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生物吸附及微生物降解对4-溴联苯醚污染水体的修复
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作者 杜敬霆 孙朋飞 张昕 《浙江农林大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期434-439,共6页
多溴联苯醚(PBDEs)作为阻燃剂被广泛使用。因为它对人类的器官、神经系统和免疫系统的危害以及向周边环境的不断迁移,已经逐渐成为人们迫切需要处理的污染物之一。以同系物4-溴联苯醚(BDE-3)作为降解对象,将海藻酸钠和生物碳混合制成微... 多溴联苯醚(PBDEs)作为阻燃剂被广泛使用。因为它对人类的器官、神经系统和免疫系统的危害以及向周边环境的不断迁移,已经逐渐成为人们迫切需要处理的污染物之一。以同系物4-溴联苯醚(BDE-3)作为降解对象,将海藻酸钠和生物碳混合制成微球制剂,对该制剂吸附BDE-3的潜力、机制及添加降解菌Sphingomonas sp.DZ3后微球菌剂的吸附增益效应进行研究。结果表明:2%的海藻酸钠为微球制备的最佳质量浓度,该微球制剂在液相中的吸附过程符合Lagergren准一级动力学方程和Elovich方程,微球的最大吸附量为28.6 mg·g^(-1)。用添加微生物的微球菌剂对BDE-3污染水体进行修复时发现,微球菌剂在溶液中能加速BDE-3的降解,与游离的微生物相比,差异达极显著水平(P<0.01)。利用Monod降解动力学方程对该降解过程进行拟合,得到降解动力学方程为υ=υ_(max)·S/(K_S+S)=14.29·S/(31.71+S)。 展开更多
关键词 环境科学 4-溴联苯醚 海藻酸钠-生物碳微球 吸附机制 菌剂 增益效应
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枯草芽孢杆菌F-2抗植物病原真菌活性物质的研究 被引量:4
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作者 鲁小城 赵宇华 方萍 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期34-39,共6页
枯草芽孢杆菌F-1和F-2与尖孢镰刀菌的对峙实验中,F-1没有抑菌作用,而F-2表现出强抑菌效果.为了分析测定F-2的抑菌活性物质,对F-1和F-2胞外代谢物粗提液的HPLC谱图进行比较,发现F-2具有F-1所没有的特征代谢产物.使用LC-MS对F-2的特征产... 枯草芽孢杆菌F-1和F-2与尖孢镰刀菌的对峙实验中,F-1没有抑菌作用,而F-2表现出强抑菌效果.为了分析测定F-2的抑菌活性物质,对F-1和F-2胞外代谢物粗提液的HPLC谱图进行比较,发现F-2具有F-1所没有的特征代谢产物.使用LC-MS对F-2的特征产物进行分析,推测主要产物的分子量为1477.0、1489.1和1505.1.进一步采用MALDI-TOFMS对F-2粗提液进行分析,发现F-2产生两组分子量相差14Da(CH2)的同系物.其中一组的分子量依次为1462.8、1476.8、1490.8、1504.8和1518.9,通过质量指纹谱技术鉴定为脂肽抗生素C14-18 Fengycin B.另一组的分子量依次为1432.8、1446.8、1460.8、1474.8和1488.9,与C14-18 Fengycin A对应分子分子量相差2Da,推测可能是Fengycin A的一种异构体,其碳链中具有一个双键,具体性质有待进一步分析. 展开更多
关键词 枯草芽孢杆菌 脂肽抗生素 质量指纹谱技术 LC—MS MALDI—TOF MS
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酵母对微量元素硒的生物富集及应用 被引量:17
3
作者 肖竞 周德平 《中国饲料》 北大核心 2004年第19期10-11,26,共3页
关键词 酵母 微量元素 生物富集 免疫功能 饲料添加剂
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节杆菌(Arthrobacter)42-1菌株的分离、鉴定及产肌氨酸氧化酶条件研究
