环氧化物酶抑制剂NS-398联合奥沙利铂对宫颈癌HeLa细胞生长抑制及诱导凋亡作用的研究 被引量：1

1

作者 王静 金燕 +1 位作者 董尚林 武欣 《中国医药导报》 CAS 2021年第3期30-34,F0004,共6页

目的研究环氧化酶抑制剂NS-398联用奥沙利铂(L-OHP)对宫颈癌HeLa细胞的抑制及诱导凋亡作用。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK-8法检测不同浓度NS-398(0、30、60μmol/L),L-OHP(0.0、2.5、5.0、10.0 mg/L)单独作用及联合作用于HeLa细... 目的研究环氧化酶抑制剂NS-398联用奥沙利铂(L-OHP)对宫颈癌HeLa细胞的抑制及诱导凋亡作用。方法体外培养人宫颈癌HeLa细胞,CCK-8法检测不同浓度NS-398(0、30、60μmol/L),L-OHP(0.0、2.5、5.0、10.0 mg/L)单独作用及联合作用于HeLa细胞后对细胞的抑制作用;将HeLa细胞随机分为:对照组、NS-398组(60μmol/L)、L-OHP组(10 mg/L)及联合组(NS-39860μmol/L+L-OHP 10 mg/L),倒置显微镜观察HeLa细胞形态改变,罗丹明染色观察HeLa细胞凋亡情况,流式细胞仪检测HeLa细胞早期凋亡率,DNA琼脂糖凝胶电泳检测梯状条带。结果CCK-8结果显示,与未加药物组比较,NS-398单药组和L-OHP单药组抑制率增高;联合组抑制率高于NS-398单药组和L-OHP单药组(均P<0.01)。对照组细胞状态良好,形态呈梭形,贴壁生长,细胞边缘清晰,胞膜完整。NS-398组细胞体积皱缩变小变圆,胞质内出现颗粒状物质,少量细胞从瓶底脱落,漂浮于培养液中。L-OHP组细胞失去正常形态,皱缩变小,培养液中可见死细胞。联合组培养液中可见大量死细胞和细胞碎片,仅余少量细胞贴在瓶底,且形态呈不同程度的皱缩,部分细胞破裂,细胞内容物溢出。罗丹明123染色结果显示,对照组无荧光;NS-398组、L-OHP组与联合组荧光强度增强,尤其以联合组最为明显。流式细胞仪检测结果显示,NS-398组和L-OHP组凋亡率明显高于对照组;联合组凋亡率明显高于NS-398组、L-OHP组(均P<0.01)。DNA电泳显示,联合组出现了明显的梯状条带,NS-398组和L-OHP组有明显的弥散现象出现;对照组即无弥散现象也无梯状条带出现。结论NS-398能够增强L-OHP对HeLa细胞的生长抑制作用和诱导凋亡作用。 展开更多

关键词 NS-398 奥沙利铂 宫颈癌细胞 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

H9N2亚型猪源性流感病毒在小鼠肺微血管内皮细胞内最佳增殖条件的研究 被引量：2

2

作者 李珮瑶 梁亭 +5 位作者 罗强 王少华 李军 徐明举 张瑞华 徐彤 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第6期1708-1714,共7页

试验旨在确定H9N2亚型猪源性流感病毒(SIV)在小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)中增殖的最佳条件。将PMVEC解冻、复苏、培养,取长成单层的PMVEC,在不同浓度TPCK-胰蛋白酶维持液(0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0μg/mL)、不同H9N2亚型SIV(A... 试验旨在确定H9N2亚型猪源性流感病毒(SIV)在小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)中增殖的最佳条件。将PMVEC解冻、复苏、培养,取长成单层的PMVEC,在不同浓度TPCK-胰蛋白酶维持液(0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0μg/mL)、不同H9N2亚型SIV(A/swine/HeBei/012/2008/(H9N2)接种剂量(1∶10、1∶100、1∶1 000、1∶10 000、1∶100 000、1∶1 000 000和1∶10 000 000)及不同病毒吸附时间(0.5、1.0、2.0和3.0h)条件下观察PMVEC形态变化,并测定细胞上清液中H9N2亚型SIV的HA滴度。在未加病毒的情况下,低于0.6μg/mL的TPCK-胰蛋白酶对PMVEC的生长未造成任何影响,但随着TPCK-胰蛋白酶浓度的增加,PMVEC开始出现肿胀、变圆,甚至脱落;采用含有0.6μg/mL TPCK-胰蛋白酶维持液将H9N2亚型SIV稀释为不同的浓度感染PMVEC,在0.3μg/mL TPCK-胰蛋白酶维持液、10-2病毒稀释倍数感染条件下48和72h HA滴度分别为4.6log2和6.4log2;病毒吸附时间为2h且中间震荡20s的条件下H9N2HA滴度最佳。结果表明,当TPCK-胰蛋白酶维持液浓度为0.3μg/mL、病毒接种浓度为10-2、吸附时间为2h且中间震荡20s时,H9N2亚型SIV在PMVEC中增殖最佳,达到6.8log2。 展开更多

