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浙江省17市县医务人员艾滋病防治知识的调查 被引量:5
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作者 饶和平 吴南屏 +2 位作者 许利军 严正 郑伟 《中国卫生事业管理》 2004年第11期664-665,共2页
目的 :通过调查医务人员对艾滋病防治知识的掌握情况 ,以便对医务人员防治艾滋病的培训提供科学依据。方法 :对浙江省 1 7个市县不同级别医院近千名医务人员采取随机问卷调查。结果 :调查结果显示大多数医务人员对艾滋病的防治知识有较... 目的 :通过调查医务人员对艾滋病防治知识的掌握情况 ,以便对医务人员防治艾滋病的培训提供科学依据。方法 :对浙江省 1 7个市县不同级别医院近千名医务人员采取随机问卷调查。结果 :调查结果显示大多数医务人员对艾滋病的防治知识有较好的了解 ,但对一些基本知识 ,还存在一些欠缺。不同地区、不同医院、及同一医院不同科室人员对艾滋病的防治知识的掌握程度和态度不一致。结论 :对非艾滋病诊疗医院及较低级别的医院的医务人员有待进一步提高艾滋病防治的认识 ,进行分专业、分期分批、有目的培训的必要。 展开更多
关键词 浙江 医务人员 艾滋病 知识 预防 治疗 调查
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人端粒酶逆转录酶和人白细胞介素18融合基因真核表达载体的构建和功能研究 被引量:1
2
作者 童向民 金洁 +2 位作者 姚航平 钱文斌 孟海涛 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2006年第4期360-365,共6页
目的:以基因重组技术在真核细胞中表达人白细胞介素18(hIL-18)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)融合基因,并观察其生物学功能。方法:健康人单核细胞经RT-PCR扩增hIL-18后、T-A克隆。亚克隆至经N heⅠ、H indⅢ酶切的PCDNA 3.1(+)/hTERT中,限... 目的:以基因重组技术在真核细胞中表达人白细胞介素18(hIL-18)和人端粒酶逆转录酶(hTERT)融合基因,并观察其生物学功能。方法:健康人单核细胞经RT-PCR扩增hIL-18后、T-A克隆。亚克隆至经N heⅠ、H indⅢ酶切的PCDNA 3.1(+)/hTERT中,限制性内切酶验证后,挑选出含有目标基因的正确克隆。经限制性内切酶和DNA测序分析两个基因是否已经正确连接到真核表达载体中。将hTERT/hIL-18融合基因质粒脂质体介导转染3T 3细胞中表达,经W estern-b lot验证目的基因表达产物,同时对转染细胞作免疫荧光染色。以EL ISA检测转染细胞刺激KG-1细胞分泌γ干扰素的能力,以流式细胞仪检测转染细胞抗MTX诱导凋亡的能力。结果:hTERT/hIL-18融合基因的真核表达载体PCDNA 3.1(+)构建成功,经限制性内切酶验证和DNA测序及同源性对比分析,该基因片段与NCB I基因库hIL-18和hTERT基因CDS序列同源性均达到99.9%;而细胞转染后经W estern-b lot验证,hTERT/hIL-18融合蛋白的分子量约127 kM r,与预期一致,荧光显微镜观察显示融合蛋白在细胞中弥散表达。此融合蛋白能刺激KG-1细胞分泌γ-干扰素,并具有抗MTX诱导凋亡的生物学功能。结论:本实验构建的PCDNA 3.1(+)/hTERT-hIL-18质粒能够在真核细胞中表达,并具有生物学功能,为进一步转染树突状细胞,研制肿瘤的治疗性疫苗提供基础。 展开更多
关键词 白细胞介素18 端粒 末端转移酶 基因表达 端粒酶逆转录酶 融合 蛋白
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糖尿病大鼠肾小球基质金属蛋白酶2和9的表达 被引量:8
3
作者 董凤芹 李红 +3 位作者 蔡卫民 陶君 郑芬萍 张哲 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 2004年第3期245-249,共5页
