福建滩涂围塘生态混养技术 被引量：1

1

作者 钟幼平 胡家财 +3 位作者 林学国 赖世云 张海亮 汪春林 《水产养殖》 CAS 2024年第3期45-48,共4页

在福建沿海滩涂围塘有近90%养殖对象均是对虾,因此,滩涂围塘一直也被称为“虾塘”。近年来,养殖南美白对虾、斑节对虾(金刚虾)以及日本对虾成为水产养殖业的聚焦点,也是福建沿海围塘养殖主要的优质养殖种类。围塘的生态混养技术在某种... 在福建沿海滩涂围塘有近90%养殖对象均是对虾,因此,滩涂围塘一直也被称为“虾塘”。近年来,养殖南美白对虾、斑节对虾(金刚虾)以及日本对虾成为水产养殖业的聚焦点,也是福建沿海围塘养殖主要的优质养殖种类。围塘的生态混养技术在某种程度已相当成熟,文献[1-10]简述了虾、鱼、贝多方式混养技术的机制和发展前景。 展开更多

关键词 养殖种类 养殖对象 日本对虾 福建沿海 混养技术 水产养殖业 斑节对虾 沿海滩涂

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红毛菜应答失水和复水的生理表现和转录组学分析

2

作者 张亚文 林密 +5 位作者 许凯 徐燕 纪德华 王文磊 陈昌生 谢潮添 《水生生物学报》 北大核心 2025年第5期197-208,共12页

为探究红毛菜(Bangia fuscopurpurea)适应潮汐快速变化的机制,研究选取野生红毛菜品系CY作为实验对象,将红毛菜原叶体在5个失水梯度(WL0%、30%、60%和90%)及复水状态(先在90%失水状态下保持2h然后再复水)下保持2h,从生理和转录表达水平... 为探究红毛菜(Bangia fuscopurpurea)适应潮汐快速变化的机制,研究选取野生红毛菜品系CY作为实验对象,将红毛菜原叶体在5个失水梯度(WL0%、30%、60%和90%)及复水状态(先在90%失水状态下保持2h然后再复水)下保持2h,从生理和转录表达水平分析其对失水/复水处理的应答机制。结果显示:红毛菜超氧阴离子(O_(2)^(-))、过氧化氢(H_(2)O_(2))、丙二醛(MDA)、脯氨酸、可溶性糖、藻红蛋白和别藻蓝蛋白含量在失水时上升;超氧化物歧化酶(SOD)及最大光化学量子产率(Fv/Fm)在失水时下降;抗坏血酸过氧化物酶(APX)和过氧化物酶(POD)的活性在失水60%时显著升高后下降;而过氧化氢酶(CAT)无显著变化。在复水后,所有生理指标均恢复至未失水处理下的水平。此外,通过差异表达基因(DEGs)富集分析,发现核糖体蛋白和热激蛋白相关基因在失水过程中上调表达,而氨基酸合成等相关基因在复水后下调表达。综上所述:红毛菜通过调节抗氧化酶活性及合成失水耐受相关核糖体蛋白等防御功能以应答失水胁迫;在复水过程中,通过抑制核糖体蛋白质合成及增强光合作用供给能量和转运有毒代谢产物以帮助红毛菜恢复生理代谢活动。研究可以加深对潮间带海藻应答失水胁迫的认识,以及为红毛菜耐干良种选育提供数据参考。 展开更多

关键词 红毛菜 失水 复水 生理响应 抗氧化系统 转录组 差异表达基因

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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)核酸适配体筛选中高频序列的进化多样性研究 被引量：1

3

作者 许净 刘慧敏 +5 位作者 林筱钧 郑江 江兴龙 鄢庆枇 范云庭 汤学敏 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1315-1322,共8页

核酸适配体是采用分子进化技术从随机寡核苷酸文库中筛选得到的对靶目标有较高亲和力的寡核苷酸序列。研究核酸适配体筛选过程中高频序列的进化多样性,对于提高筛选效率,掌握核酸适配体的进化规律具有重要意义。利用Margalef丰富度指数... 核酸适配体是采用分子进化技术从随机寡核苷酸文库中筛选得到的对靶目标有较高亲和力的寡核苷酸序列。研究核酸适配体筛选过程中高频序列的进化多样性,对于提高筛选效率,掌握核酸适配体的进化规律具有重要意义。利用Margalef丰富度指数、Shannon-Wiener多样性指数、Pielou均匀度指数、Berger-Parker优势度指数,研究了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)核酸适配体筛选产物中高频序列的进化多样性,结果表明,随着筛选进行,高频序列的种类数、丰富度、多样性、优势度和均匀度在前六轮都呈现较为剧烈的波动,之后种类数、丰富度、多样性、优势度呈现逐步增加的趋势,而均匀度则呈逐步下降的趋势,说明竞争力强的序列在筛选竞争中逐渐占据优势,其种类数量不断增加;利用相对重要性指数(IRI)对高频序列进行了计算分析,根据IRI值可将高频序列分为5类:优势序列,重要序列,常见序列,一般序列和少见序列,其中前三种序列是筛选进化中的相对优势种群;最后对IRI较高的7种核酸适配体进行了二级结构预测,结果显示其二级结构中存在着大小、数量不等的环状结构,这些环的大小数量可能与其结合位点相关。相关研究结果对于鳗弧菌的病害防控及核酸适配体的筛选都具有重要意义。 展开更多

