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强化厌氧表达dld基因以提高大肠杆菌工程菌发酵产L-乳酸的光学纯度
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作者 余杰 李正 +3 位作者 王金华 王永泽 高娃 赵筱 《中国酿造》 CAS 北大核心 2024年第8期115-121,共7页
为去除廉价发酵原料中的D-乳酸从而提高发酵最终产物L-乳酸的光学纯度,该研究通过构建带有不同厌氧诱导启动子(pflBp6、pnirB、pflBp6-pnirB)的D-乳酸脱氢酶基因(dld)的表达质粒,并将其分别转入大肠杆菌(Escherichia coli)HBUT-L,加强... 为去除廉价发酵原料中的D-乳酸从而提高发酵最终产物L-乳酸的光学纯度,该研究通过构建带有不同厌氧诱导启动子(pflBp6、pnirB、pflBp6-pnirB)的D-乳酸脱氢酶基因(dld)的表达质粒,并将其分别转入大肠杆菌(Escherichia coli)HBUT-L,加强其在发酵产L-乳酸的同时消除外源D-乳酸的能力。通过装液量与转速的单因素试验筛选最优的质粒表达条件及菌株,并在无机盐培养基与玉米浆培养基中进行发酵验证。结果表明,在装液量为200 mL/250 mL、转速为150 r/min的条件下,含有启动子pflBp6-pnirB的表达质粒的工程菌株HBUT-L4发酵18 h时D-乳酸脱氢酶活力最高,为81.1 U/g。在此条件下进行无机盐培养基和玉米浆培养基发酵时,工程菌株HBUT-L4相对于出发菌株HBUT-L,D-乳酸消耗速率分别提高250%、217%,L-乳酸的光学纯度分别从96.32%、98.48%提升至99.95%、99.98%。在大肠杆菌工程菌发酵L-乳酸的过程中,带有厌氧诱导启动子pflBp6-pnirB的表达质粒可提高D-乳酸脱氢酶活力,强化菌株消除外源D-乳酸,进而提高L-乳酸的光学纯度的能力,具有重要的工业化应用价值。 展开更多
关键词 L-乳酸 光学纯度 启动子 D-乳酸脱氢酶基因 大肠杆菌
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亚磷酸脱氢酶表达对大肠杆菌琥珀酸发酵的影响
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作者 刘利 陈炜琪 +3 位作者 邹诗瑶 王金华 高娃 王永泽 《中国调味品》 北大核心 2025年第1期210-215,共6页
琥珀酸在食品中有广泛的用途,但琥珀酸发酵往往受制于还原力不平衡的问题。相比于其他常用于平衡还原力的酶,亚磷酸脱氢酶催化产物为磷酸盐,对后续琥珀酸的分离纯化影响较小。文章克隆了来源于施氏假单胞菌的亚磷酸脱氢酶(编码基因为ptx... 琥珀酸在食品中有广泛的用途,但琥珀酸发酵往往受制于还原力不平衡的问题。相比于其他常用于平衡还原力的酶,亚磷酸脱氢酶催化产物为磷酸盐,对后续琥珀酸的分离纯化影响较小。文章克隆了来源于施氏假单胞菌的亚磷酸脱氢酶(编码基因为ptx D),比较ptx D在载体和基因组上表达对琥珀酸发酵的影响,同时研究了亚磷酸盐添加量对发酵的影响。结果表明,在ptx D表达条件下,亚磷酸盐在5~15 mmol/L范围内添加并未表现出对细胞生长的抑制性,且在10 mmol/L时展现出较高的糖耗速率和琥珀酸得率。基因组上表达ptx D的工程菌WS105(WS100,icl R::pJ23119-ptx d)能积累79.38 g/L琥珀酸,较载体上表达ptx D的工程菌WS104(WS100/puc19-pJ23119-ptx d)提升了4.87%,较出发菌株WS100提升了13.81%。WS105副产物乙酸含量显著下降,浓度为2.76 g/L,较WS100、WS104分别降低了42.38%、29.41%,表明亚磷酸脱氢酶的表达能有效促进琥珀酸产量的提高。 展开更多
关键词 琥珀酸 亚磷酸脱氢酶 还原力平衡
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中和剂对大肠杆菌工程菌HBUT-L16发酵产L-乳酸的影响
