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海南省文昌鸡主要养殖地区鸡毒支原体和鸡滑液囊支原体的血清学调查与分析
1
作者 薛琛璐 张艳 +3 位作者 刘海隆 晁哲 魏立民 刘光亮 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期62-67,共6页
为探明海南省文昌鸡主要养殖地区鸡毒支原体(MG)和鸡滑液囊支原体(MS)的感染情况,采集来自海口、文昌、琼海、儋州4个文昌鸡主要养殖地区的13个不同规模鸡场未经MG、MS疫苗免疫的文昌鸡血样1726份,采用酶联免疫吸附试验进行MG、MS血清... 为探明海南省文昌鸡主要养殖地区鸡毒支原体(MG)和鸡滑液囊支原体(MS)的感染情况,采集来自海口、文昌、琼海、儋州4个文昌鸡主要养殖地区的13个不同规模鸡场未经MG、MS疫苗免疫的文昌鸡血样1726份,采用酶联免疫吸附试验进行MG、MS血清抗体检测。结果显示,MG和MS的抗体总阳性率分别为42.00%和31.75%;4个地区以琼海市的MG抗体阳性率最高,达到68.00%;儋州市的MS抗体阳性率最高,达到36.67%;冬季MG的感染率较高,抗体阳性率达47.48%,夏、秋两季MS的感染率较高,抗体阳性率分别为37.85%和35.87%;成年文昌鸡MG和MS的抗体阳性率高于雏鸡和育成鸡(P<0.05),分别为74.45%和59%;小规模场的MG、MS抗体阳性率最高,分别为54.10%和46.45%;不同养殖类型的文昌鸡以商品代蛋鸡MG的抗体阳性率最高,达到83.33%,商品代肉鸡MS的抗体阳性率最高,达到37.04%。结果表明,海南省文昌鸡主要养殖地区普遍存在MG、MS感染。提示各养殖地区应针对性地加强对文昌鸡MG和MS的防控,以减少疫病发生。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 鸡滑液囊支原体 血清学 文昌鸡 海南省
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海南省文昌鸡传染性贫血的血清学调查
2
作者 张庆玲 史慧君 +4 位作者 刘光亮 晁哲 刘海隆 魏立民 张艳 《动物医学进展》 北大核心 2024年第1期121-125,共5页
为掌握海南省文昌鸡传染性贫血(CIAV)的流行情况,分别从海南省4个文昌鸡主要养殖地区海口、文昌、琼海和儋州的14个不同规模未免疫CIA疫苗的文昌鸡场采集血液样品1709份,采用ELISA检测CIAV抗体。结果显示,1709份血液样品共检出阳性样品... 为掌握海南省文昌鸡传染性贫血(CIAV)的流行情况,分别从海南省4个文昌鸡主要养殖地区海口、文昌、琼海和儋州的14个不同规模未免疫CIA疫苗的文昌鸡场采集血液样品1709份,采用ELISA检测CIAV抗体。结果显示,1709份血液样品共检出阳性样品564份,文昌鸡的CIAV抗体总阳性率为33%;4个地区的文昌鸡场均有不同程度的CIAV感染,其中儋州市文昌鸡的CIAV抗体阳性率最高,达到55%;成年文昌鸡的CIAV感染程度高于其他生长阶段鸡,抗体阳性率达到53.63%;CIAV在一年四季均有发生,以冬季高发,抗体阳性率为48.06%;不同规模文昌鸡场CIAV的感染率存在差异,以中小规模文昌鸡场的CIAV感染程度较高,抗体阳性率分别为41.48%和40.10%;在不同类型的文昌鸡群中商品代蛋鸡的CIAV抗体阳性率最高,达到62.62%。结果表明,CIAV在海南省文昌鸡养殖地区普遍存在,且在冬季、成年文昌鸡中高发,以商品代蛋鸡感染最为严重,因此,应针对性地加强对海南省文昌鸡传染性贫血的防控。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血 血清学调查 文昌鸡
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海南黑山羊ATG16L2基因启动子区多态性研究
3
作者 王欢 陈韬羽 +10 位作者 吴慧 蒙勇 李世元 钱和洁 牛世华 满初日嘎 陈巧玲 高宏岩 杜丽 王凤阳 陈思 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期4980-4991,共12页