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作者 赵更峰 马晓航 +1 位作者 贾小明 王园园 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期92-96,共5页
从42℃的恒化富集培养物中分离到一株产肌氨酸氧化酶(SOX)的节杆菌.对菌株42-1产酶发酵条件的研究表明,SOX可以被诱导物如肌氨酸、肌酸、肌酐和氯化胆碱诱导产生.在发酵过程中适当减少通气量对SOX的产生有显著的促进作用.葡萄糖等容易... 从42℃的恒化富集培养物中分离到一株产肌氨酸氧化酶(SOX)的节杆菌.对菌株42-1产酶发酵条件的研究表明,SOX可以被诱导物如肌氨酸、肌酸、肌酐和氯化胆碱诱导产生.在发酵过程中适当减少通气量对SOX的产生有显著的促进作用.葡萄糖等容易利用碳源的存在对SOX合成不产生降解代谢产物的抑制作用.而尿素的存在则对SOX生成有强抑制作用.因而SOX分解肌氨酸的主要作用是为细胞提供生长所需的氮源. 展开更多
关键词 肌氨酸氧化酶 肌酐 分离 菌株 节杆菌 诱导 抑制作用 氯化胆碱 生长 氮源
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十溴二苯醚降解菌的分离鉴定及其降解特性的初步研究 被引量:3
5
作者 陈雪娇 金丹凤 +1 位作者 丁海涛 赵宇华 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期521-527,共7页
通过选择性富集法从杭州炼油厂附近长期受石油污染的土壤中分离到1株以十溴二苯醚为唯一碳源、能源生长的细菌BD-24,经形态、生理生化、16S rDNA核苷酸序列分析,以及(G+C)mol%测定,菌株BD-24被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillussp.);并用高效... 通过选择性富集法从杭州炼油厂附近长期受石油污染的土壤中分离到1株以十溴二苯醚为唯一碳源、能源生长的细菌BD-24,经形态、生理生化、16S rDNA核苷酸序列分析,以及(G+C)mol%测定,菌株BD-24被鉴定为芽孢杆菌属(Bacillussp.);并用高效液相色谱法测定十溴二苯醚浓度.结果表明:菌株BD-24在含20 mg·L-1十溴二苯醚的无机盐培养基上培养15 d,十溴二苯醚残余率下降至75.1%,到第25天,残余率则为65.6%;不同种类碳源的添加均能不同程度地促进十溴二苯醚的降解,其中麦芽糖作用最为显著,培养5 d后,残余率仅剩83.5%;而不同氮源的添加对降解无显著作用. 展开更多
关键词 十溴二苯醚 降解 鉴定 芽孢杆菌属
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壳聚糖-生物炭微球对甲基红的吸附及微球菌剂的吸附增益效应 被引量:3
6
作者 杜敬霆 孙朋飞 +1 位作者 赵宇华 张昕 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期228-236,共9页
以典型偶氮染料甲基红为吸附对象,将壳聚糖和生物炭混合制成微球制剂,对该制剂吸附甲基红的潜力、机制及添加微生物后微球菌剂的吸附增益效应进行研究.结果表明,所制得的壳聚糖-生物炭微球具有良好的吸附特性,在染料初始质量浓度为500 m... 以典型偶氮染料甲基红为吸附对象,将壳聚糖和生物炭混合制成微球制剂,对该制剂吸附甲基红的潜力、机制及添加微生物后微球菌剂的吸附增益效应进行研究.结果表明,所制得的壳聚糖-生物炭微球具有良好的吸附特性,在染料初始质量浓度为500 mg/L、p H 3.0和20℃条件下,微球对甲基红的最大吸附量为460 mg/g.Freundlich等温方程和准二级动力学方程模型与该吸附过程拟合良好.利用Elovich方程与颗粒内扩散方程对微球的吸附过程进行研究,结果证实该吸附过程为自发过程,内部扩散为该过程的限速步骤.通过热力学方程计算得到吸附过程的热力学参数ΔG0、ΔH0和ΔS0分别为-24.35 k J/mol(30℃)、-21.36 k J/mol和8.45 J/(mol K).表明此吸附过程为放热过程,较高温度可降低微球吸附的自发性并抑制微球对甲基红的吸附作用.利用神经网络对影响吸附过程的4个因素(p H值,温度,初始浓度,吸附时间)进行建模分析,发现温度对吸附过程的影响最大,相对重要性为32.76%,时间次之(为25.56%),其余依次为p H(23.36%)和初始浓度(18.32%).包埋微生物的微球菌剂与无微生物的纯壳聚糖-生物炭微球相比,脱色率提高了29%;与微生物单独脱色相比,脱色率提高了76%,表明生物吸附材料与微生物混合制备成菌剂的吸附增益效果明显. 展开更多