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作者 文瑶 周玮 +2 位作者 刘枣 王永泽 王金华 《中国酿造》 CAS 北大核心 2016年第9期43-46,共4页
该文对前期构建的产高光学纯度L-乳酸的大肠杆菌工程菌HBUT-L进行了耐乳酸钠的驯化,并对驯化前后菌株发酵产L-乳酸的中和剂进行了选择和对比。结果表明,经过28代驯化后的菌株HBUT-L16以Ca(OH)_2 作中和剂时发酵效果较Na OH为中和剂时效... 该文对前期构建的产高光学纯度L-乳酸的大肠杆菌工程菌HBUT-L进行了耐乳酸钠的驯化,并对驯化前后菌株发酵产L-乳酸的中和剂进行了选择和对比。结果表明,经过28代驯化后的菌株HBUT-L16以Ca(OH)_2 作中和剂时发酵效果较Na OH为中和剂时效果好,L-乳酸产量、糖酸转化率及生产强度分别提高了6.6%、5.6%、44.4%。与驯化前菌株HBUT-L的发酵结果相比,HBUT-L16以Ca(OH)_2 为中和剂进行发酵时,乳酸产量提高了4.4%,糖酸转化率提高了2.8%,生产强度增加了26.71%;而以Na OH为中和剂时,对驯化前后菌株的发酵效果影响不大,由此推测耐乳酸钠的驯化主要通过提高工程菌对乳酸根的耐受性而非钠离子的耐受性,来提高L-乳酸的产量。 展开更多
关键词 大肠杆菌工程菌 工广乳酸 驯化 中和剂
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工业酒精发酵污染菌的分离及新型抑菌剂的应用 被引量:5
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作者 刘颖 陈雄 +2 位作者 廖蓓 李志军 王志 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期46-52,共7页
为了研究新型抑菌剂在酒精发酵染菌控制中的应用,从工业酒精发酵污染液分离出主要污染菌HG-201,其16S rDNA与Pantoea ananatis(JX215331)的核苷酸序列同源性为99%。在菌株HG-201生长对数中期添加新型抑菌剂葡萄糖氧化酶和溶菌酶,以确定... 为了研究新型抑菌剂在酒精发酵染菌控制中的应用,从工业酒精发酵污染液分离出主要污染菌HG-201,其16S rDNA与Pantoea ananatis(JX215331)的核苷酸序列同源性为99%。在菌株HG-201生长对数中期添加新型抑菌剂葡萄糖氧化酶和溶菌酶,以确定对菌株HG-201的抑菌效果。将酿酒酵母与菌株HG-201以1∶30的接种比例进行混合培养,并在发酵开始添加低浓度的抑菌剂。结果表明:10 U/m L的葡萄糖氧化酶和0.25 g/L的溶菌酶即可完全抑制菌株HG-201的生长和代谢,并且在实验条件下对酿酒酵母生长以及乙醇的产量没有影响,为新型抑菌剂在工业酒精发酵杂菌控制中的应用提供了参考。 展开更多
关键词 酒精发酵 污染菌 葡萄糖氧化酶 溶菌酶
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大肠杆菌工程菌mglB基因的敲除及水稻秸秆水解液发酵L-丙氨酸 被引量:5
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作者 王灿 潘海亮 +2 位作者 梁泉喜 王永泽 王金华 《安徽农业科学》 CAS 2020年第7期113-117,共5页
[目的]通过mglB基因敲除进一步降低混合糖发酵时常存在的葡萄糖效应,提高水稻秸秆水解液发酵L-丙氨酸的效率。[方法]以大肠杆菌ptsG基因缺陷菌株JH-B3为出发菌,利用RED同源重组技术敲除葡萄糖转运基因mglB,构建ptsG和mglB双缺陷菌株JH-... [目的]通过mglB基因敲除进一步降低混合糖发酵时常存在的葡萄糖效应,提高水稻秸秆水解液发酵L-丙氨酸的效率。[方法]以大肠杆菌ptsG基因缺陷菌株JH-B3为出发菌,利用RED同源重组技术敲除葡萄糖转运基因mglB,构建ptsG和mglB双缺陷菌株JH-B6,分别以60 g/L葡萄糖、30 g/L木糖和水稻秸秆水解液为碳源进行发酵,验证mglB基因缺失对菌株利用葡萄糖、木糖和混合糖能力的影响。[结果]以60 g/L葡萄糖发酵时,JH-B6利用葡萄糖速率较JH-B3下降了19.9%;以30 g/L木糖发酵时,JH-B6利用木糖速率较JH-B3增加了23.5%;以水稻秸秆水解液发酵时,JH-B3发酵周期和糖酸转化率分别为128 h和89.5%,JH-B6发酵周期为88 h,较JH-B3缩短了31.3%,糖酸转化率为93.9%,较JH-B3提高了4.9%。[结论]双基因缺陷型菌株JH-B6在ptsG基因缺陷菌株JH-B3的基础上缺失mglB基因,进一步降低了葡萄糖效应,提高了水稻秸秆水解液发酵L-丙氨酸的效率。 展开更多
