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甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响
被引量:
1
1
作者
李孟森
詹志农
+2 位作者
周升
刘新华
李刚
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期159-168,共10页
目的研究甲胎蛋白(AFP)对人肝癌Bel 7402细胞内caspase信息通路信号传递的影响,以及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞凋亡的对抗作用。方法激光共聚焦显微镜观察AFP与caspase-3、caspase-8在Bel 7402细胞内的共定位;...
目的研究甲胎蛋白(AFP)对人肝癌Bel 7402细胞内caspase信息通路信号传递的影响,以及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞凋亡的对抗作用。方法激光共聚焦显微镜观察AFP与caspase-3、caspase-8在Bel 7402细胞内的共定位;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与caspase-3、caspase-8的相互作用;RNA干扰(RNAi)技术封阻AFP表达,并用Western blotting检测RNAi干扰肝癌Bel 7402细胞内AFP表达的效果;用蛋白酶活性比色法检测AFP对肝癌细胞caspase-3、caspase-8活性的影响;MTT法分析干扰AFP表达30 h后再给予TRAIL(2 nmol/L)处理24 h,Bel 7402细胞的生长情况,并用荧光显微镜观察经TRAIL处理后肝癌细胞的凋亡状况。结果共聚焦显微镜观察发现AFP、caspase-3、caspase-8主要表达于Bel 7402细胞的细胞质,发现AFP能与caspase-3共定位于细胞质,但与caspase-8在细胞质的共定位可能性很小;Co-IP技术研究发现AFP能与caspase-3结合,但不能与caspase-8结合;2 nmol/L剂量的TRAIL单独处理Bel 7402细胞并不能显著改变caspase-3活性,但能提升caspase-8活性,而用全反式维甲酸(ATRA)40μmol/L加TRAIL(2 nmol/L)处理时,则能提高Bel 7402细胞caspase-3活性;干扰AFP表达后,单独用TRAIL(2 nmol/L)也能激活caspase-3,而干扰AFP表达前后对caspase-8活性没有显著性改变;MTT分析发现,2 nmol/L剂量的TRAIL对Bel 7402细胞的生长并没有显著性抑制作用,但是干扰AFP表达后TRAIL(2 nmol/L)能明显抑制Bel 7402细胞生长(抑制率为48.4%);荧光显微镜观察表明,干扰AFP表达后TRAIL(2 nmol/L)能诱导Bel 7402细胞凋亡。结论AFP选择性抑制caspase-3活性是阻断人肝癌Bel7402细胞内凋亡信息传递的重要机制,也是AFP抵抗TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的关键环节。
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关键词
甲胎蛋白
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
肿瘤耐药
肝癌细胞
caspase信息通路
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职称材料
乙肝病毒X基因对肝癌Bel7402细胞ras基因表达的影响
被引量:
1
2
作者
鲁琰
李伟
+4 位作者
朱明月
董栩
陈栘
张雪儿
李孟森
《中国医药导报》
CAS
2015年第32期9-12,共4页
目的探讨乙肝病毒X基因(HBx)对人肝癌细胞原癌基因ras表达水平的影响。方法将pcDNA3.1载体与HBx基因连接构建真核表达载体pcDNA3.1-HBx,采用脂质体介导转染人肝癌细胞Bel7402,以转染空载体pcDNA3.1的Bel7402细胞为对照,于转染后2、4、8...
