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羧甲基茯苓多糖对肠道病毒71型的抗病毒活性及其机制研究
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作者 曾露芝 吴春晨 +5 位作者 向蒙 彭逸斯 王哲 汪启明 刘实 彭国平 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期104-111,共8页
为研究羧甲基茯苓多糖(CMP)对肠道病毒71型(EV71)的抗病毒活性,并探讨其作用机制,采用CCK-8法检测CMP对人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(RD细胞)增殖的影响;采用致细胞病变效应(CPE)法观察CMP对EV71感染引起的CPE的抑制作用;采用致半数细胞病理... 为研究羧甲基茯苓多糖(CMP)对肠道病毒71型(EV71)的抗病毒活性,并探讨其作用机制,采用CCK-8法检测CMP对人恶性胚胎横纹肌瘤细胞(RD细胞)增殖的影响;采用致细胞病变效应(CPE)法观察CMP对EV71感染引起的CPE的抑制作用;采用致半数细胞病理改变的病毒感染剂量(TCID50)法检测CMP对EV71感染性病毒颗粒的抑制水平;采用RT-qPCR法检测EV71结构蛋白VP1的表达;采用Western blotting法分析VP1、P62、LC3、Caspase-3、cleaved Caspase-3蛋白的表达。结果表明:不同质量浓度(0、250、500、1000μg/mL)CMP对RD细胞无明显的细胞毒性;与对照组相比,CMP在无毒性浓度范围内可有效抑制EV71的复制,且能够呈剂量依赖性地降低病毒感染引起的细胞病变效应;CMP可呈剂量依赖性地降低EV71病毒结构蛋白VP1的表达和子代感染性病毒颗粒的产生;CMP可下调EV71病毒感染的RD细胞中的LC3-Ⅱ、cleaved Caspase-3的表达。 展开更多
关键词 羧甲基茯苓多糖 肠道病毒71型 抗病毒活性
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应用昆虫毒素基因构建重组病毒杀虫剂研究进展 被引量:3
2
作者 蒋洪 韩亚娟 +1 位作者 张珈敏 胡远扬 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期1-5,共5页
由于基因工程技术的发展和安全性研究的深入,以重组杆状病毒为主的重组昆虫病毒杀虫剂的应用正面临着突破。文章综述了通过插入昆虫专一性毒素基因构建重组昆虫病毒杀虫剂的技术路线,展望重组病毒杀虫剂的发展趋势。
关键词 昆虫毒素基因 重组病毒杀虫剂 杆状病毒 生物防治
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改造病毒基因组增强病毒杀虫剂杀虫效率研究进展 被引量:2
3
作者 蒋洪 周亮 +1 位作者 张珈敏 胡远扬 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期5-8,共4页
由于基因工程技术的发展和安全性研究的深入,以重组杆状病毒为主的重组昆虫病毒杀虫剂的应用正面临着突破。文章综述了通过修饰或删除昆虫病毒某些基因、插入控制宿主发育、代谢激素或酶的基因、删除、修饰昆虫病毒基因组中特定的基因... 由于基因工程技术的发展和安全性研究的深入,以重组杆状病毒为主的重组昆虫病毒杀虫剂的应用正面临着突破。文章综述了通过修饰或删除昆虫病毒某些基因、插入控制宿主发育、代谢激素或酶的基因、删除、修饰昆虫病毒基因组中特定的基因以扩大宿主域、应用RNA干扰技术提高昆虫病毒杀虫效率等构建重组昆虫病毒杀虫剂的技术路线,展望重组病毒杀虫剂的发展趋势。 展开更多
关键词 重组病毒杀虫剂 杆状病毒 生物防治 杀虫效率
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香菇菌丝体杆形病毒的RT-PCR检测及鉴定 被引量:4
4
作者 陈春乐 张忠信 +3 位作者 应国华 吕明亮 薛振文 李伶俐 《食用菌学报》 北大核心 2011年第3期79-82,共4页
