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DnaJ类分子伴侣PBP基因的原核表达及兔抗PBP抗体的制备被引量：2: 1; 作者刘成刚朱美财 +4 位作者李文石樱占志王荫静向培德《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期456-458,共3页; 目的:在原核系统中表达DnaJ类分子伴侣感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)基因,并制备兔抗PBP的抗体鉴定其特性。方法:应用RTPCR从人胎脑组织总RNA中扩增PBPcDNA。测序后将其克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。表达产物... 展开更多; 关键词 PBP 热休克蛋白基因表达多克隆抗体兔; 在线阅读下载PDF 职称材料

DnaJ类分子伴侣PBP的基因克隆及亚细胞定位研究被引量：6: 2; 作者刘缨朱美财 +2 位作者王荫静占志刘成刚《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期531-534,共4页; 目的:从人骨骼肌cDNA文库中,分离、鉴定视网膜感光受体外周蛋白的结合蛋白(PBP)-DnaJ(HSP40)类分子伴侣,并初步分析其在转染的哺乳动物细胞中的表达及分布。方法:以33p-dCTP标记探针杂交筛选人骨骼肌cDNA文库,对阳性克隆进行序列分析,... 展开更多; 关键词 DnaJ分子伴侣蛋白基因转染细胞外周蛋白结合蛋白; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗PAI抑制作用的组织纤溶酶原激活剂在大肠杆菌中的表达被引量：5: 3; 作者朱美财占志 +3 位作者王雅静刘成刚石缨蔡庆《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期565-569,共5页; 目的: 构建t-PA活性不被PAI-1抑制的新一代t-PA突变体.方法: 根据t-PA的结构特点,去除t-PA分子中的指状区、表皮生长因子和Kringle1区,以含全长t-PA编码区序列的pUC18质粒为模板,经PCR扩增编码氨基酸1～3和176～527位的截短式t-PA DNA序... 展开更多; 关键词组织型纤溶酶原激活剂突变体基因克隆表达纯化; 在线阅读下载PDF 职称材料

白细胞介素-18基因肌肉注射产生明显抗肿瘤作用(英文) 被引量：5: 4; 作者张国荣赵建增 +6 位作者张晋东王小平陈涛朱美财刘亚宁姜树强王哲《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期7-13,共7页; 为了探讨人白细胞介素 (h IL ) - 1 8基因转导的抗肿瘤作用 ,构建了 h IL- 1 8c DNA真核表达质粒载体 pc DNA3/h IL- 1 8.将 pc DNA3/h IL- 1 8经脂质体包裹 ,按照 1 0 0μg/只的剂量注射入雄性Balb/c小鼠后肢肌肉 ,在设定时间处死小鼠... 展开更多; 关键词人白细胞介素-18 肌肉注射肿瘤基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

正加速度重复暴露大鼠脑差异表达基因的筛选被引量：2: 5; 作者林凯蔡庆 +2 位作者卞修武刘红巾朱美财《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期956-960,共5页; 目的　筛选大鼠经正加速度 (Gositiveacceleration ,+Gz)重复暴露后脑的差异表达基因 ,探讨 +Gz重复暴露致脑损伤的分子机制。方法　应用抑制性消减杂交技术 ,构建高消减效率的 +Gz重复暴露大鼠脑cDNA消减文库 ;用差异筛选技术筛选阳性... 展开更多; 关键词正加速度(+Gz) 脑损伤差异表达基因抑制性消减杂交; 在线阅读下载PDF 职称材料

α_(2A)-肾上腺素能受体基因调控区单核苷酸多态性对基因转录活性的影响被引量：1: 6; 作者袁栎付静宜 +5 位作者刘建彬于立身王烨曹颖罗超权刘丽《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期48-51,57,共5页; [目的]探讨α_(2A)-肾上腺素能受体基因-1296位单核苷酸多态性对受体基因转录活性的影响。[方法]以基因组 DNA为模板,扩增α_(2A)-肾上腺素能受体基因 5’侧翼序列(2 085 bp),-1296位分别为g或c,与报告基因载体pGL3-enhancer相连接,构... 展开更多; 关键词多态现象遗传学晕动病 α2A-肾上腺素能受体基因调控区单核苷酸基因转录活性; 在线阅读下载PDF 职称材料

血小板生成素基因在体内的表达及对造血祖细胞增殖活性的影响被引量：5: 7; 作者赵建增刘丽 +1 位作者陈惠仁梅英杰《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期117-121,共5页; 探讨了从肌肉组织植入的人血小板生成素（ＴＰＯ）基因在小鼠体内的表达规律，以及对造血祖细胞增殖活性的影响．基因在导入后的２４小时内就开始转录，先于血小板、血液ＴＰＯ浓度、及造血祖细胞的变化．所表达的ＴＰＯ在血液中的聚积... 展开更多; 关键词血小板生成素基因治疗造血祖细胞细胞增殖; 在线阅读下载PDF 职称材料