关键词 核酸适配体 高频序列 鳗弧菌 多样性 相对重要性 进化

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精养池模式下不同生长速度花鳗鲡的肠道菌群比较研究 被引量：8

4

作者 王悦 赵盼月 +1 位作者 陈学豪 翟少伟 《饲料工业》 CAS 北大核心 2021年第4期48-52,共5页

试验旨在比较精养池模式下不同生长速度的花鳗鲡肠道菌群的差异,为筛选潜在的原籍益生菌提供参考。利用16S rDNA测序技术比较了养殖12个月、不同体重的花鳗鲡[即(83.65±9.60)g/尾为缓慢生长组,(216.98±19.97)g/尾为中速生长组... 试验旨在比较精养池模式下不同生长速度的花鳗鲡肠道菌群的差异,为筛选潜在的原籍益生菌提供参考。利用16S rDNA测序技术比较了养殖12个月、不同体重的花鳗鲡[即(83.65±9.60)g/尾为缓慢生长组,(216.98±19.97)g/尾为中速生长组,(386.73±51.90)g/尾为快速生长组]肠道菌群的差异。试验结果表明:快速生长组花鳗鲡的肠道菌群OUTs和Shannon指数高于中速生长组和缓慢生长组。梭杆菌门(Fu⁃sobacteria)和厚壁菌门(Firmicutes)是花鳗鲡肠道中的优势菌群;快速生长组慢生根瘤菌属(Bradyrhizobi⁃um)和不动杆菌属(Acinetobacter)的相对丰度显著增加(P<0.05),中速生长组Iamia、固氮弧菌属(Azoarcus)和厌氧黏细菌属(Anaeromyxobacter)的相对丰度显著增加(P<0.05),缓慢生长组拟杆菌属(Bacteroides)、代尔夫特菌属(Delftia)和水栖菌属(Enhydrobacter)等细菌的相对丰度显著增加(P<0.05)。表明:不同生长速度花鳗鲡肠道菌群存在明显差异,其中不动杆菌属中的一些细菌可能是花鳗鲡肠道中潜在的益生菌。 展开更多

关键词 精养池 花鳗鲡 生长速度 肠道菌群 益生菌

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原花青素对饲料组胺胁迫下美洲鳗鲡肝脏健康指标的影响 被引量：8

5

作者 卢文麒 何英霞 +2 位作者 梁英 陈学豪 翟少伟 《饲料工业》 北大核心 2020年第20期56-60,共5页

试验旨在研究葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSPs)对饲料组胺胁迫下美洲鳗鲡肝脏健康指标的影响。试验选用体重相近的美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)480尾,初重为(10.84±0.16)g,随机分为四组(每个处理组设4个重复,每... 试验旨在研究葡萄籽原花青素(grape seed proanthocyanidins,GSPs)对饲料组胺胁迫下美洲鳗鲡肝脏健康指标的影响。试验选用体重相近的美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)480尾,初重为(10.84±0.16)g,随机分为四组(每个处理组设4个重复,每个重复30尾鱼),即对照组、组胺胁迫组、组胺胁迫+300 mg/kg GSPs组、组胺胁迫+600 mg/kg GSPs组,试验期为77 d。与对照组相比,组胺胁迫组血清谷丙转氨酶和谷草转氨酶活性显著升高(P<0.05),肝脏总抗氧化能力和过氧化氢酶活性显著降低(P<0.05),谷胱甘肽和丙二醛水平无显著变化(P>0.05);组胺胁迫+GSPs组与对照组各项指标均接近(P>0.05)。与组胺胁迫组相比,组胺胁迫+GSPs组肝脏过氧化氢酶活性显著升高(P<0.05),丙二醛水平显著降低(P<0.05),组胺胁迫+600 mg/kg GSPs组总抗氧化能力和谷胱甘肽水平显著升高(P<0.05);组胺胁迫+GSPs组间各项指标均无显著差异(P>0.05)。各组间超氧化物歧化酶活性均无显著差异(P>0.05)。结果表明,饲料组胺胁迫下添加300 mg/kg GSPs即可降低美洲鳗鲡血清转氨酶活性及肝脏丙二醛水平,提高肝脏抗氧化能力,缓解饲料组胺诱导产生的氧化应激,改善肝脏的健康状况。 展开更多

