“双一流”背景下研究生国际学术交流能力的培养:浙江大学UPP课程的设计与启示 被引量：6

1

作者 梁君英 张明方 +6 位作者 欧阳宏伟 邢华斌 朱永群 高超 余倩 胡海岚 严建华 《学位与研究生教育》 CSSCI 北大核心 2021年第5期34-41,共8页

在推动“双一流”建设和高等教育内涵式发展的背景下,研究生亟须具备更高水平的科研创新和学术交流能力。浙江大学于2018年冬季学期开设了“英文期刊论文写作与学术报告:Understanding Publication&Presentation”跨学科课程,作为... 在推动“双一流”建设和高等教育内涵式发展的背景下,研究生亟须具备更高水平的科研创新和学术交流能力。浙江大学于2018年冬季学期开设了“英文期刊论文写作与学术报告:Understanding Publication&Presentation”跨学科课程,作为对传统学术英语课程的全方位改革尝试。课程由多个学科的资深专家学者合作讲授,面向全校研究生开放,以学术研究创新、论文写作与学术报告、学术论文发表、科学研究的可持续发展为主线,为研究生的学术研究生涯提供全过程指导。该课程针对性地解决了学术英语课程普遍存在的形式化严重,互动性、融合性和学生学习主体性不足等问题,取得了良好的实践成效,为推动科教融合、师生协同以及“金课”建设提供了可借鉴的经验。 展开更多

关键词 “双一流”建设 科教融合 学术研究 论文写作 学术报告

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线粒体调控肿瘤免疫的研究进展 被引量：2

2

作者 李静 徐平龙 陈莎莎 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期1-14,共14页

肿瘤细胞通过改变自身代谢以适应能量和生物合成的需求。线粒体作为肿瘤细胞代谢重编程的关键细胞器,其功能异常是癌症发生和进展的主要驱动因素。线粒体动力学和能量代谢途径的改变对免疫细胞活化、增殖和分化至关重要,肿瘤微环境通过... 肿瘤细胞通过改变自身代谢以适应能量和生物合成的需求。线粒体作为肿瘤细胞代谢重编程的关键细胞器,其功能异常是癌症发生和进展的主要驱动因素。线粒体动力学和能量代谢途径的改变对免疫细胞活化、增殖和分化至关重要,肿瘤微环境通过诱导免疫细胞线粒体代谢重编程和线粒体动力学变化,影响肿瘤浸润免疫细胞的活化和功能,进而促进肿瘤免疫抑制微环境形成;线粒体应激介导的线粒体DNA泄露可通过激活多条天然免疫信号通路,如cGAS-STING、TLR9和NLRP3,在宿主抗肿瘤免疫响应和肿瘤免疫抑制微环境的塑造中扮演复杂的调控角色,线粒体DNA介导的免疫原性细胞死亡是目前极具潜力的抗肿瘤免疫治疗手段;线粒体活性氧作为肿瘤发生的重要媒介,通过改变肿瘤微环境中免疫细胞组成,推动肿瘤免疫抑制微环境形成。本文围绕线粒体生物学与抗肿瘤免疫应答之间的关系,从多个角度探讨线粒体在肿瘤-宿主互作中的核心作用,以期为开发靶向线粒体的抗肿瘤免疫治疗策略提供参考。 展开更多

关键词 肿瘤免疫 肿瘤微环境 线粒体 线粒体动力学 线粒体能量代谢 线粒体DNA 线粒体活性氧 综述

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靶向肿瘤驱动基因的胃癌治疗研究进展 被引量：1

3

作者 吴世英 徐平龙 张飞 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期73-83,共11页

随着胃癌致病机制深入解析及胃癌驱动基因的鉴定,靶向胃癌驱动基因的药物逐渐应用临床。其中,曲妥珠单抗作为首个胃癌靶向药物,通过靶向过表达的人表皮生长因子受体2(HER2)抑制肿瘤细胞的增殖、生存和转移等过程,已成为HER2阳性胃癌患... 随着胃癌致病机制深入解析及胃癌驱动基因的鉴定,靶向胃癌驱动基因的药物逐渐应用临床。其中,曲妥珠单抗作为首个胃癌靶向药物,通过靶向过表达的人表皮生长因子受体2(HER2)抑制肿瘤细胞的增殖、生存和转移等过程,已成为HER2阳性胃癌患者的一线治疗药物。雷莫芦单抗则通过靶向血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)抑制肿瘤血管生成,用于晚期胃癌患者的二线治疗。此外,贝马利珠单抗和佐妥昔单抗分别靶向过度表达的成纤维细胞生长因子受体2(FGFR2)和紧密连接蛋白18.2(CLDN18.2),在临床试验中显著延长胃癌患者的无进展生存期和总生存期。本文回顾了靶向HER2、VEGF、FGFR2、CLDN18.2和MET等肿瘤驱动基因的胃癌治疗策略,介绍了肿瘤驱动基因在胃癌进程中的作用及其靶向药物的应用,以期为胃癌靶向治疗药物的研发和临床应用提供参考。 展开更多