关键词 水稻秸秆 mglB基因 葡萄糖效应 L-丙氨酸 发酵
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群体感应在发酵食品中的研究进展
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作者 王文悦 余帆 +8 位作者 易弛 张霖 肖柯 樊鑫 肖俊锋 朱晓青 穆杨 汪超 周梦舟 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期290-299,共10页
微生物在发酵食品中起着重要作用,群体感应作为微生物依赖于细胞密度而调控其生理行为的一种机制,在发酵食品中也应受到关注。近年来有研究表明发酵食品中群体感应的调控与食品品质及风味有着密切的联系。因此,该文综述了群体感应信号... 微生物在发酵食品中起着重要作用,群体感应作为微生物依赖于细胞密度而调控其生理行为的一种机制,在发酵食品中也应受到关注。近年来有研究表明发酵食品中群体感应的调控与食品品质及风味有着密切的联系。因此,该文综述了群体感应信号分子的定义及分类、群体感应对发酵体系中微生物和各种发酵食品的调控作用,最后对群体感应在发酵食品行业中的研究及应用前景进行了总结与展望,以期为发酵食品产业提供新的见解。 展开更多
关键词 群体感应 群体感应信号分子 发酵微生物 发酵食品 调控机制
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大肠杆菌L-乳酸工程菌消除外源D-乳酸以提高光学纯度的研究
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作者 余杰 麦热哈巴·玉素甫 +3 位作者 王金华 王永泽 高娃 赵筱 《中国调味品》 CAS 北大核心 2024年第12期179-184,220,共7页
L-乳酸的同分异构体D-乳酸会引起代谢性酸中毒、肠道屏障受损或其他未知的危害,因此需要减少用作食品酸味剂的L-乳酸中的D-乳酸含量。该研究通过加入硝酸钠以加强大肠杆菌L-乳酸工程菌在厌氧条件下对外源D-乳酸的消除;同时敲除L-乳酸脱... L-乳酸的同分异构体D-乳酸会引起代谢性酸中毒、肠道屏障受损或其他未知的危害,因此需要减少用作食品酸味剂的L-乳酸中的D-乳酸含量。该研究通过加入硝酸钠以加强大肠杆菌L-乳酸工程菌在厌氧条件下对外源D-乳酸的消除;同时敲除L-乳酸脱氢酶基因(lldD基因、ykgEFG基因)以降低其对L-乳酸的消耗。摇瓶发酵实验证明,敲除L-乳酸脱氢酶基因的工程菌HBUT-LB,在添加20 mmol/L硝酸钠后,可有效清除1 g/L的外源性D-乳酸。在7 L发酵罐中利用含有D-乳酸的廉价原料进行发酵,添加20 mmol/L硝酸钠相对于未添加硝酸钠,工程菌HBUT-LB的D-乳酸消耗速率提高460%,L-乳酸的光学纯度从99.32%提升到99.99%。同时,最终发酵液中无硝酸钠与亚硝酸钠残留。结果表明,大肠杆菌工程菌HBUT-LB在发酵过程中,通过添加硝酸钠,可有效消除外源D-乳酸,提高L-乳酸的光学纯度,具有精制超高光学纯度L-乳酸的工业应用价值。 展开更多
关键词 L-乳酸的光学纯度 L-乳酸脱氢酶基因 硝酸钠
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基于氢氧化钙为中和剂的大肠杆菌丁二酸发酵
8
作者 陈思宇 孙瑞雪 +3 位作者 包晨鹏 王金华 高娃 王永泽 《中国调味品》 CAS 北大核心 2024年第10期9-13,共5页
