2页
将 12只犬随机分为高温高湿组和常温常湿组 ,分别于火器伤后 0、2、4、6、8、12、2 4h抽取外周血检测碱性磷酸酶 (ALP)、乳酸脱氢酶 (LDH)、肌酸激酶 (CK)等指标。结果显示 ,ALP、LDH、CK含量随时间变化呈逐渐增高 ,其中CK含量变化较ALP... 将 12只犬随机分为高温高湿组和常温常湿组 ,分别于火器伤后 0、2、4、6、8、12、2 4h抽取外周血检测碱性磷酸酶 (ALP)、乳酸脱氢酶 (LDH)、肌酸激酶 (CK)等指标。结果显示 ,ALP、LDH、CK含量随时间变化呈逐渐增高 ,其中CK含量变化较ALP、LDH明显 ;高温高湿组较常温常湿组变化提前且各酶含量升高显著。表明组织释放酶含量与局部组织损伤程度一致 ;CK含量对组织损伤的反应更敏感 ;高温高湿环境因素与火器伤因素同时作用后机体变化更为显著 ,组织损伤更为严重。 展开更多
关键词 高温高湿环境 肢体火器伤 血清组织释放酶
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防治高温高湿环境下犬肢体火器伤进行性损伤方法的研究 被引量:2
2
作者 张洪涛 裴国献 +3 位作者 张敬良 郑晓勇 罗炳德 郭进强 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期295-296,F004,共3页
将 18只健康雄性杂种犬随机分为高温高湿组、常温常湿组和热习服组 ,肢体枪伤后分别置入相应的人工气候舱。于伤后0、4、6、8、12、2 4h进行组织形态学及细菌学指标的检测。结果发现 ,热习服组伤肢肿胀和局部病理变化较高温高湿组明显... 将 18只健康雄性杂种犬随机分为高温高湿组、常温常湿组和热习服组 ,肢体枪伤后分别置入相应的人工气候舱。于伤后0、4、6、8、12、2 4h进行组织形态学及细菌学指标的检测。结果发现 ,热习服组伤肢肿胀和局部病理变化较高温高湿组明显减轻及推迟 ,但较常温常湿组严重并提前 ;局部组织菌落计数达到感染临界的时限 ,热习服组与常温常湿组均为 12h,高温高湿组为 8h ,热习服组感染时限明显晚于高温高湿组。提示热习服的获得可减缓高温高湿环境下火器伤后的组织病理变化 。 展开更多
关键词 防治 高温高湿环境 肢体火器伤 进行性损伤
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恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶融合蛋白复性及纯化的研究 被引量:3
3
作者 李妍 宁云山 +2 位作者 郝文波 李莉 李明 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第12期1273-1276,共4页
目的建立恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)融合蛋白质的复性和纯化方法。方法将含有恶性疟原虫GDH全长基因的融合蛋白表达质粒GDH/ pGEX-4T-1转化到宿主菌BL21,该GDH/GST融合蛋白在IPTG的诱导下获得高水平的表达,经SDS-PAGE分析表达产物主... 目的建立恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)融合蛋白质的复性和纯化方法。方法将含有恶性疟原虫GDH全长基因的融合蛋白表达质粒GDH/ pGEX-4T-1转化到宿主菌BL21,该GDH/GST融合蛋白在IPTG的诱导下获得高水平的表达,经SDS-PAGE分析表达产物主要为不溶性的包涵体。经超声酶解法、离心、变性剂/去污剂洗涤后获得包涵体。包涵体经8 mol/L尿素变性后分别采用分子筛柱层析、透析和稀释3种方法复性,并通过浊度分析、非还原SDS-PAGE等方法比较、优化复性方法和条件。复性后的GDH/GST融合蛋白经过不同柱层析方法进行纯化。结果经SDS-PAGE分析表明,GDH/GST融合蛋白表达量可占到菌体总蛋白的25%左右;浊度分析表明:稀释复性法优于其它两种方法,同时20 mmol/L Tris-HCl、1 mmol/L EDTA、pH8.5及GSSG/GSH=1∶10为该融合蛋白稀释复性的最佳条件,其复性回收率可达90%以上。复性产物采用二步阴离子交换层析可获得较好的纯化效果。结论通过稀释复性,二步阴离子交换层析可获得高纯度、具有天然空间构象的重组GDH/GST融合蛋白。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 谷氨酸脱氢酶 融合蛋白 复性 纯化 包涵体
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乙型肝炎病毒多表位治疗性抗原基因的合成、表达及抗原性研究 被引量:7
4
