分子与细胞免疫学C1q和抗C1qR　mAb抑制U937细胞产生TNF－α 被引量：5

1

作者 陈政良 谢佩蓉 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1996年第4期203-207,共5页

人Ｍ　系Ｕ９３７细胞可在ＰＭＡ／ＬＰＳ诱导下产生ＴＮＦ－α。这种ＴＮＦ－α的诱生可被Ｃ１ｑ以剂量依赖方式所抑制，而且多聚Ｃ１ｑ的抑制作用比单体Ｃ１ｑ强约１０倍。将Ｃ１ｑ热灭活或加入抗人Ｃ１ｑＦ（ａｂ＇）２，Ｃ１ｑ的抑... 人Ｍ　系Ｕ９３７细胞可在ＰＭＡ／ＬＰＳ诱导下产生ＴＮＦ－α。这种ＴＮＦ－α的诱生可被Ｃ１ｑ以剂量依赖方式所抑制，而且多聚Ｃ１ｑ的抑制作用比单体Ｃ１ｑ强约１０倍。将Ｃ１ｑ热灭活或加入抗人Ｃ１ｑＦ（ａｂ＇）２，Ｃ１ｑ的抑制作用即消失，证实该作用是Ｃ１ｑ特异的。此外，抗人Ｃ１ｑＲｍＡｂＥ８能模拟Ｃ１ｑ诱导类似的抑制效应。这些资料揭示了Ｃ１ｑ／Ｃ１ｑＲ系统的一项新功能，提供了该系统与细胞因子网络联系的直接证据。 展开更多

关键词 C1Q C1q受体 肿瘤坏死因子 U937细胞

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丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合多表位抗原基因与谷胱甘肽转硫酶基因的融合表达及其在小鼠中免疫应答的研究 被引量：4

2

作者 黄建生 钟雄林 +7 位作者 毕惠祥 董文其 张潜 解咏梅 袁纪军 李安康 董宁 任大明 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第6期250-253,共4页

目的：探讨复合多表位丙型肝炎病毒（ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）及恶性疟原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ，Ｐｆ）双价疫苗的可行性。方法：将人工合成的复合多表位ＨＣＶ基因ＰＣＸ及Ｐｆ抗原基因ＡＢ... 目的：探讨复合多表位丙型肝炎病毒（ＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓ，ＨＣＶ）及恶性疟原虫（Ｐｌａｓｍｏｄｉｕｍｆａｌｃｉｐａｒｕｍ，Ｐｆ）双价疫苗的可行性。方法：将人工合成的复合多表位ＨＣＶ基因ＰＣＸ及Ｐｆ抗原基因ＡＢ（ＳＰｆ６６＋ＳＰｆ１０５）克隆到谷胱甘肽转硫酶（ＧｌｕｔａｔｈｉｏｎｅＳｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ，ＧＳＴ）表达载体ｐＧＥＸ２Ｔ中，并在大肠杆菌中高效表达ＧＳＴＨＣＶＰｆ复合抗原（ＧＳＴＣＡＢ），分析表达产物的免疫特异性、免疫原性及安全性。结果：ＧＳＴＣＡＢ可被ＨＣＶ患者血清、鼠抗ＧＺＰＣＸ及鼠抗Ｐｆ抗体特异识别，可诱发小鼠产生针对ＧＳＴＣＡＢ、ＧＺＰＣＸ及ＰｆＡｇ的特异性体液免疫应答及针对ＧＳＴＣＡＢ、ＧＺＰＣＸ的迟发性超敏反应，免疫后ＣＤ８＋Ｔ细胞比例略为升高，免疫小鼠未见明显的毒副作用。结论：ＧＳＴＣＡＢ融合蛋白具有良好的ＨＣＶ及Ｐｆ免疫特异性，可诱发理想的体液及细胞免疫应答，可望成为ＨＣＶＰｆ双价疫苗的候选抗原。 展开更多

关键词 丙型肝炎 恶性疟原虫 免疫应答 融合表达

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反义IGF-I基因对人7402肝癌细胞肿瘤免疫原性影响的研究 被引量：1

3

作者 张力 王小宁 李树浓 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1996年第4期285-288,共4页