根据GenBank公布的香菇杆形病毒部分基因组序列(登录号:GQ372842)设计引物,建立了香菇菌丝体病毒的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测方法,浙江省的36个香菇栽培菌株的菌丝体经鉴定,... 根据GenBank公布的香菇杆形病毒部分基因组序列(登录号:GQ372842)设计引物,建立了香菇菌丝体病毒的反转录-聚合酶链式反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测方法,浙江省的36个香菇栽培菌株的菌丝体经鉴定,菌株988、939、937、9319、868、66和WL-3的菌丝体不含杆形病毒;菌株灵的菌丝体可能含有杆形病毒;另外28个香菇菌株的菌丝体可能感染杆形病毒。 展开更多
关键词 香菇 菌丝体 杆形病毒 反转录-聚合酶链式反应
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巨细胞病毒与2型糖尿病视网膜病变关系的临床研究
5
作者 王晓昆 侯炜 +3 位作者 唐瑛 邓惠玲 杨李 刁波 《国际眼科杂志》 CAS 2008年第9期1857-1859,共3页
目的:探讨巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染与2型糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法:采用聚合酶链反应(chain reaction technique,PCR)技术分别检测T2DM患者86例(单纯T2DM组40例、视网膜病变组46例)以及正常... 目的:探讨巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)感染与2型糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)的关系。方法:采用聚合酶链反应(chain reaction technique,PCR)技术分别检测T2DM患者86例(单纯T2DM组40例、视网膜病变组46例)以及正常对照组30例外周血中的CMV-DNA,测定血浆内皮素(endothelin,ET)和一氧化氮(nitricox-ide,NO)。结果:T2DM视网膜病变组CMV-DNA检测阳性率(65.2%)明显高于单纯T2DM组(35.0%)和对照组(13.3%,P<0.01),T2DM视网膜病变组ET、NO含量与单纯T2DM组和对照组比较也有显著差异。结论:CMV感染与糖尿病视网膜病变的发生发展有关,CMV感染可能加重糖尿病视网膜病变。 展开更多
关键词 巨细胞病毒 糖尿病视网膜病变 内皮素 一氧化氮
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Toll样受体7小分子激动剂偶联流感病毒灭活疫苗的研究 被引量:2
6
作者 陈婷婷 胡云龙 +4 位作者 刘兵 李琴 贾铁留 郭德银 靳广毅 《中国医药导报》 CAS 2016年第9期26-30,共5页
目的研究Toll样受体7小分子激动剂SZU-101(T7)偶联H1N1流感病毒灭活疫苗对小鼠的免疫原性及安全性评价。方法将SZU-101与流感疫苗共价偶联形成SZU-101偶联流感疫苗(Flu-T7);体外评价Flu-T7的对脾脏淋巴细胞免疫诱导活性;体内评价Flu-T7... 目的研究Toll样受体7小分子激动剂SZU-101(T7)偶联H1N1流感病毒灭活疫苗对小鼠的免疫原性及安全性评价。方法将SZU-101与流感疫苗共价偶联形成SZU-101偶联流感疫苗(Flu-T7);体外评价Flu-T7的对脾脏淋巴细胞免疫诱导活性;体内评价Flu-T7对特异性抗体的诱导效果及特性,将BALB/c小鼠随机分为4组,每组8只,分别为生理盐水组、T7组、单独疫苗(Flu)组、Flu-T7组,采用腹腔注射免疫小鼠,3次免疫后检测血清中Flu特异性Ig G及其分型,并考察每组小鼠的生长状况。结果体外实验显示Flu-T7组比Flu组刺激产生更多的IL-12、IFN-γ、TNF-α和IL-6细胞因子(P<0.05),体内实验显示Flu-T7诱导的Flu特异性Ig G的血清抗体效价显著增高,同时利用Ig G2a/Ig G1的比例表明Flu-T7促进小鼠特异性Th1型免疫反应。各组小鼠脾脏指数比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 Flu-T7具有良好的有效性及安全性,有望成为新型高效的流感灭活疫苗。 展开更多
关键词 Toll样受体7小分子激动剂 流感疫苗 佐剂 免疫反应
