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利用家蚕生物反应器生产有用蛋白的研究 被引量:7
1
作者 杨瑞丽 金勇丰 +2 位作者 吴玉澄 张耀洲 吴祥甫 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期173-178,共6页
就家蚕 / Bm NPV表达系统的原理及生产流程、外源基因在该系统中的表达及表达产物的药物开发作了较为详细的阐述 ,介绍了利用家蚕大量生产有用蛋白的技术开发状况 。
关键词 家蚕 BmNPV表达系统 生物反应器 蛋白质 技术开发
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家蚕生物反应器表达hGM-CSF产业化若干问题的研究 被引量:2
2
作者 贡成良 金勇丰 +3 位作者 吴卫东 徐承智 杨昆 陈国刚 《蚕业科学》 CAS CSCD 2002年第3期207-210,共4页
报道了家蚕杆状病毒表达hGM CSF产业化过程中几个问题的研究结果。鲜茧在 4~ 7℃保存可显著抑制蚕蛹的发育 ,但随冷藏时间的延长 ,死笼率明显上升 ,接种成功率显著下降 ;接种蚕蛹血淋巴中hGM CSF的活性与鲜茧保存时间有明显的负相关关... 报道了家蚕杆状病毒表达hGM CSF产业化过程中几个问题的研究结果。鲜茧在 4~ 7℃保存可显著抑制蚕蛹的发育 ,但随冷藏时间的延长 ,死笼率明显上升 ,接种成功率显著下降 ;接种蚕蛹血淋巴中hGM CSF的活性与鲜茧保存时间有明显的负相关关系 ;生产工艺不同 ,蚕蛹冻干粉中hGM CSF的活性有明显差异 ;60 Co辐照可使冻干蚕蛹粉中微生物的数量减少 ,但同时蚕蛹中hGM CSF的活性也随辐照剂量的增加而有所降低 ,hGM CSF蚕蛹粉经 30 0 0Gyγ射线辐照后 ,口服仍使小鼠白细胞明显上升。 展开更多
关键词 杆状病毒表达系统 家蚕 生物反应器 HGM-CSF 产业化 问题
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子宫平滑肌肉瘤的分子遗传学特征与研究进展 被引量:1
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作者 王陈颖 肖荟尹 +3 位作者 诸志鹏 郑素雅 徐良 陈烨 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期603-626,共24页
子宫平滑肌肉瘤(uterine leiomyosarcoma,uLMS)是一种发生在女性生殖系统子宫肌层的恶性软组织肿瘤,漏诊误诊率高、侵袭性强、预后差。uLMS的发生机制尚未明确,疾病生物学研究相对滞后,实验模型和治疗手段也较为有限。本文重点关注了uLM... 子宫平滑肌肉瘤(uterine leiomyosarcoma,uLMS)是一种发生在女性生殖系统子宫肌层的恶性软组织肿瘤,漏诊误诊率高、侵袭性强、预后差。uLMS的发生机制尚未明确,疾病生物学研究相对滞后,实验模型和治疗手段也较为有限。本文重点关注了uLMS的病理分子生物学,系统梳理了uLMS的分子遗传学特征、表观遗传学变异、实验模型以及临床研究进展,同时还探讨了uLMS在肿瘤演进、肿瘤微环境、肿瘤治疗等生物学研究领域的发展方向和潜在需求,以期更好地理解uLMS的病理生物学机制并为开发潜在诊疗策略提供参考。 展开更多
关键词 子宫平滑肌肉瘤 遗传变异 分子病理 肿瘤治疗 疾病模型
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家蚕表达传染性法氏囊病病毒VP2蛋白的免疫原性初步研究(英文) 被引量:11
4
作者 于涟 宋坤华 +2 位作者 张耀洲 黄耀伟 李建荣 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CSCD 北大核心 2000年第1期9-16,共8页
在家蚕培养细胞及幼蚕中表达传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)主要宿主保护性抗原 VP2蛋白的基础上 ,初步研究了该表达产物的免疫原性 .Western免疫印迹和 ELISA均检测到春蚕和秋蚕中的 VP2蛋白活性 .含 VP2的春蚕蚕血制成的注射疫苗皮下注射... 在家蚕培养细胞及幼蚕中表达传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)主要宿主保护性抗原 VP2蛋白的基础上 ,初步研究了该表达产物的免疫原性 .Western免疫印迹和 ELISA均检测到春蚕和秋蚕中的 VP2蛋白活性 .含 VP2的春蚕蚕血制成的注射疫苗皮下注射 18日龄非免疫鸡 ,两周后二免 ;含 VP2的秋蚕蚕血冻干制成口服疫苗 ,隔天喂服 18日龄非免疫鸡 .于首免后第 10 ,13,2 1,2 8,37日分别采血 ,第 37日攻毒 .病毒血清中和试验显示注射组及口服组的中和抗体滴度最高可达 1∶ 42 11.3和 1∶ 3118.9,攻毒结果显示它们对 IBDV中国标准强毒株 BC6/85的攻击保护率为 10 0 %和 80 %.以上研究表明家蚕表达的 VP2蛋白具有良好的免疫原性 ,从而为开发实用化低成本的疫苗打下了扎实基础 . 展开更多