关键词 胃癌 驱动基因 靶向治疗 临床试验 综述

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肝炎病毒感染导致肝细胞癌发生的免疫机制研究进展 被引量：6

4

作者 徐令东 徐逸帆 +2 位作者 张飞 徐平龙 汪洌 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期64-72,共9页

肝炎病毒感染是肝细胞癌的主要致病因素之一。甲型肝炎病毒(HAV)通常引起急性感染,临床病理长期追踪结果显示HAV感染与肝细胞癌发生有一定联系。乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)的慢性感染可导致长期肝脏炎症和肝硬化,影响多条细... 肝炎病毒感染是肝细胞癌的主要致病因素之一。甲型肝炎病毒(HAV)通常引起急性感染,临床病理长期追踪结果显示HAV感染与肝细胞癌发生有一定联系。乙型肝炎病毒(HBV)或丙型肝炎病毒(HCV)的慢性感染可导致长期肝脏炎症和肝硬化,影响多条细胞凋亡和增殖相关信号通路,是病毒感染导致肝细胞癌的最常见诱因。HBV X蛋白(HBx)基因突变与肝细胞癌发病率密切相关,HCV核心蛋白的表达可导致肝细胞脂质积累,促进肿瘤发生。临床丁型肝炎病毒(HDV)感染常伴随HBV的共感染,从而增加慢性肝炎风险。戊型肝炎病毒(HEV)感染通常呈急性,近年HEV在器官移植和免疫缺陷患者中慢性感染增多。HEV慢性感染易导致肝硬化而增加肝细胞癌风险。本文概述了近年来肝炎病毒感染导致肝脏免疫应答异常和肝细胞癌发生的研究进展,以期有助于寻找病毒感染的早期检测、有效干预和疫苗接种的措施。 展开更多

关键词 肝细胞癌 肝炎病毒 病毒性肝炎 肝硬化 慢性感染 综述

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裂殖酵母中不稳定遗传耐药菌株的筛选及其运用

5

作者 但露凤 褚以文 +1 位作者 王欣荣 何向伟 《遗传》 北大核心 2025年第5期589-599,共11页

发生在DNA序列水平或表观遗传水平的可逆遗传突变可以调控不稳定遗传的表型,其可逆性使得生物体能更好更快地适应外界多变的环境,但也正是因为其遗传的不稳定性,在传统研究(尤其是针对耐药性调控的研究)中往往被忽略。本研究利用雷帕霉... 发生在DNA序列水平或表观遗传水平的可逆遗传突变可以调控不稳定遗传的表型,其可逆性使得生物体能更好更快地适应外界多变的环境,但也正是因为其遗传的不稳定性,在传统研究(尤其是针对耐药性调控的研究)中往往被忽略。本研究利用雷帕霉素(+咖啡因)对野生型裂殖酵母菌株进行了耐药突变株的分离,共得到173株耐药突变株,经传代培养和子代耐药性试验,发现14株耐药株存在遗传不稳定现象。进一步研究表明,其中部分菌株的不稳定遗传耐药性受到ssp1位点可逆的DNA序列改变调控。本研究对雷帕霉素作为临床抗肿瘤药物治疗过程中易产生不稳定耐药性的分子机制提供了新的思路和相关的科学依据,并为解决其耐药性问题提供了可能的新作用靶点。 展开更多