关键词 原花青素 饲料组胺 美洲鳗鲡 肝脏健康 抗氧化能力

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香菇多糖在欧洲鳗鲡饲料中添加效果的初步研究 被引量：7

6

作者 卢文麒 梁英 +1 位作者 翟少伟 贾景涛 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第21期71-74,共4页

试验旨在研究香菇多糖在欧洲鳗鲡饲料中的添加效果。选取规格(7.44±0.18) P、平均重量(824.20±17.28) kg/池的6口欧洲鳗鲡养殖池,随机分为2组,每组3个重复。对照组鳗鲡投喂基础饲料,香菇多糖组在基础饲料中添加480 mg/kg香菇... 试验旨在研究香菇多糖在欧洲鳗鲡饲料中的添加效果。选取规格(7.44±0.18) P、平均重量(824.20±17.28) kg/池的6口欧洲鳗鲡养殖池,随机分为2组,每组3个重复。对照组鳗鲡投喂基础饲料,香菇多糖组在基础饲料中添加480 mg/kg香菇多糖。试验期96 d。结果显示,与对照组相比,香菇多糖组欧洲鳗鲡的增重率、特定生长率、摄食率显著提高(P<0.05);血清总胆固醇、低密度脂蛋白含量及谷草转氨酶活性显著降低(P<0.05);肝脏丙二醛含量显著降低(P<0.05)。研究表明,饲料中添加480 mg/kg香菇多糖可促进欧洲鳗鲡生长,降低血脂,改善肝脏健康状况。 展开更多

关键词 香菇多糖 欧洲鳗鲡 生长性能 血清生化指标 肝脏健康

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福建沿海巨蛎属(Crassostrea)牡蛎的种类及其分布 被引量：3

7

作者 于诗奇 韩自强 +2 位作者 陈燕婷 郭团玉 阙华勇 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1682-1692,共11页

福建省位于我国东南沿海,海岸线曲折,港湾众多,有多条河流入海,适宜牡蛎栖息繁衍,是我国牡蛎资源最丰富的地区之一。迄今关于福建沿海牡蛎种类组成及分布情况的研究报道尚少,鉴于近20余年福建主要海湾经历了高强度的牡蛎养殖,有必要了... 福建省位于我国东南沿海,海岸线曲折,港湾众多,有多条河流入海,适宜牡蛎栖息繁衍,是我国牡蛎资源最丰富的地区之一。迄今关于福建沿海牡蛎种类组成及分布情况的研究报道尚少,鉴于近20余年福建主要海湾经历了高强度的牡蛎养殖,有必要了解福建沿海牡蛎自然群体的物种组成和数量占比等自然种质资源状况。基于现场调查取样,结合采用多重种特异性PCR、ITS2杂交种鉴定和CO I测序共同鉴定福建沿海巨蛎属(Crassostrea)牡蛎种类及其分布情况。研究结果表明,从福建沿海由北至南牡蛎野生种苗海区的19个采样点共960个样品中发现3种巨蛎属牡蛎,分别是福建牡蛎(Crassostrea angulata)、熊本牡蛎(C.sikamea)和香港牡蛎(C.hongkongensis),并未发现以往报道的近江牡蛎(C.ariakensis)。其中福建牡蛎(607个)占63.23%、熊本牡蛎(343个)占35.73%、香港牡蛎(10个)占1.04%。除个别采样点外,福建牡蛎和熊本牡蛎在各采样海区均有分布。香港牡蛎仅在泉州湾河口湿地自然保护区(新发现群体)有少量分布。研究结果揭示的福建沿海地区巨蛎属的物种种类及其分布为后续开展牡蛎遗传多样性分析和遗传分化等种群遗传研究提供了关键基础资料,为牡蛎种质资源的保护和利用打下重要基础。 展开更多

关键词 牡蛎种类 巨蛎属 福建沿海 多重种特异性PCR 基于ITS2序列的杂交种鉴定 CO I测序

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美洲鳗鲡体重与肌肉、皮肤胆固醇含量关系研究

8

作者 龙文彬 杨文连 +1 位作者 陈学豪 翟少伟 《当代水产》 2021年第8期70-71,共2页

鳗鲡(Anguilla)是我国主要的淡水养殖品种之一。据《2020中国渔业统计年鉴》统计数据显示,鳗鲡全国产量为23.4万t,其中福建和广东两省产量已超过全国的86%。虽然我国是世界鳗鲡养殖第一大国,但国内市场开发少、难度大,原因之一是很多人... 鳗鲡(Anguilla)是我国主要的淡水养殖品种之一。据《2020中国渔业统计年鉴》统计数据显示,鳗鲡全国产量为23.4万t,其中福建和广东两省产量已超过全国的86%。虽然我国是世界鳗鲡养殖第一大国,但国内市场开发少、难度大,原因之一是很多人认为鳗鲡是无磷鱼,其胆固醇含量较高。实际上鳗鲡属于有鳞鱼,身披细小而退化的鳞片。 展开更多

