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IL-12家族细胞因子:肿瘤免疫治疗研究的热点分子 被引量：11
1
作者 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期239-243,共5页
利用细胞因子提高宿主免疫能力、破坏肿瘤细胞的免疫逃逸功能是肿瘤生物治疗的重要策略。IL-12细胞因子家族是具有高度同源性的一类异源二聚体细胞因子,包括IL-12、IL-23、IL-27和IL-35,它们均由活化的抗原提呈细胞如巨噬细胞和树突状... 利用细胞因子提高宿主免疫能力、破坏肿瘤细胞的免疫逃逸功能是肿瘤生物治疗的重要策略。IL-12细胞因子家族是具有高度同源性的一类异源二聚体细胞因子,包括IL-12、IL-23、IL-27和IL-35,它们均由活化的抗原提呈细胞如巨噬细胞和树突状细胞产生,在辅助性T细胞分化过程中起重要作用。IL-12通过活化ATAT4信号转导途径产生IFNγ-促进细胞免疫反应;IL-27主要活化STAT1途径增强细胞和体液免疫反应;外源性IL-23可以产生抗肿瘤效应,而内源性IL-23通过活化STAT3诱导产生IL-17,从而促进肿瘤的发生和发展;IL-35可能是潜在的免疫抑制性细胞因子。总之,IL-12细胞因子家族成员在肿瘤免疫反应中各自发挥不同的作用,已成为肿瘤免疫治疗和研究的热点分子。 展开更多
关键词 细胞因子 IL-12细胞因子家族 肿瘤生物治疗 白细胞介素 肿瘤免疫
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转染IL-27基因的食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用 被引量：2
2
作者 刘丽华 单保恩 +2 位作者 邵丽丽 艾军 王士杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期119-122,共4页
目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27... 目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27移植裸鼠腹腔,观察瘤细胞的成瘤性和裸鼠的生存期。用RT-PCR检测IL-27基因在裸鼠体内瘤组织中的表达,用流式细胞仪检测CD204表达、细胞周期和细胞凋亡变化。结果:成功建立了表达IL-27基因的人食管癌细胞株Eca109/IL-27,该细胞培养上清中IL-27含量为(137.73±7.00)pg/ml,而Eca109/LXSN和Eca109细胞培养上清中未检出IL-27(P<0.01),但Eca109/IL-27与Eca109/LXSN和Eca109细胞周期和细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN和Eca109细胞分别接种裸鼠腹腔15天后,各组裸鼠均于腹腔形成多数瘤结节,Eca109/IL-27组明显少于Eca109/LXSN和Eca109细胞组(P<0.05);Eca109/IL-27组裸鼠的生存期(35天时均无死亡)明显长于Eca109/LXSN和Eca109细胞组[分别为(23.33±1.52)、(24.00±1.37)天](P<0.01);Eca109/IL-27组肿瘤组织中有p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN和Eca109细胞组瘤组织中未见表达(P<0.01);其CD204表达水平、细胞凋亡率也明显高于接种Eca109/LXSN与Eca109细胞组(P<0.05);G0/G1和G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少,与接种Eca109/LXSN和Eca109细胞组比较均有显著差异(P<0.05)。结论:IL-27可于体内促进肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞周期发展,提高CD204的表达,延长生存期,发挥抗肿瘤免疫活性。 展开更多
关键词 IL-27 人食管癌细胞 裸鼠 抗肿瘤活性
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五味子提取物对辐射所致小鼠淋巴细胞减少的预防效果及其机制 被引量：7
3
作者 刘丽华 刘登湘 +4 位作者 马鸣 孟君 艾军 赵连梅 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期313-317,共5页
目的:研究中药五味子(Schisandra Chinensis,SC)提取物对辐射所致小鼠外周血淋巴细胞减少的预防效果及其机制。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为SC预防组(SC+ray)、NS对照组(NS+ray)、SC对照组(SC)和正常对照组(NS)。一次性6 G... 目的:研究中药五味子(Schisandra Chinensis,SC)提取物对辐射所致小鼠外周血淋巴细胞减少的预防效果及其机制。方法:将48只BALB/c小鼠随机分为4组,分别为SC预防组(SC+ray)、NS对照组(NS+ray)、SC对照组(SC)和正常对照组(NS)。一次性6 Gyγ射线照射,照射后进行小鼠外周血白细胞和淋巴细胞计数,细胞免疫荧光检测外周血T淋巴细胞亚群,Gimsa染色观察小鼠胸腺细胞形态,流式细胞术检测胸腺细胞凋亡率,RT-PCR法检测胸腺组织中Bcl-2和Fas基因mR-NA的表达。