关键词 耐药性 不稳定遗传 可逆突变 雷帕霉素

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胭脂红对雄性小鼠生殖健康的安全性评估

6

作者 王春智 张东杰 +1 位作者 唐琦 潘传英 《畜牧兽医杂志》 2025年第4期77-82,共6页

合成色素特别是偶氮类色素已在日常生活中被广泛应用,但其安全性仍存争议。部分偶氮色素已被证实具有致癌、致畸及生殖毒性。胭脂红作为一种偶氮合成色素,广泛用于饲料、食品、饮料、药品、化妆品及烟草等行业。目前,胭脂红在胚胎毒性... 合成色素特别是偶氮类色素已在日常生活中被广泛应用,但其安全性仍存争议。部分偶氮色素已被证实具有致癌、致畸及生殖毒性。胭脂红作为一种偶氮合成色素,广泛用于饲料、食品、饮料、药品、化妆品及烟草等行业。目前,胭脂红在胚胎毒性和神经毒性方面的安全性已有相关研究评估,但其在雄性生殖方面的安全性还有待评估。因此,本研究拟通过将4种不同浓度的胭脂红添加到雄性C57BL/6小鼠日常饮用水中处理72 d后,检测小鼠精子活率、活力和畸形率,利用H&E染色观察小鼠睾丸和附睾组织学形态,随后使用胭脂红处理GC-1_(spg)细胞,探究胭脂红对小鼠雄性生殖的影响。结果表明,与对照组相比胭脂红处理组小鼠的睾丸和附睾无形态异常,附睾尾精子活率和精子密度无显著差异(P>0.05),但低浓度胭脂红可引起精子活力的降低(P<0.05)。胭脂红对GC-1_(spg)细胞密度和形态无显著影响(P>0.05)。在本研究中,处理组的摄入胭脂红量高于中国各类食品中胭脂红的最大使用限量和胭脂红ADI(acceptable daily intake,每日允许摄入量)。因此,在规定添加剂量内,胭脂红对雄性生殖健康不会造成显著影响。 展开更多

关键词 胭脂红 偶氮色素 雄性生殖 安全性评估

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脊椎动物染色体在序列和空间构象的演化

7

作者 刘靖 周琦 《遗传》 北大核心 2025年第2期183-199,共17页

染色体作为位于细胞核中的基本遗传物质单位,在真核生物的演化历史中经历了广泛和复杂变化,很多变化的模式和机制在各种包括癌症在内的疾病中拥有共性。但很长时间内生物学家只能局限于基于荧光原位杂交技术等分辨率比较低的研究手段。... 染色体作为位于细胞核中的基本遗传物质单位,在真核生物的演化历史中经历了广泛和复杂变化,很多变化的模式和机制在各种包括癌症在内的疾病中拥有共性。但很长时间内生物学家只能局限于基于荧光原位杂交技术等分辨率比较低的研究手段。当前日新月异的高通量测序技术正在快速革新人们对不同物种、同一物种不同个体甚至是单个个体不同细胞水平染色体变化的认识。本文聚焦于脊椎动物的染色体演化,概述了染色体重排在物种形成中的作用,驱动染色体重排的分子机制,祖先染色体到现今染色体的演变模式,以及性染色体作为研究染色体演化的一般范式意义,最后讨论了合成生物学为染色体演化研究领域带来的新机遇和挑战,以期为理解和研究脊椎动物的染色体演化提供新的见解和参考。 展开更多

关键词 染色体 脊椎动物 染色体重排 性染色体

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病原菌调节宿主细胞泛素化途径的研究进展 被引量：2

8

作者 谭加兴 罗书慧 +1 位作者 周艳 朱永群 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2020年第2期131-138,共8页

泛素化是真核生物特有的蛋白质翻译后修饰,广泛地参与宿主细胞各种信号通路和生理过程.病原菌常通过分泌毒性效应蛋白,对泛素和泛素结合酶进行独特的共价修饰,或者利用泛素连接酶和去泛素化酶的酶学活性,调节宿主泛素化过程,从而干扰宿... 泛素化是真核生物特有的蛋白质翻译后修饰,广泛地参与宿主细胞各种信号通路和生理过程.病原菌常通过分泌毒性效应蛋白,对泛素和泛素结合酶进行独特的共价修饰,或者利用泛素连接酶和去泛素化酶的酶学活性,调节宿主泛素化过程,从而干扰宿主细胞的信号转导,促进细菌的感染和生存.本文概述了病原菌效应蛋白调节宿主泛素化途径的主要研究进展和最新发现. 展开更多

关键词 病原菌 效应蛋白 泛素化 蛋白质翻译后修饰 宿主细胞

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微核激活cGAS-STING信号通路的机制及其肿瘤免疫功能 被引量：3