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百合致病病毒及脱毒技术研究进展 被引量:7
7
作者 杨颖 彭国平 +2 位作者 刘实 饶力群 汪启明 《现代农业科技》 2019年第24期98-101,共4页
百合病毒病是当前制约百合产业发展的主要瓶颈之一,深入了解百合病毒的种类和致病的作用机制,可为百合感病种球的早发现、快速检测以及百合无毒种球筛选提供支持。本文介绍了常见的百合致病病毒种类、病毒检测技术以及脱毒技术等方面的... 百合病毒病是当前制约百合产业发展的主要瓶颈之一,深入了解百合病毒的种类和致病的作用机制,可为百合感病种球的早发现、快速检测以及百合无毒种球筛选提供支持。本文介绍了常见的百合致病病毒种类、病毒检测技术以及脱毒技术等方面的研究进展,并根据研究结果对开发无毒百合种球的新型筛选和检测技术进行展望,以期为促进百合产业健康快速发展提供参考。 展开更多
关键词 百合致病病毒 病毒检测技术 脱毒技术
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猪轮状病毒VP融合蛋白的构建及其免疫原性研究 被引量:2
8
作者 姚帅 徐进平 《安徽农业科学》 CAS 2018年第19期100-104,共5页
[目的]研究猪轮状病毒VP8与VP7融合蛋白的免疫原性。[方法]表达和纯化了猪轮状病毒VP8、VP7蛋白与TAT转导肽序列的融合蛋白VP8-VP7-TAT以及VP8-TAT、VP7-TAT。将3种融合蛋白分别经腹腔注射和灌胃方式免疫昆明小鼠,采集免疫小鼠血液和粪... [目的]研究猪轮状病毒VP8与VP7融合蛋白的免疫原性。[方法]表达和纯化了猪轮状病毒VP8、VP7蛋白与TAT转导肽序列的融合蛋白VP8-VP7-TAT以及VP8-TAT、VP7-TAT。将3种融合蛋白分别经腹腔注射和灌胃方式免疫昆明小鼠,采集免疫小鼠血液和粪便样品,检测血清特异性抗体Ig G和黏膜特异性抗体Ig A水平;期间观察小鼠体重变化;检测融合蛋白VP8-VP7-TAT的穿肠功能。[结果]腹腔注射组血清中Ig G抗体水平明显高于其他实验组,但其黏膜Ig A抗体水平较低;灌胃组血清中Ig G抗体水平略低于腹腔注射组,但明显高于对照组。灌胃组能诱导较高水平的黏膜Ig A抗体,高于其他实验组;融合蛋白VP8-VP7-TAT诱导产生的血清中Ig G抗体和黏膜Ig A抗体水平均高于VP8-TAT以及VP7-TAT;在实验周期中,各组小鼠体重均正常;融合蛋白VP8-VP7-TAT的穿肠活性较好,与对照组之间差异极显著。[结论]融合蛋白VP8-VP7-TAT经口服或注射小鼠后,能够有效诱导小鼠机体产生体液免疫应答,并且融合蛋白VP8-VP7-TAT经口服可诱导小鼠机体产生较强的黏膜免疫应答。融合蛋白VP8-VP7-TAT相较VP8-TAT、VP7-TAT,能诱导小鼠机体产生更强的免疫应答,具有更强的免疫原性。融合蛋白VP8-VP7-TAT具有穿肠功能。融合蛋白VP8-VP7-TAT经小鼠安全性实验表明具有很好的安全性。 展开更多
关键词 猪轮状病毒 VP7 VP8 转导肽 免疫原性
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猪传染性胃肠炎病毒S1融合蛋白的构建及其免疫原性研究 被引量:1
9
作者 王芳 徐进平 《安徽农业科学》 CAS 2018年第13期104-107,169,共5页
[目的]研究猪传染性胃肠炎病毒S1融合蛋白的免疫原性。[方法]表达和纯化了猪传染性胃肠炎病毒S1与TAT转导肽序列的融合蛋白S1-TAT,将融合蛋白S1-TAT经腹腔注射和灌胃方式免疫昆明小鼠,采集免疫小鼠血液和粪便样品,检测血清Ig G抗体和黏... [目的]研究猪传染性胃肠炎病毒S1融合蛋白的免疫原性。[方法]表达和纯化了猪传染性胃肠炎病毒S1与TAT转导肽序列的融合蛋白S1-TAT,将融合蛋白S1-TAT经腹腔注射和灌胃方式免疫昆明小鼠,采集免疫小鼠血液和粪便样品,检测血清Ig G抗体和黏膜Ig A抗体水平,期间观察小鼠体重变化。[结果]腹腔注射组诱导产生的血清Ig G抗体水平明显高于其他试验组(P<0.01),但其黏膜Ig A抗体水平较低;而灌胃组能够诱导中等水平的血清Ig G抗体和较高水平的黏膜Ig A抗体(P<0.01);在试验周期中,各组小鼠体重均正常。融合蛋白S1-TAT的穿肠活性较好,与对照组之间差异极显著(P<0.01)。[结论]融合蛋白S1-TAT经口服或注射小鼠后,能够有效诱导小鼠机体产生体液免疫应答,并且融合蛋白S1-TAT经口服可诱导小鼠机体产生黏膜免疫应答;融合蛋白S1-TAT具有穿肠功能;融合蛋白S1-TAT经口服或注射小鼠,均安全。 展开更多
