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PI3K/Akt调控内质网应激对GRP78的诱导被引量：32: 1; 作者刘友平严冬梅 +4 位作者陈川宁段春燕陈绍坤李洪代荣阳《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期749-754,共6页; 目的:研究内质网应激条件下PI3K/Akt信号通路对HEK293细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的调控作用。方法:采用PI3K抑制剂LY294002、Akt1失活型突变载体Akt1(K179M)及Akt siRNAs阻断内质网应激介导的Akt活化,采用Akt激活型突变载体... 展开更多; 关键词 PI3K/AKT 葡萄糖调节蛋白质78 内质网应激 HEK293细胞; 在线阅读下载PDF 职称材料

hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用被引量：5: 2; 作者张志宏曾永秋 +3 位作者税青林田强黄燕赵小平《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期561-564,共4页; 目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTC... 展开更多; 关键词 RNA干扰 SIRNA表达载体基因 hTERT 细胞凋亡; 在线阅读下载PDF 职称材料

siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究被引量：4: 3; 作者赵矫曾永秋 +3 位作者税青林赵小平刘岚陈绍坤《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期246-249,共4页; 目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体... 展开更多; 关键词 RNA 小分子干扰基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应被引量：3: 4; 作者曾永秋税青林 +3 位作者赵矫张志宏余红赵小平《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期857-862,共6页; 为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆... 展开更多; 关键词 SIRNA HTERT基因位置效应时间效应; 在线阅读下载PDF 职称材料

miR-26a mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析被引量：4: 5; 作者刘友平李娟 +5 位作者代荣阳段春燕陈绍坤严冬梅陈川宁李洪《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期367-370,374,共5页; 目的:通过分析microRNA-26a(miR-26a)mimics转染对人肝癌细胞株HepG2表达蛋白质组的影响,以确定miR-26a与肝癌发生发展的相关性。方法:常规培养人肝癌细胞株HepG2,经miR-26a mimics转染48 h后进行细胞周期分析,并裂解转染72 h的HepG2细... 展开更多; 关键词 miR-26a MIMICS 微小RNA HEPG2细胞蛋白质组; 在线阅读下载PDF 职称材料

双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究: 6; 作者刘岚陈绍坤 +2 位作者税青林曾永秋余红《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期749-754,共6页; 背景与目的:肿瘤细胞具有端粒酶高表达及端粒稳定性强两大特点。人端粒酶逆转录酶(hTERT@是端粒酶的催化亚单位,端粒重复序列结合因子2(TRF2@对维持端粒长度及端粒稳定性非常重要。本实验研究针对hTERT和TRF2的特异性RNAi腺病毒表达载... 展开更多; 关键词 HTERT TRF2 RNA干扰基因治疗肿瘤; 在线阅读下载PDF 职称材料