关键词 美洲鳗鲡 胆固醇含量 统计数据 鳗鲡养殖 体重

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海水虾塘混养模式及效益分析

9

作者 钟幼平 黄世玉 +2 位作者 赖世云 张海亮 汪春林 《科学养鱼》 2024年第1期71-72,共2页

对虾养殖是我国海水养殖中最具活力的养殖产业之一。在闽南地区除有排污条件的高位池及棚室工厂化养殖模式外,传统的土塘养殖目前仍然是虾类主要养殖方式。闽南沿海地区主要养殖的虾类为凡纳滨对虾、日本囊对虾和金刚虾(斑节对虾),适宜... 对虾养殖是我国海水养殖中最具活力的养殖产业之一。在闽南地区除有排污条件的高位池及棚室工厂化养殖模式外,传统的土塘养殖目前仍然是虾类主要养殖方式。闽南沿海地区主要养殖的虾类为凡纳滨对虾、日本囊对虾和金刚虾(斑节对虾),适宜采用鱼、虾、贝混养模式。在虾塘混养合适的鱼和贝类不仅可以清除病虾、抑制虾病发生,提高虾的成活率,还可增加混养种类的收入。 展开更多

关键词 海水养殖 养殖产业 对虾养殖 斑节对虾 虾类 养殖方式 闽南沿海地区 高位池

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红毛菜与坛紫菜光合作用和品质的比较分析

10

作者 林密 许凯 +4 位作者 徐燕 纪德华 王文磊 陈昌生 谢潮添 《应用海洋学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期276-283,共8页

为研究两种经济红藻红毛菜(Bangia fucscopurpurea)和坛紫菜(Pyropia haitanensis)的光合作用和品质差异,选取一株野生型红毛菜CY和一株野生型坛紫菜NSD35作为实验材料,分别测定二者在相同培养条件下的关键光合参数和营养成分指标。结... 为研究两种经济红藻红毛菜(Bangia fucscopurpurea)和坛紫菜(Pyropia haitanensis)的光合作用和品质差异,选取一株野生型红毛菜CY和一株野生型坛紫菜NSD35作为实验材料,分别测定二者在相同培养条件下的关键光合参数和营养成分指标。结果显示:红毛菜的最大电子传递速率、净光合速率、藻红蛋白含量分别比坛紫菜高29.6%、96.8%、60.5%;必需矿质元素钾、钙、镁、铁、锌的含量分别比坛紫菜高59.5%、39.5%、34.1%、86.2%、68.4%;红毛菜的必需氨基酸和风味氨基酸含量都高于坛紫菜。此外,二者的呼吸速率、最大光量子产率、叶绿素a、总糖、总蛋白和碘含量没有显著差异。研究结果表明,与坛紫菜NSD35相比,红毛菜CY的光合速率更快,矿质元素积累能力更强,必需氨基酸和风味氨基酸含量更高。研究结果有助于了解红毛菜和坛紫菜的光合作用和品质特点,为开发红毛菜种质资源提供数据参考。 展开更多

关键词 海洋生物学 红毛菜 坛紫菜 光合作用 营养成分 品质

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一种基于线粒体COI PCR-RFLP单酶切快速鉴定4种巨蛎属牡蛎的方法

11

作者 崔中望 于诗奇 +1 位作者 缪雄平 阙华勇 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期68-73,共6页

本文报道了一种基于线粒体细胞色素氧化酶亚基I(mt COI)基因序列PCR-RFLP单酶切的牡蛎物种鉴定方法。本方法可快速鉴定福建牡蛎(Crassostrea angulata)、熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)、香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和近江牡蛎... 本文报道了一种基于线粒体细胞色素氧化酶亚基I(mt COI)基因序列PCR-RFLP单酶切的牡蛎物种鉴定方法。本方法可快速鉴定福建牡蛎(Crassostrea angulata)、熊本牡蛎(Crassostrea sikamea)、香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)和近江牡蛎(Crassostrea ariakensis)等中国沿海常见的4种巨蛎属(Crassostrea)牡蛎。该方法以甲基转移酶(Msp I)作为限制性内切酶,对4种巨蛎属牡蛎的线粒体DNA COI扩增序列进行酶切,以得到的特异性条带为依据进行物种鉴定。本方法的鉴定结果与COI测序方法的鉴定结果一致,并且筛选出的单一的限制性内切酶Msp I在4种牡蛎的COI序列中不存在酶切位点的突变,准确率达到100%,能够为巨蛎属牡蛎的物种鉴别提供简便可靠的技术支撑。 展开更多