关键词 H9N2亚型 猪流感病毒(SIV) 微血管内皮细胞(PMVEC) 增殖

在线阅读 下载PDF 职称材料

斑蝥酸钠对体外培养的EJ细胞的实验研究 被引量：2

3

作者 苏建玲 孙黎 罗强 《中国医药导报》 CAS 2013年第24期26-28,共3页

目的观察斑蝥酸钠对体外培养的人膀胱癌系EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 EJ细胞贴壁后分为对照组、1组、2组、3组、4组、5组,分别给予0、0.5、1、5、10、15 g/L浓度斑蝥酸钠处理,24 h后采用流式细胞仪检测细胞周期情况,CCK-8法... 目的观察斑蝥酸钠对体外培养的人膀胱癌系EJ细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法 EJ细胞贴壁后分为对照组、1组、2组、3组、4组、5组,分别给予0、0.5、1、5、10、15 g/L浓度斑蝥酸钠处理,24 h后采用流式细胞仪检测细胞周期情况,CCK-8法检测斑蝥酸钠对EJ细胞增值抑制的影响,荧光倒置显微镜下观察细胞的凋亡情况,琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡情况。结果以0.5、1、5、10、15 mg/L 5个浓度的斑蝥酸钠作用于EJ细胞24 h,EJ细胞的增殖出现不同程度的抑制,且与药物浓度成正相关。1、2、3、4、5组抑制率与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组S期细胞比例为8.94%,G2/M期为4.16%,G0/G1期为86.91%,与1、2、3、4、5组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。使用斑蝥酸钠作用EJ细胞24 h后,电泳出现凋亡特有的阶梯状条带,随着药物浓度的增加,凋亡带增多,而对照组则没有出现凋亡带。荧光显微镜下,对照组未出现凋亡小体,加入斑蝥酸钠的药物组有凋亡小体出现,0.5、5 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较少,15 g/L斑蝥酸钠药物组凋亡细胞数较多。结论斑蝥酸钠对体外培养EJ细胞增殖有显著的抑制作用,诱导EJ细胞凋亡。 展开更多

