杂色曲霉产葡聚糖内切酶条件优化及酶学性质初步研究

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作者 付跃 陆桂雅 +3 位作者 黄玲胜 易群 梁彩荣 罗奉奉 《中国饲料》 北大核心 2025年第9期45-50,共6页

本研究采用单因素试验和正交试验对杂色曲霉产葡聚糖内切酶发酵条件进行优化,并对其酶学性质进行初步探究,旨在为木质纤维素类生物质在饲料领域中的应用提供数据支撑。优化后的发酵条件为:蔗渣与麸皮比例4:3,硫酸铵添加量2%,发酵温度28... 本研究采用单因素试验和正交试验对杂色曲霉产葡聚糖内切酶发酵条件进行优化,并对其酶学性质进行初步探究,旨在为木质纤维素类生物质在饲料领域中的应用提供数据支撑。优化后的发酵条件为:蔗渣与麸皮比例4:3,硫酸铵添加量2%,发酵温度28℃,发酵时间4 d,在此条件下葡聚糖内切酶酶活为37.92 U/mL,比优化前提高了1.64倍。酶学性质研究结果表明:杂色曲霉产葡聚糖内切酶的最适温度为55℃,在温度35~55℃内是稳定的。最适pH为4,在pH为4~6内是稳定的。Ca^(2+)、Ba^(2+)对葡聚糖内切酶酶活有促进作用,Co^(2+)和Mg^(2+)具有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 杂色曲霉 葡聚糖内切酶 产酶条件优化 酶学性质

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杂色曲霉β-葡萄糖苷酶分离纯化及酶学性质研究

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作者 付跃 李书安 +1 位作者 石娟娟 罗奉奉 《中国饲料》 北大核心 2024年第13期48-54,共7页

试验旨在从杂色曲霉发酵液中分离纯化β-葡萄糖苷酶,并对其进行酶学性质研究。利用ENrich Q,10×100离子交换色谱法对杂色曲霉产β-葡萄糖苷酶分离纯化,采用SDS-PAGE测定其分子质量。结果表明:该β-葡萄糖苷酶的分子质量约为88.5 k... 试验旨在从杂色曲霉发酵液中分离纯化β-葡萄糖苷酶,并对其进行酶学性质研究。利用ENrich Q,10×100离子交换色谱法对杂色曲霉产β-葡萄糖苷酶分离纯化,采用SDS-PAGE测定其分子质量。结果表明:该β-葡萄糖苷酶的分子质量约为88.5 kDa,纯化倍数为53.44,回收率为70.78%,比酶活为1438.11 U/mg。该β-葡萄糖苷酶最适反应温度为50℃,最适反应pH为5.5;在温度20~50℃,pH 5.0~7.0时有较好的稳定性。Mn^(2+)对该酶具有明显的促进作用;Co^(2+)、Cu^(2+)、Cd^(2+)对该酶表现出抑制作用;而Na^(+)、Mg^(2+)、K^(+)、Ca^(2+)、Ba^(2+)对该酶无明显影响。该酶以水杨苷为底物时,米氏常数K_(m)为0.48 mg/mL,最大反应速率V_(m)为0.04 mg/(min·mL)。试验从杂色曲霉发酵液中成功分离出一种β-葡萄糖苷酶,为纤维素类饲料的应用提供了数据支撑。 展开更多

关键词 杂色曲霉 Β-葡萄糖苷酶 分离纯化 酶学性质

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产农用抗生素的菌种筛选鉴定及活性产物的初步研究 被引量：3

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作者 何海燕 黄舒琳 +3 位作者 李东霖 黄琦琦 黄智娴 覃拥灵 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第18期67-72,共6页

