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自噬-凋亡平衡调控在脑缺血再灌注损伤中的作用及中医药干预研究进展 被引量:8
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作者 赵艳萌 高维娟 《中华中医药学刊》 CAS 北大核心 2021年第2期132-135,I0018,共5页
脑缺血再灌注损伤过程中自噬和凋亡均被激活。适度自噬可以促进神经元存活,抑制凋亡,而自噬过度则会加速神经元凋亡。如何将自噬控制在适度范围内,维持神经元自噬-凋亡平衡,从而减轻神经损伤是目前脑缺血防治研究的热点。自噬-凋亡的平... 脑缺血再灌注损伤过程中自噬和凋亡均被激活。适度自噬可以促进神经元存活,抑制凋亡,而自噬过度则会加速神经元凋亡。如何将自噬控制在适度范围内,维持神经元自噬-凋亡平衡,从而减轻神经损伤是目前脑缺血防治研究的热点。自噬-凋亡的平衡调控涉及多重机制,以此为切入点对中医药干预作用的研究也日益受到关注。就对脑缺血再灌注损伤中神经元自噬-凋亡平衡的作用、调控机制及中医药的干预作用进行综述。 展开更多
关键词 脑缺血再灌注损伤 自噬-凋亡平衡 调控机制
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黄芪甲苷调控自噬减轻氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞氧化应激损伤研究 被引量:31
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作者 靳晓飞 张彐宁 +1 位作者 周晓红 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期53-58,共6页
目的观察黄芪甲苷对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞自噬和氧化应激的影响。方法将PC12细胞分为正常组、模型组(即氧糖剥夺/复氧复糖组)、黄芪甲苷组、自噬抑制剂+黄芪甲苷组。用CCK-8法检测细胞活性;ELISA法检测MDA含量、SOD和GSH-Px活性;... 目的观察黄芪甲苷对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞自噬和氧化应激的影响。方法将PC12细胞分为正常组、模型组(即氧糖剥夺/复氧复糖组)、黄芪甲苷组、自噬抑制剂+黄芪甲苷组。用CCK-8法检测细胞活性;ELISA法检测MDA含量、SOD和GSH-Px活性;透射电镜和MDC荧光染色检测自噬小体;Western blot检测Beclin1蛋白表达。结果与正常组相比,模型组细胞活性降低(P<0.05),MDA含量增多、SOD和GSH-Px活性下降(P<0.05),可见自噬小体,Beclin1表达增多(P<0.05);与模型组相比,黄芪甲苷组细胞活性升高(P<0.05),MDA含量减少、SOD和GSH-Px活性升高(P<0.05),自噬小体数量增多(P<0.05),Beclin1表达增多(P<0.05);当给予自噬抑制剂处理时,自噬抑制剂在减轻自噬的同时,可明显拮抗黄芪甲苷的抗氧化作用。结论黄芪甲苷可通过上调自噬减轻氧糖剥夺/复氧复糖诱导的PC12细胞氧化应激损伤,发挥保护作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 自噬 氧化应激 脑缺血/再灌注损伤 氧糖剥夺/复氧复糖 PC12细胞
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毛蕊异黄酮抑制氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞凋亡研究 被引量:4
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作者 张彐宁 靳晓飞 +2 位作者 周晓红 张颖 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1693-1698,共6页
目的研究毛蕊异黄酮对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞凋亡的影响。方法将对数生长期PC12细胞随机分为4组:正常对照组(Control)、模型组(Model)、毛蕊异黄酮组(Calycosin,0.07μmol·L^-1)和尼莫地平组(Nimodipine,5.00μmol·L^-1,... 目的研究毛蕊异黄酮对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞凋亡的影响。方法将对数生长期PC12细胞随机分为4组:正常对照组(Control)、模型组(Model)、毛蕊异黄酮组(Calycosin,0.07μmol·L^-1)和尼莫地平组(Nimodipine,5.00μmol·L^-1,阳性对照药组)。用CCK-8检测细胞存活率;流式细胞术和TUNEL染色检测细胞凋亡率和凋亡指数;免疫荧光染色检测细胞Bax/Bcl-2比值;Western blot检测细胞凋亡蛋白caspase-3表达。