目的 :对糖尿病大鼠模型的肾组织中的基质金属蛋白酶 2 ( MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 9( MMP- 9)、 型胶原 ( C- )和转化生长因子 β1( TGF- β1)的表达进行定量和定位研究 ,探讨糖尿病肾病的发病机理。方法 :SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素 ... 目的 :对糖尿病大鼠模型的肾组织中的基质金属蛋白酶 2 ( MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 9( MMP- 9)、 型胶原 ( C- )和转化生长因子 β1( TGF- β1)的表达进行定量和定位研究 ,探讨糖尿病肾病的发病机理。方法 :SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素 ( 70 mg/ kg)诱发糖尿病 ,肾标本行常规病理检查 ,用 MMP- 2、MMP- 9、C- 单克隆抗体及TGF- β1多克隆抗体标记进行免疫组织化学染色、图象分析仪分析。结果 :正常大鼠 MMP- 2、MMP- 9主要表达在肾小球系膜细胞、内皮细胞、包曼氏囊壁层上皮细胞、肾小管上皮细胞 ,偶见浸润的巨噬细胞和中性粒细胞表达。造模后 2、4、8周时糖尿病组大鼠肾小球 MMP- 2较对照组明显下降 ( P<0 .0 5 ) ,而 TGF- β1和 C- 则均较对照组明显上升 ( P<0 .0 5 ) ,且 MMP- 2与 TGF- β1、C- 均呈负相关 ( r=- 0 .4 5、- 0 .6 9,P<0 .0 5 )。肾小球 MMP- 9在三组各时点均未显示显著性差异 ,糖尿病组肾小球 MMP- 9较正常对照组似有升高趋势 ,但无统计学差异 ( P>0 .0 5 )。结论 :糖尿病时伴有肾小球 MMP- 2表达水平的下降可能与 TGF- β1水平的升高有关 ,MMP- 2的减少导致 C- 降解减少 ,可能是引起细胞外基质积聚的原因之一。 展开更多
关键词 糖尿病/并发症 肾病变/病因学 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9 Ⅳ型胶原 转化生长因子Β1
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病毒性心肌炎慢性期Th细胞凋亡蛋白的表达以及清心Ⅱ号的干预作用 被引量:5
4
作者 程志清 刘宏飞 +1 位作者 张娟 姚航平 《中华中医药学刊》 CAS 2007年第6期1098-1100,共3页
目的:初步探讨病毒性心肌炎(Viral Myocarditis VMC)慢性期Th细胞凋亡的部分调控机制,并观察清心Ⅱ号对这一环节的干预作用。课题的完成将为进一步阐明病毒性心肌炎的发病机制及清心Ⅱ号治疗本病的作用机理提供重要的实验依据。方法:按... 目的:初步探讨病毒性心肌炎(Viral Myocarditis VMC)慢性期Th细胞凋亡的部分调控机制,并观察清心Ⅱ号对这一环节的干预作用。课题的完成将为进一步阐明病毒性心肌炎的发病机制及清心Ⅱ号治疗本病的作用机理提供重要的实验依据。方法:按照文献方法建立病毒性心肌炎慢性期小鼠模型后,随机分为模型组和清心Ⅱ号治疗组,正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,治疗组给予清心Ⅱ号水溶液灌胃。疗程结束后分别采集T细胞和Th细胞,透射电镜观察T细胞凋亡;运用流式细胞术检测Th细胞凋亡;并用western-blot技术检测NF-κB,caspase-3,caspase-9蛋白在Th细胞上的表达。结果:(1)在VMC慢性期,各组均可见凋亡的T淋巴细胞,相对而言,模型组凋亡细胞数量较多。(2)与正常组比较,慢性期小鼠Th细胞凋亡显著升高(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠Th细胞凋亡显著下降(P<0.01);治疗组与正常组相比较,两者之间无明显差异(P<0.01)。(3)NF-κB,caspase-3,caspase-9蛋白在Th细胞上的表达:与正常组相比较,模型组小鼠caspase-3,caspase-9和NF-κB蛋白在Th细胞上的表达有极显著差异;与模型组相比较:治疗组caspase-3和NF-κb蛋白表达受到明显抑制;而caspase-9的表达则未受到抑制。结论:病毒性心肌炎小鼠慢性期存在Th细胞过度凋亡的现象;清心Ⅱ号干预后Th细胞过度凋亡的现象受到抑制,这一作用的途径可能是清心Ⅱ号抑制了NF-κB,caspase-3在Th细胞上的表达,但未显示出对cspase-9蛋白表达的抑制。 展开更多
关键词 心肌炎 柯萨奇B3病毒 小鼠 细胞凋亡 清心Ⅱ号
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清心胶囊对病毒性心肌炎不同分期Th细胞分化的影响 被引量:2
5