关键词 斑蝥酸钠 EJ细胞 CCK-8 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

紫花苜蓿和裸燕麦混贮发酵品质和营养成分分析 被引量：48

4

作者 葛剑 杨翠军 +3 位作者 杨志敏 白雪梅 赵海香 刘贵河 《草业学报》 CSCD 北大核心 2015年第4期104-113,共10页

以新鲜及晾晒后的紫花苜蓿和裸燕麦为原料,分别设计紫花苜蓿单贮、裸燕麦单贮、裸燕麦∶紫花苜蓿=1∶1、裸燕麦∶紫花苜蓿=2∶1及裸燕麦∶紫花苜蓿=1∶2混贮等5个处理,青贮60d后,对其感官评分、发酵品质和营养成分等进行分析。结果表明... 以新鲜及晾晒后的紫花苜蓿和裸燕麦为原料,分别设计紫花苜蓿单贮、裸燕麦单贮、裸燕麦∶紫花苜蓿=1∶1、裸燕麦∶紫花苜蓿=2∶1及裸燕麦∶紫花苜蓿=1∶2混贮等5个处理,青贮60d后,对其感官评分、发酵品质和营养成分等进行分析。结果表明,鲜贮苜蓿在感官评定、V-Score及Kaiser评价体系中表现一般,而晾晒及混合青贮各处理组均能不同程度提高青贮评分。晾晒和混合青贮对发酵品质产生影响,两者显著或极显著降低pH值、PA(丙酸)、AA(乙酸)、BA(丁酸)和AN/TN(氨态氮/总氮)含量(P<0.01或P<0.05),显著或极显著升高LA(乳酸)含量(P<0.01或P<0.05),其中以裸燕麦∶紫花苜蓿=2∶1降低或升高最明显。晾晒对青贮饲料的干物质、可溶性碳水化合物及粗灰分含量具有显著或极显著影响(P<0.05或P<0.01),对其他养分含量影响不大(P>0.05)。混合比例对青贮饲料的所有发酵项目均有极显著影响(P<0.01),对粗蛋白质、可溶性碳水化合物及中性洗涤纤维含量具有显著或极显著影响(P<0.05或P<0.01),对其他养分指标影响不显著(P>0.05)。晾晒和混合青贮的交互作用可显著提高青贮饲料的发酵品质,但对养分含量影响不明显。因此,从青贮后感官评价、发酵品质及养分含量来看,紫花苜蓿和裸燕麦混合青贮品质优于单独青贮,且晾晒相对于鲜贮更易于青贮,而无论晾晒和鲜贮,当裸燕麦∶紫花苜蓿=2∶1时,青贮品质均优于其他各组。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 裸燕麦 混合青贮 发酵品质 营养成分

在线阅读 下载PDF 职称材料

添加剂和混合比例对裸燕麦和紫花苜蓿混贮品质的影响 被引量：22

5

作者 葛剑 杨翠军 +2 位作者 刘贵河 杨志敏 白雪梅 《草业学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期116-124,共9页

探讨添加剂和不同混合比例对裸燕麦和紫花苜蓿混贮饲料品质的影响,为开展牧草混播及调制高质量的混合青贮饲料提供参考。以裸燕麦和紫花苜蓿为原料,按质量比1∶1、2∶1和1∶2进行混合青贮,并分别加入0.4%甲酸(formic acid,FA)或2%蔗糖(s... 探讨添加剂和不同混合比例对裸燕麦和紫花苜蓿混贮饲料品质的影响,为开展牧草混播及调制高质量的混合青贮饲料提供参考。以裸燕麦和紫花苜蓿为原料,按质量比1∶1、2∶1和1∶2进行混合青贮,并分别加入0.4%甲酸(formic acid,FA)或2%蔗糖(sucrose,S),青贮60 d后测定混合青贮饲料的发酵品质和营养物质含量。结果显示,裸燕麦与苜蓿混合比例为2∶1时青贮饲料的感官评价上均优于其余2种混合比例,添加0.4%甲酸或者2%蔗糖,感官评定为优并显著高于对照组(P<0.05)。混合青贮饲料的发酵品质随裸燕麦比例增加而不同程度提高。其中,p H值随裸燕麦比例增加而逐渐降低;在裸燕麦与苜蓿混合比例在2∶1时,添加2%蔗糖组乳酸(lactic acid,LA)含量显著高于对照及0.4%甲酸处理组(P<0.05),且与另外2种混合比例的处理组相比差异均显著(P<0.05);此混合比例下添加0.4%甲酸处理组p H值和氨态氮/总氮(AN/TN)较低,乙酸(acetic acid,AA)和总挥发性脂肪酸(total VFA,TVFAs)含量最低,乳酸含量及乳酸/乙酸(LA/AA)较高,丙酸(propionic acid,PA)和丁酸(butyrate acid,BA)含量极低未检出,V-Score评分最高,总体发酵品质最佳。随苜蓿比例增加,混贮饲料CP含量提高,纤维组分(NDF、ADF和HC)含量降低,青贮饲料养分更加均衡,但添加剂对青贮饲料营养成分影响不大。裸燕麦与紫花苜蓿混合青贮可形成养分互补,提高营养价值;加入适量甲酸或蔗糖有助于抑制不良发酵,提高发酵品质。 展开更多