关键词 家蚕 IBDV VP2基因 重组疫苗 免疫原性 表达系统
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螺旋藻C-藻蓝蛋白亚基分离及抗肿瘤活性研究 被引量:10
5
作者 张昕 郦剑勇 龚兴国 《浙江大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期319-323,共5页
为解决C-藻蓝蛋白分子较大,难以直接与细胞发生作用的问题,对藻蓝蛋白亚基的分离纯化方法进行研究,并初步探讨了其对肿瘤细胞的抑制作用.对通过热变性、盐析和自制的羟基磷灰石吸附层析,从钝顶螺旋藻中获得高纯度的藻蓝蛋白(C-PC,A620/A... 为解决C-藻蓝蛋白分子较大,难以直接与细胞发生作用的问题,对藻蓝蛋白亚基的分离纯化方法进行研究,并初步探讨了其对肿瘤细胞的抑制作用.对通过热变性、盐析和自制的羟基磷灰石吸附层析,从钝顶螺旋藻中获得高纯度的藻蓝蛋白(C-PC,A620/A280>4.5).C-PC用8 mol.L-1的尿素溶液变性,过CM-Sepharose F.F.阳离子交换层析、透析、复性,获得具活性的C-PC亚基.用CCK-8试剂盒分别研究了C-PC、α和β亚基对一个肺腺癌细胞株SPC-A-1的生长的影响,结果表明藻蓝蛋白及其亚基对该细胞株的生长具有抑制作用,β亚基效果最好,预示着它们具有一定的抗肿瘤潜力. 展开更多
关键词 柱层析 复性 亚基 肺腺癌细胞株SPC-A-1 生长抑制作用
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SOD活性和同工酶检测系统中干扰因素的研究 被引量:10
6
作者 胡家恕 邵爱萍 任爱霞 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期179-182,共4页
采用 NBT光化还原反应检测 SOD活性时 ,反应系统中蛋白质含量在 10 0 μg以上将对 SOD活性测定造成严重干扰 ,并且干扰程度随蛋白质含量的增加而加剧 ;连苯三酚自氧化系统受维生素 C的干扰 ,当反应系统中维生素 C的含量在 2 0 μg以上 ... 采用 NBT光化还原反应检测 SOD活性时 ,反应系统中蛋白质含量在 10 0 μg以上将对 SOD活性测定造成严重干扰 ,并且干扰程度随蛋白质含量的增加而加剧 ;连苯三酚自氧化系统受维生素 C的干扰 ,当反应系统中维生素 C的含量在 2 0 μg以上 ,则明显抑制连苯三酚的自氧化 . 展开更多
关键词 超氧物歧化酶 氮兰四唑 连苯三酚 SOD活性 同工酶检测系统 干扰因素
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鸡肠道菌基因组DNA的RAPD分类的研究 被引量:7
7
作者 吴天星 金勇丰 +1 位作者 曹广力 张耀洲 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期247-249,共3页
本文以 7种鸡肠道菌为研究对象 ,分别提取基因组DNA ,利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对其基因组进行DNA分析 ,筛选出一系列随机引物 ,能在 7种肠道细菌中有较好的多态性 ,可用作分子标记鉴别这
关键词 肠道菌 基因组DNA RAPD分类的研究
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油茶籽仁中油脂的水酶法提取研究 被引量:11
8
作者 方学智 王开良 +1 位作者 姚小华 王亚萍 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2010年第5期778-781,共4页