人白血病抑制因子基因cDNA的克隆及分析被引量：2: 8; 作者涂强王永俊 +6 位作者李文谢宝树朱元晓阎玉河余竟源兰兰林万明《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第1期41-42,共2页; 白血病抑制因子(leukemia inhibitoryfactor,LIF)是80年代初发现的一种新的细胞因子。它能不可逆地抑制白血病细胞增殖、并诱导其分化,同时它还能在没有明显毒副作用的情况下在体内或体外直接刺激巨核血小板系统生成,增加外周血血小板... 展开更多; 关键词白血病抑制因子基因克隆; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DnaJ类分子伴侣PBP基因的原核表达及兔抗PBP抗体的制备被引量：2: 1; 作者刘成刚朱美财李文石樱占志王荫静向培德; 机构空军总医院临床分子生物学中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期456-458,共3页; 基金解放军总后勤部医药卫生基金资助项目(No.01MA060); 文摘目的:在原核系统中表达DnaJ类分子伴侣感光受体外周蛋白结合蛋白(PBP)基因,并制备兔抗PBP的抗体鉴定其特性。方法:应用RTPCR从人胎脑组织总RNA中扩增PBPcDNA。测序后将其克隆到表达载体pET28a中,并在大肠杆菌中以IPTG诱导表达。表达产物经NiNTA亲和层析柱纯化后,用SDSPAGE进行鉴定。以所获纯化的PBP免疫新西兰白兔,制备兔抗PBP抗体。抗体的效价及特异性用Westernblot进行测定和分析。结果:扩增和克隆出了720bp的PBP基因。构建的重组质粒pET28aPBP在大肠杆菌中得到高表达,诱导表达的蛋白存在于包涵体和细菌裂解上清中,纯化的PBP经SDSPAGE鉴定呈单一条带。以纯化的PBP免疫兔,制备了兔抗PBP抗体。Westernblot鉴定证实,该抗体可与原核表达的PBP特异性结合,抗体效价为1∶1600。结论:在原核细胞中表达了具有生物学活性的PBP,并以其为免疫原制备了兔抗PBP的抗体,为进一步研究PBP的结构与生物学活性奠定了基础。; 关键词 PBP 热休克蛋白基因表达多克隆抗体兔; Keywords PBP heat-shock protein gene expression polyclonal antibody rabbit; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DnaJ类分子伴侣PBP的基因克隆及亚细胞定位研究被引量：6: 2; 作者刘缨朱美财王荫静占志刘成刚; 机构空军总医院临床分子生物学研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期531-534,共4页; 基金军队"十五"医药卫生基金资助项目(No.01MA060); 文摘目的:从人骨骼肌cDNA文库中,分离、鉴定视网膜感光受体外周蛋白的结合蛋白(PBP)-DnaJ(HSP40)类分子伴侣,并初步分析其在转染的哺乳动物细胞中的表达及分布。方法:以33p-dCTP标记探针杂交筛选人骨骼肌cDNA文库,对阳性克隆进行序列分析,并以脂质体介导转染哺乳动物细胞,用免疫印迹及间接免疫荧光染色法检测目的蛋白的表达。结果:筛选出全长pbp基因,经与GenBank中的序列比较分析证实,与DnaJ家族的1个成员-mrj(1.5 kb)的序列相同,且含140 bp左右富含GC的非编码区上游序列。在COS-7细胞中瞬时表达的PBP,大多呈典型的胞浆分布,而J-domain缺失的pbp片段多为胞核分布。而在CHO细胞中稳定表达的PBP,在处于不同细胞周期时相的细胞中的分布不同。结论:DnaJ除与HSP70(DnaK)协同发挥重要功能外,其本身作为分子伴侣也可能发挥着重要作用,且与细胞周期可能存在某种密切联系。; 关键词 DnaJ分子伴侣蛋白基因转染细胞外周蛋白结合蛋白; Keywords DnaJ chaperon gene transfection PBP; 分类号 Q51 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗PAI抑制作用的组织纤溶酶原激活剂在大肠杆菌中的表达被引量：5: 3; 作者朱美财占志王雅静刘成刚石缨蔡庆; 机构空军总医院临床分子生物学研究中心; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期565-569,共5页; 文摘目的: 构建t-PA活性不被PAI-1抑制的新一代t-PA突变体.方法: 根据t-PA的结构特点,去除t-PA分子中的指状区、表皮生长因子和Kringle1区,以含全长t-PA编码区序列的pUC18质粒为模板,经PCR扩增编码氨基酸1～3和176～527位的截短式t-PA DNA序列; 并将该t-PA分子中的PAI-1结合位点,即第373～384位核苷酸(AAG CAC AGG AGG)突变为(GCG GCC GCG GCG),相应的氨基酸KHRR则变为AAAA.结果:测序证实,t-PA突变体的DNA序列正确,将其克隆于大肠杆菌表达载体中,并在大肠杆菌中得到高效表达.表达蛋白占总菌体蛋白的30%,以包涵体形式存在.