基于荧光定量PCR检测和原位杂交技术分析湖北省蛋鸡滑液支原体的感染情况

1

作者 王纯 王晴 +8 位作者 吴晓倩 胡婷 崔卫涛 裴洁 宋铁平 胡思顺 张万坡 李自力 周祖涛 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第3期1396-1407,共12页

近年来,滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大,各蛋鸡品种均有饲养,目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此,本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS在产蛋壳... 近年来,滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)在鸡群中的感染率日益上升。湖北省蛋鸡存栏规模较大,各蛋鸡品种均有饲养,目前湖北省蛋鸡群MS感染情况尚不清楚。因此,本研究开展湖北省规模蛋鸡养殖场鸡群MS感染情况的调查并探究MS在产蛋壳顶端异常(eggshell apex abnormality,EAA)蛋鸡输卵管中的分布。采集湖北省36个规模蛋鸡养殖场82个鸡群血清和气管棉拭子各1637份,利用建立的荧光定量PCR(real-time qPCR)方法检测MS载量,ELISA试剂盒检测免疫鸡群和非免疫鸡群血清抗体,并对产EAA蛋的蛋鸡输卵管进行MS载量、病理切片和MS定位分析。结果显示,临床样本中,喉气管拭子MS阳性率9.41%;血清抗体阳性率92.24%,其中非免疫鸡群抗体阳性率89.04%,且6月龄抗体达100%阳性,免疫鸡群抗体阳性率95%;36个规模场中有26个(72.22%)MS感染阳性场,82个鸡群中有61个(74.39%)感染阳性群;10个蛋鸡品种均有MS感染。产EAA蛋的鸡输卵管部位检出MS且膨大部的载量极显著高于子宫部、峡部和漏斗部(P<0.01),子宫部显著高于峡部和漏斗部(P<0.05);在产EAA蛋的蛋鸡输卵管中,峡部和子宫部出现黏膜上皮细胞变性和腺体肿大以及膨大部出现腺体上皮细胞脱落和坏死,子宫部和峡部的黏膜上皮以及膨大部的黏膜上皮和管状腺周围都有MS阳性信号检出,其中膨大部和子宫部阳性信号最强。综上,湖北省蛋鸡场MS感染严重,不同品种均有感染,MS主要定植在蛋鸡输卵管子宫部和膨大部中并造成病理损伤。本研究为湖北省蛋鸡MS感染情况的认识和MS引起EAA蛋的研究提供了数据支撑。 展开更多

关键词 滑液支原体 蛋壳顶端异常 荧光定量PCR 原位杂交 组织分布

在线阅读 下载PDF 职称材料

湖北省地方鸡核心群禽白血病净化的初步研究 被引量：7

2

作者 杨荣坤 郭杰 +6 位作者 许青荣 胡迪 崔卫涛 肖运才 李自力 毕丁仁 周祖涛 《中国家禽》 北大核心 2020年第3期110-113,共4页

试验针对湖北省地方鸡江汉鸡核心群进行禽白血病初步净化。禽白血病病毒感染本底调查结果显示,该种鸡群存在A/B亚群、J亚群禽白血病病毒感染,父系精液病毒分离率为7.1%,高于种蛋蛋清p27抗原阳性率2.5%。采用1日龄胎粪p27抗原检测,开产... 试验针对湖北省地方鸡江汉鸡核心群进行禽白血病初步净化。禽白血病病毒感染本底调查结果显示,该种鸡群存在A/B亚群、J亚群禽白血病病毒感染,父系精液病毒分离率为7.1%,高于种蛋蛋清p27抗原阳性率2.5%。采用1日龄胎粪p27抗原检测,开产初期和留种前的种蛋蛋清p27抗原检测、父系公鸡血浆及精液病毒分离的方法,结合生物安全措施,对核心种群开展了净化淘汰,结果显示:经过两个世代的净化,种蛋蛋清p27抗原阳性率由2.7%降至0.5%,公鸡病毒分离阳性率由8.6%降至1.7%,阳性率显著降低。表明该净化方案实施效果明显,适于进一步推广应用。 展开更多