氢氧化钙因其价格相对低廉且与其配套的有机酸分离纯化工艺成熟,常作为中和剂应用于有机酸发酵中。但在丁二酸发酵中,因其不能提供丁二酸合成所必需的二氧化碳,存在发酵产量低的问题。文章建立并优化了以氢氧化钙为中和剂结合二氧化碳... 氢氧化钙因其价格相对低廉且与其配套的有机酸分离纯化工艺成熟,常作为中和剂应用于有机酸发酵中。但在丁二酸发酵中,因其不能提供丁二酸合成所必需的二氧化碳,存在发酵产量低的问题。文章建立并优化了以氢氧化钙为中和剂结合二氧化碳脉冲补料发酵生产丁二酸的方法。发酵初期不添加中和剂,pH值自然下降至5.7时,立即流加23%氢氧化钙溶液使pH值升至7.5,然后停止添加中和剂,通入0.2 m^(3)/(m^(3)·min)二氧化碳气体至pH值降至6.5时停止通气使发酵液自然发酵,当pH值下降至5.7时,再循环上述操作。使用该方法时,发酵产量为88.47 g/L,糖酸转化率为96.03%,平均生产强度为2.21 g/(L·h),相较于以氢氧化钙为中和剂不补入或者连续通入二氧化碳的方式,糖酸转化率分别提高了298%和95%。该方法为解决使用氢氧化钙作中和剂发酵丁二酸产量低的问题提供了新思路,也为利用现有有机酸分离设备大规模生产丁二酸打下了良好基础。 展开更多
关键词 大肠杆菌 丁二酸 氢氧化钙 二氧化碳 中和剂
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降解黄曲霉毒素B_1菌株的发酵条件优化及降解机制 被引量:12
9
作者 邵帅 戴军 +3 位作者 杜馨 王常高 林建国 蔡俊 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2016年第5期138-143,共6页
目的:鉴定一株降解黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB1)的霉菌HSK8,通过优化其发酵条件提高AFB_1降解率,并初步探索其降解机制。方法:通过形态学和内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、18S r RNA和26S r RNA序列分析对该... 目的:鉴定一株降解黄曲霉毒素B_1(aflatoxin B_1,AFB1)的霉菌HSK8,通过优化其发酵条件提高AFB_1降解率,并初步探索其降解机制。方法:通过形态学和内部转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)、18S r RNA和26S r RNA序列分析对该菌株进行鉴定,并通过单因素试验对发酵条件进行优化,采用薄层层析对AFB_1降解产物进行研究。结果:经鉴定该株霉菌为夏孢生枝孢(Cladosporium uredinicola)。其发酵条件经优化确定为:发酵温度28℃、装液量75 m L/250 m L、接种量15%、发酵时间36 h、初始p H 8.0。薄层层析观察到一个不同于AFB_1的荧光斑点。结论:发酵条件优化后,AFB_1降解率从40.68%提升到68.96%,提高了69.52%;AFB1降解产物能在365 nm波长处发出蓝色荧光。 展开更多
关键词 黄曲霉毒素B1 鉴定 发酵条件 降解产物
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产角蛋白酶菌株的筛选及发酵条件优化 被引量:5
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作者 蒋彪 王常高 +2 位作者 杜馨 林建国 蔡俊 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2017年第12期182-185,共4页
采用以羽毛为唯一碳氮源的无机盐培养基,通过考察HC值(水解圈直径与菌落直径的比值)、羽毛的降解程度,筛选得到10株产角蛋白酶的菌株,经测定10株菌株摇瓶发酵液的蛋白酶活力,确定了一株产酶能力较强的菌株CJPE209,并对菌株进行鉴定,菌株... 采用以羽毛为唯一碳氮源的无机盐培养基,通过考察HC值(水解圈直径与菌落直径的比值)、羽毛的降解程度,筛选得到10株产角蛋白酶的菌株,经测定10株菌株摇瓶发酵液的蛋白酶活力,确定了一株产酶能力较强的菌株CJPE209,并对菌株进行鉴定,菌株CJPE209被鉴定为芽孢杆菌(Bacillus sp.),其发酵液酶活为267 U/mL。通过单因素实验,确定了菌株CJPE209产角蛋白酶的最适发酵条件:发酵周期48 h,培养基装液量25 mL/250 mL,发酵温度37℃,初始pH7,摇床转速220 r/min,发酵液酶活为337.6 U/mL,是优化前的1.26倍。 展开更多