Dicer蛋白的晶体结构及其功能: 7; 作者张志宏税青林《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期648-649,共2页; 关键词 RNA干扰 Dicer蛋白核糖核酸酶类; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名PI3K/Akt调控内质网应激对GRP78的诱导被引量：32: 1; 作者刘友平严冬梅陈川宁段春燕陈绍坤李洪代荣阳; 机构泸州医学院生物化学教研室泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期749-754,共6页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81000886) 四川省教育厅科技基金资助项目(No.09ZA050) 四川省卫生厅科技基金资助项目(No.2007-431); 文摘目的:研究内质网应激条件下PI3K/Akt信号通路对HEK293细胞中葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达水平的调控作用。方法:采用PI3K抑制剂LY294002、Akt1失活型突变载体Akt1(K179M)及Akt siRNAs阻断内质网应激介导的Akt活化,采用Akt激活型突变载体Myr-Akt过度激活内质网应激介导的Akt活化,并利用RT-PCR和Western blotting技术分析内质网应激条件下PI3K/Akt信号途径对HEK293细胞中GRP78表达水平的调控作用。结果:LY294002、Akt1(K179M)及Akt1 siRNA均明显抑制了内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt1明显促进内质网应激对GRP78的诱导。Myr-Akt2/3及Akt2/3 siRNA对GRP78的诱导均无影响。PI3K/Akt信号通路阻断或过度激活对GRP78 mRNA水平的诱导无影响,但是对GRP78的降解有显著影响。结论:HEK293细胞中,PI3K/Akt通过蛋白稳定性调节促进内质网应激对GRP78的诱导。; 关键词 PI3K/AKT 葡萄糖调节蛋白质78 内质网应激 HEK293细胞; Keywords PI3K/Akt Glucose-regulated protein 78 Endoplasmic reticulum stress HEK293 cells; 分类号 R735.7 [医药卫生—肿瘤] Q255 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用被引量：5: 2; 作者张志宏曾永秋税青林田强黄燕赵小平; 机构泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期561-564,共4页; 基金四川省应用基础研究项目(04JY029-020-1); 文摘目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,并研究该载体对乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性及细胞增殖的影响,为针对端粒酶的乳腺癌基因治疗提供新的途径。方法设计针对人端粒酶逆转录酶催化亚基(hTERT)的干扰靶序列TGTTCAGCGTGCTCAACTA,构建重组siRNA表达质粒pGenesil-hTERT,同时构建不针对任何基因的阴性对照重组pGenesil-HK。两种重组质粒经酶切、电泳分析和测序鉴定后,用脂质体转染法分别转染乳腺癌MCF-7细胞,应用端粒酶重复序列扩增聚合酶链反应(TRAP-PCR)及聚丙烯酰胺凝胶电泳检测端粒酶活性,流式细胞仪测定细胞凋亡率。结果酶切电泳测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。转染pGenesil-hTERT的MCF-7细胞,凝胶电泳见端粒酶特征性条带明显减少,端粒酶活性受到明显抑制;pGenesil-hTERT转染细胞后凋亡率较对照组明显升高(P<0.01),且转染48h凋亡率最高,达54.7%±2.41%。结论hTERT-siRNA可有效抑制乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性、促进细胞凋亡,此法有望应用于肿瘤基因治疗。; 关键词 RNA干扰 SIRNA表达载体基因 hTERT 细胞凋亡; Keywords RNA interference siRNA expression vector genes, hTERT apoptosis; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究被引量：4: 3; 作者赵矫曾永秋税青林赵小平刘岚陈绍坤; 机构泸州医学院生物学与遗传学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期246-249,共4页; 基金四川省应用基础研究项目(04JY029-020-1); 文摘目的构建人端粒酶反转录酶(hTERT)基因的RNA干扰(RNAi)表达载体,探讨该载体对人乳腺癌MCF-7细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法设计针对hTERT基因的干扰靶序列,构建siRNA重组表达质粒pGenesil-hTERT,将该质粒酶切测序鉴定后,以脂质体转染MCF-7细胞,RT-PCR和Western blot技术分别检测hTERT基因及其蛋白的表达,MTT法观察转染后MCF-7细胞生长情况。结果酶切电泳和测序分析表明插入序列正确,重组质粒构建成功。该质粒转染MCF-7细胞后,hTERT基因mRNA和蛋白质的表达水平均显著降低,MCF-7细胞生长抑制。结论内源性短发夹状siRNA能有效抑制hTERT基因的表达,进而抑制乳腺癌MCF-7细胞的增殖生长,这也为肿瘤的基因治疗提供了实验依据。; 关键词 RNA 小分子干扰基因表达; Keywords RNA, small interfering gene expression; 分类号 R737.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应被引量：3: 4; 作者曾永秋税青林赵矫张志宏余红赵小平; 机构四川省泸州医学院医学生物学与遗传学教研室四川省泸州医学院医学生物学与遗传学教研室泸; 出处《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期857-862,共6页; 基金四川省教育厅课题项目(编号:04JY029-020-1)资助~~; 文摘为了探讨不同位点siRNA在不同时间点对人乳腺癌细胞系MCF-7细胞中hTERT mRNA表达的抑制作用,设计并化学合成4对针对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的特异性siRNA。以脂质体法转染入MCF-7细胞,在转染后12h、24h、48h、72h和5d,用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞中hTERT mRNA的表达。与对照组相比,4段siRNA中有3段在转染后12h即对hTERT mRNA的表达产生抑制,48h抑制率最高,72h后下降,其中位于hTERT mRNA二级结构中的结构相对简单区域的siRNA抑制率最高,达到75%,说明特异性siRNA对hTERT基因有明显的抑制效果,且该抑制效应具有位置及时间依赖性。