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用噬菌体展示筛选Gal-α-1,3-Gal的模拟肽 被引量:3
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作者 张晖 詹金彪 +2 位作者 许林海 严志焜 王克夷 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第3期461-465,共5页
猪心移植是解决心脏移植供体少的有效方法 .由于猪心血管内皮细胞表面抗原半乳糖 α 1,3 半乳糖 (Gal α 1,3 Gal) ,能与人体内预存的天然抗体结合产生超急性排斥反应 (HAR) ,而无法应用于临床 .为了解决这一难题 ,应用噬菌体展示技... 猪心移植是解决心脏移植供体少的有效方法 .由于猪心血管内皮细胞表面抗原半乳糖 α 1,3 半乳糖 (Gal α 1,3 Gal) ,能与人体内预存的天然抗体结合产生超急性排斥反应 (HAR) ,而无法应用于临床 .为了解决这一难题 ,应用噬菌体展示技术 ,筛选出一个能与抗B型血单克隆抗体 (mABanti B)特异性结合的阳性噬菌体克隆 ,应用酶联免疫吸附测定 (ELISA)和竞争性ELISA结果表明 ,所获得的阳性噬菌体克隆能特异性地与mABanti B结合 ,并且这种结合可被蜜二糖 (具有Gal α 1,6 Glc的结构 )所竞争抑制 .由此推测 ,筛选到的噬菌体阳性克隆很可能就结合在蜜二糖与mABanti B结合的位点 .同时 ,进行了阳性噬菌体克隆的抑制猪红细胞凝集活性试验 ,试验结果表明 ,此阳性克隆不仅可抑制Gal α 1,3 Gal与抗体的结合 ,也可抑制Gal α 1,3 Gal与西非单叶豆凝集素 (GS I B4)的结合 .此噬菌体阳性克隆测序后 ,得小肽序列为CCWLLRQPVRFVRSIRS .鉴于以上的结果 ,认为此小肽可以作为Gal α 1,3 Gal的模拟肽 。 展开更多
关键词 噬菌体 筛选 Gal-α-1 3-Gal 模拟肽 器官移植
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法夫红酵母高产虾青素菌株的研究进展 被引量:1
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作者 吴江 刘子贻 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2000年第5期236-240,共5页
关键词 法夫红酵母 虾青素菌株 虾青素 人工诱变
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从噬菌体展示随机肽库中筛选豌豆凝集素的结合肽
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作者 周翔 詹金彪 +1 位作者 毛献荣 王克夷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2005年第5期412-416,共5页
目的:从噬菌体展示随机肽库中筛选能与豌豆凝集素(PSA)特异结合的短肽。方法:①用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选;②α-甲基-D-甘露糖苷对筛选出的噬菌体和PSA结合的影响实验(点印迹法);③选择性地合... 目的:从噬菌体展示随机肽库中筛选能与豌豆凝集素(PSA)特异结合的短肽。方法:①用豌豆凝集素(PSA)作为靶蛋白,对噬菌体展示的随机六肽库进行亲和筛选;②α-甲基-D-甘露糖苷对筛选出的噬菌体和PSA结合的影响实验(点印迹法);③选择性地合成了3条6肽ARMWSF、RYDYSY、LRLRQL,用不同浓度的6肽对PSA、ConA与HRP的结合进行竞争抑制实验。结果:经过三轮筛选后,这些噬菌体展示肽有明显的富集,从第三轮挑选的22个克隆的插入氨基酸序列可分为三大类;点印迹结果表明,这些噬菌体展示肽能与PSA特异结合,而α-甲基-D-甘露糖苷不同程度地抑制这种结合;LRLRQL不溶于水,ARMWSF和RYDYSY对PSA和HRP的结合有抑制,而对ConA和HRP的结合没有明显抑制。结论:人工合成的2条6肽和PSA的结合部位与α-甲基-D-甘露糖苷和PSA结合的部位并非相同。 展开更多
关键词 噬菌体 肽库 肽类/分离提纯 模拟肽 外源凝集素类/遗传学 植物 噬菌体展示随机肽库 豌豆凝集素 亲和筛选 结合肽
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芋螺睡眠肽结构和功能研究进展
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作者 冯微宏 詹金彪 朱永平 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2007年第2期204-208,共5页