作者 骆利敏 李明 +3 位作者 夏虎 黄建生 陈百虹 王萍 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第8期802-805,共4页
目的研究乙型肝炎病毒多表位治疗性疫苗基因的合成、表达及其产物的抗原性。方法设计、并合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入融合表达载体pWR450-1,构建重组质粒PWR/BPT。在大肠杆菌中表达乙型肝炎多表位抗原蛋白并纯化该蛋白,并... 目的研究乙型肝炎病毒多表位治疗性疫苗基因的合成、表达及其产物的抗原性。方法设计、并合成乙型肝炎病毒多表位抗原基因BPT,克隆入融合表达载体pWR450-1,构建重组质粒PWR/BPT。在大肠杆菌中表达乙型肝炎多表位抗原蛋白并纯化该蛋白,并用Western-blotting方法初步检测该抗原蛋白的抗原性。结果成功构建了融合表达载体PWR/BPT,在大肠杆菌中表达出乙型肝炎多表位抗原蛋白,Western-blotting 检测显示该蛋白具有良好抗原性。结论HBV多表位治疗性抗原基因的设计是成功的,其在大肠杆菌中表达的重组融合蛋白具有良好的抗原性,可能是较理想的HBV治疗性疫苗候选物。 展开更多
关键词 乙型肝炎 多表位 治疗性疫苗
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恶性疟口服活菌苗的免疫原性及安全性的初步研究 被引量:2
5
作者 黄建生 王昌才 +2 位作者 任大明 李全贞 钟雄林 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第3期228-230,共3页
在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中表达了人工合成的恶性疟杂合45肽抗原基因,并在BALB/c小鼠及家兔中诱发出一定水平的特异性体液免疫及细胞免疫。在减毒菌中表达的融合抗原GZ-A可特异地识别兔抗GZ-A血清、鼠抗Pf... 在减毒鼠伤寒沙门氏菌SL3261中表达了人工合成的恶性疟杂合45肽抗原基因,并在BALB/c小鼠及家兔中诱发出一定水平的特异性体液免疫及细胞免疫。在减毒菌中表达的融合抗原GZ-A可特异地识别兔抗GZ-A血清、鼠抗Pf血清及恶性疟患者血清,滴度分别为1:6400、1:10240及1:4。小鼠口服(po)重组疫苗图SL3261(nWRA)后,细菌在肠道至少可寄生1月以上,且在体外仍然可以表达目的抗原。静脉注射(iv)活菌后首日可见菌血症。10 ̄8cfu量全身免疫(ip、iv)后可致小鼠死亡。ip、iv组脾脏肿大1~2倍,肝脏轻度肿大,而po组则未见明显改变。清理切片显示肝脏轻度充血,汇管区有淋巴细胞聚集,枯否氏细胞轻度增生等;脾小体增生扩大,巨细胞明显增生等,上述改变以ip及iv组较为明显。结果说明,SL3261(pWRA)所表达的恶性疟原虫杂合抗原可特异地被抗Pf抗体所识别,活菌苗口服后可在肠道较长久地寄生,且不引起明显的毒副作用。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 减毒 恶性疟原虫 活菌苗
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恶性疟原虫杂合45肽抗原基因重组减毒鼠伤寒沙门氏菌在家兔免疫应答的初步研究 被引量:2
6
作者 黄建生 王昌才 +4 位作者 李全贞 任大明 钟雄林 陈仕荣 李英杰 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第3期225-227,共3页
已经在减毒鼠伤寒沙门氏菌SLS361以融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫杂合抗原基因A。活菌以2×10 ̄9cfu(conolyformunits)经口服免疫新西兰家兔,用ELISA法测定血清中抗体水平,结果... 已经在减毒鼠伤寒沙门氏菌SLS361以融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫杂合抗原基因A。活菌以2×10 ̄9cfu(conolyformunits)经口服免疫新西兰家兔,用ELISA法测定血清中抗体水平,结果于首次免疫或加强免疫后都可检测到一定水平的特异性抗体,并可诱发出针对融合蛋白和恶性疟原虫抗原的迟发性超敏反应(DTH)。活菌苗免疫后未见明显的毒副作用。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门氏菌 恶性疟原虫 免疫应答 活菌苗
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皮油及其单体作为驱避剂的研究 被引量:6
7
作者 刘俊华 王芳生 +2 位作者 孙恩贵 颜立成 董文其 《中兽医医药杂志》 北大核心 1997年第2期5-7,共3页