经蛋白质变性、复性,得到有活性的t-PA突变体.t-PA突变体与PAI-1反应后t-PA的活性未受到抑制.结论:t-PA突变体可能是一种用于治疗心肌梗死和脑血栓等血栓性疾病的强效且剂量要求低的新型生物工程药物.; 关键词组织型纤溶酶原激活剂突变体基因克隆表达纯化; Keywords t-PA mutant gene cloning expression purification; 分类号 R977.3 [医药卫生—药品]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名白细胞介素-18基因肌肉注射产生明显抗肿瘤作用(英文) 被引量：5: 4; 作者张国荣赵建增张晋东王小平陈涛朱美财刘亚宁姜树强王哲; 机构空军总医院临床分子生物学研究中心基因治疗研究室; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期7-13,共7页; 基金国家自然科学基金!资助项目 (No.39870 814 ) 空军总医院科研基金; 文摘为了探讨人白细胞介素 (h IL ) - 1 8基因转导的抗肿瘤作用 ,构建了 h IL- 1 8c DNA真核表达质粒载体 pc DNA3/h IL- 1 8.将 pc DNA3/h IL- 1 8经脂质体包裹 ,按照 1 0 0μg/只的剂量注射入雄性Balb/c小鼠后肢肌肉 ,在设定时间处死小鼠取注射部位肉提取总 RNA,应用半定量反转录聚合酶链反应 (RT- PCR)及免疫组化法检测了 h IL- 1 8m RNA及其蛋白质在小鼠肌肉中不同时间点的表达水平 .随后 30只雄性 Balb/c小鼠于基因注射后第 7d腹部皮下 (i.d.)或腹腔内 (i.p.)接种 1×1 0 5个同系小鼠 S- 1 80肉瘤细胞 .观察了 S- 1 80肿瘤细胞在腹腔及皮下的生长情况、小鼠体重、肿瘤重量及存活时间 .结果发现 ,pc DNA3/h IL- 1 8注射后 2 d能检测到 h IL- 1 8m RNA表达 ,第 7d表达量较高 ,第 2 8d仍有 h IL- 1 8m RNA表达 .免疫组化染色显示了注射部位散在有 h IL- 1 8蛋白质颗粒 .h IL- 1 8基因注射组小鼠体重、肿瘤重量均比对照组轻 (P值分别小于 0 .0 0 5、0 .0 5) ,存活时间比对照组延长 .结果显示 ,真核表达系统 pc DNA3/h IL - 1 8经脂质体包裹肌注后能有效表达 ,具有明显的抑制肿瘤生长作用 .; 关键词人白细胞介素-18 肌肉注射肿瘤基因治疗; Keywords IL 18,tumor,gene therapy; 分类号 R730.5 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名正加速度重复暴露大鼠脑差异表达基因的筛选被引量：2: 5; 作者林凯蔡庆卞修武刘红巾朱美财; 机构第三军医大学附属西南医院病理学研究所空军总医院临床分子生物学研究中心航空病研究中心; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期956-960,共5页; 基金空军后勤部科研基金资助项目 (KH99190 76 ); 文摘目的　筛选大鼠经正加速度 (Gositiveacceleration ,+Gz)重复暴露后脑的差异表达基因 ,探讨 +Gz重复暴露致脑损伤的分子机制。方法　应用抑制性消减杂交技术 ,构建高消减效率的 +Gz重复暴露大鼠脑cDNA消减文库 ;用差异筛选技术筛选阳性克隆 ;用序列分析确定阳性克隆的性质 ;用RT -PCR证实阳性克隆的可靠性。结果　从消减库中获得70个阳性克隆 ;经差异筛选后 ,选取其中 10个阳性克隆 ,序列分析表明 ,7个克隆与已知基因高度同源 ,3个为新的候选基因。RT -PCR证实了差异表达基因在 +Gz重复暴露大鼠脑中高表达。结论　用抑制性消减杂交技术筛选发现的 3个新的cDNA可能在; 关键词正加速度(+Gz) 脑损伤差异表达基因抑制性消减杂交; Keywords positive acceleration(+Gz) brain damage differentially expressed genes suppression subtractive hybridization; 分类号 R322.81 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学] R39433 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名α_(2A)-肾上腺素能受体基因调控区单核苷酸多态性对基因转录活性的影响被引量：1: 6; 作者袁栎付静宜刘建彬于立身王烨曹颖罗超权刘丽; 机构中山大学中山医学院生化教研室空军总医院临床分子生物学中心实验室; 出处《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第1期48-51,57,共5页; 基金全军"十五"医药重点卫生科研基金(01Z016) 空军后勤部司令部科研基金(KH0019093); 文摘 [目的]探讨α_(2A)-肾上腺素能受体基因-1296位单核苷酸多态性对受体基因转录活性的影响。[方法]以基因组 DNA为模板,扩增α_(2A)-肾上腺素能受体基因 5’侧翼序列(2 085 bp),-1296位分别为g或c,与报告基因载体pGL3-enhancer相连接,构建重组载体,分别与pRL-CMV共转染人绒癌细胞JEG-3,检测荧光素酶相对表达量。