长期高脂饮食加小剂量链脲佐霉素建立人类普通2型糖尿病大鼠模型的研究 被引量：81

1

作者 杨架林 李果 +5 位作者 刘优萍 张芳林 崔九兰 张迪 周文中 罗敏 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2003年第3期138-141,共4页

目的　建立类似人类普通 2型糖尿病大鼠模型。方法　采用长期高脂高能量饮食结合小剂量链脲佐霉素 (STZ)腹腔注射的方法。结果　模型大鼠有高血糖 (18 78± 1 97)mmol L、高甘油三酯血症 (10 95 4± 5 5 4 )mmol L、高胆固醇... 目的　建立类似人类普通 2型糖尿病大鼠模型。方法　采用长期高脂高能量饮食结合小剂量链脲佐霉素 (STZ)腹腔注射的方法。结果　模型大鼠有高血糖 (18 78± 1 97)mmol L、高甘油三酯血症 (10 95 4± 5 5 4 )mmol L、高胆固醇血症 (2 4 4 2± 0 74 )mmol L、脂肪肝、高胰岛素血症 (0 937± 0 2 6 )mmol L、胰岛素敏感性下降及不低于正常对照组的体重。结论　这是一种类似人普通 展开更多

关键词 高脂饮食 链脲佐霉素 糖尿病 大鼠模型 非胰岛素依赖型

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人胰岛素瘤相关蛋白-2基因的克隆及原核表达研究 被引量：2

2

作者 贾秀娟 陈战 +3 位作者 许光武 谢超 谢晓雁 罗敏 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第3期196-199,共4页

目的 克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白。 方法 抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,... 目的 克隆1型糖尿病自身抗原人胰岛素瘤相关蛋白-2(IA-2)的编码基因,并从大肠杆菌中表达具有免疫原性的人IA-2重组蛋白。 方法 抽提胎脑总RNA,通过RT-PCR获得编码IA-2胞内结构域的cDNA,与Pinpoint Xa-1T质粒相连接,构建表达型重组质粒,经转化、筛选并鉴定后,从大肠杆菌诱导表达生物素酰化融合蛋白,进而用亲和层析纯化之,以dot-blot鉴定其免疫原性。 结果 重组质粒转化的大肠杆菌经IPTG诱导表达及亲和层析后得到了纯度较高、分子量约为59kd的融合蛋白,表达产物用dot-blot证明具有免疫原性。 结论 原核表达的生物素酰化人IA-2胞内段融合蛋白具有正确的免疫学构象。 展开更多

关键词 胰岛素瘤相关蛋白-2 克隆 原核表达 1型糖尿病 自身抗原 大肠杆菌 RT-PCR

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分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子融合蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 被引量：2

3

作者 叶传忠 关明 +3 位作者 张芳林 苏兵 张永康 陈常庆 《复旦学报（医学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期307-310,共4页

目的　表达及纯化人分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 (secretedformTNF relatedactivation in ducedcytokine,sTRANCE)蛋白。方法　将sTRANCE结构基因重组到含麦芽糖结合蛋白 (MBP)的融合蛋白原核表达载体 pMAL c2x中 ,在大肠杆菌... 目的　表达及纯化人分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 (secretedformTNF relatedactivation in ducedcytokine,sTRANCE)蛋白。方法　将sTRANCE结构基因重组到含麦芽糖结合蛋白 (MBP)的融合蛋白原核表达载体 pMAL c2x中 ,在大肠杆菌中进行表达。 结果　经IPTG诱导表达出的MBP sTRANCE融合蛋白相对分子质量约 70 0 0 0 ,并经Westernblot分析证实。用直链淀粉琼脂糖凝胶 (amyloseresin)亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。结论　成功地获得sTRANCE蛋白 ,为进一步研究其生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性打下了基础。 展开更多

关键词 分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子 原核表达 亲和层析 融合蛋白 STRANCE ODF 大肠杆菌