此项研究用不同浓度橘皮油在温室内对小白鼠作驱避蚊虫试验,1~2%者2~3h有驱避作用、5~7%者4h有驱避作用。用不同驱避剂在自然环境和温室内对小白鼠作驱避蚊虫对比试验,结果:7%橘皮油、蚊怕水(RANBOW,USA... 此项研究用不同浓度橘皮油在温室内对小白鼠作驱避蚊虫试验,1~2%者2~3h有驱避作用、5~7%者4h有驱避作用。用不同驱避剂在自然环境和温室内对小白鼠作驱避蚊虫对比试验,结果:7%橘皮油、蚊怕水(RANBOW,USA)和驱蚊露均有4~5h的驱避作用;7%橘皮油及其0.5%单体亦有相同的驱避效果。从人群和马骡的现场试验观察,对人体仅观察2h、对马骡观察4~4.5h,均有驱避作用;个体和群体驱避时间基本相同。各项试验的空白对照均有蚊或蠓。 展开更多
关键词 橘皮油 驱避剂
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重组人白细胞介素-3在大肠杆菌中表达及纯化研究 被引量:1
8
作者 李全贞 任大明 +3 位作者 胡罢生 毕惠祥 赵雨田 李英杰 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第1期9-11,共3页
将化学合成的人白细胞介素-3(hIL-3)基因与表达质粒pKK223-3重组并转化大肠杆菌JM105,重组菌在摇瓶中发酵并诱导表达,表达产量达菌体蛋白质总量的53%以上。发酵菌经超声破碎后得到包含体,经洗涤处理使包含... 将化学合成的人白细胞介素-3(hIL-3)基因与表达质粒pKK223-3重组并转化大肠杆菌JM105,重组菌在摇瓶中发酵并诱导表达,表达产量达菌体蛋白质总量的53%以上。发酵菌经超声破碎后得到包含体,经洗涤处理使包含体纯度达90%以上。用8mol/L盐酸胍溶解包含体后直接透析复性,复性液经Sephorose-SP离子交换层析,得到纯化的重组hIL-3,纯度达98%。用TF-1细胞进行体外检测活性,比活达到108单位/mg蛋白质。本研究为重组人白细胞介素-3的大规模生产提供了条件。 展开更多
关键词 人白细胞介素 表达 纯化 大肠杆菌
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高温高湿环境下犬肢体火器伤后细胞免疫学变化 被引量:8
9
作者 周祥吉 裴国献 +4 位作者 魏宽海 张旭辉 罗炳德 孙鸿涛 胡罢生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期297-299,共3页
为研究高温高湿环境下犬肢体火器伤后的细胞免疫学变化 ,将 18只杂种犬随机分为常温常湿组、高温高湿组、热习服组 ,用流式细胞仪荧光抗体技术检测犬肢体枪伤后外周血淋巴细胞表面CD4 + 、CD8+ 、CD11a+ 、CD11b+ 亚群及中性粒细胞表面C... 为研究高温高湿环境下犬肢体火器伤后的细胞免疫学变化 ,将 18只杂种犬随机分为常温常湿组、高温高湿组、热习服组 ,用流式细胞仪荧光抗体技术检测犬肢体枪伤后外周血淋巴细胞表面CD4 + 、CD8+ 、CD11a+ 、CD11b+ 亚群及中性粒细胞表面CD11a、CD11b的表达情况。结果显示 ,高温高湿组伤后 1h淋巴细胞CD4 + 亚群表达水平短暂升高 ,随后下降 ,10h后明显降低 ;CD8+ 亚群 4h后表达水平显著增高 ,相应导致CD4 + /CD8+ 比值 8h后持续降低 ;CD11a+ 亚群 8h后降低 ,而CD11b+ 亚群的变化轻微 ;热习服能够增加CD4 + 的表达值 ,抑制CD8+ 大量表达。常温常湿组CD11a、CD11b在致伤后即刻以及伤后 4h显著增高 ;与常温常湿组比较 ,高温高湿组第 2峰表达水平显著增高 ,但下降时间提前 ;犬热习服后可以降低第 2峰的高度并且延长其平台期。提示高温高湿环境及火器伤等复合因素共同抑制了机体免疫功能 ,热习服则能减轻这些不利因素造成的损害 。 展开更多
关键词 高温高湿环境 肢体火器伤 细胞免疫学
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高温高湿环境下犬肢体火器伤后伤道病理学改变 被引量:6
10
作者 赵东升 裴国献 +4 位作者 魏宽海 孙鸿涛 罗炳德 王前 胡罢生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期289-292,F004,共5页