; 关键词 SIRNA HTERT基因位置效应时间效应; Keywords siRNA hTERT gene position effect time effect; 分类号 Q3 [生物学—遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名miR-26a mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析被引量：4: 5; 作者刘友平李娟代荣阳段春燕陈绍坤严冬梅陈川宁李洪; 机构泸州医学院生物化学教研室泸州医学院人类疾病细胞信号与调控四川省高校重点实验室泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期367-370,374,共5页; 基金国家自然科学基金资助项目(No.81000886) 四川省教育厅科技基金资助项目(No.09ZA050) 四川省卫生厅科技基金资助项目(No.2007-431); 文摘目的:通过分析microRNA-26a(miR-26a)mimics转染对人肝癌细胞株HepG2表达蛋白质组的影响,以确定miR-26a与肝癌发生发展的相关性。方法:常规培养人肝癌细胞株HepG2,经miR-26a mimics转染48 h后进行细胞周期分析,并裂解转染72 h的HepG2细胞提取蛋白,双向电泳分离,匹配对比各蛋白斑点的表达量,筛选主要差异表达蛋白进行质谱鉴定。结果:HepG2细胞经miR-26a mimics转染后细胞增殖受到抑制;其蛋白2-DE图谱与对照组比较,差异表达超过2倍的蛋白斑点有11个。其中,有3个蛋白斑点为表达上调,有8个蛋白斑点为表达下调。质谱鉴定为:膜联蛋白A1、过氧化物酶4、增殖细胞核抗原、载脂蛋白A1、细胞色素C氧化酶5a、细胞周期蛋白E2、磷酸核糖焦磷酸激酶3、周期素依赖性蛋白激酶1和磷脂酰乙醇胺结合蛋白。结论:miR-26a可能通过影响上述蛋白分子的表达,直接或间接地调控HepG2肝癌细胞的增殖、分化和死亡,以发挥其抗癌作用。; 关键词 miR-26a MIMICS 微小RNA HEPG2细胞蛋白质组; Keywords miR - 26a mimics microRNA HepG2 cells Proteome; 分类号 Q291 [生物学—细胞生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究: 6; 作者刘岚陈绍坤税青林曾永秋余红; 机构四川泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期749-754,共6页; 基金四川省教育厅自然基金重点资助项目(No:2006A054); 文摘背景与目的:肿瘤细胞具有端粒酶高表达及端粒稳定性强两大特点。人端粒酶逆转录酶(hTERT@是端粒酶的催化亚单位,端粒重复序列结合因子2(TRF2@对维持端粒长度及端粒稳定性非常重要。本实验研究针对hTERT和TRF2的特异性RNAi腺病毒表达载体单独和联合转染乳腺癌MCF-7细胞后,对两基因的抑制效率以及对细胞凋亡的影响,探索针对端粒的多基因干扰对乳腺癌基因治疗的可行性。方法:构建RNA干扰腺病毒载体rAd-hTERT和rAd-TRF2,单独和联合转染MCF-7细胞后实时荧光定量PCR检测hTERT和TRF2基因表达情况,流式细胞仪检测各组细胞凋亡率。结果:①转染后48h,与PBS组相比,rAd-hTERT对hTERT基因mRNA的抑制率约86%,对TRF2基因表达无明显抑制(P>0.05@;rAd-TRF2对TRF2基因mRNA的抑制率约80%,对hTERT基因表达无明显抑制(P>0.05@;rAd-hTERT/rAd-TRF2联合干扰组对hTERT基因表达抑制率约88%,TRF2基因表达抑制率约85%,联合干扰与单基因干扰相比,对hTERT和TRF2基因的表达抑制差异无显著性(P>0.05@。②干扰组转染后1～6d均能促进细胞凋亡。单基因干扰组转染后3～5d凋亡最明显,第5天达凋亡高峰;凋亡率rAd-hTERT组为46.2%,rAd-TRF2组为43.5%。联合组转染后第1天凋亡率为46.2%,第2天为68.5%,第3～6天均维持在较高水平,第6天达77.6%。转染后1～6d,联合干扰细胞凋亡率与单基因干扰细胞凋亡率相比,差异均有显著性(P<0.05@。结论:①rAd-hTERT和rAd-TRF2转染MCF-7细胞48h后可分别显著抑制hTERT和TRF2基因mRNA表达,但rAd-hTERT和rAd-TRF2在抑制hTERT和TRF2基因mRNA表达上无相互协同或相互抑制作用。②rAd-hTERT和rAd-TRF2均能有效促进MCF-7细胞凋亡,且两者联合干扰效果具有累加效应。因此利用联合干扰技术靶向抑制端粒酶活性和端粒稳定性相关的多基因的表达能更高效地促进乳腺癌细胞凋亡,抑制肿瘤细胞的增殖与生长。; 关键词 HTERT TRF2 RNA干扰基因治疗肿瘤; Keywords hTERT TRF2 RNA interference gene therapy tumor; 分类号 R73-362 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Dicer蛋白的晶体结构及其功能: 7; 作者张志宏税青林; 机构泸州医学院医学生物学与遗传学教研室; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期648-649,共2页; 关键词 RNA干扰 Dicer蛋白核糖核酸酶类; 分类号 Q7 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	PI3K/Akt调控内质网应激对GRP78的诱导	刘友平严冬梅陈川宁段春燕陈绍坤李洪代荣阳	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	32	在线阅读下载PDF 职称材料
2	hTERT-siRNA表达载体的构建及对MCF-7细胞生长、端粒酶活性的抑制作用	张志宏曾永秋税青林田强黄燕赵小平	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	5	在线阅读下载PDF 职称材料
3	siRNA表达载体对MCF-7细胞生长及其hTERT基因表达抑制的研究	赵矫曾永秋税青林赵小平刘岚陈绍坤	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2008	4	在线阅读下载PDF 职称材料
4	特异性siRNA抑制hTERT基因表达的位置及时间效应	曾永秋税青林赵矫张志宏余红赵小平	《遗传》 CAS CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
5	miR-26a mimics转染人肝癌细胞株HepG2的表达蛋白质组分析	刘友平李娟代荣阳段春燕陈绍坤严冬梅陈川宁李洪	《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心	2011	4	在线阅读下载PDF 职称材料
6	双基因干扰对MCF-7细胞基因表达抑制及细胞凋亡影响的研究	刘岚陈绍坤税青林曾永秋余红	《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	Dicer蛋白的晶体结构及其功能	张志宏税青林	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料