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甲状腺激素受体研究进展 被引量：8

4

作者 罗敏 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第11期1059-1061,共3页

关键词 甲状腺激素受体 免疫组化法 免疫荧光标记技术 基因表达 基因调控

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不同病理甲状腺组织中TPO免疫组化的初步研究 被引量：1

5

作者 陈春荣 王铸钢 +3 位作者 李凤英 唐金凤 陈家伦 杨践 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1998年第1期1-4,共4页

探讨不同甲状腺病理组织中甲状腺过氧化物酶含量的变化,以免疫亲和层析纯化的人甲状腺过氧化物酶(hTPO)作为免疫原制备了TPO特异性单克隆抗体(TPOmAb),利用7G7 TPOmAb建立了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化方法,检测外科切除的... 探讨不同甲状腺病理组织中甲状腺过氧化物酶含量的变化,以免疫亲和层析纯化的人甲状腺过氧化物酶(hTPO)作为免疫原制备了TPO特异性单克隆抗体(TPOmAb),利用7G7 TPOmAb建立了碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶(APAAP)免疫组化方法,检测外科切除的甲状腺组织(16例腺瘤,18例乳头状癌,15例桥本氏甲状腺炎)及3例正常甲状腺组织TPO染色数量的差异性。结果显示TPO在桥本甲状腺炎中染色无明显降低.而部分恶性甲状腺组织中TPO含量较低。表明甲状腺过氧化物酶在良、恶性甲状腺组织中的表达存在明显的差异性。 展开更多

关键词 甲状腺肿瘤 甲状腺病理组织 TPO APAAP

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自身免疫性甲状腺病TSH受体抗体异质性研究

6

作者 陈春荣 陈名道 +3 位作者 邓侠兴 李凤英 唐金凤 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1999年第6期481-483,510,共4页

目的研究自身免疫性甲状腺病（ＡＩＴＤ患者ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ的异质性。方法选择异质性ＴＲＡｂ患者６例，用ＥＢ病毒转染其外周血Ｂ淋巴细胞并筛选能产生单克隆ＴＲＡｂ的阳性细胞孔。结果６例患者的ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白... 目的研究自身免疫性甲状腺病（ＡＩＴＤ患者ＴＳＨ受体抗体（ＴＲＡｂ的异质性。方法选择异质性ＴＲＡｂ患者６例，用ＥＢ病毒转染其外周血Ｂ淋巴细胞并筛选能产生单克隆ＴＲＡｂ的阳性细胞孔。结果６例患者的ＴＳＨ结合抑制免疫球蛋白（ＴＢＩＩ）测定值为５１％～８９％，患者１、２、４、５、６存在甲状腺兴奋性抗体（ＴＳＡ），而患者１、２、３可测得甲状腺阻断性抗体（ＴＳＢＡｂ）。以ＥＢ病毒转染外周血Ｂ淋巴细胞后，患者３有５个细胞孔能产生ＴＢＩＩ，患者６有４个细胞孔能产生ＴＳＡｂ。ＴＲＡｂ的测定值存在量效关系。结论ＡＩＴＤ患者可产生兴奋性或抑制性ＴＳＨ受体抗体，ＴＲＡｂ存在异质性。 展开更多

关键词 甲状腺疾病 TSH 受体 抗体 异质性 AITD

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肿瘤坏死因子相关激活诱导因子(TRANCE)研究进展

7

作者 叶传忠 张芳林 关明 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期553-556,共4页

关键词 肿瘤相关因子 激活诱导因子 TRANCE 分子结构 表达 调控

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胰岛素、胰岛素原对肝胚胎瘤细胞PAI-1分泌的影响 被引量：1

8

作者 李长贵 宁光 +3 位作者 彭怡文 夏泳 叶娟 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 1997年第6期430-432,共3页