芋螺睡眠肽是一类与众不同的芋螺毒素,一级结构有高度同源性,它含有丰富的γ-羧基谷氨酸,和其他类芋螺毒素不同的是一般不含二硫键(除了芋螺睡眠肽-R),在结合金属离子后,构像中α-螺旋结构的成分会有不同程度地增加。芋螺睡眠肽是一类... 芋螺睡眠肽是一类与众不同的芋螺毒素,一级结构有高度同源性,它含有丰富的γ-羧基谷氨酸,和其他类芋螺毒素不同的是一般不含二硫键(除了芋螺睡眠肽-R),在结合金属离子后,构像中α-螺旋结构的成分会有不同程度地增加。芋螺睡眠肽是一类非竞争性的N-甲基-D-天门冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体的选择性抑制剂,并且具有受体亚型特异性,颅内注射芋螺睡眠肽后,实验鼠会呈现一种睡眠样症状。序列及结构分析显示,正是芋螺睡眠肽序列中高度保守的氨基酸残基决定了它们的结构及功能,文中对其结构和功能的关系作了综合分析。 展开更多
关键词 软体动物毒液类 芋螺毒素类 芋螺睡眠肽 γ-羧基谷氨酸 NMDA受体 α-螺旋结构
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利用噬菌体展示技术筛选胰岛素模拟肽 被引量:2
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作者 裘锋平 詹金彪 王克夷 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期647-651,共5页
为了寻找能够模拟胰岛素生物活性的小肽,以胰岛素多克隆抗体为靶标,筛选噬菌体展示随机C7C环肽库.3轮筛选后,通过ELISA方法挑取与靶分子特异性结合的15个阳性克隆,测序获得两条序列,分析所得序列并合成相应短肽.通过细胞生物学活性检测... 为了寻找能够模拟胰岛素生物活性的小肽,以胰岛素多克隆抗体为靶标,筛选噬菌体展示随机C7C环肽库.3轮筛选后,通过ELISA方法挑取与靶分子特异性结合的15个阳性克隆,测序获得两条序列,分析所得序列并合成相应短肽.通过细胞生物学活性检测,小肽CPTSQANSC(ZJ1)能够竞争性的抑制胰岛素与其受体的结合,并对正常小鼠和四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠,都有明显的降血糖作用.上述结果表明,小肽CPTSQANSC具有胰岛素样生物学活性.而小肽CVQPSHSSC(ZJ2)表现出胰岛素拮抗活性,能引起正常小鼠血糖升高.这表明筛选到了能够模拟胰岛素表位的短肽CPTSQANSC,可能为治疗胰岛素依赖性糖尿病提供了新线索. 展开更多
关键词 噬菌体展示 胰岛素 糖尿病 模拟肽
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人类天然抗α-Gal抗体抑制肽的筛选
6
作者 张旭 詹金彪 +2 位作者 许林海 严士焜 王克夷 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第8期712-715,共4页
人类天然抗体可以与猪细胞抗原表位Gal α1,3 Gal结合 ,触发超急性排斥反应 (HAR) ,HAR是猪器官移植至人体时的首要障碍 .阻断人的天然抗体 ,阻止其与猪细胞表面特异性抗原的结合 ,是防止超急性排斥的有效措施 .利用噬菌体展示技术 ,从X... 人类天然抗体可以与猪细胞抗原表位Gal α1,3 Gal结合 ,触发超急性排斥反应 (HAR) ,HAR是猪器官移植至人体时的首要障碍 .阻断人的天然抗体 ,阻止其与猪细胞表面特异性抗原的结合 ,是防止超急性排斥的有效措施 .利用噬菌体展示技术 ,从XCX15随机肽库中筛选与西非单叶豆凝集素 (GS I B4)特异性结合的噬菌体展示肽 .得到一个小肽序列为SCTALSFPSFAFLARGT ,其与人血清中天然抗体的结合可以被蜜二糖(melibiose)竞争性地抑制 ,同时该小肽还能抑制人类天然抗体介导的猪红细胞的凝集反应 .因此 ,筛选到的小肽能作为人天然抗α 展开更多
关键词 人类 天然抗体 抗超急性排斥 抗α-Gal抗体 猪细胞表面特异性抗原 器官移植
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眼镜蛇血清解毒蛋白的溴化氰裂解肽段与自身神经毒素的结合
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作者 柴婴蕾 邵靖宇 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期395-398,共4页
目的为进一步认识眼镜蛇血清解毒蛋白(CSAP)如何与神经毒素结合并解毒。方法用溴化氰裂解CSAP肽链中由Met羧基端组成的肽键,裂解产物经超滤除去分子量小于10000的片段后,用亲和层析法得到与毒素仍保持有亲和力的肽... 目的为进一步认识眼镜蛇血清解毒蛋白(CSAP)如何与神经毒素结合并解毒。方法用溴化氰裂解CSAP肽链中由Met羧基端组成的肽键,裂解产物经超滤除去分子量小于10000的片段后,用亲和层析法得到与毒素仍保持有亲和力的肽段。结果与毒素仍保持有亲和力的肽段相当于Lys2-Met485,Lys2-Met275,Lys276-Met485,Pro444-Met603。结论CSAP的3个结构域均具有与毒素分子结合的活性,CSAP结合的8个毒素分子分散在整个肽链的各个段落上。 展开更多
关键词 眼镜蛇 解毒蛋白 CSAP 神经毒素 溴化氰 裂解
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