关键词 巨蛎属(Crassostrea)牡蛎 线粒体COI PCR-RFLP

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坛紫菜诱变及F1代叶状体表型性状分析 被引量：2

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作者 张亦弛 王文磊 +4 位作者 徐燕 许凯 纪德华 陈昌生 谢潮添 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第2期137-148,共12页

突变体是开展坛紫菜(Neoporphyrahaitanensis)良种选育和性状遗传调控机理研究的重要材料。为获得坛紫菜突变体,本研究利用不同强度的γ射线辐照(辐射剂量梯度:700、900、1100、1300、1500 Gy)处理野生品系NSD35的幼苗,恢复培养结果显示... 突变体是开展坛紫菜(Neoporphyrahaitanensis)良种选育和性状遗传调控机理研究的重要材料。为获得坛紫菜突变体,本研究利用不同强度的γ射线辐照(辐射剂量梯度:700、900、1100、1300、1500 Gy)处理野生品系NSD35的幼苗,恢复培养结果显示,γ射线照射导致叶状体部分细胞死亡,且藻体细胞的死亡量随着诱变剂量的增加而升高;同时,突变的细胞数量随着辐射剂量增加呈先增后降的趋势。其中,经1300 Gy处理后藻体的突变细胞最多。之后利用体细胞酶解技术和单克隆技术获得了突变体的纯系藻体,从中初步筛选出性状各异的株系67个,并利用14个表型性状对其中21个株系的F1代进行相关性分析和聚类分析。结果显示,相较于对照组,突变体F1代群体中大部分性状的变异系数增加。突变体的多个性状间存在显著相关性,其中,藻体长度与宽度、鲜重没有显著相关性(P>0.05);宽度与鲜重、叶形态呈极显著正相关(P<0.01);鲜重与颜色呈显著负相关(P<0.05);藻体不同部位的厚度之间存在极显著正相关;叶型与藻体中部、尖端的厚度呈显著负相关。进一步采用系统聚类的方法(遗传距离为20),将21份材料分成4个主要类群,分别为颜色偏红的藻体组、宽而生物量大的藻体组、薄而日均增长快的藻体组和长而窄的藻体组。综上所述,γ射线对坛紫菜叶状体具有良好的诱变效果,本研究为开展坛紫菜经济性状的遗传调控机理研究以及优良新品种选育提供了基础材料。 展开更多

关键词 坛紫菜 Γ射线 酶解 突变体 聚类分析

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利用核酸适配体的竞争置换作用检测溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus) 被引量：2

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作者 林筱钧 彭英林 +5 位作者 鄢庆枇 江兴龙 周建传 汤学敏 范云庭 郑江 《海洋与湖沼》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期215-223,共9页

溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是水产养殖中致病性较强的一种条件致病菌,为更灵敏、高效地对其进行检测,研发出一种基于核酸适配体竞争置换作用的检测方法。首先设计并制备出磁珠-核酸适配体-荧光报告探针的检测复合物(MAP检测复合物)... 溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)是水产养殖中致病性较强的一种条件致病菌,为更灵敏、高效地对其进行检测,研发出一种基于核酸适配体竞争置换作用的检测方法。首先设计并制备出磁珠-核酸适配体-荧光报告探针的检测复合物(MAP检测复合物),然后利用溶藻弧菌与其核酸适配体有较好的亲和特异性,在对样品进行检测时,样品中的溶藻弧菌就会竞争MAP检测复合物中的核酸适配体,从而置换出与该核酸适配体结合的荧光报告探针,再通过检测置换出的报告探针的荧光强度来表征溶藻弧菌的浓度,从而实现对溶藻弧菌的定量检测。结果表明,该方法对溶藻弧菌的检测限可达到1CFU/mL,与嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、迟钝爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)、大肠杆菌(Escherichia coli)等水产养殖中的常见致病微生物没有交叉反应,并在1~20、20~100和100~1000 CFU/mL范围内都表现出较好的线性关系。另外还对MAP检测复合物的制备条件进行了优化,较为理想的制备条件为:100nmol/L核酸适配体与100nmol/L荧光报告探针按体积比1︰1混合结合30 min,制备出50 nmol/L的核酸适配体-荧光报告探针复合物,然后该复合物再与25μg/mL的磁珠按体积比1︰1混合结合60 min,制备出相应的MAP检测复合物。利用核酸适配体的竞争置换作用检测溶藻弧菌有较好的灵敏度和特异性,展现了较好的应用前景。 展开更多

关键词 核酸适配体 溶藻弧菌 竞争置换作用 荧光报告探针 磁珠

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坛紫菜泛素连接酶PhCUL1基因克隆与功能验证 被引量：1

14

作者 林键章 王文磊 +4 位作者 徐燕 许凯 纪德华 陈昌生 谢潮添 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2021年第1期193-200,共8页