结果与Control组相比,Model组细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和凋亡指数明显升高(P<0.05),Bax/Bcl-2比值和caspase-3蛋白表达明显升高(P<0.05);与Model组相比,Calycosin组和Nimodipine组细胞存活率均明显升高(P<0.05),细胞凋亡率和凋亡指数均明显降低(P<0.05),Bax/Bcl-2比值和caspase-3蛋白表达均明显降低(P<0.05),差异有统计学意义。结论毛蕊异黄酮可明显提高氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞存活率,抑制细胞凋亡,其作用机制与毛蕊异黄酮调控凋亡蛋白Bax、Bcl-2、caspase-3表达有关。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 缺血性中风 氧糖剥夺/复氧复糖 细胞凋亡 PC12细胞 流式细胞术
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淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方介导铁调素干预AD细胞模型ADAM10表达的研究 被引量:8
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作者 马冬雪 高维娟 +3 位作者 刘真一 张红军 王嘉颖 董贤慧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期2198-2204,共7页
目的:探讨淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方介导铁调素(hepcidin,HAMP)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)细胞模型淀粉样前体蛋白水解中关键酶去整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)表达的影响。方法... 目的:探讨淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方介导铁调素(hepcidin,HAMP)对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)细胞模型淀粉样前体蛋白水解中关键酶去整合素金属蛋白酶10(a disintegrin and metalloproteinase 10,ADAM10)表达的影响。方法:体外培养小鼠海马神经元细胞系HT22,随机分为7组:正常对照组、Aβ组(Aβ25-35诱导HT22细胞建立AD细胞模型)、RNAi组(沉默HAMP基因)、Aβ+RNAi组(建立AD细胞模型并沉默HAMP基因)和Aβ+TCM组(建立AD细胞模型并应用淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方处理)、RNAi+TCM组(沉默HAMP基因并应用淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方处理)、Aβ+RNAi+TCM组(建立AD细胞模型沉默HAMP基因并应用淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方处理)。应用qPCR和Western blot检测HAMP的沉默效率应用免疫荧光、qPCR和Western blot检测各组ADAM10的表达情况。结果:与正常对照组比较,Aβ组、RNAi组和Aβ+RNAi组中的ADAM10表达显著降低(P<0.05);与Aβ组比较,Aβ+RNAi组中ADAM10表达显著降低(P<0.05),Aβ+TCM组中ADAM10表达显著增高(P<0.05);与RNAi组比较,Aβ+RNAi组中的ADAM10表达显著降低(P<0.05),RNAi+TCM组中的ADAM10表达显著增高(P<0.05);与Aβ+RNAi组比较,Aβ+RNAi+TCM组中的ADAM10表达显著增高(P<0.05)。结论:淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方可上调AD细胞模型ADAM10的表达,其机制可能与HAMP表达有关。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淫羊藿 黄芪 葛根 铁调素 HT22细胞
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补阳还五汤对脑缺血再灌注大鼠线粒体氧化损伤和PKCε-Nampt通路的影响 被引量:1
5
作者 尹美娟 刘真一 +4 位作者 靳晓飞 周晓红 高钰 赵月眸 高维娟 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期79-86,共8页