关键词 猪传染性胃肠炎病毒S1基因 转导肽 免疫原性
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基于宿主细胞中磷脂“自然嵌合”的杆状病毒叶酸修饰
10
作者 王丽英 文莉 +2 位作者 吕诚 林毅 庞代文 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第2期221-223,共3页
杆状病毒是节肢动物特异性的DNA病毒,具有载体容量大、增殖滴度高、易于大量扩增且对脊椎动物无致病性等优点,在新型基因载体及疫苗开发等方面具有广阔的应用前景[1,2].然而,杆状病毒缺乏对脊椎动物细胞的靶向性,因此有必要对杆状病毒... 杆状病毒是节肢动物特异性的DNA病毒,具有载体容量大、增殖滴度高、易于大量扩增且对脊椎动物无致病性等优点,在新型基因载体及疫苗开发等方面具有广阔的应用前景[1,2].然而,杆状病毒缺乏对脊椎动物细胞的靶向性,因此有必要对杆状病毒进行修饰[3-5].叶酸(FA)是一种人体必需的维生素,具有分子量小、稳定性好、无免疫原性及易于与其它载体或药物键合等优点.由于叶酸受体在多种肿瘤细胞中过度表达,叶酸已成为一种常见的通用型肿瘤靶向分子[6-9]. 展开更多
关键词 杆状病毒 叶酸 修饰 磷脂 宿主细胞
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禽流感病毒高通量测序文库构建的方法优化
11
作者 张磊 杜安娜 +1 位作者 闵娟 高丁 《科学技术创新》 2018年第2期26-27,共2页
流感的常年流行是由于流感病毒较强的基因变异,通过高通量测序的方法来研究流感病毒的基因组是研究流感病毒基因变异的最主要方法,有助于进一步加强对流感的预防和治疗研究。而测序文库的构建是研究病毒基因变异的关键技术环节。目前,... 流感的常年流行是由于流感病毒较强的基因变异,通过高通量测序的方法来研究流感病毒的基因组是研究流感病毒基因变异的最主要方法,有助于进一步加强对流感的预防和治疗研究。而测序文库的构建是研究病毒基因变异的关键技术环节。目前,禽流感病毒的测序文库构建方法存在不足,需要对测序文库的构建方法进行优化。 展开更多
关键词 流感病毒 基因组高 通量测序
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光谱法测定伊曲康唑与牛血清和人血清白蛋白相互作用(英文) 被引量:11
12
作者 郭清莲 李冉 +3 位作者 蒋风雷 涂建成 李林尉 刘义 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第10期2147-2154,共8页
用荧光光谱和紫外吸收光谱法,在pH=7.4±0.1的0.1mol·L-1磷酸缓冲溶液中,研究了伊曲康唑与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)的相互作用.实验结果表明,伊曲康唑与牛血清白蛋白和人血清白蛋白作用的猝灭常数均随着温度的升... 用荧光光谱和紫外吸收光谱法,在pH=7.4±0.1的0.1mol·L-1磷酸缓冲溶液中,研究了伊曲康唑与牛血清白蛋白(BSA)和人血清白蛋白(HSA)的相互作用.实验结果表明,伊曲康唑与牛血清白蛋白和人血清白蛋白作用的猝灭常数均随着温度的升高而降低,伊曲康唑可以有规律地使血清白蛋白内源荧光猝灭,其猝灭机理可认为是伊曲康唑与白蛋白形成复合物的静态猝灭.获得了在不同温度下,伊曲康唑与血清白蛋白作用的结合常数以及ΔG、ΔH和ΔS等热力学参数.根据所得结果可推断伊曲康唑与白蛋白的作用力主要为疏水作用力,同时,利用荧光共振能量转移理论(FRET)计算得出了伊曲康唑与白蛋白结合位置的距离d.而且,利用同步荧光光谱和紫外光谱揭示了该反应中蛋白的结构和其微环境的变化. 展开更多
关键词 热力学参数 伊曲康唑 牛血清白蛋白 人血清白蛋白 荧光猝灭 紫外可见光谱
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CEREC全瓷嵌体单面与多面修复随访8年的生存状况的Meta分析 被引量:6
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作者 李晓莺 郭家平 +2 位作者 郭毅 刘俊 高群 《口腔医学研究》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期299-305,共7页