关键词 角蛋白酶 产角蛋白酶菌株 筛选 鉴定 产酶条件
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高产琥珀酸重组大肠杆菌的构建及厌氧发酵 被引量:4
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作者 赵锦芳 华渤文 +2 位作者 王永泽 赵筱 王金华 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期6-10,共5页
以野生型大肠杆菌Escherichia coli W为出发菌株,利用Red同源重组系统分别敲除了乳酸脱氢酶基因(ldhA)、乙醇脱氢酶基因(adhE)、丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB)、丙酮酸氧化酶基因(poxB)和乙酸激酶基因(ackA),再通过无氧生长进化筛选过程,... 以野生型大肠杆菌Escherichia coli W为出发菌株,利用Red同源重组系统分别敲除了乳酸脱氢酶基因(ldhA)、乙醇脱氢酶基因(adhE)、丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB)、丙酮酸氧化酶基因(poxB)和乙酸激酶基因(ackA),再通过无氧生长进化筛选过程,构建得到在厌氧条件下能有效生长,并以琥珀酸为主要发酵产物的重组大肠杆菌WS100(△ldhA,△adhE,△pflB,△poxB,△ackA)。利用15 L发酵罐进行厌氧发酵测定显示,经72 h发酵,菌体密度OD600最大值可提高至6.48,琥珀酸产量达到70.13 g/L,琥珀酸的生产强度为0.98 g/(L.h),葡萄糖-琥珀酸转化率为76%。发酵液中副产物含量低,乙酸含量为5.34 g/L,乳酸产量仅为0.15 g/L,未检测到甲酸和乙醇生成。结果表明,厌氧条件下,该工程菌可有效利用低营养成分的无机盐培养基,在不表达任何外源基因的条件下可稳定高产琥珀酸,具有极大的工业化开发前景。 展开更多
关键词 大肠杆菌工程菌 琥珀酸 基因敲除 厌氧发酵
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发酵法生产虾青素的研究进展 被引量:14
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作者 蔡俊 游智能 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第23期358-366,共9页
虾青素(astaxanthin)是一种类胡萝卜素,具有很强的抗氧化活性,抗癌功能,显著的着色能力以及增强免疫力等功能。本文介绍了虾青素的生物活性及其在食品、化妆品、保健品、水产养殖和医药等领域的应用,并着重对虾青素的发酵法生产研究现... 虾青素(astaxanthin)是一种类胡萝卜素,具有很强的抗氧化活性,抗癌功能,显著的着色能力以及增强免疫力等功能。本文介绍了虾青素的生物活性及其在食品、化妆品、保健品、水产养殖和医药等领域的应用,并着重对虾青素的发酵法生产研究现状进行了综述,提出了虾青素未来的主要研究方向,以期为虾青素的研究开发和综合利用提供理论依据。 展开更多
关键词 虾青素 生物活性 发酵
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响应面法优化异硫链霉菌LMZM利用玉米芯粉产木聚糖酶发酵培养基的研究 被引量:2
13
作者 罗玲 蔡俊 +2 位作者 王常高 杜馨 林建国 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2015年第23期266-271,共6页
