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β-catenin拮抗因子Chibby对人喉癌细胞Hep-2增殖凋亡的影响 被引量:1
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作者 任刚 赵德安 +1 位作者 周燚 蔡成福 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期276-282,共7页
背景与目的:Wnt信号通路与肿瘤的发生、发展密切相关,Chibby是该信号通路β-catenin的拮抗因子,通过对β-catenin的拮抗,阻止异常Wnt信号,从而可能抑制肿瘤的发生、发展。该研究旨在探讨Chibby对喉癌细胞Hep-2增殖凋亡的影响。方法:采... 背景与目的:Wnt信号通路与肿瘤的发生、发展密切相关,Chibby是该信号通路β-catenin的拮抗因子,通过对β-catenin的拮抗,阻止异常Wnt信号,从而可能抑制肿瘤的发生、发展。该研究旨在探讨Chibby对喉癌细胞Hep-2增殖凋亡的影响。方法:采用基因工程技术,构建重组质粒plv-cs2.0-Chibby,经酶切鉴定及序列测定后,转染293FT细胞进行病毒包装、扩增,该重组慢病毒感染喉癌细胞Hep-2后,经puromycin筛选后建立稳定表达Chibby的Hep-2细胞系。采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,realtime qPCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测重组慢病毒感染Hep-2细胞后Chibby的表达情况,MTT比色法检测细胞的增殖能力,流式细胞术检测细胞周期的变化,TUNEL检测细胞的凋亡情况。结果:重组质粒酶切后得到与理论大小相符的基因片段,序列测定与GenBank公布的一致。重组慢病毒感染Hep-2细胞后Chibby的表达水平显著提高(P<0.01)。与对照组及plv-cs2.0组相比较,plv-cs2.0-Chibby组细胞的增殖能力明显减弱(P<0.05);细胞滞留在G1期,而S期细胞明显减少(P<0.05);同时促使了Hep-2细胞的凋亡(P<0.05)。结论:Chibby过表达后抑制了喉癌细胞Hep-2的增殖能力,促使了喉癌细胞的凋亡,为喉癌的基因治疗奠定了基础。 展开更多
关键词 Chibby 喉癌 WNT信号 Β-CATENIN
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