选择在合成PAI－1方面与肝细胞相似的肝胚胎瘤细胞株（HEPG2），用不同浓度的胰岛素、胰岛素原在不同时间内刺激单层HEPG2细胞，测培液中PAI—1活性。结果发现：胰岛素和胰岛素原均能刺激PAI－1的分泌，具有时间和剂量依赖性。不同浓度... 选择在合成PAI－1方面与肝细胞相似的肝胚胎瘤细胞株（HEPG2），用不同浓度的胰岛素、胰岛素原在不同时间内刺激单层HEPG2细胞，测培液中PAI—1活性。结果发现：胰岛素和胰岛素原均能刺激PAI－1的分泌，具有时间和剂量依赖性。不同浓度的胰岛素、胰岛素原在刺激8h内PAI－1的分泌差异性不明显，8h后超生理量的胰岛素、胰岛素原的刺激作用明显高于生理浓度的胰岛素和胰岛素原。 展开更多

关键词 肝胚胎瘤细胞 胰岛素 胰岛素原 PAI-1 糖尿病

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小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响 被引量：46

9

作者 周丽斌 杨颖 +3 位作者 唐金凤 李凤英 李荣英 陈名道 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2002年第5期412-414,共3页

目的探讨小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响。　方法检测药物处理 2 4h或 4 8h后 3T3-L1脂肪细胞对培养液中的葡萄糖消耗量 ,以 2 -脱氧 - 3H -D -葡萄糖摄入法观察葡萄糖的转运率。　结果在低糖 (5 .5mmol L)和高糖 (2 5mmol L)培养液中 ,... 目的探讨小檗碱对脂肪细胞糖代谢的影响。　方法检测药物处理 2 4h或 4 8h后 3T3-L1脂肪细胞对培养液中的葡萄糖消耗量 ,以 2 -脱氧 - 3H -D -葡萄糖摄入法观察葡萄糖的转运率。　结果在低糖 (5 .5mmol L)和高糖 (2 5mmol L)培养液中 ,小檗碱皆有显著的降糖作用 ,0 .1～ 2 0 0 μmol L小檗碱能使葡萄糖的消耗量增加2 6 % ～ 2 0 1 % ,其作用呈剂量效应 ,1 0 μmol L小檗碱能明显增强 1、1 0 0nmol L胰岛素的降糖作用 (P <0 .0 1 )。0 .1、1、1 0 μmol L小檗碱使 3T3 -L1脂肪细胞的葡萄糖转运率明显增加 ,50、1 0 0 μmol L小檗碱使其葡萄糖转运率明显降低。　 展开更多

关键词 小檗碱 脂肪细胞 糖代谢 3T3-L1细胞 葡萄糖消耗 葡萄糖转运

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2型糖尿病大鼠模型的建立及其糖代谢特征分析 被引量：132

10

作者 张芳林 李果 +6 位作者 刘优萍 丁伟 殷峻 许光武 张迪 周文中 罗敏 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2002年第1期16-20,共5页

目的　建立一种接近于人类普通型 2型糖尿病大鼠模型。方法　 8周龄SD大鼠高热量饮食喂养 2个月后给予小剂量STZ建立 2型糖尿病模型 ,然后进行胰岛素 葡萄糖耐量试验、胰岛免疫组化及其图像分析 ,并与大、小剂量STZ、单纯高热量饮食等... 目的　建立一种接近于人类普通型 2型糖尿病大鼠模型。方法　 8周龄SD大鼠高热量饮食喂养 2个月后给予小剂量STZ建立 2型糖尿病模型 ,然后进行胰岛素 葡萄糖耐量试验、胰岛免疫组化及其图像分析 ,并与大、小剂量STZ、单纯高热量饮食等各组大鼠相应指标比较。结果　高热量饮食一段时间后给予小剂量STZ的大鼠模型外周胰岛素敏感性降低 ,胰岛素合成和分泌相对于单纯高热量饮食组大鼠降低 ,但仍高于正常对照组。结论　该模型大鼠具有外周胰岛素抵抗和胰岛功能仅轻微受损等特征 ,具有类似人类 2型糖尿病的临床表现 。 展开更多