作者 刘强 程志清 +1 位作者 叶武 姚航平 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期455-459,共5页
目的:观察病毒性心肌炎(VMC)不同分期Th细胞分化的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMC急性期和恢复期BALB/c小鼠模型,给予清心较囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,ELISA法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL... 目的:观察病毒性心肌炎(VMC)不同分期Th细胞分化的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMC急性期和恢复期BALB/c小鼠模型,给予清心较囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,ELISA法检测血清IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-10水平。结果:无论急性期还是恢复期,经清心胶囊治疗后,VMC小鼠心肌病变均明显减轻;VMC小鼠血清中IL-2、IFN-γ水平显著降低(P<0.01,P<0.05),IL-10或IL-4水平显著升高(P<0.05),与正常组比较无显著差异(P>0.05)。结论:清心胶囊能够通过抑制Th1应答,促进Th2应答从而恢复Th1/Th2细胞平衡。 展开更多
关键词 心肌炎 柯萨奇病毒B组 小鼠 Th分化 细胞因子 清心胶囊
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病毒性心肌炎慢性期Th细胞凋亡蛋白的表达以及清心Ⅱ号对它的干预作用 被引量:1
6
作者 程志清 刘宏飞 +1 位作者 张娟 姚航平 《中华中医药学刊》 CAS 2007年第10期1996-1999,共4页
目的:初步探讨病毒性心肌炎(Viral Myocarditis VMC)慢性期Th细胞凋亡的部分调控机制,并观察清心Ⅱ号对这一环节的干预作用。课题的完成为进一步阐明病毒性心肌炎慢性期发病机制及清心Ⅱ号治疗本病的作用机理提供重要的实验依据。方法:... 目的:初步探讨病毒性心肌炎(Viral Myocarditis VMC)慢性期Th细胞凋亡的部分调控机制,并观察清心Ⅱ号对这一环节的干预作用。课题的完成为进一步阐明病毒性心肌炎慢性期发病机制及清心Ⅱ号治疗本病的作用机理提供重要的实验依据。方法:按照文献方法建立病毒性心肌炎慢性期小鼠模型后,随机分为模型组和清心Ⅱ号治疗组,正常组和模型组给予蒸馏水灌胃,治疗组给予清心Ⅱ号水溶液灌胃。疗程结束后分别采集T细胞和Th细胞,透射电镜观T细胞凋亡;运用流式细胞术检测Th细胞凋亡;并用western-blot技术检测NF-κB,caspase-3-9蛋白在Th细胞上的表达。结果:在VMC慢性期,各组均可见凋亡的T淋巴细胞,相对而言,模型组凋亡细胞数量较多。②与正常组比较,慢性期小鼠Th细胞凋亡有显著差异(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠Th细胞凋亡也有显著差异(P<0.01);治疗组与正常组相比较,两者之间无明显差异(P>0.05)。③NF-κb,caspase-3-9蛋白在Th细胞上的表达:与正常组相比较,模型组小鼠caspase-3caspase-9和NF-κB蛋白在Th细胞上的表达有极显著差异;与模型组相比较:治疗组caspase-3和NF-κB蛋白表达受到明显抑制;而caspase-9的表达则未受到抑制。结论:病毒性心肌炎小鼠慢性期存在Th细胞过度凋亡的现象;清心Ⅱ号干预后Th细胞过度凋亡的现象受到抑制,这一作用的途径可能是清心Ⅱ号抑制了NF-κB,caspase-3在Th细胞上的表达,但未显示出对caspase-9蛋白表达的抑制。 展开更多
关键词 心肌炎 柯萨奇B3病毒 小鼠 细胞凋亡 清心Ⅱ号
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病毒性心肌炎小鼠T淋巴细胞凋亡的调控与清心胶囊的干预作用 被引量:2
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作者 刘强 程志清 +1 位作者 叶武 姚航平 《中医药学刊》 2005年第6期1001-1004,共4页