关键词 裸燕麦 紫花苜蓿 青贮 添加剂 混合

在线阅读 下载PDF 职称材料

马齿苋多糖对雏鸡生长性能、血液代谢激素和血脂的影响 被引量：19

6

作者 葛剑 杨翠军 孙茂红 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2013年第2期87-92,共6页

选用60只28日龄雏鸡随机分为4组,每组5个重复,每重复3只,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组每天分别灌服0.5 mL质量浓度为2、20、40 mg/mL的马齿苋多糖(POP),连续给药7 d,对照组灌服等量生理盐水。分别于35、42、49日龄,每重复各取1只鸡,测定生长性能、... 选用60只28日龄雏鸡随机分为4组,每组5个重复,每重复3只,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组每天分别灌服0.5 mL质量浓度为2、20、40 mg/mL的马齿苋多糖(POP),连续给药7 d,对照组灌服等量生理盐水。分别于35、42、49日龄,每重复各取1只鸡,测定生长性能、血脂及血清激素指标。结果表明,与对照组相比,不同浓度的马齿苋多糖均能不同程度地提高雏鸡日增重,降低耗料量和料重比,以试验Ⅱ组(20 mg/mL)饲料转化率最高;血清T3、IGF-1及GH浓度升高,T4呈现降低的趋势,GHRH略有升高但差异不显著;不同浓度的POP试验组雏鸡血清TG、TC和LDL-C含量均呈现降低趋势,HDL-C和HDL-C/TC呈现不同程度的提高。从整个试验期来看,试验Ⅱ组降低雏鸡血清TG、TC和LDL-C含量及提高HDL-C的效果最好。说明,马齿苋多糖通过调控血液激素水平,提高雏鸡生长性能和饲料转化率,并具有一定的降血脂功效。 展开更多

关键词 马齿苋多糖 生长性能 激素 血脂 雏鸡

在线阅读 下载PDF 职称材料

添加糖蜜和青贮添加剂对“张杂谷”全株青贮发酵品质的影响 被引量：14

7

作者 刘婷婷 张振威 +4 位作者 岳春旺 杨翠军 李林 孔祥浩 孙茂红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第5期1382-1387,共6页

试验旨在研究不同水平的糖蜜和青贮添加剂(复合菌制剂,以植物乳杆菌为主)对"张杂谷"全株青贮发酵品质和营养成分的影响。以灌浆期"张杂谷"全株作为青贮原料,试验设5个处理组,即对照组(直接青贮)、Ⅰ组(1.5‰青贮添... 试验旨在研究不同水平的糖蜜和青贮添加剂(复合菌制剂,以植物乳杆菌为主)对"张杂谷"全株青贮发酵品质和营养成分的影响。以灌浆期"张杂谷"全株作为青贮原料,试验设5个处理组,即对照组(直接青贮)、Ⅰ组(1.5‰青贮添加剂)、Ⅱ组(2%糖蜜+1.5‰青贮添加剂)、Ⅲ组(4%糖蜜+1.5‰青贮添加剂)、Ⅳ组(6%糖蜜+1.5‰青贮添加剂),青贮期60d。结果显示:(1)试验组在感官评分上均优于对照组,试验组干物质(DM)含量均显著高于对照组(P<0.05),粗蛋白质(CP)含量均高于对照组;(2)显著降低了试验组(除Ⅰ组外)青贮饲料中酸性洗涤纤维(ADF)、中性洗涤纤维(NDF)和半纤维素(HC)含量(P<0.05),对灰分含量影响不大(P>0.05);(3)与对照组相比,试验组pH、氨态氮/总氮(AN/TN)值均显著降低(P<0.05),乳酸显著提高(P<0.05),Ⅰ、Ⅳ组乙酸含量均显著降低(P<0.05),各试验组丙酸含量均显著降低(P<0.05),在试验组和对照组中均没检出丁酸和异戊酸。综合分析认为,糖蜜和青贮添加剂能改善"张杂谷"全株青贮的发酵品质,推荐用量为4%糖蜜+1.5‰青贮添加剂。 展开更多