9

作者 沈琴 徐平龙 梅陈 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期25-34,共10页

环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路可监测微生物入侵和组织损伤等生理病理异常状态,是天然免疫系统的重要组成之一。作为DNA感受器,cGAS主要识别异常定位于细胞质的双链DNA(dsDNA),通过催化合成二级信使... 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路可监测微生物入侵和组织损伤等生理病理异常状态,是天然免疫系统的重要组成之一。作为DNA感受器,cGAS主要识别异常定位于细胞质的双链DNA(dsDNA),通过催化合成二级信使环鸟苷酸-腺苷酸启动由STING介导的Ⅰ型干扰素和炎症信号通路。微核是有丝分裂后期染色体错误分离的产物,也是细胞质dsDNA的重要来源之一。作为一类不稳定的亚细胞器结构,微核核膜倾向于不可逆的破裂,导致微核基因组DNA暴露在细胞质中。暴露的微核基因组DNA招募并激活cGAS-STING信号通路,诱导STING下游信号通路活化,包括Ⅰ型干扰素信号通路和经典核因子κB(NF-κB)信号通路,导致细胞衰老、细胞凋亡和细胞自噬的发生,从而介导免疫系统的活化以清除肿瘤细胞,或者直接诱导肿瘤细胞死亡。另外,STING持续激活诱导的内质网应激,以及慢性Ⅰ型干扰素信号通路和非经典NF-κB信号通路的活化,营造了免疫抑制的肿瘤微环境,导致肿瘤细胞免疫逃逸,促进肿瘤转移和肿瘤细胞存活。因此,在肿瘤的发生发展和治疗过程中,活化的cGAS-STING免疫通路扮演着抑制或促进肿瘤的双重作用。本文阐述了肿瘤微环境中微核诱导cGAS-STING免疫通路活化的机制研究进展,探讨了其在肿瘤发生发展和治疗中的潜在重要作用。 展开更多

关键词 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子信号通路 染色体不稳定 微核 肿瘤免疫 综述

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肿瘤免疫微环境中cGAS-STING信号通路的细胞间信号传递 被引量：1

10

作者 王梦秋 徐平龙 吴芑柔 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期15-24,共10页

环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路是肿瘤免疫治疗中备受关注的靶点。模式识别受体cGAS识别胞质双链DNA(dsDNA),生成第二信使2´3´-环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP),活化接头蛋白STING,介导干扰素和促炎... 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)-干扰素基因刺激因子(STING)信号通路是肿瘤免疫治疗中备受关注的靶点。模式识别受体cGAS识别胞质双链DNA(dsDNA),生成第二信使2´3´-环鸟苷酸-腺苷酸(cGAMP),活化接头蛋白STING,介导干扰素和促炎性细胞因子的产生,从而促进肿瘤免疫。肿瘤免疫微环境中cGAS-STING通路的细胞间信号传递维持并增强天然免疫应答,推动适应性免疫的发展。基于膜系统的细胞外囊泡运输、吞噬作用和细胞膜融合传递dsDNA、cGAMP以及活化的STING蛋白,加强免疫监视和炎症应答。基于膜蛋白的缝隙连接、膜转运蛋白传递cGAMP和dsDNA对免疫调节至关重要。此外,配体-受体反应传递干扰素进一步放大抗肿瘤免疫反应。本文描述了肿瘤免疫微环境中cGAS-STING通路的细胞间信号传递及其调控,讨论这些机制如何影响和调节肿瘤免疫过程,以及针对这些信号传递机制的潜在干预和免疫治疗策略。 展开更多

关键词 肿瘤微环境 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子 细胞间信号传递 双链DNA 肿瘤免疫 免疫应答 综述

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核酸免疫识别的机制和功能及酪氨酸磷酸化修饰调控

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作者 刘盛铎 徐平龙 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期35-46,共12页

核酸天然免疫识别是一种普遍存在且高度保守的免疫应答机制,负责监测和响应病原体入侵或组织损伤,进而在宿主防御、自身免疫反应、细胞命运决定以及肿瘤发生发展中发挥关键作用。酪氨酸磷酸化作为一类主要的蛋白质翻译后修饰机制,在核... 核酸天然免疫识别是一种普遍存在且高度保守的免疫应答机制,负责监测和响应病原体入侵或组织损伤,进而在宿主防御、自身免疫反应、细胞命运决定以及肿瘤发生发展中发挥关键作用。酪氨酸磷酸化作为一类主要的蛋白质翻译后修饰机制,在核酸识别通路中发挥重要调控功能。其中,介导核酸免疫识别通路的核心成员环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)、干扰素基因刺激因子(STING)以及TANK结合激酶1(TBK1)等蛋白均受到酪氨酸磷酸化修饰引发的活性调控,进而影响生理或病理条件下宿主的抗病毒防御和抗肿瘤免疫能力。本文综述了酪氨酸激酶和酪氨酸磷酸化修饰在核酸免疫识别中的调控作用及研究现状,讨论了靶向酪氨酸磷酸化在抗肿瘤免疫中的功能和潜在应用,以期为理解并拓展全新的抗肿瘤手段提供思路。 展开更多