关键词 甲基红 壳聚糖 生物炭微球 吸附机制 菌剂 增益效应
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Bacillus sp.C3细胞色素P450CYP102A16酶活性研究
7
作者 李泽莉 丁海涛 +3 位作者 杨玉义 陈雪娇 赵宇华 周启发 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期662-668,共7页
通过异源表达及Ni-NTA亲和层析纯化获得重组Bacillus sp.C3细胞色素P450CYP102A16蛋白;以CYP102A16纯酶为研究对象,系统研究温度、pH、有机溶剂、表面活性剂、金属和非金属离子等对该酶活性及其稳定性的影响;用还原型烟酰胺腺嘌呤... 通过异源表达及Ni-NTA亲和层析纯化获得重组Bacillus sp.C3细胞色素P450CYP102A16蛋白;以CYP102A16纯酶为研究对象,系统研究温度、pH、有机溶剂、表面活性剂、金属和非金属离子等对该酶活性及其稳定性的影响;用还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH)消减法测定CYP102A16的酶活性.结果表明:CYP102A16的最适反应温度为35℃,最适反应pH为6.5-7.5,该酶在45℃以下、pH5.0~10.0的范围内稳定;CYP102A16能完全耐受20%二甲基亚砜(dimethylsulfoxide,DMSO)、30%甲醇、10%乙醇和20%丙酮,经10%乙腈、正丙醇和异丙醇处理后残余酶活性在45%以上,经10%正丁醇处理几乎失活;添加低质量浓度氯代十六烷基吡啶(cetylpyridine chloride,CPC)(0.003-0.02g/L)和聚乙二醇辛基苯基醚(Triton X-100)(0.1-0.2g/L)可使CYP102A16酶活性分别提高40%和60%左右,而添加低质量浓度十二烷基硫酸钠(sodiumdodecyl sulphate,SDS)(O.004-0.008g/L)对该酶活性无显著影响;1-20mmol/L K^+、20-50mmol/L Na^+、0.05mmol/L Cd^2+对CYP102A16酶活性表现出轻微的促进效应,NH4^+、Ca^2+、Mg^2+、Fe^3+、CO^2+、Mn^2+、Zn^2+、Cu^2+和乙二胺四乙酸(ethylene diamine tetraacetic acid.EDTA)均能不同程度地抑制CYP102A16的活性,在离子浓度为1-100mmol/L时抑制效应表现为Ca^2+〉Mg^2+〉NH^4+〉EDTA,抑制作用的大小总体上与离子浓度呈正相关. 展开更多
关键词 细胞色素P450 CYP102A16蛋白 酶活性 影响因素
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苄嘧磺隆对淹水稻田土壤呼吸和酶活性的影响 被引量:22
8
作者 林晓燕 王袆 +2 位作者 赵宇华 丁海涛 冯志红 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期109-113,共5页
研究除草剂苄嘧磺隆对淹水稻田土壤生态环境的安全性.以淹水稻田土壤为研究对象,在室内模拟田间试验条件下,通过呼吸作用和酶活测定,定期取样研究苄嘧磺隆施用浓度(0.000、0.067、0.3551、.780、3.553μg?g-1干土)对淹水稻田土壤呼吸强... 研究除草剂苄嘧磺隆对淹水稻田土壤生态环境的安全性.以淹水稻田土壤为研究对象,在室内模拟田间试验条件下,通过呼吸作用和酶活测定,定期取样研究苄嘧磺隆施用浓度(0.000、0.067、0.3551、.780、3.553μg?g-1干土)对淹水稻田土壤呼吸强度和土壤酶活性的影响.结果表明,苄嘧磺隆施用初期能刺激土壤呼吸强度,随后产生轻微的抑制作用,这种抑制作用在取样后期逐渐减轻并趋于对照水平.苄嘧磺隆能轻微刺激过氧化氢酶活性,而蔗糖酶活性基本不受苄嘧磺隆施用量的影响,脲酶活性则是先刺激后抑制,多酚氧化酶活性受苄嘧磺隆影响不大.说明施用一定量的苄嘧磺隆对淹水稻田土壤生态环境是安全的. 展开更多