关键词 张杂谷 糖蜜 青贮添加剂 发酵品质 营养成分

在线阅读 下载PDF 职称材料

混合比例和添加EM菌剂对紫花苜蓿和裸燕麦混贮品质的影响 被引量：13

8

作者 葛剑 杨翠军 +2 位作者 刘贵河 杨志敏 白雪梅 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第12期2093-2099,共7页

探讨混合比例和EM菌剂对紫花苜蓿和裸燕麦混贮饲料品质的影响,以紫花苜蓿和裸燕麦为原料,按质量比1∶0.5,1∶1和1∶2进行混合青贮,并分别添加0,0.1%,0.2%和0.4%的EM菌剂,青贮60 d后测定混合青贮饲料的发酵品质和营养物质含量。结果显示... 探讨混合比例和EM菌剂对紫花苜蓿和裸燕麦混贮饲料品质的影响,以紫花苜蓿和裸燕麦为原料,按质量比1∶0.5,1∶1和1∶2进行混合青贮,并分别添加0,0.1%,0.2%和0.4%的EM菌剂,青贮60 d后测定混合青贮饲料的发酵品质和营养物质含量。结果显示,混贮饲料的发酵品质随裸燕麦比例增加而提高,添加EM菌剂青贮饲料p H值和氨态氮/总氮有所下降,乳酸含量有升高趋势,添加0.1%和0.2%EM处理组总挥发性脂肪酸含量显著低于相应对照组(P<0.05),其中苜蓿与裸燕麦混合比例为1∶2时,添加0.1%EM在降低总挥发性脂肪酸和提高乳酸/乙酸方面效果最好。混贮饲料苜蓿比例越高,粗蛋白质含量越高,中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量逐渐降低,但添加EM菌剂对青贮饲料营养成分影响不大。其中,裸燕麦比例较高时,添加0.1%和0.2%EM,可加速消耗原料中可溶性碳水化合物,有利于提高青贮发酵品质。总之,紫花苜蓿与裸燕麦混合青贮可形成养分互补,提高营养价值;加入0.1%或0.2%的EM菌剂有助于抑制不良发酵,提高发酵品质。 展开更多

关键词 紫花苜蓿 裸燕麦 青贮 EM

在线阅读 下载PDF 职称材料

萎蔫处理和添加剂对裸燕麦青贮饲料品质的影响 被引量：7

9

作者 葛剑 杨翠军 +1 位作者 杨志敏 白雪梅 《中国粮油学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2015年第9期18-23,共6页

研究了萎蔫处理和添加剂对裸燕麦青贮饲料发酵品质和营养成分的影响。以灌浆期的全株裸燕麦为青贮原料,分别在新鲜和萎蔫处理条件下,均设置0.4%甲酸(formic acid,FA)、2%蔗糖(sucrose,S)和EM菌液(0.1%、0.2%和0.4%)3个处理,制作袋装青... 研究了萎蔫处理和添加剂对裸燕麦青贮饲料发酵品质和营养成分的影响。以灌浆期的全株裸燕麦为青贮原料,分别在新鲜和萎蔫处理条件下,均设置0.4%甲酸(formic acid,FA)、2%蔗糖(sucrose,S)和EM菌液(0.1%、0.2%和0.4%)3个处理,制作袋装青贮饲料。每个处理设3次重复,室温下贮存60 d,启封后进行青贮饲料品质鉴定。结果表明,萎蔫处理的全株裸燕麦青贮饲料在感官评分上优于鲜贮,添加0.4%甲酸显著降低裸燕麦青贮饲料的乙酸(acetic acid,AA)、丙酸(propionic acid,PA)和丁酸(butyric acid,BA)含量(P<0.05);添加2%S与0.2%EM菌液对青贮饲料发酵品质的影响效果接近,且均能显著提高粗蛋白质(crude protein,CP)含量(P<0.05),其中2%S对青贮饲料干物质保留率的影响效果显著(P<0.05);在萎蔫处理条件下EM菌液对青贮饲料中性洗涤纤维(neutral detergent fiber,NDF)、酸性洗涤纤维(acid detergent fiber,ADF)和半纤维素含量(hemicellulose,HC)影响不大(P>0.05),且3种EM处理组间不存在剂量差异(P>0.05)。同时兼顾萎蔫处理和添加剂的作用效果能从一定程度上改善裸燕麦青贮饲料的发酵品质。 展开更多