关键词 禽白血病 地方鸡 江汉鸡 核心群 净化

在线阅读 下载PDF 职称材料

河南省和湖北省部分地区鸡球虫分离株对地克珠利耐药性调查 被引量：6

3

作者 耿天天 叶成 +5 位作者 雷振宇 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 《动物医学进展》 北大核心 2022年第7期129-133,共5页

为了解河南省和湖北省鸡球虫对地克珠利的耐药现状,选取河南省11个地区和湖北省11个地区的地方分离株进行笼养试验,以最适抗球虫活性(POAA)、病变积分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标综合评价各虫株耐药性。结... 为了解河南省和湖北省鸡球虫对地克珠利的耐药现状,选取河南省11个地区和湖北省11个地区的地方分离株进行笼养试验,以最适抗球虫活性(POAA)、病变积分减少率(RLS)、相对卵囊产量(ROP)和抗球虫指数(ACI)4项指标综合评价各虫株耐药性。结果显示,河南省34株分离虫株中,有1株对地克珠利轻度耐药,4株对地克珠利中度耐药,29株高度耐药;湖北省35株分离虫株中,有1株中度耐药,34株高度耐药。结果表明,河南省和湖北省鸡球虫对地克珠利均存在耐药现象。 展开更多

关键词 鸡球虫病 耐药性 地克珠利 笼养试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

河南省和湖北省部分地区鸡球虫分离株对磺胺氯吡嗪钠耐药性调查 被引量：4

4

作者 耿天天 罗莉妍 +5 位作者 王雅乐 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期125-129,共5页

为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河... 为了解河南省和湖北省鸡球虫对磺胺氯吡嗪钠的耐药现状,选取河南省18个地区和湖北省17个地区的地方分离株进行鸡体笼养试验,以抗球虫指数(Anticoccidial index,ACI)来评价各虫株耐药性。研究结果显示,在所研究的93株鸡球虫分离株中,河南省共计虫株52株,湖北省共计虫株41株。在河南省52株分离虫株中,有25株对磺胺氯吡嗪钠完全耐药(ACI<160),16株中度耐药(160≤ACI≤180),11株敏感(ACI>180);在湖北省共计41株鸡球虫分离虫株中,有9株完全耐药,9株中度耐药,23株敏感。研究结果为河南省和湖北省鸡球虫的耐药性提供了数据支撑。 展开更多

关键词 鸡球虫 耐药性 磺胺氯吡嗪钠 鸡体笼养试验

在线阅读 下载PDF 职称材料

湖北省牛羊衣原体抗体流行病学调查

5

作者 周文 彭伏虎 +5 位作者 胡思顺 张海燕 肖宏德 刘洋洋 李自力 毕丁仁 《湖北农业科学》 2018年第18期92-93,110,共3页

为了解湖北省牛羊衣原体病流行情况,采集了湖北省内多个地区近40个不同养殖规模的牛羊养殖场(18个牛场、20个羊场),共380份血清进行血清学检测。结果表明,380份血清中检出阳性血清168份,总阳性率为44.21%,湖北省各地区均存在衣原体抗体... 为了解湖北省牛羊衣原体病流行情况,采集了湖北省内多个地区近40个不同养殖规模的牛羊养殖场(18个牛场、20个羊场),共380份血清进行血清学检测。结果表明,380份血清中检出阳性血清168份,总阳性率为44.21%,湖北省各地区均存在衣原体抗体检测呈阳性的养殖场,牛的感染率相对较高,个别地区养殖场的衣原体抗体检测阳性率达100%。调查表明湖北省牛羊衣原体感染比较普遍,同时存在一定的地域性。 展开更多