关键词 天然免疫 肿瘤免疫 酪氨酸磷酸化 酪氨酸激酶 信号转导 蛋白质修饰 环鸟苷酸-腺苷酸合成酶-干扰素基因刺激因子 综述

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自身炎症性疾病的致病基因概述

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作者 韩旭 周青 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期811-821,共11页

自身炎症性疾病(autoinflammatory disease,AIDs)是一类因先天性免疫系统过度激活而引发的疾病,主要表现为全身的炎症反应和多系统多器官的受累。在AIDs中,遗传因素发挥着重要作用。自首个单基因AIDs被发现以来,目前系统性自身炎症性疾... 自身炎症性疾病(autoinflammatory disease,AIDs)是一类因先天性免疫系统过度激活而引发的疾病,主要表现为全身的炎症反应和多系统多器官的受累。在AIDs中,遗传因素发挥着重要作用。自首个单基因AIDs被发现以来,目前系统性自身炎症性疾病的致病基因已超过50个。随着免疫学和基因组学研究的进展,AIDs的致病基因谱被不断拓展,对AIDs的认识也逐渐加深。从AIDs的致病基因和临床表型出发,总结了AIDs的致病机制,有助于以更全面的视角了解这一类疾病。 展开更多

关键词 自身炎症性疾病 生殖系突变 体细胞突变 单基因疾病

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感染番茄斑萎病毒和番茄环纹斑点病毒的植物叶片细胞病理变化观察 被引量：5

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作者 尚卫娜 郑宽瑜 +3 位作者 董家红 张仲凯 洪健 周雪平 《电子显微学报》 CAS CSCD 2016年第3期269-274,共6页

应用透射电子显微镜观察比较了番茄斑萎病毒(TSWV)和番茄环纹斑点病毒(TZSV)感病植物叶片的细胞超微结构,发现两种病毒在病变细胞内的形态及细胞病理变化特征相似,但病毒含量及细胞受损程度存在明显差异。与TSWV相比,TZSV侵染细胞的病... 应用透射电子显微镜观察比较了番茄斑萎病毒(TSWV)和番茄环纹斑点病毒(TZSV)感病植物叶片的细胞超微结构,发现两种病毒在病变细胞内的形态及细胞病理变化特征相似,但病毒含量及细胞受损程度存在明显差异。与TSWV相比,TZSV侵染细胞的病变程度更为严重,叶绿体产生大的囊泡,片层结构被破坏,线粒体也发生囊泡化,而TSWV侵染的细胞内线粒体保存相对完好。高压冷冻-冷冻置换制备的样品细胞病理结构与常规化学固定的相似,但对膜结构的保存更加良好。该结果从细胞病理学上证明了TZSV在田间对农作物造成的危害更加严重。 展开更多

关键词 番茄斑萎病毒 番茄环纹斑点病毒 细胞病理学 高压冷冻 透射电子显微镜

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电镜超薄切片批量染色的新方法 被引量：6

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作者 王贝贝 尹伟 +6 位作者 刘双双 尚卫娜 谢礼 杨平 郭建胜 王丽 洪健 《电子显微学报》 CAS CSCD 2016年第5期462-465,共4页

超薄切片染色是透射电镜生物样本制备中的关键环节。本文介绍了一种透射电镜超薄切片染色的新方法,利用简单自制的染色液防污存储与批量染色装置,可对超薄切片载网进行批量化染色,不但极大提高染色效率,而且减少了染色过程中染色液、样... 超薄切片染色是透射电镜生物样本制备中的关键环节。本文介绍了一种透射电镜超薄切片染色的新方法,利用简单自制的染色液防污存储与批量染色装置,可对超薄切片载网进行批量化染色,不但极大提高染色效率,而且减少了染色过程中染色液、样品的污染,达到染色液的重复利用,同时减少重金属对操作者的伤害和对环境的污染。 展开更多