关键词 除草剂 苄嘧磺隆 土壤呼吸作用 土壤酶活性
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ACC脱氨酶活性菌株的筛选、鉴定及其对茄子耐盐性的影响 被引量:5
9
作者 刘琛 赵宇华 +2 位作者 傅庆林 杨丽 贾小明 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期143-148,共6页
从浙江上虞海涂土样中分离、筛选到1株具有1-氨基环丙烷1-羧酸(ACC)脱氨酶活性的菌株DW1.根据生理生化特征、16SrDNA序列分析、(G+C)mol%测定,菌株DW1被鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.DW1).研究该菌株对茄子耐盐性的影响,结果表明:用菌... 从浙江上虞海涂土样中分离、筛选到1株具有1-氨基环丙烷1-羧酸(ACC)脱氨酶活性的菌株DW1.根据生理生化特征、16SrDNA序列分析、(G+C)mol%测定,菌株DW1被鉴定为假单胞菌(Pseudomonas sp.DW1).研究该菌株对茄子耐盐性的影响,结果表明:用菌株DW1处理可以提高种子的发芽势及芽长;在茄苗盆栽实验中,经DW1菌液处理的种子,在高盐浓度下茄苗的鲜重与对照相比有显著提高,同时Ca2+含量有所增加而Na+含量则有所下降,其茄苗的长势明显优于对照.说明用具有ACC脱氨酶活性的菌株DW1处理可以有效地提高茄苗的耐盐性. 展开更多
关键词 ACC脱氨酶 盐胁迫 茄子 海涂
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球孢白僵菌不同菌株分生孢子的耐热能力 被引量:14
10
作者 李鸿文 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期158-162,共5页
为筛选获得适应我国南方夏季高温的生防菌株,将不同寄主和产地的12株球孢白僵菌(Beauveria bassiana)分生孢子分别悬浮于1mL萌发液中,接受48℃恒温水浴的热胁迫.以逻辑斯蒂方程拟合孢子萌发率随热胁迫时间的衰变过程,将孢子活力... 为筛选获得适应我国南方夏季高温的生防菌株,将不同寄主和产地的12株球孢白僵菌(Beauveria bassiana)分生孢子分别悬浮于1mL萌发液中,接受48℃恒温水浴的热胁迫.以逻辑斯蒂方程拟合孢子萌发率随热胁迫时间的衰变过程,将孢子活力丧失一半所需的时间(LT50)作为各菌株对热胁迫反应的特征指标.结果表明,对所有测试的球孢白僵菌株,孢子的残存指数均随胁迫时间延长而降低,且供试菌株之间差异显著.所测菌株孢子的LT50平均值为12.6min(6.7~21.2min),仅1株的LT50高于20min,有4株的LT50低于10min由此建立的技术体系可用于客观评价各种生防真菌的孢子耐热力. 展开更多
关键词 球孢白僵菌 生防真菌 孢子耐热力 热胁迫 致死中时
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一种人工合成的茉莉酸类似物PDJ对寄主中黄瓜花叶病毒含量的影响 被引量:3
11
作者 柴立红 陈集双 徐步进 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期534-538,共5页
茉莉酸(Jasmonic acids,Ja)为一种新型的植物内源生长激素,广泛存在于自然界中,其主要生物学效应是对生长的抑制作用和对衰老脱落的促进作用,如抑制非休眠种子的萌发、强烈抑制根系的生长、促进块茎的形成等.Ja作为关键的化学信号物质... 茉莉酸(Jasmonic acids,Ja)为一种新型的植物内源生长激素,广泛存在于自然界中,其主要生物学效应是对生长的抑制作用和对衰老脱落的促进作用,如抑制非休眠种子的萌发、强烈抑制根系的生长、促进块茎的形成等.Ja作为关键的化学信号物质在植物损伤和病原菌侵染过程中具有重要作用.本实验以一种人工合成的茉莉酸类似物PDJ(9,10-二氢茉莉酸丙酯,9,10-Propyl dihydro—jasmonate)作为研究对象,采用RNA点杂交方法对用不同浓度PDJ处理的假酸浆叶片中的黄瓜花叶病毒的基因组RNA负荷量进行测定,结果表明:在处理后不同的时间段和不同的浓度条件下,PDJ对黄瓜花叶病毒的基因组RNA负荷量具有较大差别的影响.处理早期(7d),与对照相比,各浓度PDJ促进CMV基因组RNA3的复制;随着时间的推移(处理21 d),0.001~5 mg/kg浓度PDJ处理的假酸浆叶片中CMV—RNA3负荷量的积累均明显低于对照,而高浓度50 mg/kg PDJ处理的高于对照,说明PDJ对CMV的促进作用随时间的增加逐渐消失;至处理42 d,对照中CMV RNA3的积累显著地大于各浓度的PDJ处理,显示出在处理后期PDJ对CMV较强的抑制作用,而且这种作用随PDJ浓度的降低而增强. 展开更多