关键词 裸燕麦 萎蔫 添加剂 营养成分 发酵品质

在线阅读 下载PDF 职称材料

TRPM2离子通道在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞线粒体损伤中的作用 被引量：3

10

作者 李军 高晶萍 +7 位作者 张雅琪 罗强 梁亭 李珮瑶 王少华 张瑞华 徐明举 徐彤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期2053-2060,共8页

旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道(TRPM2)在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)导致线粒体损伤过程中的作用。在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上,采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞,在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体... 旨在探讨瞬时电位受体M2离子通道(TRPM2)在H9N2流感病毒感染小鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)导致线粒体损伤过程中的作用。在已建立TRPM2 shRNA PMVEC的基础上,采用5MOI H9N2猪流感病毒感染细胞,在病毒作用后24和48 h提取各组细胞的线粒体进行蛋白定量,检测各组细胞线粒体超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、一氧化氮合成酶(NOS)、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性和ATP酶水平;利用激光共聚焦显微镜观察线粒体膜电位变化(JC-1染色)及细胞凋亡(Annexin V-FITC/PI双染色法)情况。结果表明:H9N2-SIV感染后TRPM2 shRNA PMVEC内SOD活性、GSH水平和Na^+-K^+-ATP、线粒体呼吸链复合物Ⅳ活性显著高于对照shRNA PMVEC(P<0.05或P<0.01);mtNOS活性则极显著低于shRNA PMVEC(P<0.01)。JC-1染色显示TRPM2-siRNA PMVEC线粒体膜电位水平高于对照shRNA PMVEC,但是AnnexinV-FITC/PI染色显示细胞凋亡则低于H9N2感染对照shRNA PMVEC。结果提示:TRPM2基因沉默有效减缓H9N2感染导致NOS产生,显著降低SOD、GSH、线粒体呼吸链复合物Ⅳ、Na^+-K^+-ATP的消耗以及线粒体膜电位的下降程度,进而有效缓解PMVEC线粒体损伤及细胞凋亡。 展开更多

关键词 TRPM2离子通道 H9N2流感病毒 短发卡RNA PMEVC 线粒体损伤

在线阅读 下载PDF 职称材料

彩色獭兔agouti位点基因突变及蛋白结构改变对其毛色的影响 被引量：2

11

作者 杨翠军 葛剑 +3 位作者 陈赛娟 刘亚娟 陈宝江 谷子林 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2015年第12期2071-2077,共7页

彩色獭兔是世界上重要的特种经济动物,其毛色种类繁多,因此有必要对其毛色基因开展深入研究。以不同颜色的獭兔为试验对象,首先检测彩色獭兔的agouti基因多态性,预测蛋白质的结构,构建进化树。结果发现,彩色獭兔agouti位点共发现3个等... 彩色獭兔是世界上重要的特种经济动物,其毛色种类繁多,因此有必要对其毛色基因开展深入研究。以不同颜色的獭兔为试验对象,首先检测彩色獭兔的agouti基因多态性,预测蛋白质的结构,构建进化树。结果发现,彩色獭兔agouti位点共发现3个等位基因,海狸色和青紫蓝色为野生型agouti,即A,紫貂色为tanagouti,即a^t;黑色、黄色和蓝色为non-agouti,即a。3种基因序列与其他兔类的同源性和进化树分析结果显示,与欧洲野兔亲缘关系最近,野生型的刺豚鼠信号蛋白(ASIP)和tan ASIP蛋白的基因均编码133个氨基酸序列,其空间结构具有24个氨基酸残基的分泌信号肽,具有富含赖氨酸的区域,C末端具有富含半胱氨酸的疏水区域,具有重要的生物学活性,而2种蛋白在序列上的差别,尤其是保守区的差别造成真黑素和棕黑素的沉积发生改变,由此造成被毛颜色的不同,non-agouti基因编码的蛋白为21个氨基酸序列,很不稳定,ASIP不能产生,导致黑色素产生和积累。 展开更多