试验从土壤中采样筛选获得具有抗菌活性的高拮抗菌株,并对发酵活性产物进行初步抑菌研究。结果显示,编号为LP10菌株发酵液对指示菌均有良好的抑菌效果。经过形态特征、生理生化和16S rDNA比对建立进化树鉴定,确定此菌为陶氏芽孢杆菌。... 试验从土壤中采样筛选获得具有抗菌活性的高拮抗菌株,并对发酵活性产物进行初步抑菌研究。结果显示,编号为LP10菌株发酵液对指示菌均有良好的抑菌效果。经过形态特征、生理生化和16S rDNA比对建立进化树鉴定,确定此菌为陶氏芽孢杆菌。研究表明,抑菌物质在30℃时活性最强,90℃以下较稳定,pH值8时活性最强,紫外时间6 h活性最强,最佳储藏温度25℃,在苯溶剂中活性物质溶解度较大。 展开更多

关键词 抗生素 筛选 鉴定 陶氏芽孢杆菌 优化

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产耐高温木聚糖酶菌株的筛选鉴定及酶学性质初步研究 被引量：2

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作者 何海燕 凌新 +2 位作者 黄琦琦 黄智娴 覃拥灵 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第20期60-63,共4页

研究采用透明圈法筛选1株耐高温木聚糖酶产生菌TP-1。通过菌落特征观察、显微镜观察和ITS序列分析,鉴定为杜邦嗜热菌。结果显示,经酶学性质初步研究杜邦嗜热菌TP-1所产的木聚糖酶的最佳作用温度为60℃,最佳反应pH值为5,最适条件下测得... 研究采用透明圈法筛选1株耐高温木聚糖酶产生菌TP-1。通过菌落特征观察、显微镜观察和ITS序列分析,鉴定为杜邦嗜热菌。结果显示,经酶学性质初步研究杜邦嗜热菌TP-1所产的木聚糖酶的最佳作用温度为60℃,最佳反应pH值为5,最适条件下测得酶活为75.96 U/g。pH值4、60℃条件下保温2 h,该酶仍可保持较高活性。研究表明,Fe^(2+)、Ba^(2+)、Mn^(2+)对木聚糖酶酶活具有明显的提升作用,Co^(2+)能够降低酶活。该酶在饲料加工行业具有较好应用前景。 展开更多

关键词 木聚糖酶 筛选 鉴定 杜邦嗜热菌 酶学性质

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基于网络药理学的山豆根抗癌机制研究 被引量：6

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作者 汪艳平 韦正 +4 位作者 蒋利荣 张鹏 陈海林 符益山 覃拥灵 《安徽农业科学》 CAS 2021年第17期165-169,220,共6页

[目的]运用网络药理学反向分子对接的原理,对山豆根抑癌作用机制进行预测。[方法]筛选山豆根化学成分25个,通过PharmMapper数据库查找相关靶点,NCBI数据库进行靶点的校正,利用DAVID数据库筛选药物的KEGG通路,运用cytoscape建立山豆根的... [目的]运用网络药理学反向分子对接的原理,对山豆根抑癌作用机制进行预测。[方法]筛选山豆根化学成分25个,通过PharmMapper数据库查找相关靶点,NCBI数据库进行靶点的校正,利用DAVID数据库筛选药物的KEGG通路,运用cytoscape建立山豆根的“药材-化学成分-靶点-作用通路-药理作用-临床应用”多层次作用网络图。[结果]山豆根的25个化学成分可调控CTBP2、CDKN1B、ABL1等51个靶点,得到相关通路25条,涉及癌症、炎症、肝病、心血管病等疾病,其中10条通路与癌症相关。[结论]通过网络药理学的分析方法,预测了山豆根的抗癌作用机制,为深入研究山豆根的药理作用提供方向。 展开更多

关键词 山豆根 网络药理学 抗癌 作用通路

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芽枝霉菌Lcxs9产两种耐热β-葡萄糖苷酶的快速纯化及酶学特性研究 被引量：3

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作者 何海燕 黄琦琦 +2 位作者 黄智娴 罗艳妹 覃拥灵 《中国酿造》 CAS 北大核心 2022年第7期76-81,共6页