本研究采用响应面法对异硫链霉菌LMZM产木聚糖酶的发酵培养基进行优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产酶的4个显著性因素:玉米芯粉、大豆粉、酵母粉和MgSO——4。在此基础上,研究不显著因素的最低添加量来降低生产成本,... 本研究采用响应面法对异硫链霉菌LMZM产木聚糖酶的发酵培养基进行优化。首先利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响产酶的4个显著性因素:玉米芯粉、大豆粉、酵母粉和MgSO——4。在此基础上,研究不显著因素的最低添加量来降低生产成本,然后运用最陡爬坡法逼近最大响应值区域,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明,玉米芯粉27.85 g/L、大豆粉16.25 g/L、酵母粉3.46 g/L、MgSO_41.18 g/L、K_2HPO_40.60 g/L、Na_2HPO_40.40 g/L,木聚糖酶最大理论酶活可达117.80 U/m L,经3次平行实验验证,实际酶活平均值为116.63 U/m L与预测酶活相近,且比优化之前的酶活提高了1.28倍。 展开更多
关键词 木聚糖酶 异硫链霉菌 响应面法 培养基优化 玉米芯粉
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利用氨基酸工业废水生产饲用产朊假丝酵母 被引量:3
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作者 成细瑶 胡征 +5 位作者 王辉 杨波 刘志刚 尹紫燕 邱翠翠 唐锐 《粮食与饲料工业》 CAS 北大核心 2014年第7期47-49,共3页
以毛发水解法提取胱氨酸后的废液为氮源,生产饲用产朊假丝酵母。研究选取了12种饲用菌进行耐盐性驯化筛选,并对高耐盐菌株进行培养基及培养条件优化。结果产朊假丝酵母耐盐性最高,其最佳培养条件为:培养时间3d,装液量50ml/250ml三角瓶,... 以毛发水解法提取胱氨酸后的废液为氮源,生产饲用产朊假丝酵母。研究选取了12种饲用菌进行耐盐性驯化筛选,并对高耐盐菌株进行培养基及培养条件优化。结果产朊假丝酵母耐盐性最高,其最佳培养条件为:培养时间3d,装液量50ml/250ml三角瓶,初始pH5.5。最优培养基配方为:氨基酸废水330ml/L,玉米淀粉酶解液110g/L,K2HPO420g/L,酵母粉9g/L,FeSO42g/L。在此条件下,菌体得率达4.14%,较优化前提高了128.7%。 展开更多
关键词 毛发酸解 氨基酸废水 饲料 产朊假丝酵母
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降解玉米赤霉烯酮菌株的鉴定及其发酵条件优化 被引量:2
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作者 刘盼 蔡俊 +4 位作者 廖兆民 姚晓玲 王常高 林建国 杜馨 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2018年第21期119-123,共5页
从土壤样品中得到一株能降解玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的菌株ZENL09,对该菌株的形态特征、生化理化特性和16r s RNA进行分析鉴定,并通过单因素实验得出ZENL09的较优的发酵条件。结果表明:ZENL09为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)... 从土壤样品中得到一株能降解玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)的菌株ZENL09,对该菌株的形态特征、生化理化特性和16r s RNA进行分析鉴定,并通过单因素实验得出ZENL09的较优的发酵条件。结果表明:ZENL09为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),其较优的发酵条件为:发酵时间24 h,发酵温度33℃,摇床转速200 r/min,装液量25 mL/250 mL,接种量3%,在此条件下,ZENL09发酵上清液对ZEN的降解率达到了96%。 展开更多