结果:NS对照组小鼠照射后外周血白细胞总数和淋巴细胞数量及亚群均明显下降(P<0.0),SC预防组较NS对照组白细胞总数和淋巴细胞数量均明显升高(P<0.01);SC预防组小鼠外周血中CD3+、CD4+和CD8+T细胞百分率较NS对照组小鼠明显升高(P<0.01)。NS对照组小鼠照射后胸腺细胞数目减少,并可见多处片状细胞凋亡和坏死;SC预防治疗组较NS对照组胸腺细胞凋亡率明显降低[(21.32±2.56)%vs(2.87±1.03)%,P<0.01];RT-PCR结果表明,照射后小鼠胸腺细胞Bcl-2表达明显降低,Fas表达明显升高(均P<0.01),而SC预防组较NS对照组Bcl-2表达明显升高,Fas表达明显降低(均P<0.05)。结论:SC通过升高Bcl-2表达、降低Fas表达调控胸腺细胞凋亡,从而有效预防辐射所致小鼠外周血淋巴细胞的减少。 展开更多
关键词 五味子 辐射 淋巴细胞减少 预防
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IL-27促进人胰腺癌Aspc1细胞凋亡 被引量：2
4
作者 刘丽华 郝国贞 +3 位作者 张璁 艾军 邵丽丽 单保恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期634-638,共5页
目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27)。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表... 目的:探讨IL-27基因对人胰腺癌Aspc1细胞凋亡的影响及其体内抗肿瘤作用。方法:重组载体PA317/IL-27转染Aspc1细胞,G418筛选稳定转染IL-27基因的Aspc1细胞(Aspc1/IL-27)。ELISA、细胞计数法和流式细胞术分别检测IL-27对Aspc1细胞IL-27表达、细胞增殖和MHC-Ⅰ类分子表达的影响。将Aspc1/IL-27、Aspc1/LXSN(稳定转染空质粒的Aspc1细胞)和Aspc1细胞接种于裸鼠右背部皮下,观察Aspc1细胞移植瘤的生长情况和小鼠的生存期;TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,电镜观察移植瘤细胞的超微结构变化。结果:成功建立稳定转染PA317/IL-27载体的Aspc1/IL-27细胞株。Aspc1/IL-27细胞高表达IL-27,而Aspc1/LXSN和Aspc1细胞不表达IL-27(P<0.01)。PA317/IL-27载体转染不影响Aspc1细胞表面MHC-Ⅰ类分子的表达(P>0.05)。Aspc1/IL-27组裸鼠移植瘤生长速度明显慢于Aspc1/LXSN组及Aspc1组(P<0.05),且生存期延长(P<0.05)。Aspc1/IL-27组移植瘤细胞凋亡率明显高于Aspc1/LXSN和Aspc1组[(19.5±2.4)%vs(8.5±0.3)%、(9.1±0.8)%,P<0.01]。结论:IL-27基因转染胰腺癌Aspc1细胞后通过诱导肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 IL-27基因 胰腺肿瘤 Aspc1细胞 凋亡 增殖
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食管癌患者血清蛋白指纹图谱的检测及食管癌诊断模型的建立 被引量：1
5
作者 刘丽华 单保恩 +2 位作者 王士杰 孟君 王玲 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期272-276,共5页
目的:利用蛋白质组学基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOFMS)技术检测食管癌患者血清蛋白指纹图谱,建立食管癌蛋白指纹图谱诊断模型,探讨其... 目的:利用蛋白质组学基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOFMS)技术检测食管癌患者血清蛋白指纹图谱,建立食管癌蛋白指纹图谱诊断模型,探讨其临床应用价值。方法:收集河北医科大学第四医院2008年5月至9月间胸外科食管癌患者血清32例和健康志愿者血清28例,采用弱阳离子交换蛋白质芯片(WCX磁珠)提纯血清蛋白,MALDI-TOFMS技术进行血清蛋白质质谱检测,所得结果用ZUCI-蛋白芯片数据分析系统进行分析。运用遗传算法结合支持向量机运算建立食管癌蛋白指纹图谱诊断模型;将60例标本随机分成训练组和盲法测试组,训练组为21名食管癌患者和19名健康人,盲法测试组为11名食管癌患者和9名健康人,验证诊断模型的特异性和敏感性。结果:采集食管癌患者和健康对照者的血清蛋白指纹图谱,经数据对比分析找到44个有显著性差异的质荷比峰(P<0.05);从中筛选出差异最显著的6个蛋白质荷比峰(m/z分别为2210、2864、6634、4068、2083和8131),并以此建立食管癌蛋白指纹图谱诊断预测模型;验证该模型诊断食管癌的特异性为88.9%、敏感度为100%。结论:应用MALDI-TOFMS技术检测食管癌患者血清蛋白指纹图谱建立的食管癌蛋白指纹图谱诊断模型在食管癌的诊断中具有较高的敏感度和特异性。 展开更多
关键词 食管癌 基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱 蛋白指纹图谱 诊断模型