为研究高温高湿环境下犬肢体火器伤后伤道的病理学改变 ,将 8只犬随机分为高温高湿 (HHE)组和常温常湿 (NE)组 ,分别于火器伤后 4、8、12、2 4h进行大体和病理形态学观察 ,测定挫伤区、震荡区和震荡外区的ATP、ADP、AMP及能荷含量。结... 为研究高温高湿环境下犬肢体火器伤后伤道的病理学改变 ,将 8只犬随机分为高温高湿 (HHE)组和常温常湿 (NE)组 ,分别于火器伤后 4、8、12、2 4h进行大体和病理形态学观察 ,测定挫伤区、震荡区和震荡外区的ATP、ADP、AMP及能荷含量。结果发现 ,HHE组大体病理改变较NE组明显加重 ;光镜及电镜观察到HHE组各区肌肉纤维的病理变化均较NE组显著 ,且呈进行性加重 ,而NE组的震荡区及震荡外区 2 4h伤道组织病理变化均有减轻趋势。ATP在HHE组伤后 8、12、2 4h挫伤区及伤后 2 4h震荡区较NE组低。ADP在HHE组伤后 8h挫伤区及伤后 12、2 4h震荡区较NE组低。AMP在HHE组挫伤区 12h后明显高于NE组。HHE组伤后 8h震荡区及伤后 12、2 4h挫伤区能荷较NE组降低。说明高温高湿环境下肢体火器伤伤道肌肉组织病理损伤严重 ,且随时间的延长而逐渐加重 ;肌组织能量储备匮乏 ,且随时间延长能量储备显著下降 ;其处理更应强调及早、彻底的清创。 展开更多
关键词 高温高湿环境 肢体火器伤 伤道病理学改变
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微孢子虫一新种的描述及分子鉴定 被引量:6
11
作者 吴后波 吴英松 吴灶和 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期150-154,共5页
With the rapid development of aquaculture, the limit resulted from infective parasites is being significant. In a routine investigation of ocean fishery, a new species of fish parasitic microsporidium was found in the... With the rapid development of aquaculture, the limit resulted from infective parasites is being significant. In a routine investigation of ocean fishery, a new species of fish parasitic microsporidium was found in the abdominal cavity of Epinephelus akaara at Daya Wan in South China Sea in October, 2001. To our best knowledge this is the first report of parasitic microsporidium in groupers in the world. The type specimens were preserved in the South China Sea Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences.Through routine taxonomic detection, we placed it in the genus of Glugea, and named it Glugea epinephelus sp nov for it owns the obvious and representative characteristics of Glugea genus. However, the specie reported in the present study have significant differences compared to other microsporidiums belong to Glugea genus reported until now. Among the differences, it is most significant that the xenomas of Glugea epinephelus are black. For more validating the taxonomic position of the microsporidium, the SSUrRNA sequence of the pathogen was amplified using a specific pair primer. We compared the SSUrRNA sequences of Glugea epinephelus and that of other 15 species from GeneBank. The constructed homology tree and phylogenetic tree of these species displayed that there are highest homology between Glugea epinephelus and G. anomala, the type specie of Glugea genus, but exist relative significant genetic differences with Pleistophora typicalis, the type specie of Pleistophora genus and Loma salmonae, the type specie of Loma genus. As a result, we thought that the microsporidium was a new specie and belong to Glugea genus. 展开更多