以高产β-葡萄糖苷酶的芽枝霉菌(Cladosporium cladosporioides)Lcxs9为研究对象,对其进行固态发酵,采用硫酸铵沉淀及强阴离子交换柱对其所产β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测其分子质量... 以高产β-葡萄糖苷酶的芽枝霉菌(Cladosporium cladosporioides)Lcxs9为研究对象,对其进行固态发酵,采用硫酸铵沉淀及强阴离子交换柱对其所产β-葡萄糖苷酶进行分离纯化,通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测其分子质量,并研究其酶学性质。结果表明,快速纯化获得两种β-葡萄糖苷酶,分别命名为BG CC1和BG CC2,分子质量分别为41 kDa、53 kDa,比酶活力分别为8.6 U/mg、12.2 U/mg。两种酶都具有水解活性,可以水解纤维二糖得到葡萄糖;同时具有转苷活性,可以利用低分子质量的单糖合成纤维三糖和纤维四糖。两种酶的最适作用pH及温度均分别为6.0、60℃,均在pH 4~10和20~80℃条件下较稳定,Ag^(2+)、Co^(2+)、Cu^(2+)、Hg^(2+)对两种酶均有抑制作用,而Mn^(2+)、Ca^(2+)和Mg^(2+)均有明显的激活作用,Zn^(2+)和Ni^(+)无明显影响。利用4-硝基苯基-β-D-吡喃葡萄糖苷(pNPG)为底物,两种酶的动力学常数Km和最大反应速率(V_(max))均分别为2.76 mg/mL、20.6 U/mg。 展开更多

关键词 芽枝霉菌Lcxs9 Β-葡萄糖苷酶 纯化 酶学性质 耐热性 水解活性 转苷活性

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沙福芽孢杆菌G7-7碱性果胶酶纯化及酶学性质研究 被引量：4

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作者 何海燕 何丽妃 +2 位作者 罗艳妹 付跃 覃拥灵 《饲料研究》 CAS 北大核心 2021年第9期80-83,共4页

通过硫酸铵盐析、Mono Q阴离子交换层析技术,对1株来自沙福芽孢杆菌G7-7所产果胶酶进行分离纯化,得到分子质量为57 kDa电泳纯的果胶酶。结果显示,发酵上清液经两步分离纯化后,活力达6.6 U/mg,纯化回收率为30.3%,纯化倍数为3.7。果胶酶... 通过硫酸铵盐析、Mono Q阴离子交换层析技术,对1株来自沙福芽孢杆菌G7-7所产果胶酶进行分离纯化,得到分子质量为57 kDa电泳纯的果胶酶。结果显示,发酵上清液经两步分离纯化后,活力达6.6 U/mg,纯化回收率为30.3%,纯化倍数为3.7。果胶酶最适的作用温度36℃,50℃以下稳定;最适pH值9.5,pH值7~11稳定,为碱性果胶酶。纯化的果胶酶Km=8.75 g/L,Vmax=60.24μg/(min·mL)。 展开更多

关键词 沙福芽孢杆菌G7-7 果胶酶 耐热 纯化 酶学性质

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蔗渣纤维素预处理及纤维素酶混合发酵研究 被引量：2

8

作者 黄琦琦 黄智娴 +3 位作者 张健 付跃 何海燕 覃拥灵 《饲料研究》 CAS 北大核心 2022年第14期69-73,共5页

试验旨在研究蔗渣纤维素预处理方法,优化纤维素酶系组成,提高产酶量。试验使用甘蔗渣为原料,经过微波、磷酸和蒸汽爆破预处理蔗渣纤维素。结果显示:厚垣镰孢霉HML278产纤维素酶及半纤维素酶酶活均有提高,滤纸酶酶活比未处理材料提高了1... 试验旨在研究蔗渣纤维素预处理方法,优化纤维素酶系组成,提高产酶量。试验使用甘蔗渣为原料,经过微波、磷酸和蒸汽爆破预处理蔗渣纤维素。结果显示:厚垣镰孢霉HML278产纤维素酶及半纤维素酶酶活均有提高,滤纸酶酶活比未处理材料提高了1.02倍,处理后酶解葡萄糖比未处理蔗渣提高100%。米曲霉HML366可以产高转苷活性的β-葡萄糖苷酶,合成龙胆二糖,龙胆二糖可以诱导厚垣镰孢霉HML278产纤维素酶。厚垣镰孢霉HML278和米曲霉HML366菌种兼容性较好,混合发酵优化纤维素酶系组成,比厚垣镰孢霉HML278单独发酵滤纸酶活酶活提高了83.62%,β-葡萄糖苷酶比米曲霉HML366单一培养酶活提高93.09%。研究表明,米曲霉HML366和厚垣镰孢霉HML278混合培养产酶效果优于单一菌种培养产酶。 展开更多