目的:探讨CEREC全瓷嵌体在后牙缺损中单面与多面修复随访8年的生存情况。方法:检索Cochrane图书馆,Pubmed,Embase,CBM,中国知网,维普,万方等中英文数据库,截止至2013年12月31日所有文献。纳入后牙牙体缺损患者,实验组为CEREC全瓷嵌体... 目的:探讨CEREC全瓷嵌体在后牙缺损中单面与多面修复随访8年的生存情况。方法:检索Cochrane图书馆,Pubmed,Embase,CBM,中国知网,维普,万方等中英文数据库,截止至2013年12月31日所有文献。纳入后牙牙体缺损患者,实验组为CEREC全瓷嵌体单面修复,对照组为多面修复。研究类型为随机对照试验或同期非随机对照试验。采用Cochrane手册中偏倚风险评价方法进行方法学质量评价,使用GRADE系统评估证据质量等级。结果:3个随访研究纳入分析。共计3538个CEREC全瓷嵌体。结果:CEREC全瓷嵌体生存率二面高于一面(8年)(HR=6.32,95%CI:1.72~23.20,P=0.005);三面高于一面(8年)(HR=5.87,95%CI:1.84~18.71,P=0.003),一面与≥四面类似(HR=1.92,95%CI:0.42~8.79,P=0.4)。GRADE系统评价结果显示2个结局证据水平为低级(一面vs.二面;一面vs.三面)。1个结局证据水平为极低级(CEREC全瓷嵌体一面vs.≥四面)。结论:在随访8年的观察中,当前证据表明CEREC全瓷嵌体生存风险并不完全随修复涉及面数增加而增加。 展开更多
关键词 嵌体 CEREC 生存 长期 HR值
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茯苓总三萜对小鼠肝损伤的预防作用 被引量:34
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作者 张先淑 饶志刚 +1 位作者 胡先明 刘鹏 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第15期270-273,共4页
目的:研究茯苓三萜对四氯化碳(CCl4)所致小鼠肝损伤的治疗作用。方法:将小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组及茯苓三萜高、中、低剂量组共6组。小鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液造模。治疗组以高、中、低剂量(180、90、45mg/(kg.d))茯... 目的:研究茯苓三萜对四氯化碳(CCl4)所致小鼠肝损伤的治疗作用。方法:将小鼠随机分为正常组、模型组、联苯双酯组及茯苓三萜高、中、低剂量组共6组。小鼠腹腔注射CCl4橄榄油溶液造模。治疗组以高、中、低剂量(180、90、45mg/(kg.d))茯苓三萜进行灌胃,阳性药物对照组用联苯双酯滴丸(180mg/(kg.d)),皆以1g/100mL羧甲基纤维素钠溶液混悬,0.2mL/10g体质量进行灌胃;正常组与模型组以0.9%生理盐水(0.2mL/10g)体质量灌胃。最后摘眼球取血,收集血清,检测丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性;以及小鼠肝组织HE染色后做病理切片观察。结果:与模型组相比茯苓三萜治疗组能够显著降低小鼠血清中AST、ALT活性。病理切片清楚地显示茯苓三萜能够显著减轻小鼠肝损伤的程度。结论:茯苓三萜对CCl4所致的小鼠肝损伤有明显治疗作用。 展开更多
关键词 茯苓三萜 小鼠 肝损伤 四氯化碳 治疗作用
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金黄色葡萄球菌活细胞合成ZnSe量子点 被引量:4
15
作者 张亚楠 杨玲玲 +2 位作者 涂家薇 崔然 庞代文 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1158-1163,共6页