关键词 彩色獭兔 AGOUTI ASIP 多态性

在线阅读 下载PDF 职称材料

流式细胞仪在细胞生物学实验教学改革中的应用 被引量：6

12

作者 刘华 张林西 《安徽农业科学》 CAS 2012年第11期6958-6959,共2页

[目的]为本科细胞生物学实验提供新颖选题,提高流式细胞仪利用率。[方法]基于细胞生物学基础知识,应用流式细胞仪,采用不同方法对细胞凋亡进行检测分析。[结果]不同方法的实验结果均可体现和解释细胞凋亡现象,可提高学生对细胞特性和流... [目的]为本科细胞生物学实验提供新颖选题,提高流式细胞仪利用率。[方法]基于细胞生物学基础知识,应用流式细胞仪,采用不同方法对细胞凋亡进行检测分析。[结果]不同方法的实验结果均可体现和解释细胞凋亡现象,可提高学生对细胞特性和流式细胞术的进一步掌握。[结论]通过利用流式细胞仪对细胞凋亡的测定及结果分析,提高了仪器利用率,巩固了理论课内容,是本科细胞生物学实验的理想选题。 展开更多

关键词 流式细胞仪 细胞生物学 实验教学 教学改革

在线阅读 下载PDF 职称材料

1株抗肿瘤新城疫病毒的毒力分析

13

作者 马媛媛 高翠 +1 位作者 杨翠军 刘开扬 《安徽农业科学》 CAS 2012年第26期12937-12938,12942,共3页

[目的]分析1株抗肿瘤新城疫病毒(NDV)的毒力。[方法]通过传统毒力的测定方法,测定此株NDV的最小致死量的平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)及静脉致病指数(IVPI)。通过RT-PCR扩增此株病毒基因组的多个片段,相邻扩增片段之间有部分... [目的]分析1株抗肿瘤新城疫病毒(NDV)的毒力。[方法]通过传统毒力的测定方法,测定此株NDV的最小致死量的平均死亡时间(MDT)、脑内致病指数(ICPI)及静脉致病指数(IVPI)。通过RT-PCR扩增此株病毒基因组的多个片段,相邻扩增片段之间有部分核酸序列重叠且覆盖完整的融合蛋白(F)基因和血凝素神经氨酸酶(HN)基因的区域,并进行测序。[结果]此株NDV的MDT为105.6h,ICPI约为0.26,IVPI为0。测序结果表明,此株病毒是1株新的NDV,其F蛋白剪切位点为112RRQRRF117。[结论]此株NDV为弱毒株,其F蛋白剪切位点与强毒株一致。除F蛋白剪切位点外,NDV的毒力必然与其他因素相关。 展开更多

