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二甲基亚砜对体外培养眼组织细胞的毒性作用 被引量：3
1
作者 赵春晖 兰碧菲 +1 位作者 侯江平 程凌云 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期216-220,共5页
背景 二甲基亚砜（DMSO）是常用的药物助溶剂,但DMSO体积分数较高时对细胞有毒性,可能影响对受试药物的正确评价,所以确定不同眼组织细胞对DMSO的敏感性十分重要. 目的 探讨DMSO对体外培养的多种眼组织细胞的最小毒性体积分数,为眼部药... 背景 二甲基亚砜（DMSO）是常用的药物助溶剂,但DMSO体积分数较高时对细胞有毒性,可能影响对受试药物的正确评价,所以确定不同眼组织细胞对DMSO的敏感性十分重要. 目的 探讨DMSO对体外培养的多种眼组织细胞的最小毒性体积分数,为眼部药物的体外筛选提供依据. 方法 采集青紫蓝兔的视网膜色素上皮（RPE）细胞进行培养,并利用免疫组织化学法进行鉴定.分别对人视网膜色素上皮细胞株（ARPE19）、巩膜成纤维细胞（S75-Fron）、Müller细胞（MIO-M1）、人晶状体上皮细胞（HLEC）、人眼葡萄膜黑色素瘤细胞（OCM-1）、人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）进行体外培养.取160μl DMSO溶液和9.84 ml含体积分数2％胎牛血清（FBS）的RPM I1640或DMEM/F12或DMEM培养液配制体积分数分别为1.6％、1.0％、0.8％、0.4％、0.2％和0.1％ DMSO的RPMI1640、DMEM/F12和DMEM培养液,在培养的各种细胞中分别加入不同体积分数的DMSO培养液作用96 h,采用MTS法检测各组细胞的吸光度（A）值. 结果 培养的兔原代RPE细胞对细胞角蛋白（CK）和HMB45呈黄绿色荧光,细胞质和细胞核内S100阳性反应呈红色荧光.随着DMSO体积分数的增加,各细胞活性（A值）逐渐降低,随着DMSO体积分数的增加,ARPE19、S75-Fron、HLEC、OCM-1、HUVEC和原代RPE细胞活性（A值）均明显下降,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,当DMSO体积分数≥0.8％时,RPE细胞活性均明显低于空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,但MIO-M1细胞株活性的差异无统计学意义（F=0.830,P=0.547）.DMSO对ARPE19、HUVEC、HELA、HLEC、MIO-M1、OCM-1、原代RPE细胞和S75-Fron细胞最低有毒体积分数分别为0.8％、0.1％、0.8％、＞1.6％、＞1.6％、0.2％、0.2％和0.2％,HUVEC对DMSO的毒性最敏感,在0.1％ DMSO情况下即显示出毒性（P=0.02）,而MIO-M1细胞在1.6％ DMSO的情况下仍未显示出毒性作用（P=0.39）.HUVEC和原代RPE细胞活性随DMSO体积分数的增加而下降,S75-Fron细胞活性在DMSO体积分数为0.1％时开始下降,之后虽然DMSO体积分数增加,但细胞活性保持平稳,当DMSO体积分数增至1.6％时,S75-Fron细胞活性进一步下降,MIO-M1细胞活性在不同体积分数的DMSO组无明显变化. 结论 DMSO在体外实验中的细胞毒性随体积分数的增大而增强,在达到助溶效果的情况下应选用最小体积分数的DMSO,同时设与样品中DMSO相同体积分数的DMSO对照. 展开更多
关键词 二甲基亚砜 细胞毒性 眼组织细胞 药物筛选
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“健康快车”特殊条件下眼科手术器械漂洗方法的研究 被引量：3
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作者 马思文 孙怡雯 +3 位作者 陈晨 唐媛 陈茹 陈燕燕 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期37-42,共6页