关键词 微孢子虫病 养殖鱼类 高密度养殖 分子鉴定 寄生虫病 病原生物 养殖业 原因 描述 研究
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表达谱基因芯片 被引量:13
12
作者 徐伟文 李文全 毛裕民 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第6期822-826,共5页
表达谱基因芯片具有高通量、缩微、多参数、平行化等优点 .在功能基因组学研究中正发挥越来越重要的作用 .就其原理、应用。
关键词 表达谱基因芯片 基因表达谱 应用
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人离体骨肉瘤组织血管噬菌体肽库筛选模型的建立及其意义 被引量:3
13
作者 李中齐 史占军 +1 位作者 郝文波 吕海 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第3期212-214,共3页
目的建立人离体骨肉瘤血管亲和筛选模型。方法(1)建立模型。术前对患肢局部行数字减影造影检查,标记肿瘤固有动脉大致走行,术后小心修剪,并连接类似于Langendorff的灌流装置,监控模型血管内的pH值、温度、氧分压等;(2)对噬菌体十二肽库... 目的建立人离体骨肉瘤血管亲和筛选模型。方法(1)建立模型。术前对患肢局部行数字减影造影检查,标记肿瘤固有动脉大致走行,术后小心修剪,并连接类似于Langendorff的灌流装置,监控模型血管内的pH值、温度、氧分压等;(2)对噬菌体十二肽库进行筛选。结果28例骨肉瘤离体标本均建模成功,可直接用于灌流实验,并筛选出具有较高特异性的亲和短肽(基序为RLTR),各项指标显示离体骨肉瘤较好模拟了人体内的环境。结论建立人离体骨肉瘤血管亲和筛选模型是可行的,可直接用于对噬菌体随机肽库的亲和筛选,为骨肉瘤的靶向化疗提供参考。 展开更多
关键词 噬菌体 肽库 骨肉瘤 体内生物淘筛 亲和筛选模型
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乙型肝炎病毒全基因在肝癌细胞中的转染与表达 被引量:5
14
作者 倪宏 骆抗先 +4 位作者 朱幼芙 张明霞 吴英松 马佩球 朱科伦 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第7期501-502,共2页
目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)复制状态模型。方法 体外连接HBV DNA获得6.4 kb的双拷贝DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的Eco RV位点,通过聚合酶链反应(PCR)和酶切筛选获得头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质粒,再通过脂质体... 目的 建立乙型肝炎病毒(HBV)复制状态模型。方法 体外连接HBV DNA获得6.4 kb的双拷贝DNA片段,然后将其插入pcDNA3载体的Eco RV位点,通过聚合酶链反应(PCR)和酶切筛选获得头尾串联双拷贝HBV全基因重组真核表达质粒,再通过脂质体介导法转染肝癌细胞。结果 通过G418筛选,对阳性克隆细胞进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western免疫印迹分析,证明已将HBV全基因重组真核表达质粒转染至肝癌细胞并获得稳定表达。结论 通过脂质体介导法将HBV全基因转染至肝癌细胞,成功建立了HBV复制状态的细胞模型。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 基因重组 基因转染 基因表达 肝癌
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酸性鞘磷脂水解酶和MAPK信号通路在UVA诱导细胞凋亡中的作用 被引量:6
15
作者 袁长青 丁振华 +2 位作者 杜华 凌朝辉 马树东 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期540-544,共5页