目的:观察病毒性心肌炎(VMC)T细胞凋亡与凋亡蛋白表达的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMCBALB/c小鼠模型,给予清心胶囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,Annexinv/PI双染色流式细胞术和透射电镜观察T淋巴... 目的:观察病毒性心肌炎(VMC)T细胞凋亡与凋亡蛋白表达的变化以及清心胶囊对这一环节的干预作用。方法:复制VMCBALB/c小鼠模型,给予清心胶囊治疗后,采用光镜和透射电镜观察心肌病理改变,Annexinv/PI双染色流式细胞术和透射电镜观察T淋巴细胞凋亡;流式细胞术检测Fas、FasL、bcl-2及Bax蛋白在T细胞上的表达。结果:(1)模型组小鼠心肌病变明显,治疗组心肌病理改变明显减轻,正常组心肌无明显病理改变。(2)与正常组比较,VMC小鼠脾T细胞的凋亡率均显著升高(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠脾T细胞的凋亡率均显著降低(P<0.01),但与正常组比较,仍有显著性差异(P<0.01)。透射电镜下可见正常T细胞和凋亡T细胞的典型形态,模型组T细胞凋亡增多。(3)与正常组比较,模型组小鼠脾T细胞Fas、FaSL表达均显著升高(P<0.01)lbcl-2表达均显著降低(P<0.01);与模型组比较,治疗组小鼠脾T细胞FasL表达均显著降低(P<0.01),bcl-2表达均显著升高(P<O.01、),Fas表达无统计学差异(P>0.05);与正常组比较,治疗组小鼠脾T细胞FaSL表达无显著性差异(P>0.05),Fas、bcl-2表达仍有显著性差异(P<0.05);而Bax表达各组间均无显著性差异(P>0.05)。结论:VMC发病过程中存在T细胞过度凋亡现象,这与Fas、FasL表达升高和bcl-2表达降低有关;清心胶囊能够显著抑制T细胞的过度凋亡,与其下调FasL表达和上调bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎 T淋巴细胞 细胞凋亡 凋亡蛋白 清心胶囊
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人胃癌组织中基质金属蛋白酶7的基因表达及意义 被引量:3
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作者 杜月光 陈慰浙 +2 位作者 陈智 孔梅 万海同 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2003年第3期201-203,共3页
目的 :研究基质金属蛋白酶 7基因 (MMP 7)在胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞中的表达情况 ,探讨其临床意义。方法 :用RT PCR及凝胶成像仪检测MMP 7mRNA表达 ,用改良的BoydenChamber检测肿瘤细胞的侵袭能力。结果 :①MMP 7mRNA在胃癌... 目的 :研究基质金属蛋白酶 7基因 (MMP 7)在胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞中的表达情况 ,探讨其临床意义。方法 :用RT PCR及凝胶成像仪检测MMP 7mRNA表达 ,用改良的BoydenChamber检测肿瘤细胞的侵袭能力。结果 :①MMP 7mRNA在胃癌组织中表达的阳性率为 60 % ,正常组织中表达的阳性率为 1 1 % ,肿瘤组织MMP 7mRNA表达量 (MMP 7/ β actin光密度平均比值为 0 .62 7± 0 .2 76)显著地高于正常组织 (为 0 2 37±0 1 2 ) (P <0 .0 5) ,同时有淋巴结转移的癌组织表达增高更为显著 ;②分化程度低的MGC 80 2、KATOⅢ、SGC 790 1细胞株MMP 7mRNA表达强阳性 ,而分化程度高的MKN2 8细胞株表达弱阳性 ;③转染了MMP7 asODN的KATOⅢ穿过膜的细胞数 (1 5 .6± 1 .2 1 )明显低于对照组、PS sODN组及PS mODN组 (分别为 75 .4± 6 .1 6、53 .8± 7.32、58.4± 5 .87) (P <0 .0 5)。结论 :MMP 7基因在胃癌组织中表达明显升高 ;分化低的细胞表达强阳性 ,而分化高的细胞表达弱阳性 ;MMP7反义寡核苷酸可明显降低肿瘤细胞的侵袭能力。MMP7在肿瘤浸润与转移中起作用。 展开更多
关键词 胃癌 基质金属蛋白酶7 基因表达 癌组织 癌细胞
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