目的探索在“健康快车”无流动水清洗设备的特殊条件下,复用眼科手术器械有效的漂洗方法。方法研究分两个阶段进行,分别探索不同漂洗方法对手术器械多酶清洗剂清除效果和清洗质量的影响。分别选择无污染和模拟临床手术污染的白内障显微... 目的探索在“健康快车”无流动水清洗设备的特殊条件下,复用眼科手术器械有效的漂洗方法。方法研究分两个阶段进行,分别探索不同漂洗方法对手术器械多酶清洗剂清除效果和清洗质量的影响。分别选择无污染和模拟临床手术污染的白内障显微手术器械。A、B、C、D、F、G组为试验组,模拟“健康快车”条件下使用非流动水漂洗手术器械,A、B、C 3组的漂洗方法分别为“2、4、6 L水结合刷洗”、D组“不漂洗”、F组漂洗方法同B组、G组在B组的基础上增加“0.5 L水结合涮洗”的步骤。E、H组为对照组,遵守指南使用流动水漂洗手术器械。清洗效果评价:采用蛋白残留检测仪间接检测多酶清洗剂残留量;采用ATP生物荧光检测仪检测手术器械的清洗质量。结果B组多酶清洗剂残留量为(1.90±0.23)μg/20把,B组与对照组[(3.45±0.46)μg/20把]的多酶清洗剂残留结果比较,差异无统计学意义(P=0.053)。G组ATP生物荧光检测结果为(9.46±1.50)RLU/把,G组ATP生物荧光检测结果与对照组[(11.60±1.44)RLU/把]比较,差异无统计学意义(P=0.339)。结论结合两阶段试验结果,在“健康快车”无流动水清洗设备的特殊条件下漂洗眼科手术器械,推荐选用G组漂洗方法。 展开更多
关键词 健康快车 清洗 漂洗 眼科 显微器械 白内障
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CRISPR家族新成员:CRISPR-Cpf1 被引量：5
3
作者 周晨晨 刘写写 +1 位作者 谢海华 谷峰 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第6期585-592,共8页
近年来,基因组编辑技术得到了飞速发展,该技术正在基础生物学研究、医学、生物技术等多个领域引起一场新的变革.Cpf1,作为CRISPR系统的新成员,极大地扩展了基因编辑靶位点的选择范围,同时其介导的多基因编辑具有明显的优势.另外,较短的c... 近年来,基因组编辑技术得到了飞速发展,该技术正在基础生物学研究、医学、生物技术等多个领域引起一场新的变革.Cpf1,作为CRISPR系统的新成员,极大地扩展了基因编辑靶位点的选择范围,同时其介导的多基因编辑具有明显的优势.另外,较短的crRNA序列也使Cpf1更容易产业化.本文将从Cpf1的结构和编辑特点、应用进展、目前面临的问题及展望等方面进行介绍和总结. 展开更多
关键词 基因组编辑技术 成簇规律间隔短回文重复(clustered REGULATORY interspaced SHORT palindromic repeats CRISPRs) CRISPR-Cpf1
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药物溶解度对经巩膜给药的影响 被引量：1
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作者 卢萍 程凌云 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期305-310,共6页
经巩膜给药因其创伤性小，吸收面积大，靶向传递性好等特点已成为备受关注的治疗眼后段疾病的给药方式。但在治疗眼后段疾病时，其临床有效性不及玻璃体腔给药，其原因在于药物经巩膜进入眼内的生物利用度不仅受到巩膜、脉络膜、视网膜... 经巩膜给药因其创伤性小，吸收面积大，靶向传递性好等特点已成为备受关注的治疗眼后段疾病的给药方式。但在治疗眼后段疾病时，其临床有效性不及玻璃体腔给药，其原因在于药物经巩膜进入眼内的生物利用度不仅受到巩膜、脉络膜、视网膜色素上皮等解剖屏障的影响，还受到眼压及眼内液体向外作用力和脉络膜血流的影响。同时所用药物的溶解度、溶出速度、相对分子质量、分子半径、脂溶性等药物本身理化性质对药物传递到视网膜的效率也有很大的影响。其中药物溶解度是影响经巩膜给药后药物在眼内生物利用度的首要因素，也是研究给药时调控的关键因素之一。因为溶解度高时药物从药源溶出的速度也快，大量的药物在巩膜表面溶出，很容易通过结膜和表层巩膜中的血液和淋巴循环进入全身而引起不良反应；当药物溶解度很小或在溶液中溶出速度太慢时，很快被结膜和表层巩膜中的血液和淋巴循环移除，在巩膜表面形成药物浓度梯度，难以穿透巩膜进入眼内。因此在经巩膜给药治疗眼后段疾病过程中，药物的溶解度成为影响药物眼内生物利用度的重要因素之一。通常，治疗眼后段疾病的药物多为亲脂难溶于水的药物，科学家通过使用助溶剂改变药物分子的晶型，使用分散剂做成脂质体或微球混悬液等来增加药物水溶性以达到局部应用的目的。因此提高难溶性药物的溶解度是开发经巩膜给药剂型的常用手段，以促进药物经巩膜渗透进入眼内。本文就药物的溶解度对经巩膜给药的影响以及增大难溶性药物溶解度的方法进行综述，以期为经巩膜给药的基础和临床研究提供更多的科学依据和指导。 展开更多
关键词 经巩膜给药 难溶性药物 生物利用度 药物溶解度
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