为了探讨酸性鞘磷脂水解酶 (ASM)和MAPK信号通路在UVA诱导的细胞凋亡中的作用 ,用DNA梯形条带 (DNAladder)和荧光显微镜鉴定细胞凋亡 ,Western印迹分析MAPK信号通路的激活情况 .结果显示 :①经UVA照射 ,正常的淋巴母细胞JY出现严重的细... 为了探讨酸性鞘磷脂水解酶 (ASM)和MAPK信号通路在UVA诱导的细胞凋亡中的作用 ,用DNA梯形条带 (DNAladder)和荧光显微镜鉴定细胞凋亡 ,Western印迹分析MAPK信号通路的激活情况 .结果显示 :①经UVA照射 ,正常的淋巴母细胞JY出现严重的细胞凋亡 ,而ASM遗传性缺陷的淋巴母细胞MS1 4 1 8出现轻微凋亡 ;给予ASM特异性抑制剂NB6 ,UVA诱导的JY细胞凋亡明显减轻 ,表明UVA诱导的细胞凋亡依赖于ASM .②UVA照射后 ,磷酸化ERK含量在MS1 4 1 8细胞中明显升高 ,在JY细胞中受到抑制 ;UVA照射前给予NB6 ,JY细胞中磷酸化ERK含量上升 ,表明ASM能抑制ERK的激活 .③UVA照射后 ,磷酸化JNK含量在MS1 4 1 8细胞中几乎没有变化 ,而在JY细胞中含量升高 ;UVA照射前给予NB6 ,JY细胞中磷酸化JNK含量没有明显升高 ,表明ASM激活JNK通路 .④NB6对UVA激活的p38MAPK信号通路没有影响 ,表明p38的激活与ASM关系不大 .研究表明 ,UVA诱导的细胞凋亡是通过激活ASM。 展开更多
关键词 紫外辐射 细胞凋亡 酸性鞘磷脂水解酶 MAPK信号通路
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恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶的表达及免疫活性鉴定 被引量:2
16
作者 李林海 李明 +2 位作者 吴英松 王萍 田泽维 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第10期883-887,共5页
目的在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性。方法采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)GDH基因,双酶切后克隆入pGEX-4T-1载体中进行诱导表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制... 目的在大肠杆菌中表达恶性疟原虫谷氨酸脱氢酶(GDH)与谷胱甘肽S-转移酶融合蛋白,测定重组蛋白的免疫活性。方法采用PCR方法特异性扩增恶性疟原虫(海南株)GDH基因,双酶切后克隆入pGEX-4T-1载体中进行诱导表达,重组蛋白纯化后免疫小鼠制备特异性血清,并用琼脂双向扩散法检测效价,ELISA、Western blotting检测重组抗原的免疫活性。结果获到了重组表达的抗原蛋白,表达产物能与鼠抗恶性疟原虫血清发生特异反应,并能诱导小鼠产生特异性体液免疫应答,免疫琼脂扩散法检测抗体滴度为1∶16。结论恶性疟原虫GDH在大肠杆菌中获得高效表达且表达产物具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 疟原虫 恶性 谷氨酸脱氢酶 免疫活性
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恶性疟原虫保护性抗原复合基因痘苗病毒重组活疫苗株在换人血猕猴模的抗攻击试验 被引量:2
17
作者 董文其 李明 +3 位作者 毕惠祥 李英杰 吴军 曲利芝 《中国免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第5期271-274,共4页
探讨恶性疟原虫保护性抗原复合基因 痘苗病毒重组活疫苗候选株在实验动物的抗疟原虫攻击能力 ,为下一步进入夜猴及人体试验奠定基础。方法 :利用多次部分换人血猕猴模经静脉输血法进行了抗疟原虫红内期虫体的攻击试验。结果 :在免疫后 ... 探讨恶性疟原虫保护性抗原复合基因 痘苗病毒重组活疫苗候选株在实验动物的抗疟原虫攻击能力 ,为下一步进入夜猴及人体试验奠定基础。方法 :利用多次部分换人血猕猴模经静脉输血法进行了抗疟原虫红内期虫体的攻击试验。结果 :在免疫后 1个月攻虫 ,重组痘苗病毒免疫猴从第 3天一直到第 12d的采血检查中均未发现疟原虫 ;非重组痘苗病毒(对照病毒 )免疫猴第 3天后原虫感染率上升 ,第 6天原虫感染率最高达到 6 .0 % ,而后原虫感染率逐渐下降 ,原虫持续时间为13天 ;空白对照猴第 3天后原虫感染率也上升 ,第 8天原虫感染率最高达到 2 .5 % ,而后原虫感染率逐渐下降 ,原虫持续出现时间为 12d。结论 :初步说明该候选疫苗株具有一定的抗恶性疟原虫红内期虫体攻击的能力。 展开更多