旨在研究海南黑山羊ATG16L2基因启动子区的结构特征及其遗传分布情况,为进一步探索该基因的表达调控机制及功能提供理论依据。本研究以200头海南黑山羊为研究对象,构建DNA混池,采用Sanger法测序对海南黑山羊ATG16L2基因启动子区的多态... 旨在研究海南黑山羊ATG16L2基因启动子区的结构特征及其遗传分布情况,为进一步探索该基因的表达调控机制及功能提供理论依据。本研究以200头海南黑山羊为研究对象,构建DNA混池,采用Sanger法测序对海南黑山羊ATG16L2基因启动子区的多态性进行初筛,应用PCR-RFLP技术对200头海南黑山羊个体进行基因型鉴定。对筛选到的SNP位点进行连锁不平衡分析,构建单倍型。利用生物信息学方法分析SNP位点对海南黑山羊ATG16L2基因表达的影响。在海南黑山羊ATG16L2基因启动子区共检测到3个SNPs位点,分别为SNP1(g.30667970T>C)、SNP2(g.30668540T>C)和SNP3(g.30668664C>T),且彼此连锁。SNP1和SNP2位点均表现为中度多态性,SNP3位点表现为低度多态性,且符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。单倍型分析结果显示,H1、H2、H3和H4单倍型频率分别为0.321、0.304、0.271和0.097,且H1(CGC)为优势单倍型。生物信息学分析显示,山羊ATG16L2基因共预测到3个启动子和4个CpG岛区域;存在2个重复元件LINE2(-1989~-1826 bp、-562~-426 bp)、hAT-Charlie(-1804~-1511 bp)以及5个CCAAT-Box、13个CAAT-Box、10个CGCG-Box、11个GATA-Box和2个TATA-Box。综合多种在线软件预测发现,上述SNPs可能通过影响ATG16L2基因的启动子区的顺式作用元件,从而影响海南黑山羊ATG16L2基因的转录表达。本研究在海南黑山羊ATG16L2基因启动子序列中发现3个SNPs位点,其中SNP1和SNP2表现为中度多态性,SNP3表现为低度多态性,并预测这些SNPs可能影响转录因子结合,从而调控基因表达,为进一步探究ATG16L2基因功能及其调控机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 海南黑山羊 ATG16L2基因 启动子 多态性 生物信息学
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海南省奶源和养殖环境主要肠杆菌科细菌的分布及基因分型 被引量：2
4
作者 郝若晨 唐敏嘉 +5 位作者 刘光亮 张艳 Muhammad Shoaib 尚若锋 曹宗喜 蒲万霞 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5184-5197,共14页
本研究从2021年海南省两个奶牛场采集的52份样本中分离肠杆菌科细菌,并对分离菌株进行了毒力基因、质粒型和生物被膜形成能力检测及肠杆菌科细菌基因间重复序列分子分型(ERIC-PCR)研究,以期明确牛奶及奶牛场环境中肠杆菌科细菌分布流行... 本研究从2021年海南省两个奶牛场采集的52份样本中分离肠杆菌科细菌,并对分离菌株进行了毒力基因、质粒型和生物被膜形成能力检测及肠杆菌科细菌基因间重复序列分子分型(ERIC-PCR)研究,以期明确牛奶及奶牛场环境中肠杆菌科细菌分布流行状况及其生物学特性。首先,采用16S rDNA PCR和ERIC-PCR对分离的肠杆菌科细菌进行鉴定和去重,结果显示52份样本中分离到肠杆菌科细菌49株,其中大肠埃希菌(Escherichia coli)32株,肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)13株,阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)3株,产气肠杆菌(Enterobacter aerogenes)1株;其次,采用PCR方法进行了分离菌株的毒力基因检测,结果显示,ompA的检出率最高;之后,采用CARATTOLI创建的基于PCR的质粒复制子分型,结果显示K质粒的检出率最高;采用刚果红琼脂法对分离菌株进行了生物被膜形成能力定性检测,发现49株肠杆菌科细菌中有37株指示有生物被膜形成能力;最后,通过ERIC-PCR分型进行了肠杆菌科细菌的亲缘关系和遗传多样性分析,发现49株肠杆菌科菌株可划分为17型(Ⅰ~ⅩⅦ),Ⅵ型为优势型(均为Escherichia coli),共20株。整体研究表明肠杆菌科细菌在奶源环境中广泛存在、生物特性多样,推测具有一定的致病力和耐药性,引起人类和动物疾病风险较高,提示养殖、运输中的卫生和规范操作至关重要。 展开更多
关键词 肠杆菌科细菌 分子分型 质粒型 生物被膜
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海南省规模猪场猪传染性胸膜肺炎的血清学调查 被引量：15
5
作者 张艳 刘海隆 +2 位作者 林哲敏 曹宗喜 谭树义 《动物医学进展》 北大核心 2016年第1期129-132,共4页