关键词 玉米赤霉烯酮 降解 枯草芽孢杆菌 发酵优化
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响应面法优化假单胞菌HFE733产脂肪酶发酵培养基的研究 被引量:1
16
作者 胡珺 王常高 +2 位作者 林建国 杜馨 蔡俊 《中国调味品》 北大核心 2017年第12期12-16,共5页
研究采用响应面法对假单胞菌HFE733产脂肪酶的发酵培养基进行了优化。在前期运用单因素试验优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出培养基组分中影响脂肪酶活力的2个显著性因素:酵母膏和橄榄油。运用单因素试验研究非显著因素... 研究采用响应面法对假单胞菌HFE733产脂肪酶的发酵培养基进行了优化。在前期运用单因素试验优化的基础上,利用Plackett-Burman试验设计筛选出培养基组分中影响脂肪酶活力的2个显著性因素:酵母膏和橄榄油。运用单因素试验研究非显著因素的最低添加量来降低生产成本,然后运用最陡爬坡试验找到中心复合试验的中心点,最后利用中心复合设计确定显著性因素之间的交互作用及最佳组成。结果表明:最佳培养基组分为酵母膏34g/L、橄榄油5.92 mL/L、蔗糖12.5g/L、CuSO_4·5H_2O 0.4g/L、MnSO_4·H_2O 0.2g/L,在此条件下脂肪酶酶活可达到9.27U/mL,与模型预测值相近,且与单因素优化后的酶活(4.53U/mL)相比,提高了104.64%。 展开更多
关键词 假单胞菌 脂肪酶 响应面法 培养基优化
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大曲清香型白酒固态发酵培养基的优化 被引量:1
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作者 管健 方尚玲 +2 位作者 曹敬华 陈茂彬 毛志海 《酿酒》 CAS 2018年第6期69-73,共5页
以陶坛为发酵容器,模拟大曲清香型白酒发酵工艺,通过二氧化碳失重法,确定了白酒固态发酵周期为25d,跟踪固态小试发酵过程中乙醇含量和淀粉消耗变化,分别得到乙醇生成量和底物消耗量动力学方程。以发酵力为响应指标,选择初始pH、发酵温... 以陶坛为发酵容器,模拟大曲清香型白酒发酵工艺,通过二氧化碳失重法,确定了白酒固态发酵周期为25d,跟踪固态小试发酵过程中乙醇含量和淀粉消耗变化,分别得到乙醇生成量和底物消耗量动力学方程。以发酵力为响应指标,选择初始pH、发酵温度和无机盐添加量进行单因素实验,并通过Box-Behnken响应面进行分析。结果表明,陶坛小试发酵力最佳条件为:初始pH7、发酵温度28℃、无机盐添加量的为1.4%,此时响应值为10.028U,与预测值10.101U较接近。 展开更多
关键词 小试实验 发酵动力学 发酵力 响应面分析
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响应面法优化丁酸梭菌发酵培养工艺 被引量:10
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作者 邢宏观 林建国 +3 位作者 钟雪兆 王常高 杜馨 蔡俊 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期237-243,共7页
采用响应面法对丁酸梭菌生物量的发酵工艺进行优化。在单因素实验的基础上利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响菌体数的显著性因素。在此基础上,运用最陡爬坡实验找出CCD实验的中心点,并确定非显著因素最低添加量来降低生产成本。最... 采用响应面法对丁酸梭菌生物量的发酵工艺进行优化。在单因素实验的基础上利用Plackett-Burman实验设计筛选出影响菌体数的显著性因素。在此基础上,运用最陡爬坡实验找出CCD实验的中心点,并确定非显著因素最低添加量来降低生产成本。最后通过响应面法分析获得最佳发酵培养基组成成份。结果表明:酵母浸粉、Fe SO4和K2HPO4为影响菌体量的3个显著性因素;可溶性淀粉2%、酵母浸粉6%、Fe SO41.74%、K2HPO40.37%、Na Cl 0.2%、Mg SO40.024%为最佳培养基组合;优化后的菌体数可达1.01×109个/m L,与优化前(2.3×108个/m L)相比,提高至4.39倍。 展开更多