本研究利用基因治疗方法中的反义技术,通过脂质体包裹反义胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因导入人7402肝癌细胞株,研究肿瘤细胞表面MHC分子的表达和其对LAK细胞杀伤的敏感性。结果表明,反义IGF-I基因转染的人7402肝癌细胞,经潮霉素筛选后,... 本研究利用基因治疗方法中的反义技术,通过脂质体包裹反义胰岛素样生长因子-I(IGF-I)基因导入人7402肝癌细胞株,研究肿瘤细胞表面MHC分子的表达和其对LAK细胞杀伤的敏感性。结果表明,反义IGF-I基因转染的人7402肝癌细胞,经潮霉素筛选后,Northern Blot分析显示反义IGF-I RNA表达阳性,MHC Ⅰ类和Ⅱ类抗原的表达水平高于亲本7402细胞。LAK细胞对反义IGF-I基因转染的人7402肝癌细胞的杀伤活性明显高于亲本7402细胞组(P<0.05)。说明反义IGF-I基因转移至该肝癌细胞,可提高肿瘤的MHC Ⅰ类和Ⅱ类分子的表达,显示肿瘤细胞的免疫原性增强,并可提高LAK细胞对其杀伤的敏感性。 展开更多

关键词 反义IGF-I基因 人7402肝癌细胞 肿瘤免疫原性 影响

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C型凝集素的免疫功能 被引量：8

4

作者 陈政良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1997年第A02期34-37,共4页

哺乳类Ｃ型凝集素是一个超家族，根据其糖识别域的一级结构分为６个家族，每一家族的成员具有类似的分子结构和生物学功能。其中胶原凝素、选凝素、Ⅱ型淋巴细胞受体及巨噬细胞甘露糖受体等４个家族分子在抗感染、抗肿瘤、抗原提呈、免... 哺乳类Ｃ型凝集素是一个超家族，根据其糖识别域的一级结构分为６个家族，每一家族的成员具有类似的分子结构和生物学功能。其中胶原凝素、选凝素、Ⅱ型淋巴细胞受体及巨噬细胞甘露糖受体等４个家族分子在抗感染、抗肿瘤、抗原提呈、免疫调节。 展开更多

关键词 C型凝集素 免疫功能 胶原凝素 选凝素

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体外LAK细胞杀伤人直肠腺癌细胞时微管蛋白变化的免疫荧光研究 被引量：1

5

作者 丁彦青 张进华 +2 位作者 李春德 王小宁 罗荣成 《第一军医大学学报》 CSCD 1993年第1期20-23,共4页

应用免疫荧光细胞化学方法观察了体外LAK细胞杀伤人直肠腺癌细胞(HR8348)时效靶细胞内微管蛋白的变化。结果表明,LAK细胞与靶细胞相互接触形成效靶复合体后,两种细胞胞浆内微管蛋白出现重排现象。LAK细胞内的微管蛋白全部集中在两类细... 应用免疫荧光细胞化学方法观察了体外LAK细胞杀伤人直肠腺癌细胞(HR8348)时效靶细胞内微管蛋白的变化。结果表明,LAK细胞与靶细胞相互接触形成效靶复合体后,两种细胞胞浆内微管蛋白出现重排现象。LAK细胞内的微管蛋白全部集中在两类细胞质膜接触处,呈月芽状分布。靶细胞内的微管蛋白在效靶复合体质膜接触处浓集成斑块状并与LAK细胞的月芽状结构融合,靶细胞逐渐变性坏死。这提示,靶细胞的溶解可能与效靶细胞的微管重排有关。 展开更多