为了解海南省规模猪场猪传染性胸膜肺炎(PCP)的感染情况,采集海南省8个市县16个不同规模猪场血清样品1 286份,用ELISA方法对猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)ApxⅣ抗体进行检测,分析APP的感染情况。结果显示,1 286份猪血清样品共检出阳性样品436... 为了解海南省规模猪场猪传染性胸膜肺炎(PCP)的感染情况,采集海南省8个市县16个不同规模猪场血清样品1 286份,用ELISA方法对猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)ApxⅣ抗体进行检测,分析APP的感染情况。结果显示,1 286份猪血清样品共检出阳性样品436份,抗体阳性率为33.90%。其中,检测母猪血清326份,抗体阳性率为47.85%;检测哺乳仔猪血清324份,抗体阳性率为37.65%;检测保育猪血清316份,抗体阳性率为18.99%;检测育肥猪血清320份,抗体阳性率为30.63%。8个市县均有APP感染,其中文昌市APP抗体阳性率最高;不同规模猪场均有APP感染,其中中型规模猪场APP抗体阳性率最高;不同品种猪均有APP感染,其中杜长陆三元杂猪APP抗体阳性率最高。说明PCP在海南省部分规模猪场中普遍存在,对猪场进行PCP的控制是十分必要的。 展开更多
关键词 猪传染性胸膜肺炎 胸膜肺炎放线杆菌 血清学调查
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基于全基因组重测序研究文昌鸡产蛋性能的影响因素 被引量：3
6
作者 任钰为 陈星 +8 位作者 林燕宁 黄潇仙 洪玲玲 王峰 孙瑞萍 张艳 刘海隆 郑心力 晁哲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期502-514,共13页
旨在通过研究文昌鸡进化过程的特征,深入理解影响产蛋性能的因素,为文昌鸡优良品种选育提供基础。本研究采集35只健康文昌鸡(35周龄,15公,20母)和30只健康江汉鸡(35周龄,10公,20母)的血液组织各3 mL提取DNA,采用全基因组重测序方法建库... 旨在通过研究文昌鸡进化过程的特征,深入理解影响产蛋性能的因素,为文昌鸡优良品种选育提供基础。本研究采集35只健康文昌鸡(35周龄,15公,20母)和30只健康江汉鸡(35周龄,10公,20母)的血液组织各3 mL提取DNA,采用全基因组重测序方法建库测序。首先,对于原始测序数据用trimmomatic软件过滤,获得高质量序列比对到鸡的参考基因组,GATK软件提取变异位点SNPs,设置参数质控去除低质量、假阳性变异位点,进一步采用snpEff对过滤的SNPs进行基因结构和功能注释。然后,比较文昌鸡和江汉鸡的群体结构差异,分别设置评估群体差异参数Fst、ROD、Tajima′s D的阈值,筛选受到选择的区域,并对这些区域的基因进行功能富集。结果表明:1)文昌鸡测序获得1.05 Tb clean data,平均每个样本大约29.97 Gb,测序深度大约28×;江汉鸡测序获得1.10 Tb clean data,每个样本大约36.72 Gb,测序深度大约35×;平均比对率>98%。2)两个群体基因结构注释总数均是内含子>基因间区>上下游调控区>编码区;系统进化树和主成分分析显示文昌鸡和江汉鸡亲缘关系较远;文昌鸡的连锁不平衡程度低于江汉鸡。3)与产蛋性能相关基因的功能富集结果主要包括3种必须氨基酸(缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸)代谢途径、钙离子沉积、金属肽酶抗氧化、肾上腺素和催乳素受体活性等功能,而且这些通路的基因都位于受到强烈选择的区域。综上所述,影响文昌鸡产蛋性能的因素主要包括必须氨基酸代谢、矿物质沉积和抗氧化、性腺激素分泌,这3个因素在进化过程中都受到强烈选择,对产蛋性能发挥重要调控作用。从进化分子遗传学角度研究鸡的产蛋机理,不但能够促进理解文昌鸡产蛋性能的进化特征,而且有助于加速高产蛋鸡品种或品系的培育。 展开更多
关键词 文昌鸡 全基因组重测序 遗传选择 产蛋性能 影响因素
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PRRSV的病毒蛋白研究进展 被引量：8
7
作者 曹宗喜 师志海 +2 位作者 林哲敏 焦培荣 张桂红 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期134-137,共4页
猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的病毒性疾病,给世界养猪业造成了极大的威胁。从猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组、非结构蛋白和结构蛋白3个方... 猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒引起的一种以妊娠母猪严重繁殖障碍及仔猪的呼吸道症状和高死亡率为特征的病毒性疾病,给世界养猪业造成了极大的威胁。从猪繁殖与呼吸综合征病毒的基因组、非结构蛋白和结构蛋白3个方面对PRRSV的病毒蛋白研究进展进行综述。 展开更多
关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒 病毒基因组 非结构蛋白 结构蛋白
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木薯粉对文昌鸡生产性能、血清生化及免疫指标的影响
8
作者 郭琪琪 魏立民 +5 位作者 薛琛璐 吴蔚 欧阳坤 刘宇航 孙瑞萍 刘圈炜 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第2期615-623,共9页
[目的]试验旨在研究添加不同水平木薯粉对文昌鸡生产性能、血清生化及免疫指标的影响。[方法]选取遗传背景一致、体重相近(1 215.56 g±3.73 g)的81日龄健康文昌鸡母鸡600只,随机分入5个处理组,每组设6个重复,每重复20只鸡,分别饲... [目的]试验旨在研究添加不同水平木薯粉对文昌鸡生产性能、血清生化及免疫指标的影响。[方法]选取遗传背景一致、体重相近(1 215.56 g±3.73 g)的81日龄健康文昌鸡母鸡600只,随机分入5个处理组,每组设6个重复,每重复20只鸡,分别饲喂添加0(CM0组)、5%(CM5组)、10%(CM10组)、20%(CM20组)和25%(CM25组)木薯粉的饲粮。试验期40 d。试验结束后称重,计算生长性能;从每个重复选取2只鸡翅静脉采血,测定血清生化指标和免疫指标;屠宰后测定屠宰性能及脏器系数。[结果](1)与CM0组相比,CM10、CM20和CM25组文昌鸡日增重均显著增加(P<0.05),料重比均显著降低(P<0.05)。(2)添加不同水平木薯粉对文昌鸡屠宰性能及脏器系数均未产生显著影响(P>0.05)。(3)与CM0组相比,CM20和CM25组文昌鸡血清葡萄糖水平显著提高(P<0.05);CM20组血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性显著提高(P<0.05);CM5组文昌鸡血清免疫球蛋白A(IgA)含量显著升高(P<0.05);CM25组文昌鸡血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量显著降低(P<0.05)。[结论]添加适量木薯粉可提高文昌鸡生产性能,还能改善其糖代谢及抗氧化性能。推荐81~120日龄文昌鸡饲粮中木薯粉的适宜添加水平为20%。 展开更多
关键词 木薯粉 文昌鸡 生产性能 血清生化指标 血清免疫指标
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牛乳头瘤病毒的研究进展 被引量：9
9
作者 史巧芸 庞峰 +1 位作者 杜丽 王凤阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第6期1613-1619,共7页
牛乳头状瘤(bovine papillomatosis,BP)是由牛乳头瘤病毒(bovine papillomavirus,BPV)引起的一种传染性肿瘤病。该病易复发进而癌变,给养殖业等造成严重经济损失。作者主要对BPV的基因型、基因结构及其功能和致病机制方面的研究进展作... 牛乳头状瘤(bovine papillomatosis,BP)是由牛乳头瘤病毒(bovine papillomavirus,BPV)引起的一种传染性肿瘤病。该病易复发进而癌变,给养殖业等造成严重经济损失。作者主要对BPV的基因型、基因结构及其功能和致病机制方面的研究进展作一综述,为深入研究BPV致癌潜能及抗病毒疫苗的开发提供参考。 展开更多
关键词 乳头瘤病毒 牛 研究进展
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海南黑山羊MBL2基因的转录调控元件的筛选与分析 被引量：2
10
作者 王雪梅 翟哲 +9 位作者 陈巧玲 吴艳茹 吴昊天 黄惠娴 刘志勇 李崇瑞 满初日嘎 王凤阳 杜丽 陈思 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1795-1806,共12页