关键词 超薄切片 批量染色

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Hippo信号通路:器官大小与组织稳态调控器 被引量：2

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作者 张雷 袁增强 +1 位作者 周大旺 赵斌 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期535-536,共2页

复杂机体如何控制器官大小是发育生物学最基本问题之一,其调控机制的解析也是生命科学领域长期存在的一大难题。Hippo信号通路是21世纪初利用果蝇遗传学研究发现并命名的,它可以通过调控细胞增殖、凋亡和干细胞的自我更新与分化,在器官... 复杂机体如何控制器官大小是发育生物学最基本问题之一,其调控机制的解析也是生命科学领域长期存在的一大难题。Hippo信号通路是21世纪初利用果蝇遗传学研究发现并命名的,它可以通过调控细胞增殖、凋亡和干细胞的自我更新与分化,在器官大小决定、组织稳态维持与重塑等生命活动过程中发挥关键作用。由于Hippo信号通路在物种间高度保守,它的发现为人们研究生物个体器官发育大小及再生的调控机制提供了可能。 展开更多

关键词 HIPPO 信号通路 果蝇遗传学 自我更新 细胞增殖 生物个体 生命科学 发育生物学 神经系 胶质细胞分化

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番茄环纹斑点病毒Gn蛋白的原核表达及多抗血清制备 被引量：2

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作者 郑宽瑜 尚卫娜 +2 位作者 张洁 郑雪 董家红 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期179-183,共5页

通过生物信息学预测,番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)Gn蛋白为跨膜蛋白,有3个跨膜结构域,抗原表位预测发现非跨膜区包含有较高的抗原指数区域,因此选择Gn蛋白的非跨膜区进行原核表达及多抗血清制备。用特异性引物,通过... 通过生物信息学预测,番茄环纹斑点病毒(Tomato zonate spot virus,TZSV)Gn蛋白为跨膜蛋白,有3个跨膜结构域,抗原表位预测发现非跨膜区包含有较高的抗原指数区域,因此选择Gn蛋白的非跨膜区进行原核表达及多抗血清制备。用特异性引物,通过RT-PCR从感染TZSV的番茄中扩增出部分Gn基因片段,将获得的片段构建到原核表达载体pET-30a中,获得原核表达载体pET-30a-Gn,转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳分析显示,高效诱导表达了40 kD融合蛋白。用回收纯化的融合蛋白免疫家兔,获得多抗血清。间接ELISA测定多抗血清的效价为1/16 384。利用制备好的抗血清对感染TZSV的病样进行Western blotting检测,能检测到特异性条带。结果表明该抗血清特异性良好,可用于TZSV Gn相关的免疫反应实验。 展开更多

关键词 番茄环纹斑点病毒 Gn蛋白 原核表达 抗血清

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TSWV病毒粒子在系统寄主烟草K326维管组织中的分布特征 被引量：4

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作者 温志多 丁勇 +6 位作者 尚卫娜 王田田 吴少政 苏晓霞 张洁 张仲凯 郑宽瑜 《西南林业大学学报（自然科学）》 CAS 北大核心 2020年第6期124-131,共8页

为解析番茄斑萎病毒(TSWV)长距离运动机制,利用透射电子显微镜观察TSWV在系统寄主普通烟草K326维管组织各类细胞中的分布特征。结果表明:导管内有囊泡包裹的病毒粒体及病毒核壳体聚集体(NCA)类似物;维管薄壁细胞内发现病毒粒体分布于细... 为解析番茄斑萎病毒(TSWV)长距离运动机制,利用透射电子显微镜观察TSWV在系统寄主普通烟草K326维管组织各类细胞中的分布特征。结果表明:导管内有囊泡包裹的病毒粒体及病毒核壳体聚集体(NCA)类似物;维管薄壁细胞内发现病毒粒体分布于细胞质的内质网池中,细胞质中有囊泡增多现象;伴细胞中发现有成熟的病毒粒体,并发现大量直径120 nm左右的囊泡小体,伴随有线粒体的基质膨大,线粒体崩解等现象;筛管中未发现有病毒粒体,但筛管中发现有较多直径80~200 nm的囊泡小体。提示TSWV病毒粒体有可能通过导管进行长距离运动,TSWV囊泡相关复合体(VRC)有可能通过筛管进行长距离运动。 展开更多