目的探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注(I/R)大鼠线粒体氧化损伤及PKCε-Nampt通路的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组(14.3 g/kg)和依达拉奉组(3 mg/kg),除假手术组外均采用MCAO法建立脑I/R损伤模型,术后24 h各组给... 目的探讨补阳还五汤对脑缺血再灌注(I/R)大鼠线粒体氧化损伤及PKCε-Nampt通路的影响。方法大鼠随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组(14.3 g/kg)和依达拉奉组(3 mg/kg),除假手术组外均采用MCAO法建立脑I/R损伤模型,术后24 h各组给予相应剂量药物,给药7 d后通过神经功能评分评估神经功能缺损情况,免疫荧光检测神经元标志物MAP-2表达,观察神经元损伤情况,检测ROS、MDA水平和SOD活性评价氧化损伤情况,荧光探针JC-1检测线粒体膜电位变化,修饰酶循环法检测NAD^(+)/NADH比值,Western blot法检测PKCε、p-PKCε、Nampt蛋白表达,免疫组化法检测p-PKCε、Nampt蛋白阳性表达。结果与模型组比较,补阳还五汤组脑梗死体积、神经功能评分降低(P<0.05),脑组织MAP-2荧光强度增强(P<0.05),神经元损伤减轻,脑组织ROS、MDA水平降低(P<0.05),SOD活性、线粒体膜电位、NAD^(+)/NADH比值升高(P<0.05),p-PKCε、Nampt蛋白表达升高(P<0.05)。结论补阳还五汤可通过激活PKCε-Nampt信号通路、提高线粒体功能来减轻大鼠脑I/R损伤。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑缺血再灌注损伤 线粒体 PKCΕ NAMPT
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补阳还五汤通过notch信号通路增强神经干细胞移植对脑缺血/再灌注大鼠的脑保护作用 被引量:20
6
作者 张紫微 翟羽 +3 位作者 张怡 靳晓飞 董贤慧 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期858-863,共6页
目的探讨补阳还五汤通过调控Notch信号通路增强神经干细胞移植对脑缺血/再灌注大鼠的脑保护作用。方法脑缺血/再灌注模型的建立使用改良线栓堵塞法。给药组于术后补阳还五汤灌胃处理。神经干细胞在造模24 h后移植于缺血侧纹状体区。移植... 目的探讨补阳还五汤通过调控Notch信号通路增强神经干细胞移植对脑缺血/再灌注大鼠的脑保护作用。方法脑缺血/再灌注模型的建立使用改良线栓堵塞法。给药组于术后补阳还五汤灌胃处理。神经干细胞在造模24 h后移植于缺血侧纹状体区。移植14 d后,各组大鼠神经功能、脑梗死体积、脑组织细胞受损情况以及缺血侧Notch1、Hes1、Hes5蛋白的变化,采用Zea Longa神经功能行为学评分、TTC染色、HE染色、Western blot检测观察。结果模型组大鼠神经功能缺损明显,脑梗死体积明显,脑组织细胞损伤严重,Notch1、Hes1、Hes5蛋白表达增高(P<0.05);与移植组相比,补阳还五汤加移植组神经功能学评分明显降低,脑组织细胞损伤情况明显缓解,蛋白水平明显上调(P<0.05)。结论补阳还五汤可以促进脑缺血/再灌注大鼠神经干细胞移植后的脑保护作用,其机制与上调Notch1、Hes1、Hes5的表达有关。 展开更多
关键词 脑缺血/再灌注 神经干细胞移植 补阳还五汤 大鼠 NOTCH信号通路 HES1
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雷帕霉素通过抑制细胞焦亡缓解缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞损伤 被引量:1
7
作者 张怡 张彐宁 +2 位作者 张紫微 周晓红 高维娟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2022年第12期9-15,共7页
目的观察自噬激活剂——雷帕霉素对缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞焦亡的影响。方法取对数生长期的HT22细胞,随机分为4组:正常组、模型组、溶剂对照组、雷帕霉素组,除正常组外,其余各组细胞均进行缺氧缺糖6 h、复氧复糖24 h处理。倒置显微... 目的观察自噬激活剂——雷帕霉素对缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞焦亡的影响。方法取对数生长期的HT22细胞,随机分为4组:正常组、模型组、溶剂对照组、雷帕霉素组,除正常组外,其余各组细胞均进行缺氧缺糖6 h、复氧复糖24 h处理。倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8法检测细胞活性,LDH法检测细胞损伤情况,免疫荧光染色法观察细胞内NLRP3阳性表达,Western blot法检测细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、IL-18、IL-1β蛋白表达。结果正常组细胞胞体饱满、折光性强,细胞突触较多且相互间连接成网状;模型组及溶剂对照组细胞皱缩、变圆,大量脱落、漂浮,细胞间连接大幅减少;雷帕霉素组细胞损伤情况较模型组显著缓解。与正常组比较,模型组细胞活力显著降低,LDH漏出率、NIRP3阳性率、细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、IL-18、IL-1β蛋白表达均显著升高(P<0.01);与模型组比较,雷帕霉素组细胞活力显著升高,LDH漏出率、NIRP3阳性率、细胞内NLRP3、Cleaved Caspase-1、IL-18、IL-1β蛋白表达均显著降低(P<0.01)。溶剂对照组与模型组比较无显著差异(P>0.05)。结论雷帕霉素可能通过抑制细胞焦亡发挥对缺氧缺糖/复氧复糖HT22细胞的保护作用。 展开更多