关键词 细胞化学 直肠肿瘤 自然杀伤细胞

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LAK细胞杀伤直肠腺癌细胞时酶细胞化学定量观察

6

作者 丁彦青 蔡俊杰 +4 位作者 张进华 李春德 朱梅刚 王小宁 罗荣城 《第一军医大学学报》 CSCD 1993年第2期96-99,共4页

采用酶细胞化学技术及MIAS—300型图象分析仪观察了LAK细胞杀伤HR8348细胞不同时间的效靶细胞内SDH和AcPase的变化。结果显示:①效靶细胞共育不同时间的HR8348细胞内AcPase均明显高于对照组,并随时间延长,AcPase含量增加。靶细胞内SDH... 采用酶细胞化学技术及MIAS—300型图象分析仪观察了LAK细胞杀伤HR8348细胞不同时间的效靶细胞内SDH和AcPase的变化。结果显示:①效靶细胞共育不同时间的HR8348细胞内AcPase均明显高于对照组,并随时间延长,AcPase含量增加。靶细胞内SDH含量在共育30、60min时明显增加,90min后逐渐下降。②LAK细胞内AcPaSe在60、90、120min时酶含量较高,与对照组相比有非常显著的统计学差异(P<0.01)。SDH在效靶共育60,90,120,180、240min时含量明显增高,与对照组相比差异非常显著(P<0.01)。效靶细胞内AcPase、SDH含量变化说明两种细胞功能非常活跃。效靶细胞接触早期靶细胞内SDH变化可能与靶细胞抵御损伤而表现出细胞功能活跃有关。靶细胞内AcPase含量增加,是靶细胞内溶酶体活化的表现,是靶细胞自溶的物质基础。 展开更多

关键词 腺癌 杀伤细胞 直肠肿瘤

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巨噬细胞在MIF基因修饰瘤苗诱导小鼠抗肿瘤免疫中的作用 被引量：5

7

作者 刘艳君 田野苹 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2000年第1期35-38,共4页

目的：研究巨噬细胞游走抑制因子（ＭＩＦ）基因修饰的瘤苗诱导抗肿瘤免疫反应的机理。方法：ＭＩＦ基因修饰的ＦＢＬ３瘤苗小鼠免疫后，观察腹腔巨噬细胞数量和功能的变化。结果：ＭＩＦ基因修饰的瘤苗免疫后，小鼠腹腔巨噬细胞的数量... 目的：研究巨噬细胞游走抑制因子（ＭＩＦ）基因修饰的瘤苗诱导抗肿瘤免疫反应的机理。方法：ＭＩＦ基因修饰的ＦＢＬ３瘤苗小鼠免疫后，观察腹腔巨噬细胞数量和功能的变化。结果：ＭＩＦ基因修饰的瘤苗免疫后，小鼠腹腔巨噬细胞的数量，表面免疫相关分子的表达，以及ＴＮＦ－α和ＮＯ的分泌水平增高，吞噬功能、杀伤活性和抗原提呈功能增强。结论： ＭＩＦ基因修饰的瘤苗体内免疫后，其分泌的ＭＩＦ显著增强了巨噬细胞的功能，被活化的巨噬细胞在瘤苗诱导机体抗肿瘤免疫中起重要的作用。 展开更多

关键词 巨噬细胞 MIF基因 基因修饰 小鼠

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GGC54GAC MBL突变体的构建 被引量：8

8

作者 陈政良 卢晓 +1 位作者 张丽芸 韩强涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期260-262,265,共4页

目的 :在人甘露聚糖结合凝集素 (MBL)基因中引入GGC5 4GAC点突变。方法 :设计上下游引物和诱变引物 ,以汉族人野生型MBLcDNA为模板 ,采用megaprimer PCR技术进行定点突变 ,将PCR产物克隆至pGEM T载体 ,酶切和测序分析。结果 :以上游引... 目的 :在人甘露聚糖结合凝集素 (MBL)基因中引入GGC5 4GAC点突变。方法 :设计上下游引物和诱变引物 ,以汉族人野生型MBLcDNA为模板 ,采用megaprimer PCR技术进行定点突变 ,将PCR产物克隆至pGEM T载体 ,酶切和测序分析。结果 :以上游引物和诱变引物进行第一轮PCR ,获得一约 180bp的DNA片段 ,以此片段和下游引物行第二轮PCR扩增 ,得到一长约 780bp的产物 ;将其克隆至pGEM T载体 ,酶切发现第 5 4位密码中的BanI酶切位点已被破坏 ,与计算机酶切图谱分析结果一致 ;序列分析表明 ,除第 5 4位密码变为GAC外 ,余与野生型MBLcDNA完全相同。结论 :构建成功了GGC5 4GACMBL突变体 。 展开更多

关键词 甘露聚糖结合凝集素 GGC54GAC突变体 定点突变 MBL

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中国广东地区汉族人MHC补体单倍型的分析 被引量：7

9

作者 陈仁馨 黄为民 +1 位作者 聂晓波 刘新 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第4期205-207,共3页