关键词 衣原体 流行病学 抗体 湖北省

在线阅读 下载PDF 职称材料

副猪格拉瑟菌OppA过表达株的构建及其对小鼠免疫保护性研究

6

作者 李枝卉 罗金林 +7 位作者 谢虹 李明坤 林杨 张宇姣 徐引弟 陈焕春 蔡旭旺 徐晓娟 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第2期860-869,共10页

本研究旨在增加副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶(oligopeptide permease,OppA)表达量,构建可以过表达OppA的副猪格拉瑟菌株,并对其进行小鼠的免疫保护试验以评价其作为格拉瑟病弱毒活疫苗的潜力。以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株,利用自然转化和... 本研究旨在增加副猪格拉瑟菌寡肽渗透酶(oligopeptide permease,OppA)表达量,构建可以过表达OppA的副猪格拉瑟菌株,并对其进行小鼠的免疫保护试验以评价其作为格拉瑟病弱毒活疫苗的潜力。以副猪格拉瑟菌CF7066株为亲本株,利用自然转化和Flp-FRT无抗突变系统构建副猪格拉瑟菌OppA过表达株,通过Western blot检测OppA的表达量,通过阿拉伯糖诱导和提高培养温度消除抗性基因和Flp表达质粒。进行小鼠免疫保护试验,通过检测血清中抗体水平及脾淋巴细胞增殖、观察小鼠死亡率。结果显示:构建了3株副猪格拉瑟菌OppA过表达株ΔnanH::oppA^(R),ΔnanH::oppA和ΔnanH::P qseB-oppA。由于ΔnanH::oppA^(R)株中OppA的表达量显著高于CF7066(P<0.001),所以选择该过表达株进行小鼠免疫保护试验。小鼠在免疫后进行rOppA-ELISA的抗体检测,结果表明,ΔnanH::oppA^(R)免疫组的OppA抗体水平比CF7066组、ΔnanH组和PBS组高,但低于灭活疫苗组。用rOppA蛋白刺激脾淋巴细胞,ΔnanH::oppA^(R)和CF7066组小鼠脾淋巴细胞的增殖量显著高于刺激前(P<0.05),而ΔnanH、灭活疫苗组和PBS对照组没有改变。用CF7066菌株进行攻毒,其中灭活疫苗组、ΔnanH::oppA^(R)组、CF7066组对小鼠的保护率均为100%,ΔnanH组为75%。当前研究构建的3株副猪格拉瑟菌重组菌株中,ΔnanH::oppA^(R)的OppA表达水平最高,用该菌株免疫小鼠后产生OppA特异性的体液免疫和细胞免疫,而且可对CF7066攻毒提供有效保护。基于此,副猪格拉瑟菌OppA过表达株ΔnanH::oppA^(R)有望作为副猪格拉瑟菌的减毒活疫苗。 展开更多

关键词 副猪格拉瑟菌 寡肽渗透酶 过表达 基因工程 弱毒疫苗

在线阅读 下载PDF 职称材料

鸡传染性贫血病毒湖北分离株XH16全基因组序列分析 被引量：3

7

作者 靳泽华 黄英 +1 位作者 王泽宇 张安定 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2020年第12期1-4,8,I0001,共6页

为了解鸡传染性贫血病毒(CAV)的基因组特征及遗传变异情况,本试验对湖北某家禽养殖场中疑似CAV感染的肉鸡进行剖检,从其肝脏中分离得到1株病毒。通过聚合酶链式反应(PCR)试验验证为CAV,并将其命名为CAV-XH16。克隆该毒株全基因组,测序... 为了解鸡传染性贫血病毒(CAV)的基因组特征及遗传变异情况,本试验对湖北某家禽养殖场中疑似CAV感染的肉鸡进行剖检,从其肝脏中分离得到1株病毒。通过聚合酶链式反应(PCR)试验验证为CAV,并将其命名为CAV-XH16。克隆该毒株全基因组,测序拼接得到全基因组序列,并将该毒株与国内外已发表的其他病毒序列进行遗传进化分析。结果显示,该分离株具有高毒力毒株的分子特征,属于亚洲CAV分离株所属的主要亚群A1亚群。与中国分离株JL14023(NCBI登记号KY486145)有99.65%的相似性。本试验为CAV分子流行病学研究和新型疫苗研发提供了参考依据。 展开更多