高温影响坛紫菜(Pyropia haitanensis)的产量和品质,是制约紫菜产业发展的主要因素。前期研究发现,高温胁迫下,坛紫菜泛素蛋白酶体系统相关基因显著上调表达,但其响应高温胁迫的分子功能还未知。本研究通过分子生物学、遗传学等技术手... 高温影响坛紫菜(Pyropia haitanensis)的产量和品质,是制约紫菜产业发展的主要因素。前期研究发现,高温胁迫下,坛紫菜泛素蛋白酶体系统相关基因显著上调表达,但其响应高温胁迫的分子功能还未知。本研究通过分子生物学、遗传学等技术手段对坛紫菜cullin E3连接酶基因(PhCUL1)的功能进行研究。利用PCR方法克隆了PhCUL1基因的全长,PhCUL1全长为2500 bp,开放阅读框(ORF)长度为2481 bp,该基因存在1个Cullin(407~618 aa)结构域和1个Cullin Nedd8(754~821 aa)结构域,其中,Cullin Nedd8结构域为蛋白融合位点。进化树分析显示,PhCUL1在进化上与脐形紫菜(Porphyra umbilicalis)有较近的亲缘关系。qRT-PCR结果显示,PhCUL1基因被高温显著诱导。为进一步阐明PhCUL1的分子功能,将其转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)进行功能验证,过表达PhCUL1株系比野生型更能耐受高温胁迫。同时,在高温33℃下处理3 h和6 h内,转基因植株的PhCUL1基因呈上调表达。这初步说明PhCUL1基因在坛紫菜响应高温胁迫过程中发挥着重要作用,其具体调控机制有待进一步研究。本研究有助于阐明坛紫菜泛素蛋白酶体系统响应高温胁迫的分子机制,为指导耐高温新品种选育提供理论依据。 展开更多

关键词 高温 坛紫菜 泛素连接酶 莱茵衣藻 转基因

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坛紫菜转录因子NhbZIP1克隆和功能验证 被引量：1

15

作者 曾高雄 许凯 +4 位作者 徐燕 纪德华 陈昌生 谢潮添 王文磊 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第1期201-209,共9页

高温是制约坛紫菜(Neoporphyra haitanensis)产业发展的主要因素之一,阐明坛紫菜高温胁迫应答机理对耐高温品种选育至关重要。人们已分离多个坛紫菜抗逆相关基因,但尚不清楚这些基因的表达调控机制。本研究通过分子生物学和生物信息学... 高温是制约坛紫菜(Neoporphyra haitanensis)产业发展的主要因素之一,阐明坛紫菜高温胁迫应答机理对耐高温品种选育至关重要。人们已分离多个坛紫菜抗逆相关基因,但尚不清楚这些基因的表达调控机制。本研究通过分子生物学和生物信息学技术分离了坛紫菜转录因子NhbZIP1基因。该基因开放阅读框长825 bp,编码274个氨基酸。从开放阅读框推导的氨基酸序列有5个低复杂度区域和1个BRLZ结构。其中,BRLZ是bZIP家族的保守结构域,含有一个α卷曲螺旋结构(121~171aa)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测发现,NhbZIP1受高温胁迫显著诱导。为进一步阐明NhbZIP1的功能,将其转入莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)中。结果显示,高温胁迫下转基因藻株生物量始终高于野生型,且随处理时间增加差异越来越显著。转基因藻株中热激蛋白家族和抗氧化系统相关基因的表达量显著高于野生型。研究表明,NhbZIP1激活下游抗逆基因表达,在坛紫菜应答高温胁迫中发挥重要作用。研究结果有助于阐明bZIP调控坛紫菜响应高温胁迫的分子机制,为耐高温新品种选育提供了基础信息。 展开更多

关键词 坛紫菜 高温胁迫 bZIP转录因子 转基因 莱茵衣藻

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鳗弧菌(Vibrio anguillarum)核酸适配体的筛选及其结合蛋白的分离鉴定 被引量：5

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作者 郑江 刘慧敏 +5 位作者 黄力行 林筱钧 彭雪云 江兴龙 周建传 汤学敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2022年第1期250-261,共12页