用国际补体参考实验室方法。首次对广东地区正常汉族家系126条染色体作了补体单倍型检测与分析。共发现18个补体单倍型,居前四位者为SC31、SC42、SC32、和SC41。其中有7个型呈连锁不平衡。4个位点等位基因分别是BF、C2、C4A、C4B。BF 以... 用国际补体参考实验室方法。首次对广东地区正常汉族家系126条染色体作了补体单倍型检测与分析。共发现18个补体单倍型,居前四位者为SC31、SC42、SC32、和SC41。其中有7个型呈连锁不平衡。4个位点等位基因分别是BF、C2、C4A、C4B。BF 以BFS;C2以C2C;C4A以C4A3和C4A4;C4B 以C482和C481频率居高。C4AQO 占4.8%,C4BQO 占1.2%,本文主要补体单倍型频率和黄、白人种接近。和日本人及东南亚地区民族接近。但和黑种人差异较大。并对地区间频率差异意义做了讨论。 展开更多

关键词 补体 单倍型 MHC 广东地区 汉族

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PcDNA4/His C-MBL表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达 被引量：11

10

作者 白志军 张丽芸 +2 位作者 林佐贤 卢晓 陈政良 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第8期859-863,共5页

目的构建PcDNA4/HisC-MBL表达载体,在哺乳细胞中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)。方法应用PCR从含有中国人野生型MBLcDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至PcDNA4/HisC真核表达载体。经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO细... 目的构建PcDNA4/HisC-MBL表达载体,在哺乳细胞中表达人甘露聚糖结合凝集素(MBL)。方法应用PCR从含有中国人野生型MBLcDNA的质粒pGEM-MBL中扩增目的基因片段,将其克隆至PcDNA4/HisC真核表达载体。经酶切及测序鉴定后,以电穿孔法转染CHO细胞,以RT-PCR分析其mRNA表达,通过Ni-NTA琼脂糖柱层析纯化目的蛋白并以SDS-PAGE和Western-blotting鉴定,以其为免疫原免疫小鼠后取鼠血清进行ELISA检测分析目的蛋白的免疫活性。结果从pGEM-MBL中扩增得到约750bp的cDNA片段,构建成重组载体经酶切出现约5100和750bp片段,测序鉴定与预期的完全一致。RT-PCR证实转染细胞有MBLmRNA表达,纯化蛋白经SDS-PAGE电泳可见约29000、58000和87000条带,其中29000蛋白带可与6-His抗体反应。纯化蛋白免疫小鼠所获抗血清ELISA效价是1∶819200,与天然人MBL和重组MBL三聚体糖识别域反应的ELISA效价均为1∶25600。结论获得了表达中国人MBL的CHO细胞株和重组人MBL,为MBL分子的进一步研究提供了条件。 展开更多

关键词 甘露聚糖结合凝集素 表达载体 CHO细胞

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Th1/Th2细胞在慢性乙型肝炎病毒感染中的作用 被引量：16

11

作者 姜荣龙 卢桥生 +5 位作者 郭亚兵 侯金林 冯筱榕 章廉 骆抗先 富宁 《第一军医大学学报》 CSCD 2000年第2期103-105,共3页

目的了解慢性ＨＢＶ感染者外周血单核细胞（ＰＤＭＣ）中ＣＤ４~＋Ｔ细胞内ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ的表达情况，以测定Ｔｈ０／Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞的百分数，探明Ｔｈ１、Ｔｈ２细胞在慢性ＨＢＶ感染中的作用。方法常规分离ＰＢＭＣ，在... 目的了解慢性ＨＢＶ感染者外周血单核细胞（ＰＤＭＣ）中ＣＤ４~＋Ｔ细胞内ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ的表达情况，以测定Ｔｈ０／Ｔｈ１／Ｔｈ２细胞的百分数，探明Ｔｈ１、Ｔｈ２细胞在慢性ＨＢＶ感染中的作用。方法常规分离ＰＢＭＣ，在ＰＭＡ、ｉｏｎｏｍｙｃｉｎ、莫能菌素的刺激下，采用流式细胞检测（ＦＡＣＳ）对慢性ＨＢＶ感染者ＰＢＭＣ中ＣＤ４~＋Ｔ细胞内ＩＬ－４和ＩＦＮ－γ表达进行分析。结果正常对照组，２．３％－１８.６％的ＣＤ４~＋Ｔ细胞为Ｔｈ１细胞，０.９％－９．２％为Ｔｈ２细胞；在慢性ＨＢＶ感染者外周血单个ＣＤ４~＋Ｔ细胞中，以Ｔｈ０细胞居多：而Ｔｈ１细胞则随着慢性乙型肝炎肝脏炎症活动的加剧而明显增多，在炎症活动明显的慢性乙型肝炎患者中，Ｔｈ１细胞百分数明显高于炎症活动呈静止状态的慢性乙型肝炎；Ｔｈ２细胞在慢性ＨＢＶ感染的不同阶段则较为恒定，但明显高于对照组。结论Ｔｈ１细胞与炎症活动呈正相关，Ｔｈ２细胞可能与ＨＢＶ感染的慢性化相关联。 展开更多

