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分析超速离心技术研究膜蛋白TmrAB
被引量：
2
1
作者
褚文丹
徐扬
+4 位作者
周翠燕
芦亚菲
于晓霞
张瑞轩
李文奇
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期1047-1053,共7页
去垢剂在膜蛋白的提取纯化过程中起到必要的作用,对膜蛋白的聚合状态、结晶条件以及理化性质等方面都有较大影响.分析超速离心技术(analytical ultracentrifuge,AUC)通过测定溶液中膜蛋白-去垢剂复合物在离心场中的沉降运动轨迹,可以分...
去垢剂在膜蛋白的提取纯化过程中起到必要的作用,对膜蛋白的聚合状态、结晶条件以及理化性质等方面都有较大影响.分析超速离心技术(analytical ultracentrifuge,AUC)通过测定溶液中膜蛋白-去垢剂复合物在离心场中的沉降运动轨迹,可以分析获得其沉降系数、摩尔质量、流体力学半径、结合常数等水力学和热力学性质,进而判断膜蛋白-去垢剂复合物的均一性及聚合状态.本文以嗜热菌来源的ATP结合转运蛋白(ABC transporter)TmrAB作为研究对象,利用分析超速离心技术结合分子排阻层析和冷冻电镜负染技术,研究其均一性、聚合状态以及去垢剂与膜蛋白的摩尔比.结果显示,在8倍临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)的DDM条件下,TmrAB性质均一,并以异二聚体的单体形式存在,DDM与Tmr AB的摩尔比为116∶1.本研究表明,分析超速离心技术是一种测定膜蛋白分子质量、研究膜蛋白聚合状态的可靠手段.
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关键词
分析超速离心
分子排阻层析
冷冻电镜
膜蛋白
分子质量
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职称材料
分析超速离心研究多聚酸性氨基酸对SnRK2.6的影响
被引量：
4
2
作者
褚文丹
周翠燕
+2 位作者
芦亚菲
徐扬
李文奇
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期256-264,共9页
分析超速离心技术是一种通过检测分子在离心场作用下的沉降行为，分析获得其沉降系数、扩散系数、流体力学半径、摩尔质量、结合常数等水力学和热力学性质的方法，被广泛应用于蛋白质分子溶液性质的研究中．本文利用分析超速离心技术研...
分析超速离心技术是一种通过检测分子在离心场作用下的沉降行为，分析获得其沉降系数、扩散系数、流体力学半径、摩尔质量、结合常数等水力学和热力学性质的方法，被广泛应用于蛋白质分子溶液性质的研究中．本文利用分析超速离心技术研究了拟南芥SnRK2．6（sucrosenon—fermentingl一relied protein kinase2．6）末端一段多聚酸性氨基酸序列对其溶液性质的影响，并将多聚酸性氨基酸序列SnRK2．6（333-362）及人源PDI（protein disulfide isomerase）（441-491）连接至拟南芥PYLIO（PYR likep rotein10）分子末端进行分析，同时结合分子排阻层析和静态光散射技术，研究了上述蛋白质分子的分子质量和聚合状态．结果表明，多聚酸性氨基酸序列可以引起蛋白质分子轴长比增加，在溶液中运动时摩擦系数增加，水合半径明显增大，分子排阻层析洗脱体积明显变小．
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关键词
分析超速离心
分子排阻层析
静态光散射
蛋白质分子质量
聚合状态
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职称材料
题名
分析超速离心技术研究膜蛋白TmrAB
被引量：
2
1
作者
褚文丹
徐扬
周翠燕
芦亚菲
于晓霞
张瑞轩
李文奇
机构
清华大学生命科学与医学研究院蛋白质研究技术中心
清华大学
生命科学
学院
中国
科学
院生物物理
研究
所
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2018年第10期1047-1053,共7页
基金
中国博士后科学基金面上资助(2014M550050)
清华大学结构生物学高精尖创新中心资助项目~~
文摘
去垢剂在膜蛋白的提取纯化过程中起到必要的作用,对膜蛋白的聚合状态、结晶条件以及理化性质等方面都有较大影响.分析超速离心技术(analytical ultracentrifuge,AUC)通过测定溶液中膜蛋白-去垢剂复合物在离心场中的沉降运动轨迹,可以分析获得其沉降系数、摩尔质量、流体力学半径、结合常数等水力学和热力学性质,进而判断膜蛋白-去垢剂复合物的均一性及聚合状态.本文以嗜热菌来源的ATP结合转运蛋白(ABC transporter)TmrAB作为研究对象,利用分析超速离心技术结合分子排阻层析和冷冻电镜负染技术,研究其均一性、聚合状态以及去垢剂与膜蛋白的摩尔比.结果显示,在8倍临界胶束浓度(critical micelle concentration,CMC)的DDM条件下,TmrAB性质均一,并以异二聚体的单体形式存在,DDM与Tmr AB的摩尔比为116∶1.本研究表明,分析超速离心技术是一种测定膜蛋白分子质量、研究膜蛋白聚合状态的可靠手段.
关键词
分析超速离心
分子排阻层析
冷冻电镜
膜蛋白
分子质量
Keywords
analytical ultracentrifugation
membrane protein；size exclusion chromatography
Cryo-SEM
protein molecular mass
分类号
Q5 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
分析超速离心研究多聚酸性氨基酸对SnRK2.6的影响
被引量：
4
2
作者
褚文丹
周翠燕
芦亚菲
徐扬
李文奇
机构
清华大学
生命科学
与医学
研究院
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2016年第3期256-264,共9页
基金
中国博士后科学基金面上资助项目(2014M550050)~~
文摘
分析超速离心技术是一种通过检测分子在离心场作用下的沉降行为，分析获得其沉降系数、扩散系数、流体力学半径、摩尔质量、结合常数等水力学和热力学性质的方法，被广泛应用于蛋白质分子溶液性质的研究中．本文利用分析超速离心技术研究了拟南芥SnRK2．6（sucrosenon—fermentingl一relied protein kinase2．6）末端一段多聚酸性氨基酸序列对其溶液性质的影响，并将多聚酸性氨基酸序列SnRK2．6（333-362）及人源PDI（protein disulfide isomerase）（441-491）连接至拟南芥PYLIO（PYR likep rotein10）分子末端进行分析，同时结合分子排阻层析和静态光散射技术，研究了上述蛋白质分子的分子质量和聚合状态．结果表明，多聚酸性氨基酸序列可以引起蛋白质分子轴长比增加，在溶液中运动时摩擦系数增加，水合半径明显增大，分子排阻层析洗脱体积明显变小．
关键词
分析超速离心
分子排阻层析
静态光散射
蛋白质分子质量
聚合状态
Keywords
analytical ultracentrifugation, size exclusion chromatography, static light scattering, proteinmolecular mass, oligomerization state
分类号
Q5 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
分析超速离心技术研究膜蛋白TmrAB
褚文丹
徐扬
周翠燕
芦亚菲
于晓霞
张瑞轩
李文奇
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2018
2
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职称材料
2
分析超速离心研究多聚酸性氨基酸对SnRK2.6的影响
褚文丹
周翠燕
芦亚菲
徐扬
李文奇
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2016
4
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