关键词 蔗渣 纤维素酶 龙胆二糖 混合发酵

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缫丝废水发酵产果胶酶的条件优化研究 被引量：2

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作者 何海燕 付跃 覃拥灵 《中国饲料》 北大核心 2021年第5期28-31,共4页

果胶酶制剂能够有效地提高饲养动物对营养物质的消化吸收率,是一种绿色饲料添加剂。缫丝废水是缫丝厂的主要排放物,是一种无毒、含氮和磷较高的有机废水。本研究以前期选育所得高产果胶酶菌株沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)G7-7作为... 果胶酶制剂能够有效地提高饲养动物对营养物质的消化吸收率,是一种绿色饲料添加剂。缫丝废水是缫丝厂的主要排放物,是一种无毒、含氮和磷较高的有机废水。本研究以前期选育所得高产果胶酶菌株沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)G7-7作为试验菌株,利用缫丝废水为主要发酵原料,对产果胶酶条件进行优化。通过单因素试验和正交试验得出该菌株的最佳产酶条件为:以5%蚕沙为产酶诱导物,发酵液蔗糖添加量1.1%,接种量16%,发酵液初始pH 9.5,36℃发酵84 h。在此条件下菌株的产果胶酶能力可达到21.84 U/mL,是优化前12.39 U/mL的1.76倍,其中发酵液蔗糖添加量对产果胶酶影响达到显著水平。 展开更多

关键词 沙福芽孢杆菌 缫丝废水 果胶酶 正交设计

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三叶青细胞悬浮培养体系的条件优化和总黄酮含量的测定研究 被引量：1

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作者 何海燕 付跃 +1 位作者 覃拥灵 张健 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第7期77-80,共4页

试验旨在探讨使用三叶青细胞悬浮培养生产三叶青黄酮的可行性。试验以野生三叶青叶片和茎段为外植体诱导愈伤组织,测定增殖、单细胞培养及其总黄酮含量,悬浮培养细胞经不同液体培养基配方、光照方式、摇床转速、接种量、pH值、培养天数... 试验旨在探讨使用三叶青细胞悬浮培养生产三叶青黄酮的可行性。试验以野生三叶青叶片和茎段为外植体诱导愈伤组织,测定增殖、单细胞培养及其总黄酮含量,悬浮培养细胞经不同液体培养基配方、光照方式、摇床转速、接种量、pH值、培养天数培养,以乙醇为溶剂,回流提取总黄酮,使用NaNO_(2)-Al(NO_(3))_(3)显色,在500 nm处用紫外分光光度计测定总黄酮含量。结果显示,三叶青最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+2.5 mg/L 2-4D+3 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-KT,8 h/d光照,摇床转速110 r/min,接种量25 m L/L,pH值5.8,培养时间为13 d。研究表明,三叶青细胞培养可生产黄酮,最优培养条件下三叶青细胞悬浮培养体系黄酮积累量可达20.524 mg/g。 展开更多

关键词 三叶青 细胞培养 总黄酮

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缫丝废水发酵生产菌体蛋白研究 被引量：1

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作者 何海燕 付跃 覃拥灵 《饲料研究》 CAS 北大核心 2019年第11期80-82,共3页