关键词 实验性糖尿病 糖代谢 大鼠模型

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小檗碱的体外降糖作用 被引量：42

11

作者 殷峻 胡仁明 +3 位作者 唐金凤 李凤英 陈名道 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第5期425-427,共3页

目的研究小檗碱能否通过刺激胰岛素分泌或直接作用于肝细胞而产生降糖作用。　方法检测HepG2细胞 2 4h培养液中葡萄糖的消耗量。另外检测 βTC3细胞胰岛素的释放量。　 结果小檗碱 5～ 10 0 μmol/L可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加 32 ... 目的研究小檗碱能否通过刺激胰岛素分泌或直接作用于肝细胞而产生降糖作用。　方法检测HepG2细胞 2 4h培养液中葡萄糖的消耗量。另外检测 βTC3细胞胰岛素的释放量。　 结果小檗碱 5～ 10 0 μmol/L可使HepG2细胞的葡萄糖消耗量增加 32 %～ 6 0 % (P <0 .0 0 1) ,与 1mmol/L二甲双胍相比无显著差异 ;小檗碱的降糖效能随着培养液中葡萄糖浓度的升高而降低 ;胰岛素对小檗碱的降糖作用没有明显的影响。小檗碱没有刺激βTC3细胞胰岛素分泌的作用。　 结论小檗碱能通过肝细胞发挥非胰岛素依赖的降糖作用 。 展开更多

关键词 小檗碱 HEPG2细胞 ΒTC3细胞 降糖作用

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小檗碱对大鼠脂代谢的影响 被引量：23

12

作者 殷峻 陈名道 +2 位作者 杨颖 唐金凤 李凤英 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第B10期28-30,共3页

目的 研究小檗碱对实验大鼠血脂和组织内甘油三酯沉积的影响。方法 设计七组大鼠:普食对照组,普食小檗碱治疗组;高脂对照组,高脂小檗碱治疗组;高脂饮食与极小剂量链脲霉素诱导的糖尿病对照组,糖尿病小檗碱治疗组和糖尿病二甲双弧治疗组... 目的 研究小檗碱对实验大鼠血脂和组织内甘油三酯沉积的影响。方法 设计七组大鼠:普食对照组,普食小檗碱治疗组;高脂对照组,高脂小檗碱治疗组;高脂饮食与极小剂量链脲霉素诱导的糖尿病对照组,糖尿病小檗碱治疗组和糖尿病二甲双弧治疗组。5周后观察分析各组血清甘油三酯(TG)、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、游离脂肪酸(FFA)水平以及肝脏和骨骼肌中甘油三酯含量。结果 小檗碱使普食、高脂、糖尿病鼠的血FFA水平分别下调14％、24％、20％,TG分别降低11％、57％、14％。小檗碱使高脂鼠肝脏和骨骼肌中的甘油二酯含量分别减少36％和23％。结论 小檗碱对实验大鼠的脂代谢有显著的改善作用,该药能降低血清和组织中的甘油三酯含量,同时降低血清FAA水平。 展开更多

关键词 小檗碱 大鼠 脂代谢 甘油三酯 游离脂肪酸

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妊娠期雌二醇和催乳素与瘦素的关系 被引量：10

13

作者 唐金凤 朱鋐达 +3 位作者 郁忠勤 杨键 汪启迪 陈名道 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第1期44-46,共3页