关键词 恶性疟原虫 痘苗病毒 疫苗 抗攻击试验
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恶性疟原虫海南、云南、安徽株裂殖子表面抗原MSA2基因的克隆和序列分析 被引量:2
18
作者 李明 谢毅 +2 位作者 李英杰 任大明 毕惠祥 《第一军医大学学报》 CSCD 1995年第2期94-98,共5页
应用PCR技术扩增并克隆了恶性疟原虫海南、云南、安徽三个地理株的MSA2基因,测定并分析了全基因序列。结果表明,海南、云南、安徽株MSA2基因序列完全相同,全长为795bp,编码264个氨基酸,与FCQ-27/PNG... 应用PCR技术扩增并克隆了恶性疟原虫海南、云南、安徽三个地理株的MSA2基因,测定并分析了全基因序列。结果表明,海南、云南、安徽株MSA2基因序列完全相同,全长为795bp,编码264个氨基酸,与FCQ-27/PNG株MSA2高度同源。对抗原表位进行多参数综合分析表明,我国虫株除具有国外已确定的抗原表位STNS、DTPTATE外,在第53—72位氢基酸间可能具有一个新的抗原表位。 展开更多
关键词 疟原虫 裂殖子 表面抗原 基因序列分析 MSA2
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内含子和5'非翻译区对人血小板生成素基因表达的影响 被引量:3
19
作者 宁云山 李妍 +3 位作者 周明乾 李明 曾溢滔 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第9期991-994,共4页
目的观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5'非翻译区对TPO表达的影响。方法分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO 真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量... 目的观察人血小板生成素(TPO)基因组中内含子及5'非翻译区对TPO表达的影响。方法分别构建含TPO基因组中不同内含子的各类TPO 真核表达质粒,在cos-1细胞中进行了瞬间表达,并采用高灵敏定量试剂盒检测培养上清中人血小板生成素的含量。结果在转染48 h后,各类TPO重组质粒在cos-1细胞中表达顺序为:TPO intron v> TPOcDNA>ΔTPO intron I> TPO intron I> TPO gDNA。结论在TPO基因组中,最后一个内含子可显著提高TPO的表达水平,表明其可能含有特殊的增强序列;同时进一步证实,在TPO基因组中可能存在抑制TPO高水平表达的结构元件,造成TPO基因组在细胞中不表达或低水平表达。 展开更多
关键词 血小板生成素 内含子 基因表达
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丙型肝炎病毒整个开放阅读框序列的克隆及各组分蛋白的表达 被引量:1
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作者 吴娴波 吴英松 +2 位作者 张彦明 董文其 李明 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期581-583,共3页
目的在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白。方法将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后,构建重组质粒pVHCV。重组质粒转染BHK21细胞后,再用痘苗病毒vTF7-3株感染,培养48 h后收集细胞。Western blotting... 目的在痘苗系统中表达丙型肝炎病毒(HCV)各组分蛋白。方法将编码HCV大前体蛋白的开放阅读框(ORF)序列克隆至痘苗启动子后,构建重组质粒pVHCV。重组质粒转染BHK21细胞后,再用痘苗病毒vTF7-3株感染,培养48 h后收集细胞。Western blotting和免疫荧光技术鉴定HCV非结构蛋白NS3和NS5a的表达情况。结果Western blotting结果表明,在细胞中检测到相对分子质量为70 000 (NS3)和58 000 (Ns5a)的两条带;免疫荧光试验结果表明,无论采用抗NS3 单抗还是抗NS5a 单抗,大部分转染质粒细胞的细胞质中都具有较强的荧光反应。结论HCV非结构蛋白NS3和NS5a在BHK21细胞中得到表达。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 开放阅读框 克隆 表达 非结构蛋白
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