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表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗增强DC活性 被引量：1
6
作者 武立华 张超 +2 位作者 单保恩 刘丽华 艾军 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期514-520,共7页
目的:观察表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗体内外对DC活性的影响。方法:以脂质体法将CD40L基因转染colon26细胞获得稳定表达CD40L的colon26/CD40L瘤苗。colon26/CD40L细胞与小鼠骨髓来源DC共培养,流式细胞术检测DC表型变化,RT-PCR法... 目的:观察表达CD40L的小鼠结肠癌colon26瘤苗体内外对DC活性的影响。方法:以脂质体法将CD40L基因转染colon26细胞获得稳定表达CD40L的colon26/CD40L瘤苗。colon26/CD40L细胞与小鼠骨髓来源DC共培养,流式细胞术检测DC表型变化,RT-PCR法检测细胞因子基因P19、P35、P40、IL-18和IFN-γ的表达,ELISA法检测共培养上清中IL-12、IL-23和IFN-γ的水平。BALB/c小鼠皮下注射colon26细胞制备荷瘤小鼠模型,colon26/CD40L致敏DC治疗荷结肠癌小鼠,ELISA法检测荷瘤小鼠外周血中IL-12、IL-23、IFN-γ、IL-10和TGF-β的水平,H-E染色观察肝、脾和肿瘤组织的病理学变化。结果:成功获得高表达CD40L的丝裂霉素(MMC)处理的colon26/CD40L瘤苗。DC与colon26/CD40L瘤苗共培养后,DC表面共刺激分子CD80、CD86、MHCⅠ和MHCⅡ表达增高(P<0.01);共培养体系中可检测到P19、P35、P40、IL-18和IFN-γmRNA的表达,而在其他组未检测到上述基因的表达;共培养细胞上清中有较高水平的IL-12、IL-23和IFN-γ(P<0.01)。co-lon26/CD40L瘤苗致敏DC治疗组与colon26/CD40L瘤苗治疗组、DC治疗组比较,小鼠移植瘤的体积和质量明显减小和减少(P<0.05);小鼠外周血IL-12、IL-23和IFN-γ明显升高(P<0.01),IL-10和TGF-β明显降低(P<0.01);小鼠移植瘤组织病理变化显著减轻。结论:表达CD40L的丝裂霉素(MMC)处理的结肠癌瘤苗可促进DC的成熟,刺激DC分泌细胞因子,增强DC体内外活性,从而增强治疗体系的抗肿瘤免疫效应。 展开更多
关键词 CIMOL基因 树突状细胞 结肠癌细胞 基因转染
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应用MALDI-TOF MS技术建立贲门癌血清蛋白指纹图谱诊断模型 被引量：1
7
作者 孟君 刘丽华 +4 位作者 单保恩 艾军 张超 张璁 韩丽娜 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期881-886,共6页
背景与目的:贲门癌是常见的消化道肿瘤,预后差,5年生存率低。早期诊断是改善其预后的关键因素之一。近年来,蛋白质组学的迅速发展推进了肿瘤标志物研究的进程,其中基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption... 背景与目的:贲门癌是常见的消化道肿瘤,预后差,5年生存率低。早期诊断是改善其预后的关键因素之一。近年来,蛋白质组学的迅速发展推进了肿瘤标志物研究的进程,其中基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)作为常用的蛋白质组学技术,成为检测和验证血液等体液肿瘤标志物的新技术及平台。本研究利用MALDI-TOF MS技术检测贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,建立贲门癌诊断模型,探讨其临床应用价值。方法:收集河北医科大学第四医院2009年3月—2010年5月胸外科贲门癌患者血清63例和健康志愿者血清54例,采用弱阳离子蛋白芯片(WCX磁珠)对血清进行分析前处理,MALDI-TOF MS技术进行血清蛋白图谱检测,所得结果用ZUCI-蛋白芯片数据分析系统进行处理。运用遗传算法(genetic arithmetic,GA)结合支持向量机(support vector machine,SVM)运算建立贲门癌蛋白指纹图谱诊断模型:将117例标本随机分为训练组和盲法测试组,经训练后验证诊断模型的特异度和灵敏度。结果:采集贲门癌患者和健康对照者的血清蛋白指纹图谱,经数据对比分析找到69个有显著性差异的质荷比峰(P<0.01);从中筛选出差异最显著的10个蛋白质荷比峰建立诊断模型(m/z分别为2 863、4 655、3 883、3 241、3 952、2 295、2 741、1 546、4 054和2 671)。通过验证,该诊断模型的灵敏度为96.83%、特异度为90.74%。结论:应用MALDI-TOF MS技术能够检测贲门癌患者血清蛋白指纹图谱,建立贲门癌诊断模型。该模型在贲门癌诊断中具有较高的灵敏度和特异度,有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 贲门癌 基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱 蛋白质组学
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