甘露聚糖结合凝集素C(mannose binding lectin C,MBL-C)是C型(Ca^(2+)依赖型)凝集素超家族的成员,其作为一种急性期蛋白,具有抗细菌感染的功能,参与机体的天然免疫反应。为鉴定出结合在MBL2基因启动子区(1009 bp)的重要转录因子,探寻该... 甘露聚糖结合凝集素C(mannose binding lectin C,MBL-C)是C型(Ca^(2+)依赖型)凝集素超家族的成员,其作为一种急性期蛋白,具有抗细菌感染的功能,参与机体的天然免疫反应。为鉴定出结合在MBL2基因启动子区(1009 bp)的重要转录因子,探寻该基因的转录调控机制,本研究选取海南黑山羊MBL2基因的启动子序列1009 bp,采用DNA重组技术克隆6个转录起始位点上游1009 bp的启动子5′端侧翼缺失序列,克隆片段经双酶切后连接至pGL3-Basic载体。重组质粒转染至293T细胞中,结合双荧光素酶活性检测系统筛选MBL2基因的核心启动子区域。通过在线生物信息学软件预测山羊MBL2基因的核心启动子区域的转录因子结合位点,利用点突变技术构建转录因子结合位点缺失的载体,转染293T细胞后结合双荧光素酶活性检测系统分析其转录活性。结果表明,海南黑山羊MBL2基因的核心启动子区域位于转录起始位点上游-304~-45 bp范围内,在线软件分析该区域存在RELA、NF-κB2、MZF1等3种转录因子结合位点。双荧光素酶报告分析结果表明,RELA和NF-κB2的结合位点缺失后均使山羊MBL2基因的转录活性极显著下降(P<0.01)。结果提示,RELA和NF-κB2对山羊MBL2基因的转录活性可能具有重要的正调控作用。该研究为进一步探寻海南黑山羊MBL2基因的功能提供理论依据。 展开更多
关键词 海南黑山羊 MBL2基因 转录调控 双荧光素酶 核心启动子
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鸡HSP90AA1基因SNP检测及启动子区CpG岛的甲基化研究 被引量：2
11
作者 晁哲 吴望军 +4 位作者 邢漫萍 黄丽丽 孙瑞萍 刘海隆 郑心力 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第2期504-511,共8页
试验旨在获得鸡热休克蛋白90α(HSP90AA1)基因序列并分析其基因结构和相关遗传变异,检测HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化状态,初步探索HSP90AA1基因在肌肉组织生长发育中的作用。以文昌鸡和北京油鸡为试验材料,利用PCR扩增鸡HSP90AA... 试验旨在获得鸡热休克蛋白90α(HSP90AA1)基因序列并分析其基因结构和相关遗传变异,检测HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化状态,初步探索HSP90AA1基因在肌肉组织生长发育中的作用。以文昌鸡和北京油鸡为试验材料,利用PCR扩增鸡HSP90AA1基因组序列;通过基因测序寻找该基因中的单核苷酸多态性(SNP)位点;使用在线软件MethPrimer预测鸡HSP90AA1基因中CpG岛的位置;应用MassArray质谱法检测鸡胸肌中HSP90AA1基因启动子区CpG岛的甲基化水平,比较分析文昌鸡和北京油鸡HSP90AA1基因的甲基化差异。结果显示,在鸡HSP90AA1基因组中共发现7个SNPs位点,分别位于启动子区(A-189G,C-109T)、第1外显子(A+6G)、第2外显子(C+343T)、第2内含子(A+634G、A+836G)和第7内含子(A+3449G);鸡HSP90AA1基因包含10个外显子和9个内含子,其启动子区存在1个CpG岛,位于-1 802～-469bp处;在HSP90AA1基因启动子区共检测了42个CpG位点的甲基化水平,文昌鸡和北京油鸡中分别有9个(CpG_16.17.18、CpG_21.22.23、CpG_32.33和CpG_57)和4个CpG位点(CpG_1、CpG_5.6和CpG_57)在胸肌生长发育过程中发生甲基化改变。结果表明,文昌鸡与北京油鸡HSP90AA1基因序列信息和启动子区CpG岛的甲基化水平不同,这可能导致两种鸡对于应激反应具有不同的耐受程度。以上试验结果将为文昌鸡和北京油鸡生长发育规律、系统选育等方面的研究提供表观遗传学依据。 展开更多
关键词 文昌鸡 北京油鸡 HSP90AA1基因 启动子 甲基化
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羊口疮病毒ORF059基因的真核表达研究 被引量：2
12
作者 朱姝 庞峰 +7 位作者 李国华 李亚颖 彭冬梅 杨小健 聂鑫 曹瑞勇 王凤阳 杜丽 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第9期2291-2295,共5页