目的研究妊娠期间性激素与瘦素水平之间的关系。　方法在 180例不同孕周的妇女中 ,按孕周分为 <2 0周组 ,2 0～ 2 3周组 ,2 4～ 2 7周组 ,≥ 2 8周组 ,采用酶联免疫吸附法测定其外周血血清雌二醇 (E2 )和催乳素(PRL) ,放射免疫法测... 目的研究妊娠期间性激素与瘦素水平之间的关系。　方法在 180例不同孕周的妇女中 ,按孕周分为 <2 0周组 ,2 0～ 2 3周组 ,2 4～ 2 7周组 ,≥ 2 8周组 ,采用酶联免疫吸附法测定其外周血血清雌二醇 (E2 )和催乳素(PRL) ,放射免疫法测定血清瘦素水平 ,分析这些激素之间的相互关系。　结果E2 和PRL均随妊娠进展而逐步升高 (P <0 .0 0 0 1) ,组间均有显著差异 (P <0 .0 5 )。各组瘦素水平均高于非妊娠组 ,但组间差异无显著性。瘦素水平与孕妇的体重及体重指数显著相关 (P <0 .0 1) ,与PRL也呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,而与E2 无明显相关。　结论PRL水平与妊娠期瘦素水平升高有一定关系。 展开更多

关键词 妊娠 雌二醇 催乳素 瘦素 性激素

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抵抗素基因多态性与华东地区2型糖尿病的相关性 被引量：14

14

作者 董艳 李果 +3 位作者 骆天红 吴刚 黄微 罗敏 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2003年第2期97-99,共3页

目的 研究华东地区汉族人群中抵抗素基因的单核苷酸多态性(SNP)及其与2型糖尿病的相关性。方法 选取华东地区汉族2型糖尿病患者116例及正常对照者96例,采用直接测序法对抵抗素基因作SNP筛查,并作进一步的基因分型。结果 抵抗素基因启动... 目的 研究华东地区汉族人群中抵抗素基因的单核苷酸多态性(SNP)及其与2型糖尿病的相关性。方法 选取华东地区汉族2型糖尿病患者116例及正常对照者96例,采用直接测序法对抵抗素基因作SNP筛查,并作进一步的基因分型。结果 抵抗素基因启动子区发现4个SNP(-638G/A,-537A/C,-420C/C,-358G/A),内含子区3个SNP(-167C/T,+157C/T、+299C/A),这些SNP的等位基因频率在2型糖尿病和正常对照组之间无显著性差异(P>0.05)。结论 抵抗素基因的SNP与华东地区汉族人群中2型糖尿病无显著相关性。 展开更多

关键词 2型糖尿病 抵抗素 基因 单核苷酸多态性

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人甲状腺受体相互作用蛋白15基因全长cDNA的克隆及其特性 被引量：5

15

作者 彭永德 张新 +6 位作者 宋怀东 姜春玲 曲建 陈名道 胡仁明 陈家伦 韩泽广 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期563-568,共6页

通过生物信息学分析及RT PCR技术 ,从人垂体cDNA文库中克隆到甲状腺素受体相互作用蛋白 15(hTRIP15)的全长cDNA ,长度 1963bp ,编码 4 4 3氨基酸 ,同时克隆该基因不同剪接方式所形成的新的异构体 ,长度 1984bp ,编码 4 50氨基酸 .与基... 通过生物信息学分析及RT PCR技术 ,从人垂体cDNA文库中克隆到甲状腺素受体相互作用蛋白 15(hTRIP15)的全长cDNA ,长度 1963bp ,编码 4 4 3氨基酸 ,同时克隆该基因不同剪接方式所形成的新的异构体 ,长度 1984bp ,编码 4 50氨基酸 .与基因组序列比较显示该基因具有 12个外显子 ,5号外显子 3′端具有 2个剪切的接点 (-ag) .搜寻UniGene数据库作染色体定位于D15S146 D15S117,该基因在生物进化上具有较高的保守性 ,从单细胞藻类到人类均有该基因同源物表达 ,亚细胞定位为核内 .Northern杂交显示 ,该基因具有 3种不同大小的转录本 ,分别约为 2 0、3 5及 4 0kb ,且在人体各组织中均有一定表达 ,其中骨骼肌、心脏及肾脏组织为高表达 .半定量RT PCR显示在一些内分泌组织均有表达 ,以肾上腺较高 . 展开更多

