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槲皮素通过FOXO1介导自噬抑制ox-LDL诱导泡沫细胞脂滴形成
1
作者
曾江琴
孙勤国
+3 位作者
徐鸿婕
丁晓明
牟艳杰
蒋跃文
《生物化学与生物物理进展》
北大核心
2025年第3期716-723,共8页
目的探讨槲皮素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫细胞脂滴形成的影响及作用机制。方法用50 mg/L的ox-LDL诱导小鼠RAW264.7细胞构建泡沫细胞模型,分别用不同浓度的槲皮素处理不同时间后,通过CCK8筛选槲皮素最佳作用浓度和时间。基...
目的探讨槲皮素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫细胞脂滴形成的影响及作用机制。方法用50 mg/L的ox-LDL诱导小鼠RAW264.7细胞构建泡沫细胞模型,分别用不同浓度的槲皮素处理不同时间后,通过CCK8筛选槲皮素最佳作用浓度和时间。基于构建的泡沫细胞模型,在添加或不添加AS1842856(FOXO1抑制剂)的情况下,用槲皮素处理后,通过油红O染色观察脂滴形成,通过流式细胞术检测细胞凋亡;通过免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞FOXO1蛋白表达水平;通过吖啶橙染色观察自噬小体形成情况;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞Beclin1、LC3II和P62的m RNA和蛋白质表达水平。结果100μmol/L槲皮素干预12 h后,泡沫细胞脂滴形成和细胞凋亡被显著抑制(P<0.05)。与对照组相比,模型组细胞脂滴形成和细胞凋亡增加(P<0.05),自噬小体减少(P<0.05),FOXO1蛋白表达减少(P<0.05),Beclin1和LC3II蛋白的m RNA和蛋白质表达水平均显著下降(P<0.05),P62的mRNA和蛋白质表达水平显著增加(P<0.05)。与模型组相比,槲皮素处理上调FOXO1蛋白表达(P<0.05),诱导自噬小体形成(P<0.05),促进Beclin1和LC3II的蛋白质和mRNA表达水平(P<0.05),抑制P62的蛋白质和mRNA表达水平(P<0.05)。而FOXO1抑制剂会逆转槲皮素对ox-LDL诱导的泡沫细胞的作用效果。结论槲皮素通过上调FOXO1的表达诱导自噬,抑制ox-LDL诱导的脂滴形成。
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关键词
槲皮素
泡沫细胞
脂滴
自噬
叉头盒转录因子O1
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题名
槲皮素通过FOXO1介导自噬抑制ox-LDL诱导泡沫细胞脂滴形成
1
作者
曾江琴
孙勤国
徐鸿婕
丁晓明
牟艳杰
蒋跃文
机构
武汉市第三医院
中医
科
湖北中医药大学中医学院伤寒教研室
湖北
时珍实验室
出处
《生物化学与生物物理进展》
北大核心
2025年第3期716-723,共8页
基金
武汉市卫生计生委科研计划(WZ18A01,WZ24B51)
湖北省教育厅科学技术研究计划(D20202001)
+1 种基金
李家庚全国名老中医药专家传承工作室建设项目(国中医药人教函[2022]75号)
湖北省时珍人才工程科研项目(鄂卫函[2024]256号)资助。
文摘
目的探讨槲皮素对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的泡沫细胞脂滴形成的影响及作用机制。方法用50 mg/L的ox-LDL诱导小鼠RAW264.7细胞构建泡沫细胞模型,分别用不同浓度的槲皮素处理不同时间后,通过CCK8筛选槲皮素最佳作用浓度和时间。基于构建的泡沫细胞模型,在添加或不添加AS1842856(FOXO1抑制剂)的情况下,用槲皮素处理后,通过油红O染色观察脂滴形成,通过流式细胞术检测细胞凋亡;通过免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞FOXO1蛋白表达水平;通过吖啶橙染色观察自噬小体形成情况;通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot检测各组细胞Beclin1、LC3II和P62的m RNA和蛋白质表达水平。结果100μmol/L槲皮素干预12 h后,泡沫细胞脂滴形成和细胞凋亡被显著抑制(P<0.05)。与对照组相比,模型组细胞脂滴形成和细胞凋亡增加(P<0.05),自噬小体减少(P<0.05),FOXO1蛋白表达减少(P<0.05),Beclin1和LC3II蛋白的m RNA和蛋白质表达水平均显著下降(P<0.05),P62的mRNA和蛋白质表达水平显著增加(P<0.05)。与模型组相比,槲皮素处理上调FOXO1蛋白表达(P<0.05),诱导自噬小体形成(P<0.05),促进Beclin1和LC3II的蛋白质和mRNA表达水平(P<0.05),抑制P62的蛋白质和mRNA表达水平(P<0.05)。而FOXO1抑制剂会逆转槲皮素对ox-LDL诱导的泡沫细胞的作用效果。结论槲皮素通过上调FOXO1的表达诱导自噬,抑制ox-LDL诱导的脂滴形成。
关键词
槲皮素
泡沫细胞
脂滴
自噬
叉头盒转录因子O1
Keywords
quercetin
foam cells
fat drops
autophagy
forkhead box O
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
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作者
出处
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1
槲皮素通过FOXO1介导自噬抑制ox-LDL诱导泡沫细胞脂滴形成
曾江琴
孙勤国
徐鸿婕
丁晓明
牟艳杰
蒋跃文
《生物化学与生物物理进展》
北大核心
2025
0
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