关键词 人工合成 茉莉酸类似物 PDJ 寄主 黄瓜花叶病毒 含量 RNA点杂交 定量检测 诱导抗病性
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适于玫烟色拟青霉液相发酵生产的培养基和初始接种量及pH 被引量:10
12
作者 陈宜涛 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期39-43,共5页
从美国引进对刺吸式口器害虫具侵染力的玫烟色拟青霉(Paecilomycesfumosoroseus)菌株Pfr116,用5种培养液在25℃下进行深层培养,以菌丝生物量作为指标筛选出了适合于工业生产的发酵液配方(w/v):食用蔗糖2%,马铃薯20%,蛋白胨0.1%,NaNO30.0... 从美国引进对刺吸式口器害虫具侵染力的玫烟色拟青霉(Paecilomycesfumosoroseus)菌株Pfr116,用5种培养液在25℃下进行深层培养,以菌丝生物量作为指标筛选出了适合于工业生产的发酵液配方(w/v):食用蔗糖2%,马铃薯20%,蛋白胨0.1%,NaNO30.01%,KCl0.01%,MgSO40.025%,MnSO40.005%,FeSO40.005%及KH2PO40.05%。用此培养液对Pfr116菌株进行48h的深层发酵,可获>20mg/mL的干菌丝产量,与萨氏培养液的菌丝产量无显著差异。通过对液培初始接种量和pH值进行优化,确定最佳初始接种量为培养液的菌丝含量1.5~2.0mg/mL,最佳初始pH值为5~7。 展开更多
关键词 液相发酵 培养基 初始接种量 PH 玫烟色拟青霉 深层培养 菌丝生物量 昆虫真菌 微生物杀虫剂
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基于球孢白僵菌的真菌杀虫剂生产工艺与剂型述评 被引量:11
13
作者 张丽靖 冯明光 《浙江农业学报》 CSCD 2004年第6期395-399,共5页
球孢白僵菌作为重要的生防真菌,其制剂产品已在全球广泛用于防治多种农林害虫。文章回顾性评述了该菌孢子粉生产及其制剂的工艺和技术特征以及孢子制剂的助剂功能和筛选原则,并就真菌杀虫剂的产业化关键技术问题及在无公害农业中的地位... 球孢白僵菌作为重要的生防真菌,其制剂产品已在全球广泛用于防治多种农林害虫。文章回顾性评述了该菌孢子粉生产及其制剂的工艺和技术特征以及孢子制剂的助剂功能和筛选原则,并就真菌杀虫剂的产业化关键技术问题及在无公害农业中的地位进行了讨论,希望有助于理清真菌杀虫剂的研发思路并推动其推广应用。 展开更多
关键词 球孢白僵菌 分生孢子粉生产 孢子制剂 助剂 微生物防治
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三种丝孢类生防真菌孢子类疏水蛋白的含量与组分比较 被引量:1
14
作者 应盛华 邓米霞 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期401-405,共5页
比较研究了6株球孢白僵菌Beuaveria bassiana(Bb)、5株玫烟色拟青霉Paecilomycesfumosoroseus(Pf)和3株金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Ma)孢子类疏水蛋白(HLP)的含量和组分.结果表明HLP含量因菌种和菌株不同而呈现显著差异,其中Bb... 比较研究了6株球孢白僵菌Beuaveria bassiana(Bb)、5株玫烟色拟青霉Paecilomycesfumosoroseus(Pf)和3株金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae(Ma)孢子类疏水蛋白(HLP)的含量和组分.