关键词 鸡传染性贫血病毒 全基因组 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

猪弓形虫病阻断ELISA方法的建立及初步应用 被引量：2

8

作者 潘珂 张静 +5 位作者 莫心宇 申邦 方瑞 胡敏 赵俊龙 周艳琴 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第3期79-87,共9页

本研究利用制备的GRA7单克隆抗体为基础建立猪弓形虫病的阻断ELISA方法。以rGRA7重组蛋白免疫小鼠,取脾细胞进行细胞融合,筛选出4株能够稳定产生单克隆抗体的阳性单克隆细胞株。经对此单克隆抗体进行IFA和Western blot检测确认成功制备G... 本研究利用制备的GRA7单克隆抗体为基础建立猪弓形虫病的阻断ELISA方法。以rGRA7重组蛋白免疫小鼠,取脾细胞进行细胞融合,筛选出4株能够稳定产生单克隆抗体的阳性单克隆细胞株。经对此单克隆抗体进行IFA和Western blot检测确认成功制备GRA7蛋白的单克隆抗体后,以重组蛋白为包被抗原对阻断ELISA方法进行优化后,经过重复性、交叉性、符合性实验验证本方法具有可重复性,与MAT符合性高。初步应用于288份临床样品检测,检出率为11.46%,与MAT检测结果重合率为84.8%。本研究成功制备弓形虫GRA7蛋白的单克隆抗体,并建立了一种猪弓形虫病的阻断ELISA方法,为弓形虫病的检测提出了新的方案。 展开更多

关键词 弓形虫 GRA7蛋白 单克隆抗体 阻断ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵敏感性与生物被膜形成能力相关性分析 被引量：1

9

作者 崔恒洁 覃金珑 +3 位作者 朱志豪 鲍雪 栗绍文 孟宪荣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3669-3677,共9页

以35株生猪屠宰场及养殖场来源的金黄色葡萄球菌分离菌株为试验材料,分析金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵敏感性与生物被膜形成能力的相关性。采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵的敏感性,结晶紫染色法检测生物被膜形成能力,基... 以35株生猪屠宰场及养殖场来源的金黄色葡萄球菌分离菌株为试验材料,分析金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵敏感性与生物被膜形成能力的相关性。采用微量肉汤稀释法检测金黄色葡萄球菌对苯扎溴铵的敏感性,结晶紫染色法检测生物被膜形成能力,基于全基因组测序结果分析屠宰环节的26株金黄色葡萄球菌多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)情况,以及消毒剂抗性与生物被膜形成相关基因的携带情况。结果表明,35株菌中,苯扎溴铵的最小杀菌浓度(minimum bactericidal concentration,MBC)范围为1~16 mg·L^(-1),强成膜能力菌株共16株,占总数的45.71%(16/35),其中93.75%(15/16)来自于屠宰链的下游。ST7是强成膜能力菌株的优势序列型(93.75%,15/16)。金黄色葡萄球菌生物被膜形成能力和苯扎溴铵MBC值呈正相关(相关系数为0.690),而消毒剂抗性与相关基因携带情况无关。综上,金黄色葡萄球菌可通过形成生物被膜提高对消毒剂的耐受性,减弱了苯扎溴铵的消毒效果,增加了养殖和屠宰环节中细菌污染和传播的风险。 展开更多