试验旨在扩增羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)ORF059基因并进行真核表达。提取羊ORFV HCE弱毒株基因组为模板,参照GenBank上ORF059的基因序列,利用DNAMAN设计引物,应用PCR扩增ORF059目的片段,凝胶回收后将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pE... 试验旨在扩增羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)ORF059基因并进行真核表达。提取羊ORFV HCE弱毒株基因组为模板,参照GenBank上ORF059的基因序列,利用DNAMAN设计引物,应用PCR扩增ORF059目的片段,凝胶回收后将其连入pEGFP-N1质粒,构建重组质粒pEGFP-ORF059-N1,测序正确后瞬时转染NIH3T3细胞,应用荧光显微镜观察,Western blotting鉴定融合蛋白的表达。结果表明,ORF059基因片段大小为1 005bp;重组质粒pEGFP-ORF059-N1构建正确;转染pEGFP-ORF059-N1的NIH3T3细胞有明显的绿色荧光;表达的融合蛋白大小约为64ku。本试验结果为进一步研究ORF059的作用机理奠定了基础。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 ORF059基因 真核表达 NIH3T3细胞
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海南黄牛Cdc42 cDNA的克隆、表达及鉴定 被引量：2
13
作者 张冬琳 杜丽 +4 位作者 成鹰 刘涛 雷明 满初日嘎 王凤阳 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2011年第6期68-71,共4页
试验以构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出海南黄牛细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全长cDNA,构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行可溶性分析和蛋白纯化,并应用Western b... 试验以构建的海南黄牛外周血白细胞cDNA文库为材料,采用菌落PCR的方法筛选出海南黄牛细胞分裂周期蛋白42(cell division cycle 42,Cdc42)全长cDNA,构建pET28a-Cdc42重组质粒,经IPTG诱导表达后,进行可溶性分析和蛋白纯化,并应用Western blotting对其进行鉴定。结果显示,海南黄牛Cdc42 cDNA的编码框由576个碱基组成,编码191个氨基酸,融合蛋白分子质量约为30 ku,该蛋白主要以包涵体形式存在;纯化后的蛋白经Western blotting检测,发现对应大小的特异性条带,表明本试验成功克隆Cdc42并表达。 展开更多
关键词 海南黄牛 CDC42 原核表达 纯化
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低蛋白质饲粮添加支链氨基酸对生长前期海南猪体尺指标和抗氧化指标的影响 被引量：3
14
作者 魏立民 刘圈炜 +5 位作者 晁哲 黄丽丽 邢漫萍 王峰 郑心力 孙瑞萍 《养猪》 2022年第3期7-11,共5页
为研究低蛋白质饲粮添加支链氨基酸对生长前期海南猪生长性能和饲料养分表观消化率的影响,选健康、体重为(18.1±0.67)kg的阉割海南猪公猪144头,随机分为4个处理组,每组6个重复,每个重复6头猪,其中1个处理组为对照组,饲喂正常饲粮[2... 为研究低蛋白质饲粮添加支链氨基酸对生长前期海南猪生长性能和饲料养分表观消化率的影响,选健康、体重为(18.1±0.67)kg的阉割海南猪公猪144头,随机分为4个处理组,每组6个重复,每个重复6头猪,其中1个处理组为对照组,饲喂正常饲粮[21%CP(粗蛋白质)],其余3个处理组为试验组,其中试验Ⅰ组粗蛋白质水平为18%,试验Ⅱ组为18%CP+支链氨基酸,试验Ⅲ组为18%CP+2倍支链氨基酸。预试期为7 d,正式试验期40 d。结果表明:生长前期海南猪饲粮粗蛋白质水平降低3个百分点,不会影响海南猪的体尺指标;饲粮降低粗蛋白质水平至18%时,补充添加支链氨基酸后,试验猪的胴体重和眼肌面积可以恢复到正常饲粮(对照组)的水平;低蛋白质饲粮补充支链氨基酸可以显著提高试验猪血清中超氧化物歧化酶含量(P<0.05),低蛋白质饲粮有助于降低试验猪机体血清中丙二醛的含量(P<0.05)。 展开更多
关键词 低蛋白质饲粮 支链氨基酸 海南猪 体尺指标 抗氧化指标