关键词 新城疫病毒 毒力 融合蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

hsa-miRNA-424-5p靶向GPR30对宫颈癌恶性生物学行为的影响 被引量：3

14

作者 王佳佳 丁佳 +5 位作者 常永霞 王新生 张斌 刘训涛 徐丹丹 张凡 《山东医药》 CAS 2021年第28期42-46,共5页

目的探讨hsa-miRNA-424-5p(miR-424-5p)对宫颈癌恶性生物学行为的影响及机制。方法选取12例正常宫颈组织和33例宫颈癌组织;将宫颈癌HeLa细胞随机分为NCmimics组、mimics组、NCinhibitor组、inhibitor组,分别转染miR-424-5p模拟物阴性对... 目的探讨hsa-miRNA-424-5p(miR-424-5p)对宫颈癌恶性生物学行为的影响及机制。方法选取12例正常宫颈组织和33例宫颈癌组织;将宫颈癌HeLa细胞随机分为NCmimics组、mimics组、NCinhibitor组、inhibitor组,分别转染miR-424-5p模拟物阴性对照、模拟物、抑制物阴性对照、抑制物序列。采用实时荧光定量PCR检测宫颈癌组织中miR-424-5p及新型雌激素受体G蛋白偶联受体30(GPR30)mRNA表达及宫颈癌细胞转染效率;平板克隆形成实验检测克隆形成能力;Transwell小室测定细胞侵袭能力;AnnexinV-PE/7-AAD双染色法测算细胞凋亡率;双荧光素酶实验初步验证miR-424-5p与GPR30的靶向关系;Westernblotting法进一步证实miR-424-5p和GPR30的靶向关系并检测PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白。结果实时荧光定量PCR实验结果显示,宫颈癌组织较正常宫颈组织中miR-424-5p相对表达量减少,而GPR30 mRNA表达增加(P均<0.05)。转染24 h后,NCmimics组、mimics组、NCinhibitor组、inhibitor组miR-424-5p相对表达量分别为1.00±0.06、10.91±0.42、1.00±0.03、0.01±0.00,细胞克隆率分别为(36.87±0.35)%、(17.43±1.40)%、(14.67±0.65)%、(21.23±0.68)%,细胞侵袭数分别为(179±9)、(71±5)、(133±5)、(221±11)个,细胞凋亡率分别为(12.73±0.31)%、(18.00±1.65)%、(22.37±2.17)%、(15.77±1.88)%,GPR30蛋白表达分别为1.00±0.03、0.72±0.03、1.00±0.11、2.55±0.13,p-AKT/AKT分别为1.00±0.07、0.84±0.02、1.00±0.05、1.17±0.08,p-mTOR/mTOR分别为1.00±0.08、0.65±0.14、1.00±0.05、1.43±0.25,mimics组与NCmimics组相比,inhibitor组与NCinhibitor组相比,P均<0.01。双荧光素酶证实GPR30为miR-424-5p的直接靶基因。结论miR-424-5p在宫颈癌中发挥抑癌基因的作用,过表达miR-424-5p能够抑制宫颈癌细胞的克隆、侵袭,并促进细胞凋亡;miR-424-5p可能通过GPR30作用于PI3K/AKT/mTOR通路从而抑制宫颈癌的恶性生物学行为。 展开更多

关键词 宫颈癌 微小RNA-424-5p 细胞克隆 细胞侵袭 细胞凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

新城疫病毒特异性杀伤肿瘤细胞的机制 被引量：1

15

作者 庞敏红 卢志红 刘开扬 《山东医药》 CAS 2014年第13期85-87,共3页

新城疫病毒（ NDV ）属副黏病毒科副黏病毒亚科的副黏病毒属，为不分节段的单股负链RNA病毒。其可以感染禽类，主要表现为呼吸道炎症，也可出现脑部和胃肠道炎症；同时也能感染人，但仅引起人流感样症状、结膜炎或喉炎［1］。

关键词 新城疫病毒 抗肿瘤 细胞因子

在线阅读 下载PDF 职称材料

肺康饮口服液对肺腺癌A549细胞生长及凋亡的影响

16

作者 苏建玲 孙黎 +2 位作者 罗强 李旺 张淑萍 《中国医药导报》 CAS 2013年第12期9-10,13,共3页

目的通过观察肺康饮口服液对人非小细胞肺癌A549生长及凋亡的影响,探讨其体外的抗肿瘤效应。方法体外培养A549细胞,以不同浓度的肺康饮口服液作用为实验组,并设对照组,CCK8法测细胞增殖抑制效应,透射电镜观察药物对细胞形态学的影响,流... 目的通过观察肺康饮口服液对人非小细胞肺癌A549生长及凋亡的影响,探讨其体外的抗肿瘤效应。方法体外培养A549细胞,以不同浓度的肺康饮口服液作用为实验组,并设对照组,CCK8法测细胞增殖抑制效应,透射电镜观察药物对细胞形态学的影响,流式细胞术检测A549细胞中p53和Bcl-2蛋白表达情况。结果不同浓度肺康饮口服液作用A549细胞24 h增殖抑制明显(P﹤0.05),其抑制效应具有剂量依赖的特点,并可诱导A549细胞凋亡,同时上调p53基因表达、下调Bcl-2基因表达(P﹤0.05)。结论肺康饮口服液可抑制A549细胞的生长且增殖抑制效应具有剂量依赖性,并可诱导肿瘤细胞凋亡,其抗肿瘤效应可能与细胞凋亡相关基因表达的调控有关。 展开更多

关键词 肺康饮口服液 A549 CCK-8 P53 BCL-2

在线阅读 下载PDF 职称材料