关键词 金黄色葡萄球菌 生物被膜 苯扎溴铵 相关性

在线阅读 下载PDF 职称材料

一株猪流行性腹泻病毒变异株的分离、鉴定与全基因组序列分析 被引量：1

10

作者 刘曦 贾相超 +1 位作者 李晨曦 李自力 《湖北农业科学》 2024年第7期134-140,共7页

江苏省某猪场疑似发生猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),采集病料后,经RT-PCR检测PEDV呈阳性。病毒感染Vero细胞能够引起明显的细胞病变,间接免疫荧光鉴定结果显示病毒感染细胞后能被抗PEDV N蛋白的特异性单克隆抗体识别。... 江苏省某猪场疑似发生猪流行性腹泻(Porcine epidemic diarrhea,PED),采集病料后,经RT-PCR检测PEDV呈阳性。病毒感染Vero细胞能够引起明显的细胞病变,间接免疫荧光鉴定结果显示病毒感染细胞后能被抗PEDV N蛋白的特异性单克隆抗体识别。通过全基因组序列分析,鉴定该毒株为PEDV G2b亚型变异株,并将其命名为PEDV JS-B株。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 分离鉴定 变异毒株 分段测序 序列分析

在线阅读 下载PDF 职称材料

肉牛传染性牛支原体肺炎流行的诊断 被引量：139

11

作者 石磊 龚瑞 +11 位作者 尹争艳 周勇 裴洁 胡智斌 王利霞 胡长敏 刘涛 陈颖钰 廖娟红 赵俊龙 陈焕春 郭爱珍 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期629-633,共5页

采用多种诊断方法,对2008年以来湖北省多个地区新引进育肥肉牛呼吸道传染病进行了病原学研究。患牛病理变化主要集中在肺部,轻者可见肺局部肉样变,严重者可见肺广泛分布干酪样或化脓性坏死灶。将肺坏死组织制作石蜡切片,显微镜观察发现... 采用多种诊断方法,对2008年以来湖北省多个地区新引进育肥肉牛呼吸道传染病进行了病原学研究。患牛病理变化主要集中在肺部,轻者可见肺局部肉样变,严重者可见肺广泛分布干酪样或化脓性坏死灶。将肺坏死组织制作石蜡切片,显微镜观察发现,肺组织表现为坏死性肺炎,未见典型的结核结节。实验室病原检测项目包括:支原体培养鉴定,PCR检测与目的基因测序鉴定;细菌分离鉴定;牛结核检测;泰勒虫血涂片检测与PCR检测等。最终确定该新发呼吸道传染病为牛支原体(Mycoplasma bovis)肺炎。同时,环形泰勒虫混合感染与细菌继发感染率很高,使病情复杂化。通过药敏试验发现,不同牛场分离的牛支原体最敏感药物为环丙沙星,其次为左氟沙星、四环素。文中还对该病的综合防治提供了合理的建议。 展开更多

关键词 牛支原体 牛 肺炎 诊断

在线阅读 下载PDF 职称材料

肉牛传染性牛支原体肺炎流行的初步诊断 被引量：66

12

作者 石磊 龚瑞 +11 位作者 尹争艳 周勇 裴洁 胡智斌 王利霞 胡长敏 刘涛 陈颖钰 廖娟红 赵俊龙 陈焕春 郭爱珍 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期572-572,共1页

关键词 牛支原体 牛 肺炎

在线阅读 下载PDF 职称材料

牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 被引量：7

13

作者 周毅 吴玉石 +4 位作者 段宏安 张睿 周祖涛 毕丁仁 石德时 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期538-543,共6页

从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL... 从持续感染牛白血病病毒(BLV)的羊胎肾细胞(FLK-BLV)中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env(gp51)基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL21(DE3)进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000,Western-blot结果表明重组表达蛋白具有免疫反应性。以纯化的重组蛋白gp51作为抗原,建立检测BLV抗体的间接ELISA诊断方法。结果表明,抗原gp51的最佳包被浓度为2.19μg.mL-1,血清的最佳稀释倍数为1∶80,阳性判定标准确定为样品OD450 nm大于0.451。用该方法对12份参考血清进行检测,准确率为91.67%。 展开更多