关键词 丁酸梭菌 生物量 响应面法 发酵工艺
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基于酶活性调节的酿酒酵母谷胱甘肽发酵调控研究 被引量:7
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作者 方聪明 刘联杰 +3 位作者 周安盛 杜馨 林建国 蔡俊 《中国酿造》 CAS 2014年第6期79-83,共5页
研究了酿酒酵母分批补料发酵合成谷胱甘肽(GSH)过程中pH与温度对GSH产量的影响。通过先研究工程菌所表达的酿酒酵母中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在不同pH及温度下的酶学特性,再以此为基础在分批补料发酵过程进行pH值和温度控制的优化。... 研究了酿酒酵母分批补料发酵合成谷胱甘肽(GSH)过程中pH与温度对GSH产量的影响。通过先研究工程菌所表达的酿酒酵母中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶在不同pH及温度下的酶学特性,再以此为基础在分批补料发酵过程进行pH值和温度控制的优化。结果表明:与初始发酵条件相比,pH控制在5.5~7.5的变化范围内菌体生物量达到(44.80±1.20)g/L,胞内GSH含量为(19.74±0.51)mg/g,GSH产量为(884.35±27.30)mg/L,分别提高了10.07%、3.35%、13.76%。当温度控制在35℃时,菌体生物量达到(46.30±1.55)g/L,胞内GSH含量为(19.84±0.44)mg/g,GSH产量为(918.59±29.22)mg/L,分别提高了3.87%、13.70%、18.17%。研究表明在发酵过程中,通过对pH控制和温度的优化来提高GSH产量是有效的。 展开更多
关键词 酿酒酵母 谷胱甘肽 发酵调控 Γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 酶活性
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混合碳源对地衣芽孢杆菌发酵合成杆菌肽的影响 被引量:5
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作者 刘道奇 陈守文 +2 位作者 李俊辉 陈雄 王志 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期52-57,共6页
在10 L发酵罐水平研究了地衣芽孢杆菌批发酵、补料(葡萄糖、乳糖)批发酵对细胞生长以及溢流代谢和杆菌肽合成的影响。批发酵过程中,细胞28 h达到峰值(91×10~8CFU/mL)后自溶,杆菌肽效价32 h达到峰值(960 U/mL)后逐渐降解。20~28 h... 在10 L发酵罐水平研究了地衣芽孢杆菌批发酵、补料(葡萄糖、乳糖)批发酵对细胞生长以及溢流代谢和杆菌肽合成的影响。批发酵过程中,细胞28 h达到峰值(91×10~8CFU/mL)后自溶,杆菌肽效价32 h达到峰值(960 U/mL)后逐渐降解。20~28 h流加葡萄糖批发酵的峰值生物量(24 h)为115×10~8CFU/mL,比对照提高了26%。但是,流加葡萄糖后杆菌肽合成速率(20~40 h)是17.2 U/(mL·h),仅为补料前(20 h之前)的53%。基料添加乳糖批培养的峰值生物量(32 h)为110×10~8CFU/mL,比分批发酵提高了20.6%,并与流加葡萄糖批发酵接近。同时,杆菌肽以29 U/(mL·h)的速率持续合成至40 h的1 143 U/mL,比分批发酵效价提高了19%。 展开更多
关键词 地衣芽孢杆菌 杆菌肽 葡萄糖 乳糖 溢流代谢
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