目的探讨乙肝病毒X基因(HBx)对人肝癌细胞原癌基因ras表达水平的影响。方法将pcDNA3.1载体与HBx基因连接构建真核表达载体pcDNA3.1-HBx,采用脂质体介导转染人肝癌细胞Bel7402,以转染空载体pcDNA3.1的Bel7402细胞为对照,于转染后2、4、8、16 h收集细胞,提取细胞总蛋白并用Western blot技术检测肝癌细胞内n-Ras蛋白表达水平。结果与转染空载体pcDNA3.1的Bel7402对照组相比,转染重组表达载体pcDNA3.1-HBx的Bel7402细胞Ras蛋白表达水平在第2小时明显降低,第4小时Ras蛋白的表达水平仍有降低趋势,但比第2小时表达量有所增加;第8小时和第16小时,Ras蛋白的表达水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBx对人肝癌Bel7402细胞Ras蛋白表达有明显影响,HBx持续表达可能对Ras表达有促进作用。
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关键词
肝癌
乙肝病毒X基因
RAS
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职称材料
题名
甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响
被引量:
1
1
作者
李孟森
詹志农
周升
刘新华
李刚
机构
海南医学院分子生物学重点实验室
北京大学
医学
部
生物
化学与
分子生物学
系
海南医学院
检验
医学
系
出处
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第2期159-168,共10页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30660071
30760090
+2 种基金
30671856
30772536)
教育部博士点资金资助项目(No.20070001735)~~
文摘
目的研究甲胎蛋白(AFP)对人肝癌Bel 7402细胞内caspase信息通路信号传递的影响,以及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞凋亡的对抗作用。方法激光共聚焦显微镜观察AFP与caspase-3、caspase-8在Bel 7402细胞内的共定位;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与caspase-3、caspase-8的相互作用;RNA干扰(RNAi)技术封阻AFP表达,并用Western blotting检测RNAi干扰肝癌Bel 7402细胞内AFP表达的效果;用蛋白酶活性比色法检测AFP对肝癌细胞caspase-3、caspase-8活性的影响;MTT法分析干扰AFP表达30 h后再给予TRAIL(2 nmol/L)处理24 h,Bel 7402细胞的生长情况,并用荧光显微镜观察经TRAIL处理后肝癌细胞的凋亡状况。结果共聚焦显微镜观察发现AFP、caspase-3、caspase-8主要表达于Bel 7402细胞的细胞质,发现AFP能与caspase-3共定位于细胞质,但与caspase-8在细胞质的共定位可能性很小;Co-IP技术研究发现AFP能与caspase-3结合,但不能与caspase-8结合;2 nmol/L剂量的TRAIL单独处理Bel 7402细胞并不能显著改变caspase-3活性,但能提升caspase-8活性,而用全反式维甲酸(ATRA)40μmol/L加TRAIL(2 nmol/L)处理时,则能提高Bel 7402细胞caspase-3活性;干扰AFP表达后,单独用TRAIL(2 nmol/L)也能激活caspase-3,而干扰AFP表达前后对caspase-8活性没有显著性改变;MTT分析发现,2 nmol/L剂量的TRAIL对Bel 7402细胞的生长并没有显著性抑制作用,但是干扰AFP表达后TRAIL(2 nmol/L)能明显抑制Bel 7402细胞生长(抑制率为48.4%);荧光显微镜观察表明,干扰AFP表达后TRAIL(2 nmol/L)能诱导Bel 7402细胞凋亡。结论AFP选择性抑制caspase-3活性是阻断人肝癌Bel7402细胞内凋亡信息传递的重要机制,也是AFP抵抗TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的关键环节。
关键词
甲胎蛋白
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体
肿瘤耐药
肝癌细胞
caspase信息通路
Keywords
alpha-fetoprotein
tumor necrosis factor related apoptosis-inducing ligand (TRAIL)
drug resistance in cancer
hcpatocellular carcinoma cell
caspase signal transduction
分类号
R318 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
乙肝病毒X基因对肝癌Bel7402细胞ras基因表达的影响
被引量:
1
2
作者
鲁琰
李伟
朱明月
董栩
陈栘
张雪儿
李孟森
机构
海南医学院
海南
省肿瘤发生和干预
重点
实验室
海南医学院分子生物学重点实验室
海南医学院
海南医学院
肿瘤研究所
出处
《中国医药导报》
CAS
2015年第32期9-12,共4页
基金
国家自然科学基金(81360307
81260306
+4 种基金
81160261
31060164)
海南省社会发展科技专项(2015SF03)
海南医学院科研培育基金(HY2013-19)
海南医学院大学生创新创业训练计划项目(HYCX2014031)
文摘
目的探讨乙肝病毒X基因(HBx)对人肝癌细胞原癌基因ras表达水平的影响。方法将pcDNA3.1载体与HBx基因连接构建真核表达载体pcDNA3.1-HBx,采用脂质体介导转染人肝癌细胞Bel7402,以转染空载体pcDNA3.1的Bel7402细胞为对照,于转染后2、4、8、16 h收集细胞,提取细胞总蛋白并用Western blot技术检测肝癌细胞内n-Ras蛋白表达水平。结果与转染空载体pcDNA3.1的Bel7402对照组相比,转染重组表达载体pcDNA3.1-HBx的Bel7402细胞Ras蛋白表达水平在第2小时明显降低,第4小时Ras蛋白的表达水平仍有降低趋势,但比第2小时表达量有所增加;第8小时和第16小时,Ras蛋白的表达水平与对照组相比明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HBx对人肝癌Bel7402细胞Ras蛋白表达有明显影响,HBx持续表达可能对Ras表达有促进作用。
关键词
肝癌
乙肝病毒X基因
RAS
Keywords
Hepatocellular carcinoma
HBx
Ras
分类号
R734 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响
李孟森
詹志农
周升
刘新华
李刚
《西安交通大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2009
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
乙肝病毒X基因对肝癌Bel7402细胞ras基因表达的影响
鲁琰
李伟
朱明月
董栩
陈栘
张雪儿
李孟森
《中国医药导报》
CAS
2015
1
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职称材料
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