利用"时-空耦合策略"在金黄色葡萄球菌内制得ZnSe量子点,从而将金黄色葡萄球菌转变成为荧光细胞.采用透射电子显微镜(TEM)、原子力显微镜(AFM)、动态光散射(DLS)、紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱等对从细胞内提取出的ZnSe... 利用"时-空耦合策略"在金黄色葡萄球菌内制得ZnSe量子点,从而将金黄色葡萄球菌转变成为荧光细胞.采用透射电子显微镜(TEM)、原子力显微镜(AFM)、动态光散射(DLS)、紫外-可见吸收光谱和荧光发射光谱等对从细胞内提取出的ZnSe量子点进行了表征.结果表明,提取出的ZnSe量子点粒径均一、分散性好,平均粒径为(2.96±0.76)nm,具有良好的荧光性质,最大荧光发射波长为537 nm. 展开更多
关键词 ZNSE 量子点 金黄色葡萄球菌 活细胞 生物合成
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薄膜分散联合冻融法制备小菜蛾抗菌肽脂质体研究 被引量:3
16
作者 邱瑞桂 靳世英 +5 位作者 徐和 徐平华 靳士晓 孟小林 袁海龙 韩晋 《环球中医药》 CAS 2012年第12期904-907,共4页
目的制备小菜蛾抗菌肽脂质体,提高小菜蛾抗菌肽的稳定性。方法采用薄膜分散联合冻融法制备小菜蛾抗菌肽脂质体,最终冷冻干燥成粉末。建立小菜蛾抗菌肽的HPLC含量测定方法,以包封率为主要指标,综合考虑冻融过程对包封率和粒径的影响,采... 目的制备小菜蛾抗菌肽脂质体,提高小菜蛾抗菌肽的稳定性。方法采用薄膜分散联合冻融法制备小菜蛾抗菌肽脂质体,最终冷冻干燥成粉末。建立小菜蛾抗菌肽的HPLC含量测定方法,以包封率为主要指标,综合考虑冻融过程对包封率和粒径的影响,采用正交实验进行处方优化。并考察形态、粒径、包封率及不同储存温度下的稳定性。结果通过处方工艺优化制备的小菜蛾脂质体冻干粉呈球形或类球形,平均粒径为(223.1±31.2)nm,包封率为62%。本品在4℃下贮存3个月稳定,粒径及包封率无显著性变化。结论采用薄膜分散联合冻融法制备的小菜蛾抗菌肽脂质体能显著提高其长期贮存稳定性。 展开更多
关键词 小菜蛾抗菌肽 脂质体 薄膜分散法 冻融法 包封率 稳定性
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HrpZ激发对几种植物防御相关酶活性的影响 被引量:3
17
作者 袁瑞玲 孟小林 +2 位作者 徐进平 王健 鲁伟 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第32期13951-13953,14066,共4页
[目的]测定HrpZ激发对黄瓜、番茄和茄子3种防御酶活性的影响情况。[方法]以盆栽黄瓜、番茄和茄子幼苗为材料,研究了15μg/ml的HrpZ激发黄瓜、番茄和茄子3种植株幼叶后,不同时间苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)3... [目的]测定HrpZ激发对黄瓜、番茄和茄子3种防御酶活性的影响情况。[方法]以盆栽黄瓜、番茄和茄子幼苗为材料,研究了15μg/ml的HrpZ激发黄瓜、番茄和茄子3种植株幼叶后,不同时间苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)3种防御酶活性的影响变化。[结果]经HrpZ激发后,植株叶片中的3种防御酶活性均有不同程度的提高。HrpZ喷施黄瓜12、24和48 h后,PPO、PAL、POD活性相应比清水对照提高83.0%、54.1%和39.3%;HrpZ喷施番茄12、24和48 h后,POD、PPO、PAL活性相应比清水对照提高31.8%、44.6%和33.3%;HrpZ喷施茄子1和3 h,POD、PPO活性相应比清水对照提高228.4%和142.5%。[结论]HrpZ能诱导植物PAL、POD、PPO的表达,从而诱导植物防御反应和系统获得抗性,增强植物的抗病性。 展开更多
关键词 HrpZ 苯丙氨酸解氨酶 过氧化物酶 多酚氧化酶 诱导抗性
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桑色素与血清白蛋白相互作用热力学行为 被引量:3
18
作者 谢文 何欢 +2 位作者 董家新 郭清莲 刘义 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第7期725-733,共9页