An aqueous enzymatic extraction method was used to extract oil from oil-tea camellia seed(Camellia oleifera).The factors influencing the yield rate such as enzyme kind,addition methods,concentration of enzyme,enzymati... An aqueous enzymatic extraction method was used to extract oil from oil-tea camellia seed(Camellia oleifera).The factors influencing the yield rate such as enzyme kind,addition methods,concentration of enzyme,enzymatic hydrolysis time and temperature,and ration of solid to liquid were investigated.The results are as following: The acid protease and cellulase have higher oil yield rate than the other treatments,but there is no significant difference between acid protease and cellulase(P<0.05).By directly adding acid protease to seed slurry of oil-tea camellia seed,more oil yield rate can be gotten than those treatments which added acid protease to ground slurry or filtered ground slurry.By single factor experiment,the optimum conditions of enzymolysis are: the concentration of acid protease,0.1 %(w/w);the enzymolysis temperature and time,55 ℃ and 3 h,respectively;and the ratio of solid to liquid,1∶10. 展开更多
关键词 油茶 水酶法提取 油茶籽
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沙门菌属外膜蛋白(OMP)的分子免疫学研究进展 被引量:5
9
作者 王丽鸳 朱成钢 张耀洲 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2003年第4期106-108,114,共4页
关键词 沙门菌属 外膜蛋白 OMP 分子免疫学 研究进展
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榨菜胞质雄性不育系和保持系叶绿体多肽电泳比较研究 被引量:2
10
作者 陈学军 陈竹君 +1 位作者 杜广唏 张耀洲 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期88-88,共1页
关键词 榨菜 胞质雄性不育系 保持系 叶绿体多肽 电泳
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肿瘤基因治疗的研究进展 被引量:2
11
作者 朱振洪 金勇丰 张耀洲 《生物学杂志》 CAS CSCD 2001年第3期11-13,共3页
基因治疗作为一种新的治疗手段 ,给许多绝症患者带来希望。基因治疗的范围已从最初的单基因疾病扩展到恶性肿瘤、心脑血管及自身免疫病等诸多领域 ,其中以恶性肿瘤为主要对象。本文综述了肿瘤基因治疗中的基因转移方法、基因治疗策略、... 基因治疗作为一种新的治疗手段 ,给许多绝症患者带来希望。基因治疗的范围已从最初的单基因疾病扩展到恶性肿瘤、心脑血管及自身免疫病等诸多领域 ,其中以恶性肿瘤为主要对象。本文综述了肿瘤基因治疗中的基因转移方法、基因治疗策略、导向基因治疗及其在应用上的问题与展望。 展开更多
关键词 肿瘤 基因治疗 研究进展
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东方蜜蜂与西方蜜蜂酯酶同工酶的比较研究 被引量:2
12
作者 童富淡 胡家恕 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期113-113,共1页
关键词 东方蜜蜂 西方蜜蜂 脂酶同工酶 IEF-PAGE 电泳
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杆状病毒的酪氨酸蛋白磷酸酯酶研究 被引量:1
13
作者 郭锡杰 杨明观 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 2000年第3期176-181,共6页