关键词 雷帕霉素 缺氧缺糖/复氧复糖 焦亡 自噬
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补阳还五汤通过SIRT1/NF-κB p65信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤 被引量:14
8
作者 辛紫媛 靳晓飞 +4 位作者 周晓红 刘真一 高萍 马娴 高维娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第8期1454-1462,共9页
目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB p65(NF-κB p65)炎症信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤(CIRI)的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术(sham)组、模型组(MCAO/R组)、BYHWD组、SIRT1抑制剂组(EX... 目的:探讨补阳还五汤(BYHWD)通过调控沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB p65(NF-κB p65)炎症信号通路减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤(CIRI)的作用机制。方法:SD大鼠随机分为假手术(sham)组、模型组(MCAO/R组)、BYHWD组、SIRT1抑制剂组(EX527组)和BYHWD+EX527组,每组15只。除sham组外,其余各组均构建大脑中动脉栓塞(MCAO)模型缺血2 h再灌注3 d并给予药物干预。采用ZeaLonga评分标准进行神经功能缺损评分;TTC染色检测脑梗死体积百分比;HE染色观察脑组织病理学变化;Westernblot检测SIRT1、乙酰化核因子κB p65(AcNF-κB p65)、NF-κB p65、和白细胞介素6(IL-6)蛋白的相对表达量;免疫荧光检测NF-κB p65入核表达水平;免疫组化染色检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平。结果:与sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分升高(P<0.05);脑梗死体积百分比增加(P<0.05);缺血侧脑组织皮质区病理损伤严重,神经细胞排列紊乱、细胞核固缩、碎裂;SIRT1蛋白表达减少,AcNF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白表达升高(P<0.05);免疫荧光显示细胞核内NF-κB p65表达增多(P<0.05);免疫组化显示TNF-α阳性表达升高(P<0.05)。与MCAO/R组相比,BYHWD组神经功能学评分降低(P<0.05);脑梗死体积百分比减小(P<0.05);缺血侧脑组织皮质区病理损伤减轻,神经细胞形态有所恢复;SIRT1蛋白表达增加,AcNF-κB p65/NF-κB p65和IL-6蛋白表达减少(P<0.05);免疫荧光显示细胞核内NF-κB p65表达减少(P<0.05);免疫组化显示TNF-α阳性表达减少(P<0.05)。SIRT1抑制剂EX527能降低SIRT1的表达,抑制脱乙酰酶活性,削弱了BYHWD通过激活SIRT1后对CIRI产生的上述作用。结论:BYHWD可有效减轻大鼠CIRI,激活SIRT1/NF-κB p65信号通路进而抑制炎症反应是其发挥作用的机制之一。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 补阳还五汤 炎症 SIRT1/NF-κB p65信号通路
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补阳还五汤通过AMPK/mTOR/ULK1信号通路调控自噬减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤 被引量:35
9
作者 马秀娟 赵艳萌 +3 位作者 王文良 靳晓飞 周晓红 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期147-152,共6页