结果表明HLP含量因菌种和菌株不同而呈现显著差异,其中Bb2861孢子HLP含量最高达23.4μg?mg-1,而Ma297的最低仅5.0μg?mg-1.HLP组分在三种生防真菌间差异明显,球孢白僵菌(12.0、15.0和17.5 kDa)和玫烟色拟青霉(15.0和17.5 kDa)的种内差异不明显.但是,金龟子绿僵菌的HLP组分种内差异较大,Ma2125主要包括17.0和14.5 kDa条带,Ma0201主要包括19.0和13.5 kDa,而Ma297主要条带仅为13.5 kDa.在对Bb2860不同菌体结构的比较研究中,发现其气生分生孢子、气生菌丝和液生菌丝的HLP含量分别为26.3、18.2和16.5μg?mg-1,相互间差异显著,且均含有15.0和17.5 kDa的主要条带.害虫生防真菌孢子HLP含量及组分的初步探明为研究其生物学功能与潜在应用奠定了基础. 展开更多
关键词 昆虫病原真菌 球孢白僵菌 金龟子绿僵菌 玫烟色拟青霉 类疏水蛋白
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苜蓿花叶病毒粒子的统计学特征和分组 被引量:2
15
作者 陈集双 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期477-482,共6页
以一株来自于白车根草 (Trifolium repens L.)上的苜蓿花叶病毒分离物 AMV- SY为材料 ,在电镜下观察测量经醋酸铀负染的 196个提纯病毒粒子 ,按其长度分成等距离的 5个组 ,用统计分析方法确定组间的差异 .所得各组粒子的平均大小依次是... 以一株来自于白车根草 (Trifolium repens L.)上的苜蓿花叶病毒分离物 AMV- SY为材料 ,在电镜下观察测量经醋酸铀负染的 196个提纯病毒粒子 ,按其长度分成等距离的 5个组 ,用统计分析方法确定组间的差异 .所得各组粒子的平均大小依次是组 :(2 0 .4± 2 .5) nm× (18.7± 2 .3) nm,组 :(2 8.0± 2 .4 ) nm× (18.1± 2 .1) nm,组 :(36 .0± 2 .4 ) nm× (17.2± 2 .0 ) nm,组 :(4 4 .8± 2 .7)nm× (16 .9± 2 .0 ) nm,组 :(52 .0± 3.0 ) nm× (17.4± 1.0 ) nm.它们分别相当于前人根据 X-射线衍射或核磁共振所测定的 Ta- t,Ta- b,Tb,M和 B型病毒粒子 .方差分析表明 ,5组病毒粒子间长度差异极显著 ,即组 <组 <组 <组 <组 ;病毒粒子宽度差异也极显著 ,但仅组 粒子的宽度明显大于组 和组 ,说明在没有病毒 RNA参与的情况下 ,单由不含病毒 RNA的外壳蛋白亚基所构成的粒子其横向结构较为松散 .对 AMV统计分析的结果与前人根据对病毒粒子结晶中典型的粒子进行 X射线衍射分析或计算机模拟所获得的结果基本吻合 ,但组 粒子 ,即最长一组 AMV病毒粒子的统计长度明显小于结晶中 X-射线衍射分析所测得最长的 展开更多
关键词 苜蓿花叶病毒 病毒粒子 统计分组 白车根草
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纤维素油脂生产菌株青霉 P-2的筛选及其纤维素油脂统合加工行为(英文)
16
作者 林辉 马军伟 +2 位作者 王群 赵宇华 符建荣 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期611-620,共10页
纤维素油脂的统合生物加工过程是将纤维素酶生产、纤维素水解和微生物油脂发酵过程组合,通过一种微生物完成。运用统合生物加工过程生产微生物油脂可以降低生物转化过程的成本。该文对20株纤维素降解菌进行筛选评价,结果发现青霉菌株P-... 纤维素油脂的统合生物加工过程是将纤维素酶生产、纤维素水解和微生物油脂发酵过程组合,通过一种微生物完成。运用统合生物加工过程生产微生物油脂可以降低生物转化过程的成本。该文对20株纤维素降解菌进行筛选评价,结果发现青霉菌株P-2同时具备有效的纤维素降解和油脂积累能力。脂肪酸组分分析表明,菌株P-2胞内油脂的脂肪酸组分主要为棕榈酸(C16:0,21.05%)、油酸(C18:1,22.43%)和亚油酸(C18:2,27.78%)。