关键词 hTRIP15 CDNA克隆 亚细胞定位 组织表达谱 染色体定位 人甲状腺素 受体相互作用蛋白15

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糖尿病性高血压大鼠肾损害相关基因cDNA片段的克隆与初步鉴定 被引量：4

16

作者 张芳林 李果 +6 位作者 叶传忠 丁伟 刘优萍 谢超 张迪 孙卫华 罗敏 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第1期94-99,共6页

为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异... 为筛选大鼠糖尿病性高血压病所致的肾损害相关基因 ,自发性高血压大鼠以STZ 5 0mg/kg一次性尾静脉注射 ,建立糖尿病性高血压大鼠模型 ,4周后该模型大鼠尿蛋白持续阳性 ,电镜观察到肾小球基质增生、足突融合或扁平 .应用荧光标记的差异显示反转录聚合酶链反应 (DDRT PCR)及RNA印迹技术 ,比较两种模型大鼠肾皮质的基因表达差异 ,并进行差异条带的cDNA序列生物信息学分析 .其中 4个差异条带与Genbank数据库比较 ,2个为未知基因 ,2个为已知基因 ,即成淀粉样糖蛋白 (amyloidogenicglycoprotein ,AGG)、CDK10 9,两者可能与糖尿病性高血压肾损害的发生相关 ,对它们的进一步研究将为肾损害发病机理的发现提供思路 . 展开更多

关键词 差异显示 糖尿病性高血压 肾损害 生物信息学 相关基因 CDNA片段 克隆

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竞争性RT-PCR在基因表达定量分析中的应用 被引量：7

17

作者 苏青 罗敏 +3 位作者 刘红标 陆志强 陈源 陈家伦 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第3期265-266,共2页

目的用竞争性RT -PCR测定鼠脑GoαmRNA水平。　方法通过RT -PCR制备内标和外标 ,将等量内标和倍比稀释的外标作竞争性共扩增 ,得到标准曲线。然后将等量内标与cDNA标本共扩增 ,通过标准曲线求出标本中靶序列的水平。　结果内标和外标在... 目的用竞争性RT -PCR测定鼠脑GoαmRNA水平。　方法通过RT -PCR制备内标和外标 ,将等量内标和倍比稀释的外标作竞争性共扩增 ,得到标准曲线。然后将等量内标与cDNA标本共扩增 ,通过标准曲线求出标本中靶序列的水平。　结果内标和外标在共扩增反应中表现出明显的竞争性。一鼠脑标本GoαmRNA的测定结果为 17.6 2amol/ μg总RNA。　 结论竞争性RT -PCR是一种简便、快速、灵敏的测定基因表达 (mRNA) 展开更多

关键词 基因表达 聚合酶链反应 G蛋白 MRNA RT-PCR

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cDNA RDA在类似普通2型糖尿病大鼠肾脏组织基因差异表达筛查中的应用 被引量：3

18

作者 杨架林 李果 +6 位作者 张芳林 刘优萍 张迪 周文中 许光武 杨义生 罗敏 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期667-671,共5页

应用代表性差异分析 (cDNARDA)技术 ,对类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏组织基因差异表达进行筛查 ,初步探讨类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏损害发病的分子机制 .首先以类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏组织作为实验组 (Tester) ,正常大鼠肾脏作为... 应用代表性差异分析 (cDNARDA)技术 ,对类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏组织基因差异表达进行筛查 ,初步探讨类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏损害发病的分子机制 .首先以类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏组织作为实验组 (Tester) ,正常大鼠肾脏作为对照组或驱动组 (Driver)通过cDNARDA进行基因差异表达筛查 ;最终的差异产物亚克隆到Puc 18载体 ,测序及并进行生物信息学分析 ;半定量RT PCR对筛查到新的基因进行初步的鉴定 .结果发现 9个新ESTs ,2个新基因 .这 2个新基因分别与人及小鼠的丝氨酸蛋白酶抑制因子F ,及真核细胞转录启动因子 3亚单位 5 (EIF 3epsilon)基因有高度的相似性 (>90 % )并在类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏组织表达上调 .推测 2个新基因分别是大鼠的丝氨酸蛋白酶抑制因子F及真核细胞转录启动因子 3亚单位 5 .两个新基因在类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏组织表达上调 ,可能与类似普通 2型糖尿病大鼠肾脏损害相关 .同时 。 展开更多