[结果]成功构建重组质粒 pGL3FSg/pGL3FSc,荧光素酶检测结果显示,当5侧翼-1296位为g时,荧光素酶基因表达量高,而为c时,荧光素酶基因表达量低。[结论]a_(2A)-肾上腺素能受体基因5’侧翼-1296位为g时,基因转录活性较高;为c时,基因转录活性较低。; 关键词多态现象遗传学晕动病 α2A-肾上腺素能受体基因调控区单核苷酸基因转录活性; Keywords receptors,α2A-adrenergic polymorphism ( genetics) genes, reporter transcription,genetic/physiology; 分类号 R854 [医药卫生—航空、航天与航海医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名血小板生成素基因在体内的表达及对造血祖细胞增殖活性的影响被引量：5: 7; 作者赵建增刘丽陈惠仁梅英杰; 机构空军总医院临床分子生物学研究中心; 出处《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1998年第2期117-121,共5页; 文摘探讨了从肌肉组织植入的人血小板生成素（ＴＰＯ）基因在小鼠体内的表达规律，以及对造血祖细胞增殖活性的影响．基因在导入后的２４小时内就开始转录，先于血小板、血液ＴＰＯ浓度、及造血祖细胞的变化．所表达的ＴＰＯ在血液中的聚积可持续４周以上．巨核祖细胞，粒系祖细胞都出现２周左右的增殖增长，长于血小板计数的升高，但红系祖细胞的变化不明显．这些结果显示，基因治疗过程中血小板计数等变化源于ＴＰＯ的表达及刺激，而在此期间一些调控机制被激活，对血小板形成的平衡发挥作用．; 关键词血小板生成素基因治疗造血祖细胞细胞增殖; Keywords Thrombopoietin Gene therapy CFU MK CFU GM; 分类号 Q592.1 [生物学—生物化学] R456 [医药卫生—治疗学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人白血病抑制因子基因cDNA的克隆及分析被引量：2: 8; 作者涂强王永俊李文谢宝树朱元晓阎玉河余竟源兰兰林万明; 机构空军总医院临床分子生物学研究中心军事医学科学院基础医学研究所河南省农业科学院畜牧兽医研究所; 出处《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 1993年第1期41-42,共2页; 文摘白血病抑制因子(leukemia inhibitoryfactor,LIF)是80年代初发现的一种新的细胞因子。它能不可逆地抑制白血病细胞增殖、并诱导其分化,同时它还能在没有明显毒副作用的情况下在体内或体外直接刺激巨核血小板系统生成,增加外周血血小板数量。; 关键词白血病抑制因子基因克隆; 分类号 R392－33 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	DnaJ类分子伴侣PBP基因的原核表达及兔抗PBP抗体的制备	刘成刚朱美财李文石樱占志王荫静向培德	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	2	在线阅读下载PDF 职称材料
2	DnaJ类分子伴侣PBP的基因克隆及亚细胞定位研究	刘缨朱美财王荫静占志刘成刚	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2003	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	抗PAI抑制作用的组织纤溶酶原激活剂在大肠杆菌中的表达	朱美财占志王雅静刘成刚石缨蔡庆	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	白细胞介素-18基因肌肉注射产生明显抗肿瘤作用(英文)	张国荣赵建增张晋东王小平陈涛朱美财刘亚宁姜树强王哲	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心	2001	5	在线阅读下载PDF 职称材料
5	正加速度重复暴露大鼠脑差异表达基因的筛选	林凯蔡庆卞修武刘红巾朱美财	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2003	2	在线阅读下载PDF 职称材料
6	α_(2A)-肾上腺素能受体基因调控区单核苷酸多态性对基因转录活性的影响	袁栎付静宜刘建彬于立身王烨曹颖罗超权刘丽	《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心	2003	1	在线阅读下载PDF 职称材料
7	血小板生成素基因在体内的表达及对造血祖细胞增殖活性的影响	赵建增刘丽陈惠仁梅英杰	《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD	1998	5	在线阅读下载PDF 职称材料
8	人白血病抑制因子基因cDNA的克隆及分析	涂强王永俊李文谢宝树朱元晓阎玉河余竟源兰兰林万明	《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心	1993	2	在线阅读下载PDF 职称材料