目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖中的重要条件致病菌,每年给水产养殖业造成巨大的经济损失,研究其致病机制、对其进行快速的检测鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体因其高亲和力、高特异性等多种优点,在微生物的靶标... 目的鳗弧菌(Vibrio anguillarum)是水产养殖中的重要条件致病菌,每年给水产养殖业造成巨大的经济损失,研究其致病机制、对其进行快速的检测鉴定是其病害防治的前提和基础。核酸适配体因其高亲和力、高特异性等多种优点,在微生物的靶标分析、检测鉴定以及致病机制等多个领域都呈现出较好的应用潜力。因此,筛选鳗弧菌的核酸适配体,利用核酸适配体对鳗弧菌相关位点进行分析鉴定,不仅能为鳗弧菌的检测鉴定提供一个新的手段,对于探索鳗弧菌相关位点在其病害防治中的作用也具有重要意义。方法以鳗弧菌为靶目标,采用每轮测序的SELEX筛选方法,从高频序列中筛选鳗弧菌的核酸适配体;采用单链DNA浓度法测定核酸适配体的亲和力,研究核酸适配体对鳗弧菌的亲和特异性;采用Origin软件、选择反比例函数(Hyperbola函数)进行非线性拟合,获得核酸适配体的亲和常数(K_(d))和最大亲和力(A_(m));采用磁分离技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离纯化出核酸适配体H5的结合蛋白,通过质谱对该蛋白质进行分析鉴定,并利用Prabi、Phyre2、Psortb 3.0等在线网站分析该结合蛋白的空间结构及其亚细胞位置。结果建立了以高频序列为基础的快速筛选核酸适配体的方法,采用该方法筛选出了一系列对鳗弧菌有较好亲和特异性的核酸适配体(H1、H5、H6、H12、H25、H26、H28、H33、H38和H42),测定了其中6个核酸适配体(H1、H5、H25、H26、H33、H38)的K_(d)和A_(m),相应的K_(d)值分别为(78.77±10.99)、(180.65±23.01)、(121.14±21.43)、(276.42±51.23)、(89.24±10.84)、(167.12±23.73)nmol/L,A_(m)值分别为(229.42±8.35)、(891.04±50.14)、(647.20±41.51)、(720.85±75.35)、(510.65±33.89)、(576.06±38.73)nmol/L。核酸适配体H5的结合蛋白为鳗弧菌中的丙酮酸脱氢酶E1组分,该蛋白质主要位于细胞质中,α螺旋和β折叠结构构成了其主要骨架,环状的无规卷曲结构则大多分布在该蛋白质的外部。并对结合蛋白与核酸适配体的互作区域进行了分析推测。结论以高频序列为基础,采用每轮测序的SELEX筛选方法具有较高的筛选效率;核酸适配体最终的表观亲和力是K_(d)和A_(m)共同作用的结果,A_(m)在核酸适配体的表观亲和力中也发挥着不可忽略的作用;核酸适配体H5可能是通过胞吞等方式进入鳗弧菌内部,与细胞质中的丙酮酸脱氢酶E1组分结合,说明核酸适配体是可以进入细菌内部与相应的靶标结合,这为鳗弧菌病害的防控及新型核酸适配体药物的开发提供了一个新的思路。 展开更多

关键词 核酸适配体 鳗弧菌 高频序列 亲和常数 最大亲和力 结合蛋白 SELEX 丙酮酸脱氢酶

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不同开口饵料对美洲鳗鲡白仔苗肠道菌群的影响 被引量：5

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作者 刘海姿 梁英 翟少伟 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第5期51-55,共5页

为比较不同开口饵料对美洲鳗鲡白仔苗肠道菌群的影响,采集投喂红虫和开口配合饲料白仔鳗的肠道样品,利用16S rDNA高通量测序方法,分析肠道菌群的差异情况。结果显示,开口配合饲料组美洲鳗鲡白仔苗的肠道菌群Chao1指数和Shannon指数高于... 为比较不同开口饵料对美洲鳗鲡白仔苗肠道菌群的影响,采集投喂红虫和开口配合饲料白仔鳗的肠道样品,利用16S rDNA高通量测序方法,分析肠道菌群的差异情况。结果显示,开口配合饲料组美洲鳗鲡白仔苗的肠道菌群Chao1指数和Shannon指数高于红虫组。美洲鳗鲡白仔苗肠道以厚壁菌门(Firmicutes)和变形菌门(Proteobacteria)为优势菌群。红虫组乳球菌属(Lactococcus)、莱朗河菌属(Reyranella)、浮丝藻菌属(Planktothrix)、土孢杆菌属(Terrisporobacter)和鲁杰氏菌属(Ruegeria)的相对丰度显著增加(P<0.05);开口配合饲料组芽孢杆菌属(Bacillus)、厌氧芽孢杆菌属(Anaerobacillus)、不动杆菌属(Acinetobacter)、分节丝状菌属(Candidatus arthromitus)、贪噬菌属(Variovorax)、布劳特氏菌属(Blautia)、志贺氏埃希菌属(Escherichia shigella)和邻单胞菌属(Plesiomonas)的相对丰度显著增加(P<0.05)。试验表明,与投喂红虫相比,投喂开口配合饲料美洲鳗鲡白仔苗的肠道菌群种类和相对丰度存在明显差异,潜在的益生菌增加。 展开更多