关键词 cDNARDA 糖尿病 大鼠 肾脏组织 基因差异表达 表达序列标签

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PPARγ2诱导脂肪细胞分化相关基因的克隆及鉴定 被引量：4

19

作者 李果 左祥生 +3 位作者 丁伟 骆天红 李纪平 罗敏 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2001年第5期404-407,427,共5页

目的分离和克隆小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2 (mPPARγ2 )诱导脂肪细胞分化的相关基因。方法在体外建立mPPARγ2诱导NIH3T3成纤维细胞分化成脂肪细胞模型基础上 ,采用mRNA差异显示技术分离、克隆PPARγ2诱导的脂肪细胞高表达或低... 目的分离和克隆小鼠过氧化物酶体增殖体激活受体γ2 (mPPARγ2 )诱导脂肪细胞分化的相关基因。方法在体外建立mPPARγ2诱导NIH3T3成纤维细胞分化成脂肪细胞模型基础上 ,采用mRNA差异显示技术分离、克隆PPARγ2诱导的脂肪细胞高表达或低表达的cDNA片段 ,再通过半定量RT—PCR证实。　结果经mRNA差异显示技术分离到 2 0条差异显示片段 ,进一步对差异显示片段进行PCR扩增、T/A亚克隆及测序分析 ,与GenBank基因数据库比较后 ,得到 8个已知基因 ,一条新基因序列 ,2个EST序列和 7个新的EST序列。半定量RT—PCR结果显示UNR基因在PPARγ2诱导的脂肪细胞中表达上调 ,而凋亡抑制因子 5 (API5 )的表达则下调。 展开更多

关键词 PPARΓ2 MRNA差异显示 基因克隆 CDNA 脂肪细胞分化

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妊娠妇女骨骼密度变化的观察 被引量：5

20

作者 王琴琴 朱鋐达 +3 位作者 郁忠勤 杨键 张志方 罗敏 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2000年第4期328-330,共3页

目的观察妊娠期到产后妇女骨骼密度的变化。　方法 198名妇女 ,分为四组 ,妊娠 2 4周 6 3人、36周 5 3人、产后 6周 5 8人及对照组 2 4人 ,运用英国CUBAClinical定量骨超声分析系统 ,测定其左侧跟骨的骨密度 [宽频超声衰减 (BUA)和超声... 目的观察妊娠期到产后妇女骨骼密度的变化。　方法 198名妇女 ,分为四组 ,妊娠 2 4周 6 3人、36周 5 3人、产后 6周 5 8人及对照组 2 4人 ,运用英国CUBAClinical定量骨超声分析系统 ,测定其左侧跟骨的骨密度 [宽频超声衰减 (BUA)和超声传导速度 (VOS) ],分析妊娠对骨密度的影响。　结果四组妇女的BUA没有明显差异 ,VOS随妊娠发展直到产后逐渐下降 ,与对照组相比 ,妊娠 2 4周及 36周VOS虽渐有下降 ,但并无显著性差异 ,产后 6周组妇女VOS值较妊娠组及对照组明显下降 (P <0 .0 5 )。　结论妊娠期间存在骨密度下降现象 ,但到产后 6周才能检测到定量骨超声指标的变化。定量骨超声作为一种无福射、无创伤的骨骼强度测定技术 ,适用于妊娠妇女骨骼强度监测。 展开更多

关键词 定量骨超声 妊娠 骨骼密度 宽频超声衰减

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