关键词 慢性乙型肝炎 TH1/TH2细胞 IL-4 IFN-Γ

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广东地区汉族人MBL基因启动子区SNP的研究 被引量：5

12

作者 吕成伟 陈政良 +1 位作者 刁志宏 王方勇 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第11期1165-1168,共4页

目的研究广东汉族人群甘露聚糖结合凝集素(MBL) 基因启动子单核苷酸多态性(SNP) 。方法抽提人外周血白细胞基因组DNA,建立SSP-PCR及分子灯塔实时荧光PCR技术,检测MBL基因启动子区SNP位点-550(G/C,称H/L等位基因) 、-220(G/C,X/Y等位基... 目的研究广东汉族人群甘露聚糖结合凝集素(MBL) 基因启动子单核苷酸多态性(SNP) 。方法抽提人外周血白细胞基因组DNA,建立SSP-PCR及分子灯塔实时荧光PCR技术,检测MBL基因启动子区SNP位点-550(G/C,称H/L等位基因) 、-220(G/C,X/Y等位基因) 和+4(C/T,P/Q等位基因),分析其单倍型及基因型频率。结果从167人中检出等位基因型LYP/LYP 10例(5.9%)、HYP/LYQ 7例(4.2%)、LYP/LYQ 94例(56.3%)、LXP/LXP 6例(3.6%)、LYQ/LYQ 4例(2.4%)、LXP/LYQ 29例(17.4%)、HYP/LYP 3例(1.8%)、HYP/LXP 2例(1.2%)、HYP/HYP 12例(7.2%)。结论广东地区汉族人群MBL基因启动子区SNP等位基因型以LYP/LYQ和LXP/LYQ为主。 展开更多

关键词 广东地区 汉族 MBL 基因启动子区 SNP 甘露聚糖结合凝集素

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从噬菌体环肽库中筛选TNF-α表位模拟肽的研究 被引量：3

13

作者 罗海波 刘北一 +2 位作者 刘艳君 朱平 富宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期322-325,共4页

目的 :用具有中和活性的抗TNF α单抗 (mAb)J1D9筛选噬菌体环七肽库 ,从中获得可模拟TNF α表位的短肽。方法 :筛选TNF α表位模拟肽 ,并用夹心ELISA法鉴定阳性克隆。结果 :对环七肽库进行 3轮筛选后 ,随机挑选 2 0个噬菌体克隆 ,经ELIS... 目的 :用具有中和活性的抗TNF α单抗 (mAb)J1D9筛选噬菌体环七肽库 ,从中获得可模拟TNF α表位的短肽。方法 :筛选TNF α表位模拟肽 ,并用夹心ELISA法鉴定阳性克隆。结果 :对环七肽库进行 3轮筛选后 ,随机挑选 2 0个噬菌体克隆 ,经ELISA鉴定出 9个阳性克隆。DNA序列分析后 ,推导的氨基酸序列共 3种 :c RRPAQSG c、c NKHNRKI c和c RGMSRKI c。结论 :筛选的环七肽克隆展示肽具有TNF α的抗原性 ,为TNF 展开更多

关键词 噬菌体肽库 TNF—α 表位模拟肽

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钙离子载体诱导人外周血单个核细胞向树突状细胞分化的信号转导 被引量：2

14

作者 吴军 杨德懋 +4 位作者 杨太成 王晓怀 王捷 陈政良 富宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期540-543,共4页