酪氨酸蛋白磷酸酯酶是生命细胞内一类重要的酶 ,与细胞信号转导有关 ,对多种生理过程如生长、分化、代谢、细胞周期调节和细胞骨架等具有重要的调节功能。某些杆状病毒和痘苗病毒的基因组中具有编码酪氨酸蛋白磷酸酯酶的开读框 ,与感染... 酪氨酸蛋白磷酸酯酶是生命细胞内一类重要的酶 ,与细胞信号转导有关 ,对多种生理过程如生长、分化、代谢、细胞周期调节和细胞骨架等具有重要的调节功能。某些杆状病毒和痘苗病毒的基因组中具有编码酪氨酸蛋白磷酸酯酶的开读框 ,与感染性和致病性有关。病毒编码的酪氨酸蛋白磷酸酯酶具有双重底物特异性 ,即可以同时催化蛋白质酪氨酸和丝氨酸 展开更多
关键词 杆状病毒 酪氨酸蛋白磷酸酯酶 结构 功能 病原性
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氟尼辛葡甲胺临床应用和研究进展 被引量:10
14
作者 邹毅弢 吴英娟 +1 位作者 邵爱萍 朱成钢 《中国动物保健》 2006年第11期37-39,共3页
本文对非甾体抗炎药——氟尼辛葡甲胺最新的临床应用以及药代动力学、不良反应等方面的研究进行综述。
关键词 氟尼辛葡甲胺 临床 药代动力 不良反应
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结核杆菌D29噬菌体几丁质酶基因的表达及功能研究 被引量:2
15
作者 朱成钢 丁志山 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第8期753-757,共5页
噬菌体一般通过表达内溶素来降解宿主菌细胞壁上的肽聚糖.用PCR技术从结核杆菌D29噬菌体基因组中克隆了gene10,并使其在大肠杆菌中得到了高效表达,蛋白质C端带有6×His.用镍柱亲和纯化了大肠杆菌表达的gp10蛋白可溶性部分.活性测定... 噬菌体一般通过表达内溶素来降解宿主菌细胞壁上的肽聚糖.用PCR技术从结核杆菌D29噬菌体基因组中克隆了gene10,并使其在大肠杆菌中得到了高效表达,蛋白质C端带有6×His.用镍柱亲和纯化了大肠杆菌表达的gp10蛋白可溶性部分.活性测定表明,gp10不但具有几丁质酶活性,还具有溶菌酶活性,是一种双功能的酶.耻垢杆菌经gp10作用后,其生长受到抑制,扫描电镜观察发现部分耻垢杆菌被降解.说明与其他种类噬菌体降解细胞壁的方式不同,D29噬菌体可能利用gp10的溶菌酶活性使结核杆菌细胞壁降解.这有助于揭示结核杆菌噬菌体与其宿主的相互作用机制,是关于噬菌体几丁质酶的首次报道. 展开更多
关键词 噬菌体 结核杆菌 几丁质酶
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治疗性抗体的基础研究进展
16
作者 王雷杰 袁谦 +1 位作者 施利敏 朱成钢 《畜禽业》 2003年第8期54-55,共2页
单克隆抗体作为一种具有靶向性的生物大分子,始终是基础医学工作者研究的热点之一。临床上,已被用于治疗肿瘤、病毒感染、自身免疫病、中毒性休克、RH溶血症和抗移植排斥等。但单克隆抗体的临床应用受到一定限制,主要障碍是诱导产生人... 单克隆抗体作为一种具有靶向性的生物大分子,始终是基础医学工作者研究的热点之一。临床上,已被用于治疗肿瘤、病毒感染、自身免疫病、中毒性休克、RH溶血症和抗移植排斥等。但单克隆抗体的临床应用受到一定限制,主要障碍是诱导产生人抗鼠抗体(HAHA反应)、肿瘤渗入量低、亲和力低和半衰期短等。然而,近年来分子生物学技术的发展和向各学科的渗透,人们已经可以通过基因操作技术对抗体进行改造,使其适用于疾病的治疗。如近年来应用噬菌体抗体库技术(phagedisplayantibodylibrarytechniques),筛选具有特异治疗作用的人源性单克隆抗体。另外,通过与基因敲除(knockout)和置换(knockin)技术结合筛选获得完全人源化的单克隆抗体也备受人们的普遍关注。本文就这些技术的基本原理、特点和治疗性抗体的研究进展进行了介绍。 展开更多
关键词 治疗性抗体 单克隆抗体 生物大分子 临床应用 噬菌体技术 治疗机理 分子生物学技术
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人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因在家蚕细胞中的表达和活性研究 被引量:4
17
作者 郭冬生 朱成钢 +1 位作者 张耀洲 吴祥甫 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期803-807,共5页