菌株P-2在以纤维素粉为底物的液体发酵和以秸秆、麸皮混合物为底物的固态发酵条件下可达到的最高油脂产量分别为0.65g/L和40.13mg/g(按干物质计)。说明青霉P-2是一株潜在的低成本纤维素油脂生产菌。进一步分析在发酵试验中的油脂产量和纤维素酶活力发现,菌株P-2的纤维素酶分泌能力在其油脂生产过程中具有重要作用。外源纤维素酶添加试验证实,在培养基中外源纤维素酶添加量的提高可以促进P-2油脂的生产。添加24IU/g(按干物质计)纤维素酶可使P-2发酵后的最高油脂产量达到0.83g/L。对固态发酵所得到的滤纸酶活力和油脂产量数据进行相关分析,结果证实滤纸酶活力与油脂产量之间存在极显著的正相关关系(R2=0.711,P<0.01)。当固态发酵系统中的滤纸酶活力从1.0IU/g增加到3.5IU/g(按干物质计)时,对应的油脂产量从26.24mg/g上升到40.13mg/g(按干物质计),产量增长量达到52.93%。以上结果暗示纤维素酶分泌能力不足是制约P-2油脂产量的一个重要原因;因此,通过调控菌株P-2的纤维素酶分泌能力可能是提高油脂产量的可行性策略之一。 展开更多
关键词 纤维素酶 青霉菌 统合生物加工过程 微生物油脂 液态发酵 固态发酵 PENICILLIUM sp .
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限制性内切酶介导的玫烟色拟青霉原生质转化体系构建 被引量:5
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作者 杨旭芬 应盛华 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期606-612,共7页
丝孢类害虫生防真菌的生态适应性和环境抗逆性决定着生防菌剂的田间适用性,兼具多个抗逆性状的菌株一般只能通过相关功能基N的遗传操作和定向选育而获得,但这类真菌遗传操作的可行方法目前相当有限,本文利用限制性内切酶介导插入法... 丝孢类害虫生防真菌的生态适应性和环境抗逆性决定着生防菌剂的田间适用性,兼具多个抗逆性状的菌株一般只能通过相关功能基N的遗传操作和定向选育而获得,但这类真菌遗传操作的可行方法目前相当有限,本文利用限制性内切酶介导插入法将含有草丁膦抗性标记的Bar基因的质粒pAN52-1N-Bar转入玫烟色拟青霉Pfr116菌株的原生质体中,转化效率约为6~13个转化子μg^-1质粒DNA.通过对Pfr116菌株突变转化子的基因组DNA进行PCR产物检测及基因组DNA单酶切片段的Southern杂交分析,证明Bar基因已整合到随机抽取的转化子基因组中,且都在基因组上单位点插入,转化子对草丁膦的抗性具有遗传稳定性,由此构建的原生质体转化体系具有低拷贝、转化率较高,遗传稳定强的特点,不失为一种丝孢类生防真菌遗传操作的有效方法. 展开更多
关键词 玫烟色拟青霉 原生质体转化 限制性内切酶 草丁膦抗性基因
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模拟昆虫中肠环境对球孢白僵菌分生孢子的影响 被引量:3
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作者 僧明华 应盛华 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期261-265,共5页
为了观察孢子在模拟昆虫中肠环境的变化,先配制不同组分的中肠模拟消化酶液(均为0.5%),将稳定表达绿色荧光蛋白菌株的分生孢子悬浮其中,25℃或35℃恒温孵育4h后,分别采用流式细胞仪和扫描电子显微镜检测孢子荧光强度和孢子壁形态的变化... 为了观察孢子在模拟昆虫中肠环境的变化,先配制不同组分的中肠模拟消化酶液(均为0.5%),将稳定表达绿色荧光蛋白菌株的分生孢子悬浮其中,25℃或35℃恒温孵育4h后,分别采用流式细胞仪和扫描电子显微镜检测孢子荧光强度和孢子壁形态的变化.孢子荧光强度的改变可以反映酶液对孢子壁消解的程度.结果显示,5种模拟消化液导致荧光强度显著上升,分别为蛋白酶K、链霉蛋白酶E、纤维素酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶,但昆布多糖酶、葡萄糖苷酶、蜗牛酶模拟消化液导致荧光强度下降.与单因素模拟消化液相比,复合酶类模拟消化液作用后的荧光强度大幅下降.在pH5~11范围内,复合酶类模拟消化液处理后的分生孢子荧光强度变化情况差异显著.扫描电子显微镜观察到分生孢子经昆虫模拟消化液处理后孢壁表面结构发生明显变化.这意味着昆虫中肠消化液可能影响球孢白僵菌分生孢子壁结构及其侵染功能. 展开更多