目的 :初步探讨钙离子载体 (calciumionophore,CI)诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)向树突状细胞 (DC)分化的细胞信号转导途径。方法 :分离健康献血者的PBMC ,加入rhGM CSF及A2 3187各 10 0 μg/L ,部分细胞预先用W 7(10 μmol/L)或CsA(0 ... 目的 :初步探讨钙离子载体 (calciumionophore,CI)诱导人外周血单个核细胞 (PBMC)向树突状细胞 (DC)分化的细胞信号转导途径。方法 :分离健康献血者的PBMC ,加入rhGM CSF及A2 3187各 10 0 μg/L ,部分细胞预先用W 7(10 μmol/L)或CsA(0 .5mg/L)或KT5 92 6 (1μmol/L)处理 30min后 ,再加入rhGM CSF及A2 3187各 10 0 μg/L。体外培养 4 0h后 ,于相差显微镜下观察细胞的形态 ;流式细胞仪检测细胞的表面标志 ;用MTT比色法检测上述细胞刺激同种异体T细胞的增殖作用。结果 :与 10 0 μg/L的A2 3187及rhGM CSF共同培养 4 0h的健康献血者的PBMC ,出现典型的树突状突起 ,同时CD83、CD80及CD86分子的表达上调 ,CD14分子的表达下调 ,刺激同种异体T细胞增殖的能力增强 ;而预先用W 7或CsA或KT5 92 6处理 30min后、再给予rhGM CSF及A2 3187处理的PBMC ,其形态、表面标志物及对T细胞的刺激增殖能力 ,均不同程度的受到抑制。结论 :CI诱导的PBMC向DC的分化 ,可能受控于Ca2 + 展开更多

关键词 钙离子载体 树突状细胞 细胞信号转导 外周血单个核细胞

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反义IGF-I基因转染人肝癌细胞分泌CEA和AFP水平的研究 被引量：6

15

作者 张力 李树浓 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期411-414,共4页

本研究利用基因治疗方法中的反义RNA技术，通过脂质体包裹反义胰岛素样生长因子－I（IGF－I）基因导入人HepG2肝癌细胞株，NorthernBlot分析显示反义IGF－IRNA表达阳性。研究反义IGF－I基因转染的HePG2细胞分泌CEA和AFP的水平，放射性... 本研究利用基因治疗方法中的反义RNA技术，通过脂质体包裹反义胰岛素样生长因子－I（IGF－I）基因导入人HepG2肝癌细胞株，NorthernBlot分析显示反义IGF－IRNA表达阳性。研究反义IGF－I基因转染的HePG2细胞分泌CEA和AFP的水平，放射性同位素的测定结果表明细胞培养上清中的CEA的水平显著地低于亲本细胞（P＜0．05），而分泌AFP的水平更显著地低于亲本细胞（P＜0．01）。预示着阳性克隆细胞的恶性程度低于亲本细胞，细胞内原有的生物学过程发生改变。 展开更多

关键词 肝肿瘤 反义IGF-I 基因转染 癌胚抗原 甲胎蛋白

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分步低速离心法快速分离纯化瘤细胞和肿瘤浸润淋巴细胞 被引量：7

16

作者 温汉平 王小宁 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第3期165-165,177,共2页

从临床实体瘤或胸腹水中分离得到的瘤细胞悬液中,既含大量瘤细胞,又含有肿瘤浸润淋巴细胞、单核细胞、组织细胞等。如何简便快速分离、纯化瘤细胞和淋巴细胞用于不同目的。

关键词 肿瘤 淋巴细胞 离心法

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大肠杆菌脂多糖2630模拟位的研究 被引量：2

17

作者 罗海波 郑山根 +1 位作者 朱平 富宁 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期682-685,共4页