关键词 牛白血病病毒 gp51蛋白 原核表达 间接ELISA

在线阅读 下载PDF 职称材料

表达乙脑病毒PrM基因重组伪狂犬病病毒的构建 被引量：8

14

作者 李自力 陈焕春 +4 位作者 徐高原 方六荣 肖少波 王祥 何启盖 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期53-58,共6页

本研究以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株基因组RNA为模板,采用RT-PCR一步法扩增了PrM基因的全长cDNA(558 bp),用BamHI和EcoRI双酶切PrM基因的扩增产物,回收目的基因后将其克隆至经同样酶切的伪狂犬病病毒通用转移载体pPgG-uni中,获得了转... 本研究以乙型脑炎病毒SA14-14-2疫苗株基因组RNA为模板,采用RT-PCR一步法扩增了PrM基因的全长cDNA(558 bp),用BamHI和EcoRI双酶切PrM基因的扩增产物,回收目的基因后将其克隆至经同样酶切的伪狂犬病病毒通用转移载体pPgG-uni中,获得了转移载体pPgG-PrM,并对其外源片段进行了测序。序列分析结果表明:与已报道的乙型脑炎病毒SA14强毒株和SA14-14-2疫苗株的核苷酸序列比较,PrM基因的同源性为100%。以伪狂犬病病毒Ea株TK-/gG-/LacZ+突变株为载体构建了一株表达乙型脑炎病毒PrM基因的重组伪狂犬病病毒TK-/gG-/PrM+,为进一步开展猪乙型脑炎与伪狂犬病二价基因工程疫苗的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 乙型脑炎病毒 PrM基因 重组伪狂犬病病毒

在线阅读 下载PDF 职称材料

应用巢氏PCR方法快速检测猪鼻拭子样品中产毒素多杀性巴氏杆菌 被引量：5

15

作者 汤细彪 吴斌 +4 位作者 刘国平 杨明柳 罗勇 卢顺 陈焕春 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第10期1083-1087,共5页

根据产毒素多杀性巴氏杆菌的toxA基因序列,设计了2对特异性引物,扩增的片段大小分别为864和447 bp,从而建立了一种能直接从猪鼻拭子中快速检测产毒素多杀性巴氏杆菌的巢氏PCR方法。该方法能检出26CFU菌量以上的模板DNA,且不能从猪的其它... 根据产毒素多杀性巴氏杆菌的toxA基因序列,设计了2对特异性引物,扩增的片段大小分别为864和447 bp,从而建立了一种能直接从猪鼻拭子中快速检测产毒素多杀性巴氏杆菌的巢氏PCR方法。该方法能检出26CFU菌量以上的模板DNA,且不能从猪的其它7种常见病原菌扩增到特异性条带。通过对5个不同地区阳性猪群中采集的146份临床鼻拭子样品进行巢氏PCR检测和细菌分离鉴定,结果2种方法同时为阳性的样品有44份,同时为阴性的样品有97份,另有5份样品只有巢氏PCR检测为阳性,巢氏PCR检测与细菌分离鉴定的符合率为96.58%。试验表明:巢氏PCR方法能快速、灵敏地从猪鼻拭子样品中检出产毒素多杀性巴氏杆菌,适合临床进行大规模病原学检测,具有良好的应用前景。 展开更多

关键词 产毒素多杀性巴氏杆菌 toxA 鼻拭子 巢氏PCR

在线阅读 下载PDF 职称材料

益生菌对仔猪作用机制研究进展 被引量：14

16

作者 张飞 李越 +1 位作者 毕丁仁 王喜亮 《家畜生态学报》 北大核心 2021年第1期7-14,共8页

在规模养殖过程中,断奶诱发仔猪肠道疾病进而导致生产性能下降,益生菌可降低肠道病原菌感染,提高仔猪生产性能和降低腹泻的发生率。该文主要从益生菌对仔猪胃肠道微生物群、机体免疫系统、炎症调控、抗氧化调控、肠道发育和营养消化调... 在规模养殖过程中,断奶诱发仔猪肠道疾病进而导致生产性能下降,益生菌可降低肠道病原菌感染,提高仔猪生产性能和降低腹泻的发生率。该文主要从益生菌对仔猪胃肠道微生物群、机体免疫系统、炎症调控、抗氧化调控、肠道发育和营养消化调控等方面探讨其作用机制,旨在为益生菌在仔猪上的应用提供理论依据。 展开更多