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氟烷敏感基因在海南地方猪中的检测分析 被引量：3
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作者 晁哲 刘海隆 +3 位作者 孙瑞萍 魏立民 王峰 郑心力 《养猪》 2014年第2期51-52,共2页
猪氟烷基因（Halothane,HAL）又被称为氟烷敏感基因或兰尼定受体基因，是控制猪应激综合征（porcine stress syndrome, PSS）的一个主效基因[1]。PSS是一种遗传缺陷病，主要是由猪兰尼定受体基因突变造成的。该基因位于猪6号染色体上，... 猪氟烷基因（Halothane,HAL）又被称为氟烷敏感基因或兰尼定受体基因，是控制猪应激综合征（porcine stress syndrome, PSS）的一个主效基因[1]。PSS是一种遗传缺陷病，主要是由猪兰尼定受体基因突变造成的。该基因位于猪6号染色体上，当其cDNA中第1843个碱基由C突变为T时，会使受体蛋白第615位的精氨酸突变为半胱氨酸[2]。兰尼定受体是骨骼肌细胞内肌浆网上控制钙离子进出肌纤维的通道，应激敏感猪的基因突变改变了兰尼定受体结构，使该通道失常，表现出通道的关闭及泵的作用受到抑制。当受到某些环境因素刺激后，会造成大量钙离子析出，引起电解质代谢紊乱，析出的钙离子会激活过量的糖原酵解，引起肌肉pH的异常变化，从而产生劣质肉。 展开更多
关键词 猪应激综合征 氟烷敏感基因 检测分析 基因突变 海南 受体基因 钙离子 氟烷基因
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MC4R基因多态性在海南地方猪中的分布 被引量：3
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作者 晁哲 魏立民 +4 位作者 孙瑞萍 刘海隆 刘圈炜 王峰 郑心力 《养猪》 2014年第2期53-54,共2页
通过PCR-RFLP方法对90头海南五指山猪和36头临高猪进行了MC4R基因型检测。结果表明,MC4R基因中的TaqⅠ酶切位点在五指山猪中均为AA基因型,在临高猪中该位点A等位基因和G等位基因频率分别是0.92和0.08。该结果为海南地方猪的杂交选育提... 通过PCR-RFLP方法对90头海南五指山猪和36头临高猪进行了MC4R基因型检测。结果表明,MC4R基因中的TaqⅠ酶切位点在五指山猪中均为AA基因型,在临高猪中该位点A等位基因和G等位基因频率分别是0.92和0.08。该结果为海南地方猪的杂交选育提供理论依据。 展开更多
关键词 MC4R PCR—RFLP 五指山猪 临高猪
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FSHβ和FUT1基因多态性在海南临高猪中的分布 被引量：3
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作者 晁哲 孙瑞萍 +3 位作者 刘海隆 黄丽丽 郑心力 王峰 《养猪》 2015年第6期60-62,共3页
通过PCR、PCR-RFLP方法对70头海南临高猪进行了FSHβ和FUT1基因型检测。结果发现,FSHβ基因在临高猪中存在AA、AB和BB 3种基因型,其中A等位基因频率为0.81,B等位基因频率为0.19。在FUT1基因编码区的Hin6Ⅰ-RFLP位点上,临高猪以GG基因型... 通过PCR、PCR-RFLP方法对70头海南临高猪进行了FSHβ和FUT1基因型检测。结果发现,FSHβ基因在临高猪中存在AA、AB和BB 3种基因型,其中A等位基因频率为0.81,B等位基因频率为0.19。在FUT1基因编码区的Hin6Ⅰ-RFLP位点上,临高猪以GG基因型为主,该位点A等位基因和G等位基因频率分别是0.07和0.93。试验结果为海南临高猪的杂交选育提供理论依据。 展开更多
关键词 FSHΒ FUT1 PCR-RFLP 临高猪
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海南五指山猪VRTN基因的检测分析 被引量：1
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作者 晁哲 邢漫萍 +3 位作者 黄丽丽 孙瑞萍 刘海隆 王峰 《养猪》 2022年第3期61-63,共3页