目的 :利用纯化的抗大肠杆菌L2 6 30多抗筛选噬菌体环七肽库 ,以获得可模拟脂多糖 (LPS)表位的短肽克隆。方法 :以亲和层析纯化的抗大肠杆菌L2 6 30多克隆抗体为靶分子 ,筛选噬菌体随机环七肽库 ,用双夹心ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性... 目的 :利用纯化的抗大肠杆菌L2 6 30多抗筛选噬菌体环七肽库 ,以获得可模拟脂多糖 (LPS)表位的短肽克隆。方法 :以亲和层析纯化的抗大肠杆菌L2 6 30多克隆抗体为靶分子 ,筛选噬菌体随机环七肽库 ,用双夹心ELISA和竞争抑制ELISA鉴定阳性噬菌体克隆的抗原性。结果 :对噬菌体环肽库进行 3轮筛选后 ,随机挑选 2 0个克隆 ,经鉴定其中 12个可与抗L2 6 30抗体结合 ,即为阳性克隆 ;其中有 5个阳性噬菌体克隆表现出与抗鼠伤寒沙门氏菌LPS多抗结合的活性 ,提示这 5个噬菌体展示的短肽具有模拟大肠杆菌LPS及鼠伤寒沙门氏菌LPS共同表位的性质。经DNA序列分析显示 ,其中 8个克隆的氨基酸序列具有X DGLL XX或X EDGLL X保守序列 ,其余 4个克隆的序列均不相同。结论 :筛选获得的噬菌体环七肽克隆具有模拟大肠杆菌LPS表位的活性 ,为大肠杆菌L2 6 30多表位模拟短肽。其中 展开更多

关键词 脂多糖 模拟肽 噬菌体肽库

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人血小板生成素基因cDNA和基因组DNA的克隆和序列测定 被引量：2

18

作者 宁云山 周宏伟 +4 位作者 周明乾 陈泽洪 方向东 富宁 王小宁 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第12期881-884,共4页

目的研究内含子和5＇非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ～Ⅳ和内含子Ⅴ... 目的研究内含子和5＇非翻译区对血小板生成素(TPO)基因表达的影响.方法以中国人胎肝mRNA为模板,应用RT-PCR和长距离PCR(LD-PCR)技术扩增了约1.1kb的全长人TPO cDNA.6.2 kb的TPO基因组DNA和TPO基因组中的内含子I,内含子Ⅱ～Ⅳ和内含子Ⅴ.结果全序列分析表明,全部的编码序列、所有的内含子/外显子剪切部位序列同已知一致,个别差异发生在内含子中.结论通过PCR扩增技术,成功地从中国人胎肝组织中克隆了全长人TPO cDNA、TPO基因组DNA及其全部的内含子. 展开更多

关键词 血小板生成素 基因组DNA 内含子 聚合酶链反应 PCR 克隆 序列分析

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哺乳类C型凝集素超级家族 被引量：29

19

作者 陈政良 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1997年第6期491-496,共6页

C型凝集素超级家族根据其糖识别域 (CRD)的一级结构分为蛋白聚糖、Ⅱ型跨膜受体、胶原凝素、选凝素、自然杀伤细胞受体及多CRDⅠ型跨膜受体等 6个家族 .每一家族的成员具有同源的氨基酸序列、相同的总体分子结构及类似的生物学功能 .

关键词 C型凝集素 结构 功能 哺乳动物纲

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人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶-2基因的克隆与鉴定 被引量：2

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作者 陈政良 张丽芸 +1 位作者 乔贵林 卢晓 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期248-250,共3页

目的 获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶－２（ＭＡＳＰ－２）编码区基因。方法采用 ＲＴ－巢式 ＰＣＲ技术从 人胎肝组织总ＲＮＡ扩增目的cＤＮＡ片段，克隆人ｐＧＥＭ－Ｔ载体，酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号... 目的 获得人甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶－２（ＭＡＳＰ－２）编码区基因。方法采用 ＲＴ－巢式 ＰＣＲ技术从 人胎肝组织总ＲＮＡ扩增目的cＤＮＡ片段，克隆人ｐＧＥＭ－Ｔ载体，酶切图谱分析和测序鉴定。结果获得了编码合信号 顺序的ＭＡＳＰ－２肽链全长cＤＮＡ，将其与pＧＥＭ－Ｔ载体连接，转化大肠杆菌ＴＧ１，建立了ＭＡＳＰ－２的重组克隆。酶切图 谱与微机分析结果无异；序列分析表明，与报道的人 ＭＡＳＰ－２ｃＤＮＡ序列一致。结论成功克隆了人 ＭＡＳＰ－２基因，为深 入研究补体凝集素途径的激活机制和甘露聚糖结合凝集素基因突变引起免疫缺损的发病机制奠定了基础。 展开更多

关键词 甘露聚糖结合凝集素 相关丝氨酸蛋白酶-2 聚合酶链反应 基因克隆 MBL MASP-2

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