根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm Bac... 根据细胞因子协同作用的特点,采用重组DNA技术构建了人干扰素(IFN)α2b 胸腺肽(THY)α1融合基因,克隆到pBacPAK8上,获得重组转移载体pBacPAK IFN THY.与线形化Bm BacPAK6病毒基因组DNA共转染家蚕细胞,经过体内重组,筛选到重组病毒Bm BacPAK IFN THY.将Bm BacPAK IFN THY感染家蚕细胞进行表达.DNA印迹证明IFN THY已插入Bm BacPAK6中(4kb左右的杂交带);SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳、蛋白质印迹证明IFN THY在家蚕细胞中得到了表达(分子质量为 2 3ku左右),且具有IFN蛋白的免疫原性;微量细胞病变抑制法和玫瑰花结法显示 96h的表达产物IFN活性为 3 72× 10 4U/ml,12 0h表达产物IFN活性为 3 10× 10 5U/ml,4 8~ 72h表达产物IFN活性较低;4 8~ 12 0h表达产物的玫瑰花结形成率均在 10 %以上.结果表明融合基因在家蚕细胞中得到了高效表达,表达的融合蛋白具有IFN α2b和THY 展开更多
关键词 人干扰素α2b-胸腺肽α1融合基因 家蚕细胞 活性 家蚕核型多角体病毒 基因表达
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杆状病毒细胞凋亡抑制基因的研究进展 被引量:2
18
作者 于威 吴玉澄 +1 位作者 金勇丰 张耀洲 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期244-248,共5页
细胞凋亡是多细胞生物为维持自身的正常机能而产生的细胞自杀性行为 ,杆状病毒为维持自身的生长繁殖而产生了对抗细胞凋亡的基因 p35和 iap,二者分别作用于细胞凋亡途径的不同部位 ,以抑制细胞的凋亡 .近年来人们对这两种基因的蛋白结... 细胞凋亡是多细胞生物为维持自身的正常机能而产生的细胞自杀性行为 ,杆状病毒为维持自身的生长繁殖而产生了对抗细胞凋亡的基因 p35和 iap,二者分别作用于细胞凋亡途径的不同部位 ,以抑制细胞的凋亡 .近年来人们对这两种基因的蛋白结构及作用机制等方面进行了大量的研究 ,对它们的作用机制有了进一步的了解 。 展开更多
关键词 P35 IAP 细胞凋亡 杆状病毒细胞凋亡抑制基因 蛋白结构
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黄酒的体外抗氧化性及其机理研究 被引量:19
19
作者 谢广发 朱成钢 +1 位作者 胡志明 邹慧君 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期5-8,共4页
对黄酒的抗氧化性和抗氧化机理进行了研究。结果表明,黄酒具有很强的总抗氧化能力,并具有较强的还原性、清除DPPH自由基能力和清除超氧阴离子能力。检测表明,黄酒中多酚的含量为192μg/mL,但黄酒的强抗氧化性可能还与其他多种物质有关。
关键词 黄酒 抗氧化活性
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家蚕Mod基因的序列分析及表达与亚细胞定位研究
20
作者 周秋梅 金勇丰 张耀洲 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期746-753,共8页
已知多数含BTB/POZ结构域的锌指蛋白对生物体的发育、分化及染色体重组等具有重要的调节作用。从已构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条编码MOD(mdg4)蛋白的基因序列(GenBank登录号:DN237077)。该基因序列的ORF长1 080 bp,编码359个氨基... 已知多数含BTB/POZ结构域的锌指蛋白对生物体的发育、分化及染色体重组等具有重要的调节作用。从已构建的家蚕蛹cDNA文库中筛选到一条编码MOD(mdg4)蛋白的基因序列(GenBank登录号:DN237077)。该基因序列的ORF长1 080 bp,编码359个氨基酸残基,蛋白含有BTB保守结构域和FLYWCH保守结构域,与黑腹果蝇、冈比亚按蚊、赤拟谷盗和埃及伊蚊的MOD多序列比对,其同源性不超过40%。表达、纯化带有His标签的家蚕MOD蛋白(BmMOD),并用纯化的融合蛋白免疫新西兰兔获得多克隆抗体。实时荧光定量PCR显示BmMod基因mRNA转录水平在家蚕蛾期及5龄幼虫的卵巢最高,推测BmMod基因在家蚕生殖腺发育过程中产生一定作用。利用纯化的BmMOD蛋白多克隆抗体进行Western blotting分析也表明该蛋白在家蚕蛾期及5龄幼虫卵巢中的表达量最高,验证了BmMod在家蚕生殖腺发育中的功能。亚细胞定位结果显示BmMOD蛋白几乎完全定位于家蚕卵巢上皮细胞(BmN)的细胞核中。 展开更多
关键词 家蚕 Mod(mdg4)基因 序列分析 原核表达 表达特征 亚细胞定位
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