关键词 球孢白僵菌 昆虫模拟消化液 孢壁通透性 流式细胞术
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利用生防真菌孢子粉生产中的废米生产饲用β-葡聚糖酶和木聚糖酶的黑曲霉固相发酵条件优化 被引量:6
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作者 王晓晓 冯明光 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期39-44,共6页
为资源化利用生防真菌高纯度孢子粉在生产过程中产生的大量废米,将废米粉按比例混入麦麸作为基础物料,接种黑曲霉固相发酵生产饲用β-葡聚糖酶和木聚糖酶,得到麸米比7∶3的最佳配料;纯麦麸发酵3d后2种酶的产量为353.8、343.8U·g-1... 为资源化利用生防真菌高纯度孢子粉在生产过程中产生的大量废米,将废米粉按比例混入麦麸作为基础物料,接种黑曲霉固相发酵生产饲用β-葡聚糖酶和木聚糖酶,得到麸米比7∶3的最佳配料;纯麦麸发酵3d后2种酶的产量为353.8、343.8U·g-1干曲.在对发酵时间、配料含水量、补充氮源、微量元素、拌料水的表面活性剂浓度及pH值等单因素分别优化试验的基础上,选取对产酶影响较大的金属离子类型、硫酸铵添加量、拌料水的吐温80浓度和pH进行4因素3水平9处理的正交试验,获得的最优组合为麸米比7∶3的配料中加入0.1%KH2PO4和1%(NH4)2SO4,拌料水为0.3%吐温80和pH5.经3次重复试验验证,用最优组合配料接种后在25℃下发酵54h,β-葡聚糖酶和木聚糖酶产量(±SD)分别达到(716.1±9.2)、(453.0±62.5)U?g-1干曲,远高于优化前相同麸米比配料的酶产量.这一结果为建立环境友好型真菌杀虫剂生产线提供了有用的配套技术,使饲用酶制剂生产节约麦麸30%. 展开更多
关键词 黑曲霉 固相发酵 Β-葡聚糖酶 木聚糖酶
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柠檬酸杆菌N10的分离及其溶藻特性
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作者 孙朋飞 卢丽玲 +1 位作者 王冠 赵宇华 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期613-620,共8页
以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)为溶解对象,利用液体感染分离技术从浙江大学华家池校区湖水样品中分离到1株溶藻菌N10,对其生长及溶藻相关特性进行了研究.结果表明:经过16SrDNA核苷酸序列分析,该菌株属于柠檬酸杆菌属(Citrobacte... 以铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)为溶解对象,利用液体感染分离技术从浙江大学华家池校区湖水样品中分离到1株溶藻菌N10,对其生长及溶藻相关特性进行了研究.结果表明:经过16SrDNA核苷酸序列分析,该菌株属于柠檬酸杆菌属(Citrobacter sp.);当N10无细胞培养物(cell-free culture filtrate,CCF)与铜绿微囊藻液按照体积比为1∶5混合后,在24h内N10CCF对铜绿微囊藻的溶藻率可达到86.55%,并且溶藻率随着溶藻时间的延长而增强,在72h内溶藻率可达到97.08%;对N10生长量影响最大的是pH值,其次是NaCl质量分数,最后是温度,但N10菌株对铜绿微囊藻的溶藻率受培养温度和培养基中NaCl质量分数的影响很小;N10菌株通过分泌一种对高温(115℃)敏感但却能抗蛋白酶K的物质来溶解铜绿微囊藻;透射电子显微镜观察表明,经过N10CCF处理后的藻细胞出现了细胞膜、细胞壁破裂,伪空胞结构、细胞质中磷酸颗粒以及蓝色体等颗粒性物质消失,细胞中的光合片层排列趋于松散且混乱的现象. 展开更多
关键词 柠檬酸杆菌 溶藻细菌 铜绿微囊藻 溶藻特性
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