菌体蛋白是一种微生物蛋白,是食品工业和饲料工业的重要蛋白来源。研究以产朊假丝酵母发酵菌种,利用缫丝废水为发酵原料,设计正交试验对菌体蛋白的发酵生产进行初步研究,试验结果表明:在发酵液初始pH值6.0、装液量75 mL/250 mL、接种量... 菌体蛋白是一种微生物蛋白,是食品工业和饲料工业的重要蛋白来源。研究以产朊假丝酵母发酵菌种,利用缫丝废水为发酵原料,设计正交试验对菌体蛋白的发酵生产进行初步研究,试验结果表明:在发酵液初始pH值6.0、装液量75 mL/250 mL、接种量12%、发酵温度31℃、发酵时间84 h的最优发酵条件下,菌体蛋白产量可达2.26 g/L。 展开更多

关键词 缫丝废水 产朊假丝酵母 菌体蛋白 正交试验

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一株重金属镉耐受小球藻的分离鉴定及其生长条件优化 被引量：1

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作者 李启虔 卢福芝 覃勇荣 《生态科学》 CSCD 2022年第1期59-65,共7页

以龙江河镉污染水体预留样本为实验材料,从中筛选得到一株重金属镉耐受藻株,经形态和分子生物学鉴定为小球藻属,命名为Chlorella sp.LQQ-1。实验从温度、pH、Cd^(2+)、有机碳源及有机氮源等方面对该藻株生长条件进行优化,并考察其在最... 以龙江河镉污染水体预留样本为实验材料,从中筛选得到一株重金属镉耐受藻株,经形态和分子生物学鉴定为小球藻属,命名为Chlorella sp.LQQ-1。实验从温度、pH、Cd^(2+)、有机碳源及有机氮源等方面对该藻株生长条件进行优化,并考察其在最佳生长条件下对水体中Cd^(2+)的去除效果。结果表明:该小球藻最适宜生长温度为30℃,最适宜pH为7.0左右。Cd^(2+)在低浓度下能促进小球藻的生长,当Cd^(2+)浓度超过30μmol·L^(-1)时,小球藻的生长受到抑制。适宜该小球藻生长的最佳葡萄糖添加浓度为10g·L^(-1),最佳尿素添加浓度为1g·L^(-1)。在最佳生长条件下,该小球藻对水体中Cd^(2+)的去除率达89.7%。 展开更多

关键词 小球藻 重金属耐受藻株 镉 分离鉴定

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产果胶酶菌株的筛选鉴定及产酶条件初步优化 被引量：8

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作者 刘均珠 黄玉婷 +4 位作者 梁丽陈 陈桂慈 王琴 覃拥灵 何海燕 《饲料研究》 CAS 北大核心 2022年第11期71-75,共5页

试验以果胶为唯一碳源,从高效酒饼粉中筛选得到一株产果胶酶菌株JYJ,以来源丰富的百香果皮为发酵原材料进行单因素试验和正交试验进行培养条件优化。结果显示,经过形态学观察和16S rDNA序列比对,鉴定其为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibac... 试验以果胶为唯一碳源,从高效酒饼粉中筛选得到一株产果胶酶菌株JYJ,以来源丰富的百香果皮为发酵原材料进行单因素试验和正交试验进行培养条件优化。结果显示,经过形态学观察和16S rDNA序列比对,鉴定其为纺锤形赖氨酸芽孢杆菌(Lysinibacillus fusiformis)。最优的发酵产酶条件组合为:接种量6%、发酵时间72 h、发酵培养温度30℃、发酵培养基初始pH值6.5。研究表明,该条件所测得的果胶酶活为121.46 U/mL,比初始发酵酶活81.43 U/mL提高了1.49倍。 展开更多

关键词 果胶酶 筛选 纺锤形赖氨酸芽孢杆菌 百香果皮 发酵条件优化

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一株纤维素酶真菌的筛选鉴定及产酶条件优化 被引量：10

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作者 罗奉奉 付跃 +3 位作者 黄秀艳 黄文彬 陈慧珍 覃拥灵 《中国酿造》 CAS 北大核心 2021年第2期133-139,共7页