关键词 美洲鳗鲡白仔苗 红虫 开口配合饲料 16SrDNA 肠道菌群

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鳗用进口白鱼粉和红鱼粉的营养成分比较 被引量：2

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作者 瞿倩 蔡国鹤 +1 位作者 陈学豪 翟少伟 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第13期95-97,共3页

试验旨在比较鳗用进口白鱼粉和红鱼粉的常规营养成分和氨基酸水平差异情况。试验设置白鱼粉组和红鱼粉组,每组4个重复,不同鱼粉样品的粗蛋白质水平接近且均高于64.5%。结果显示,白鱼粉的水分和粗蛋白质含量显著低于红鱼粉(P<0.05),... 试验旨在比较鳗用进口白鱼粉和红鱼粉的常规营养成分和氨基酸水平差异情况。试验设置白鱼粉组和红鱼粉组,每组4个重复,不同鱼粉样品的粗蛋白质水平接近且均高于64.5%。结果显示,白鱼粉的水分和粗蛋白质含量显著低于红鱼粉(P<0.05),灰分、钙和磷含量显著高于红鱼粉(P<0.05)。白鱼粉中天冬氨酸、丝氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸、胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸、精氨酸水平显著高于红鱼粉(P<0.05),其中相差值大于10%的氨基酸为丝氨酸和甘氨酸。白鱼粉中组氨酸、赖氨酸和色氨酸水平显著低于红鱼粉(P<0.05),其中相差值大于10%的氨基酸为组氨酸和色氨酸。白鱼粉的总非必需氨基酸和总氨基酸含量显著高于红鱼粉(P<0.05)。研究表明,与红鱼粉相比,白鱼粉水分、粗蛋白质含量较低,灰分、钙和磷的含量较高;白鱼粉丝氨酸和甘氨酸含量较高,组氨酸和色氨酸含量较低。 展开更多

关键词 进口鱼粉 白鱼粉 红鱼粉 营养成分 氨基酸

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不同规格花鳗鲡肌肉营养成分比较分析 被引量：2

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作者 卢文麒 许琪娅 +2 位作者 蔡国鹤 梁英 翟少伟 《饲料工业》 北大核心 2023年第14期80-86,共7页

研究旨在比较3种规格花鳗鲡肌肉常规营养成分、氨基酸含量和脂肪酸组成的差异情况。实验选用投喂相同饲料而不同规格的24尾花鳗鲡,分为10P组(体重约100 g/尾)、4P组(体重约250 g/尾)、2.5P组(体重约400 g/尾),进行肌肉基本营养成分、氨... 研究旨在比较3种规格花鳗鲡肌肉常规营养成分、氨基酸含量和脂肪酸组成的差异情况。实验选用投喂相同饲料而不同规格的24尾花鳗鲡,分为10P组(体重约100 g/尾)、4P组(体重约250 g/尾)、2.5P组(体重约400 g/尾),进行肌肉基本营养成分、氨基酸含量和脂肪酸组成测定和分析,每个组8重复。结果表明:2.5P组的粗蛋白含量最高;10P组粗脂肪含量最高;氨基酸总量高低依次为4P组(64.99%)>2.5P组(62.52%)>10P组(60.84%),4P组必需氨基酸总量、非必需氨基酸总量和鲜味氨基酸总量均最高;花鳗鲡肌肉多不饱和脂肪酸中的二十碳五烯酸与二十二碳六烯酸之和所占比例由高到低分别为4P组(10.64%)>2.5P组(9.80%)>10P组(9.06%)。结果表明,3种规格花鳗鲡肌肉营养价值存在一定差异,4P花鳗鲡肌肉营养价值总体上最高。 展开更多

关键词 花鳗鲡 肌肉 营养成分 氨基酸 脂肪酸

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欧洲鳗鲡必需氨基酸需要量初探 被引量：1

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作者 张明亮 许琪娅 +2 位作者 瞿倩 陈学豪 翟少伟 《饲料研究》 CAS 北大核心 2020年第11期61-63,共3页

文章通过分析欧洲鳗鲡肌肉必需氨基酸的比例,用鱼类"理想蛋白"模型中的A/E法估算出欧洲鳗鲡在黑仔鳗、幼鳗和成鳗3个生长阶段饲料中10种必需氨基酸的需要量,其中对蛋氨酸(Met)、色氨酸(Trp)和苯丙氨酸(Phe)的需要量与其他品... 文章通过分析欧洲鳗鲡肌肉必需氨基酸的比例,用鱼类"理想蛋白"模型中的A/E法估算出欧洲鳗鲡在黑仔鳗、幼鳗和成鳗3个生长阶段饲料中10种必需氨基酸的需要量,其中对蛋氨酸(Met)、色氨酸(Trp)和苯丙氨酸(Phe)的需要量与其他品种鳗鲡相比有较大差异。 展开更多

关键词 欧洲鳗鲡 必需氨基酸 营养需求

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