关键词 番茄斑萎病毒 长距离运动 维管组织 透射电子显微镜 组织分布

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电子显微镜的生物样品包埋前块染色技术探究 被引量：5

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作者 尚卫娜 谢礼 +4 位作者 王贝贝 徐德月 马杰 李倩倩 洪健 《实验技术与管理》 CAS 北大核心 2022年第4期14-18,共5页

该研究在经典OTO技术基础上,探索比较5种可直接用于透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)观察的包埋前块染色生物样品制备方法。通过优化试剂和实验条件,结果显示:四氧化锇、亚铁氰化物和硫代甲酰二肼等试剂的添加顺序及浓度对样品亚细胞结构... 该研究在经典OTO技术基础上,探索比较5种可直接用于透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)观察的包埋前块染色生物样品制备方法。通过优化试剂和实验条件,结果显示:四氧化锇、亚铁氰化物和硫代甲酰二肼等试剂的添加顺序及浓度对样品亚细胞结构有影响;OTO法虽有很强的图像对比度,但是不适用于果蝇眼睛这类较难固定渗透的组织;OFTO法(改自HUA的方法)在多种制样方法中成像效果最佳,可满足TEM及SEM双重成像要求;ROPA法制样过程中添加甲酰胺、连苯三酚可在无铅、铀等重金属染色情况下,得到较理想的对比度。 展开更多

关键词 生物样品 块染色 透射电镜 扫描电镜

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泛素蛋白磷酸化修饰的功能与解析 被引量：2

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作者 季然 陈祎霖 +1 位作者 钱程民 金建平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第4期740-748,共9页

泛素化是存在于真核生物中一种重要的翻译后修饰过程,参与调控包括蛋白质降解在内的多种生命活动。实现这一调控过程需要将一个由76个氨基酸组成的泛素蛋白共价连接到底物蛋白上。同时,泛素本身也存在多种翻译后修饰,包括泛素化、磷酸... 泛素化是存在于真核生物中一种重要的翻译后修饰过程,参与调控包括蛋白质降解在内的多种生命活动。实现这一调控过程需要将一个由76个氨基酸组成的泛素蛋白共价连接到底物蛋白上。同时,泛素本身也存在多种翻译后修饰,包括泛素化、磷酸化、乙酰化等,进一步丰富了泛素的修饰类型,决定了底物蛋白不同的命运。近年来,伴随着第65位丝氨酸磷酸化泛素蛋白参与调控线粒体自噬这一突破性进展,泛素蛋白其余磷酸化位点的功能研究也获得越来越多的关注。本文根据目前已有的国内外研究和报道,总结了泛素蛋白已知的磷酸化修饰位点,梳理了泛素蛋白第12位和66位苏氨酸、第57位和65位丝氨酸等位点的磷酸化修饰对其生物物理特性带来的改变,并对相应修饰位点所涉及的生物学功能调控进行了综述。 展开更多

关键词 泛素 泛素化 泛素密码 磷酸化 线粒体自噬 DNA损伤修复

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R-loop的调控及其生理功能

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作者 张译匀 叶素敏 金建平 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2023年第5期1099-1109,共11页

R环(R-loop)是一种DNA∶RNA杂合链(DNA∶RNA hybrids),由一条RNA单链侵入双链DNA,与其中一条DNA模板链结合,从而释放出一条DNA单链而产生。R-loop在细胞生命活动中扮演着重要角色,与基因组稳定性、转录调控,以及表观修饰等重要生物学过... R环(R-loop)是一种DNA∶RNA杂合链(DNA∶RNA hybrids),由一条RNA单链侵入双链DNA,与其中一条DNA模板链结合,从而释放出一条DNA单链而产生。R-loop在细胞生命活动中扮演着重要角色,与基因组稳定性、转录调控,以及表观修饰等重要生物学过程有着密不可分的关系。很多因素参与对R-loop的调控,例如RNA转录和加工、染色体的修饰、DNA损伤反应等;同时,许多酶蛋白,如核糖核酸酶、解旋酶和拓扑异构酶等也参与调节细胞内的R-loop水平。了解R-loop的调控机制及其生物学功能有助于更好地理解基因组稳定性的维持机制,为治疗骨髓增生异常综合征、白血病、乳腺癌、前列腺癌等疾病开拓新思路。 展开更多

关键词 R环 DNA∶RNA杂合链 基因组稳定性 转录 DNA损伤反应

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