以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,从自然界筛选出一株纤维素酶高产菌HJC-79,通过单因素试验和正交试验对其培养基成分和发酵条件进行优化。结果表明,经形态观察和ITS序列分析,菌株HJC-79被鉴定为杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。最佳培... 以羧甲基纤维素钠为唯一碳源,从自然界筛选出一株纤维素酶高产菌HJC-79,通过单因素试验和正交试验对其培养基成分和发酵条件进行优化。结果表明,经形态观察和ITS序列分析,菌株HJC-79被鉴定为杂色曲霉(Aspergillus versicolor)。最佳培养基成分为蔗渣、麸皮和Mandels营养盐液的添加量分别为2%、9%、89%;最佳发酵条件为发酵温度33℃,初始pH值为4,接种量9.0%,发酵时间48 h。在此优化条件下,葡聚糖内切酶、β-葡萄糖苷酶和滤纸酶酶活分别为2.22 U/mL、1.93 U/mL、1.53 U/mL,分别比优化前提高了125.55%、76.37%和172.47%。 展开更多

关键词 纤维素酶 菌株筛选 鉴定 杂色曲霉 培养基 发酵条件 优化

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缫丝废水发酵产果胶酶菌种选育 被引量：2

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作者 何海燕 付跃 覃拥灵 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期493-499,共7页

果胶酶是分解果胶质酶类的总称,在食品、饲料工业上有很好的发展前景。本试验通过平板透明圈法筛选到一株能利用缫丝废水发酵产果胶酶的菌株G7,表型分析及rDNA ITS序列分子鉴定该菌株为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)。利用紫外照射... 果胶酶是分解果胶质酶类的总称,在食品、饲料工业上有很好的发展前景。本试验通过平板透明圈法筛选到一株能利用缫丝废水发酵产果胶酶的菌株G7,表型分析及rDNA ITS序列分子鉴定该菌株为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)。利用紫外照射对G7进行诱变育种获得一株酶活力有大幅度提高的正突变株G7-7,在初始发酵条件下测得其酶活为12.39 U/mL,是G7酶活(5.25 U/mL)的2.36倍,对G7-7进行5次传代培养,测得酶活都较稳定,表明G7-7是一株遗传性状稳定的产酶优良的正突变株。 展开更多

关键词 缫丝废水 果胶酶 沙福芽孢杆菌 紫外诱变

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缫丝废水发酵产蛋白酶的菌种筛选及发酵工艺优化 被引量：1

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作者 覃宝山 付跃 +1 位作者 何海燕 覃拥灵 《饲料研究》 CAS 北大核心 2023年第18期69-73,共5页

试验旨在研究筛选菌株发酵缫丝废水生产蛋白酶。试验从自然环境取样,筛选得到能利用缫丝废水发酵产蛋白酶的菌株Z416,形态学观察和分子生物学鉴定该菌株为硝基愈创木胶类节杆菌(Paenarthrobacter nitroguajacolicus),并通过单因素和正... 试验旨在研究筛选菌株发酵缫丝废水生产蛋白酶。试验从自然环境取样,筛选得到能利用缫丝废水发酵产蛋白酶的菌株Z416,形态学观察和分子生物学鉴定该菌株为硝基愈创木胶类节杆菌(Paenarthrobacter nitroguajacolicus),并通过单因素和正交设计试验优化了该菌株的产酶条件组合。结果显示,发酵液乳糖添加量4%、发酵培养基初始pH值7.5、接种量16%、摇床转速180 r/min、发酵温度33℃、发酵时间84 h为最优发酵方案。在此条件下,菌株Z416酶活力达到17.89 U/mL,是优化前酶活(3.21 U/mL)的5.57倍。研究表明,该蛋白酶具有应用到禽和猪饲料中的潜力,可以改善畜禽的生长性能。 展开更多

关键词 缫丝废水 蛋白酶 筛选鉴定 硝基愈创木胶类节杆菌

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