利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、分子模拟等方法,在近似生理条件下,以牛血清白蛋白(BSA)为模式蛋白质,研究了桑色素(Morin)和血清白蛋白相互作用的热力学行为及其特征。荧光光谱结果表明:Morin能有效猝灭BSA的内源荧光,猝... 利用荧光光谱、紫外-可见吸收光谱、圆二色谱、分子模拟等方法,在近似生理条件下,以牛血清白蛋白(BSA)为模式蛋白质,研究了桑色素(Morin)和血清白蛋白相互作用的热力学行为及其特征。荧光光谱结果表明:Morin能有效猝灭BSA的内源荧光,猝灭机制为静态猝灭;通过van’t Hoff方程,获取了BSA与Morin结合的热力学参数(ΔH^θ、ΔS^θ、ΔG^θ等),发现Morin与BSA两者之间的相互作用是一个吉布斯自由能降低的自发过程,且氢键和范德华力是二者结合的驱动力。通过分子模拟方法,发现Morin结合在BSA分子亚结构域ⅢA的疏水腔内位点Ⅱ,荧光共振能量转移结果表明Morin和与BSA的两个色氨酸残基的平均距离为3.09nm。圆二色谱结果表明Morin分子的结合会引起BSA分子α-螺旋含量降低。 展开更多
关键词 桑色素 牛血清白蛋白 相互作用 热力学参数
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HIV-1跨膜蛋白gp41重组抗原的表达及其免疫反应性 被引量:5
19
作者 王林定 付碧石 +1 位作者 李宝林 钟平 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期99-101,共3页
目的为开发和建立敏感、特异的抗HIV-1抗体的检测方法研制重组gp41抗原。方法根据HIV-1的基因序列,设计并合成了1对PCR扩增引物,应用PCR技术从HIV-1外膜基因组中扩增出HIV-1的gp41截短体,将扩增的基因片段插入质粒pET-28a中构建成重组... 目的为开发和建立敏感、特异的抗HIV-1抗体的检测方法研制重组gp41抗原。方法根据HIV-1的基因序列,设计并合成了1对PCR扩增引物,应用PCR技术从HIV-1外膜基因组中扩增出HIV-1的gp41截短体,将扩增的基因片段插入质粒pET-28a中构建成重组表达质粒pET-gp41。诱导表达并纯化gp41重组抗原,对gp41进行了初步应用分析。结果gp41在大肠埃希菌BL21(DE3)中获得高表达,表达量占菌体总蛋白量的26.08%。纯化后截短体gp41的纯度为97.94%。经间接ELISA和免疫印迹检测,纯化后的表达产物gp41具有很高的抗原特异性和免疫反应性。结论研制的重组抗原gp41有较强的抗原性和潜在的应用价值。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型 gp41抗原 免疫原性
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高通量微孔板DAMBO-P^H荧光检测一氧化氮 被引量:2
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作者 张晓玲 杨桥 马明 《分析科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期522-526,共5页
一氧化氮(NO)是生物体内的一种重要生物信号传导分子,广泛参与生物体内多种生理及病理过程。为建立快速高效、准确检测生物体释放NO的分析方法,本文选用高灵敏度、高选择性的NO特异性荧光探针8-(3,4-diaminophenyl)-2,6-bis(2-car-boxye... 一氧化氮(NO)是生物体内的一种重要生物信号传导分子,广泛参与生物体内多种生理及病理过程。为建立快速高效、准确检测生物体释放NO的分析方法,本文选用高灵敏度、高选择性的NO特异性荧光探针8-(3,4-diaminophenyl)-2,6-bis(2-car-boxyethyl)-4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene(DAM-BO-PH),激发波长和发射波长分别为520 nm和535 nm,以高通量微孔板(384孔)作为实验工具载体。该方法荧光强度与NO浓度在8.0×10-10~8.0×10-7mol.L-1范围内呈良好线性关系,R=0.9989,检出限为0.18 nmol.L-1,回收率为98%~102%。该方法应用于多种生物样品中释放NO的分析检测,结果令人满意。 展开更多
关键词 一氧化氮 DAMBO-PH 荧光检测 高通量微孔板
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