为了研究五指山猪VRTN基因,获得基因序列并分析基因结构和相关遗传变异。试验利用PCR扩增猪VRTN基因序列,通过DNA测序寻找该基因中的碱基突变位点。结果显示,在五指山猪VRTN基因第2外显子中共发现10处碱基突变,其中3个错义突变、6个同... 为了研究五指山猪VRTN基因,获得基因序列并分析基因结构和相关遗传变异。试验利用PCR扩增猪VRTN基因序列,通过DNA测序寻找该基因中的碱基突变位点。结果显示,在五指山猪VRTN基因第2外显子中共发现10处碱基突变,其中3个错义突变、6个同义突变;在五指山猪VRTN基因内含子中检测到291 bp左右的插入突变,但该插入突变的频率极低。研究成功获得五指山猪VRTN基因序列信息,为下一步五指山猪VRTN基因的功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 五指山猪 VRTN基因 序列比对 碱基突变
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水牛四种主要细菌性传染病研究概况
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作者 杜丽 王凤阳 《动物医学进展》 北大核心 2016年第8期99-103,共5页
随着国内水牛养殖集约化程度的提高,对于水牛细菌性传染病研究水平提升的需求日益迫切。乳房炎、布鲁菌病、结核病和李氏杆菌病是水牛4种主要的细菌性传染病,国内相关研究报道较少。血清学调查可以为水牛细菌性传染病的流行提供基础数据... 随着国内水牛养殖集约化程度的提高,对于水牛细菌性传染病研究水平提升的需求日益迫切。乳房炎、布鲁菌病、结核病和李氏杆菌病是水牛4种主要的细菌性传染病,国内相关研究报道较少。血清学调查可以为水牛细菌性传染病的流行提供基础数据;病原分型可以为水牛细菌性传染病的诊断提供重要依据;诊断技术的准确性和特异性研究可以提高水牛细菌性传染病的诊断水平。基于此,对国外关于乳房炎、布鲁菌病、结核病和李氏杆菌病等水牛细菌病在血清学调查、病原分型、诊断技术等方面的研究进展进行了综述,旨在为提高我国水牛细菌性传染病的研究水平提供参考。 展开更多
关键词 水牛 细菌性传染病 诊断
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姜黄素对海南屯昌猪生长性能、饲料养分表观消化率和血清生化指标的影响 被引量：8
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作者 欧阳坤 魏立民 +7 位作者 孙瑞萍 解娅立 齐琪 李想 刘圈炜 晁哲 张永亮 陈婷 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1867-1875,共9页
【目的】研究饲粮中添加姜黄素对生长期海南屯昌猪生长性能、血清生化指标和饲料养分表观消化率的影响。【方法】选取健康、体重(35.88 kg±0.25 kg)接近的80头海南屯昌猪,随机分成5组,每组4个重复,每个重复4头猪,其中对照组饲喂基... 【目的】研究饲粮中添加姜黄素对生长期海南屯昌猪生长性能、血清生化指标和饲料养分表观消化率的影响。【方法】选取健康、体重(35.88 kg±0.25 kg)接近的80头海南屯昌猪,随机分成5组,每组4个重复,每个重复4头猪,其中对照组饲喂基础饲粮,抗生素组在基础饲粮中添加300 mg/kg硫酸黏膜杆菌素,3个试验组分别在基础饲粮中添加200(姜黄素1组)、400(姜黄素2组)和600 mg/kg(姜黄素3组)姜黄素。预饲期7 d,正试期50 d。试验第51天早上称重,计算生长性能;从每组随机选取6头猪静脉采血,检测血清生化指标;每个重复随机收集3头猪的新鲜粪便,测定饲料养分表观消化率。【结果】与对照组相比,姜黄素3组猪平均日增重(ADG)提高23.82%(P<0.05);料重比(F/G)降低20.06%(P<0.05);血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性和二氨氧化酶(DAO)含量分别降低22.23%和29.31%(P<0.05);血清IgA含量提高21.14%(P<0.05)。与抗生素组相比,姜黄素3组猪平均日增重(ADG)提高23.09%(P<0.05);粗纤维表观消化率提高42.14%(P<0.05);血清AST活性降低31.75%(P<0.05)。姜黄素2组猪平均日增重与对照组和抗生素组均无显著差异(P>0.05),粗纤维表观消化率极显著高于对照组和抗生素组(P<0.05);与对照组相比,姜黄素1、2组猪血清D-乳酸和DAO含量均显著降低(P<0.05)。【结论】饲粮中添加600 mg/kg姜黄素可以提高生长期海南屯昌猪的生长性能和粗纤维表观消化率,提升机体免疫状态,具有替代抗生素的潜力。 展开更多
关键词 姜黄素 海南屯昌猪 生长性能 表观消化率 血清生化指标
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