关键词 益生菌 仔猪 机制 微生态制剂

在线阅读 下载PDF 职称材料

口蹄疫病毒单克隆抗体的制备及检测应用 被引量：6

17

作者 李任峰 何启盖 +2 位作者 刘正飞 钱平 阮力 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第C00期544-548,共5页

用纯化的口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus,FMDV)免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,经筛选获得多株能稳定分泌抗FMDV单抗的杂交瘤细胞株。选择其中一株(2G12)用于下列实验,其细胞培养... 用纯化的口蹄疫病毒(Footandmouthdiseasevirus,FMDV)免疫BALB/C小鼠,将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用有限稀释法进行克隆,经筛选获得多株能稳定分泌抗FMDV单抗的杂交瘤细胞株。选择其中一株(2G12)用于下列实验,其细胞培养上清液的效价是1:256,腹水效价是1:1280;以自行制备的兔抗FMDV高免血清IgG为捕获抗体包被酶联免疫吸附试验微量反应板,以单抗2G12为第二抗体,建立了快速检测FMDV抗原的双抗体夹心ELISA,该方法能检出90ng病毒,而且只与FMDV发生特异性反应,与猪瘟病毒(HCV)、猪蓝耳病病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和乙脑病毒(JEV)均不发生反应。本研究为检测口蹄疫病毒抗原提供了灵敏和特异的方法。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 单克隆抗体 双抗体夹心ELLSA 抗原检测

在线阅读 下载PDF 职称材料

禽流感灭活疫苗对商品肉鸭免疫效果的评价 被引量：2

18

作者 胡思顺 郭锐 +5 位作者 刘梅 肖运才 李自力 许青荣 李东 毕丁仁 《湖北农业科学》 北大核心 2007年第6期963-965,共3页

为了了解和掌握商品肉鸭高致病性禽流感疫苗的免疫效果,对不同日龄的商品肉鸭进行了免疫试验。结果表明,3～10日龄时(H组)免疫,可以有效地刺激肉鸭产生禽流感HI抗体,并一直持续到40日龄;但由于母源抗体的干扰,在20日龄前后5～7 d,是一... 为了了解和掌握商品肉鸭高致病性禽流感疫苗的免疫效果,对不同日龄的商品肉鸭进行了免疫试验。结果表明,3～10日龄时(H组)免疫,可以有效地刺激肉鸭产生禽流感HI抗体,并一直持续到40日龄;但由于母源抗体的干扰,在20日龄前后5～7 d,是一段易感染的免疫空白期。建议每年禽流感的免疫预防须提前到10月中上旬进行,以使侯鸟南飞迁徙时,所有家养水禽有充足的时间产生免疫力。 展开更多

关键词 禽流感 商品肉鸭 免疫预防

在线阅读 下载PDF 职称材料

基于结核菌素与CFP10/ESAT6的牛IFN-γ检测法在牛结核病诊断中的比较研究 被引量：7

19

作者 陈颖钰 邓铨涛 +4 位作者 郭爱珍 晁彦杰 匡有吉 于清龙 陈焕春 《中国奶牛》 2008年第6期12-14,共3页

本研究通过比较三种刺激物(牛结核菌素、禽结核菌素和牛型结核菌特异性抗原CFP10/ESAT6对结核菌素皮内变态反应阳性牛的IFN-γ刺激反应,探讨IFN-γ检测法在我国牛结核病诊断中的应用前景。无菌采集22头结核菌素皮内变态反应阳性牛的血液... 本研究通过比较三种刺激物(牛结核菌素、禽结核菌素和牛型结核菌特异性抗原CFP10/ESAT6对结核菌素皮内变态反应阳性牛的IFN-γ刺激反应,探讨IFN-γ检测法在我国牛结核病诊断中的应用前景。无菌采集22头结核菌素皮内变态反应阳性牛的血液,肝素抗凝。每1mL全血与1mLRPMI1640完全培养基混合均匀,并加入0.1mL(20μg)PHA(阳性对照孔)、0.1mL(20μg PHA)CFP10/ESAT6融合蛋白、0.1mL(2000U)牛结核菌素(PPD/B)、0.1mL(2500U)禽结核菌素(PPD/A)或等量PBS(无刺激阴性对照),37℃培养过夜。次日用夹心ELISA法检测各刺激组0.1mL培养上清的IFN-γ,以OD630表示IFN-γ浓度。结果,特异性抗原CFP10/ESAT6刺激组与牛结核菌素(PPD/B)刺激组的IFN-γ反应具有良好的相关性,相关系数为0.84。但CFP10/ESAT6刺激组IFN-γ浓度与牛和禽PPD的比较反应(以两刺激组IFN-γ浓度差值表示)间无相关性,相关系数为-0.11。分析禽PPD组的IFN-γ反应,发现实验牛中有少数牛对禽PPD有反应。以OD630=0.17为阳性反应切割值,牛PPD检出阳性牛21头,CFP10/ESAT6检出20头,牛和禽PPD比较反应(以OD值差值表示)检出14头,禽PPD阳性反应3头。扣除禽PPD阳性反应牛后,牛和禽PPD比较反应与牛PPD刺激组的相关系数增至0.54。结果表明,牛PPD的IFN-γ释放反应检测灵敏度最高。当出现牛型结核菌与环境分枝杆菌混合感染时,应用牛和禽PPD比较反应检测牛结核的准确度低,混合感染牛被误判为结核阴性牛。而基于CFP10/ESAT6的IFN-γ释放反应不受环境分枝杆菌的影响,检测具有良好的特异性与敏感性。 展开更多

关键词 牛结核 IFN—γ 牛结核菌素 CFP10 ESAT6 禽结核菌素

在线阅读 下载PDF 职称材料

禽流感疫苗免疫和野毒感染的鉴别诊断策略 被引量：1

20

作者 吴玉石 肖运才 +3 位作者 胡思顺 李自力 石德时 毕丁仁 《动物医学进展》 CSCD 2007年第2期100-102,共3页

近年来,用灭活疫苗免疫接种已成为我国控制禽流感的一种主要策略,但免疫禽类不能与自然野毒感染的禽类从血清学水平上进行鉴别,并常导致贸易障碍。为了克服禽流感灭活苗的这种局限性,提出对疫苗免疫和野毒感染禽类鉴别诊断。一是免疫群... 近年来,用灭活疫苗免疫接种已成为我国控制禽流感的一种主要策略,但免疫禽类不能与自然野毒感染的禽类从血清学水平上进行鉴别,并常导致贸易障碍。为了克服禽流感灭活苗的这种局限性,提出对疫苗免疫和野毒感染禽类鉴别诊断。一是免疫群内安插未免疫过的“哨兵禽”,二是采用亚单位疫苗免疫定向检测血凝素蛋白,三是接种疫苗的血凝素与野毒同源而神经氨酸酶为异源,四是检测非结构蛋白(NS1)的血清学反应。文章对上述四种鉴别诊断策略的优缺点进行了评价,为禽流感的控制策略提供一些新的思路。 展开更多

关键词 禽流感 鉴别诊断 非结构蛋白 血凝素 神经氨酸酶 抗原漂移

在线阅读 下载PDF 职称材料