目的探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血/再灌注损伤的AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路机制。方法用改良线栓法建造大鼠左侧脑缺血模型,各组大鼠每24 h给药1次,共3次。再灌注72 h后观察大鼠神经损伤情况和脑梗死体积改变;尼氏染色法和TUNEL染色法... 目的探讨补阳还五汤抗大鼠脑缺血/再灌注损伤的AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路机制。方法用改良线栓法建造大鼠左侧脑缺血模型,各组大鼠每24 h给药1次,共3次。再灌注72 h后观察大鼠神经损伤情况和脑梗死体积改变;尼氏染色法和TUNEL染色法观察神经细胞形态、数量以及凋亡情况;Western blot检测自噬蛋白和AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路相关蛋白表达情况。结果补阳还五汤改善大鼠神经功能缺陷,减少脑梗死体积和神经细胞凋亡,减轻脑组织病理损伤;抑制AMPK磷酸化活化,解除AMPK对下游mTOR和ULK1的抑制,促进二者磷酸化激活,抑制细胞自噬。AMPK激动剂Metformin提高细胞自噬水平,同时逆转了补阳还五汤抗大鼠脑缺血/再灌注损伤作用。结论补阳还五汤介导AMPK/mTOR/ULK1自噬信号通路对脑缺血/再灌注损伤大鼠发挥神经保护作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑缺血/再灌注损伤 AMPK MTOR ULK1 自噬 神经保护
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淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方对APPswe/PS1dE9双转基因AD模型小鼠海马CA3区hepcidin表达的影响 被引量:9
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作者 马冬雪 董贤慧 +3 位作者 贺小平 许力军 刘亚磊 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1523-1527,共5页
目的 探索黄芪、淫羊藿、葛根有效组分复方对APPswe/PS1dE9双转基因AD模型小鼠海马CA3区hepcidin表达的影响。方法 将30只10月龄的雄性APPswe/PS1dE9双转基因模型小鼠随机分为复方组、模型组和去铁斯诺(DFX)组,10只10月龄的雄性C57BL/6... 目的 探索黄芪、淫羊藿、葛根有效组分复方对APPswe/PS1dE9双转基因AD模型小鼠海马CA3区hepcidin表达的影响。方法 将30只10月龄的雄性APPswe/PS1dE9双转基因模型小鼠随机分为复方组、模型组和去铁斯诺(DFX)组,10只10月龄的雄性C57BL/6J小鼠作为正常对照组。用药结束后,取出小鼠的脑组织,应用免疫荧光、Real-time PCR和Western blot检测各组小鼠海马CA3区hepcidin的表达情况。结果 与正常对照组小鼠相比,模型组小鼠海马CA3区hepcidin的表达明显降低( P <0.05);淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方和DFX灌胃干预后,hepcidin表达水平较APPswe/PS1dE9双转基因AD模型小鼠海马CA3区明显升高( P <0.05)。复方组和DFX组相比,hepcidin表达水平差异无显著性( P >0.05)。结论 黄芪、淫羊藿、葛根有效组分复方可以上调hepcidin的表达,提示淫羊藿、黄芪、葛根有效组分复方在阿尔茨海默病的铁超载临床治疗方面具有重要的理论意义。 展开更多
关键词 阿尔茨海默病 淫羊藿 黄芪 葛根 中药有效组分 转基因物模型 铁调素
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补阳还五汤通过PI3K/AKT通路调控自噬抗大鼠脑缺血/再灌注损伤的作用 被引量:25
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作者 单玉栋 赵艳萌 +6 位作者 靳晓飞 周晓红 叶佳蓓 马秀娟 田甜 蔡国英 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期386-391,共6页
目的探究补阳还五汤通过PI3K/AKT通路调控自噬抗大鼠脑缺血/再灌注损伤的作用。方法大鼠随机分为5组(n=10):假手术组(Sham)、模型组(Model)、补阳还五汤组(BYHWD)、PI3K抑制剂组(LY294002)与溶媒剂组(Vehicle)。除Sham组外,其余各组均缺... 目的探究补阳还五汤通过PI3K/AKT通路调控自噬抗大鼠脑缺血/再灌注损伤的作用。方法大鼠随机分为5组(n=10):假手术组(Sham)、模型组(Model)、补阳还五汤组(BYHWD)、PI3K抑制剂组(LY294002)与溶媒剂组(Vehicle)。除Sham组外,其余各组均缺血2 h,再灌注72 h造模处理。Zea Longa评分评估神经缺损、TTC检测脑梗死体积、HE观察脑部缺血半暗带(ischemic penumbra,IP)损伤、免疫荧光检测LC3B、Western blot检测PI3K/AKT通路与自噬标志蛋白。结果BYHWD组与Model组相比,大鼠神经功能评分降低、脑梗死体积减小、脑部IP病理损伤减轻,PI3K与p-AKT/AKT表达增加,LC3Ⅱ/Ⅰ降低,p62升高(P<0.05);BYHWD的调控作用被LY294002减弱(P<0.05)。结论补阳还五汤通过激活PI3K/AKT通路抑制细胞自噬,从而减轻大鼠脑缺血/再灌注损伤。 展开更多
关键词 补阳还五汤 PI3K/AKT通路 自噬 缺血性脑卒中 脑缺血/再灌注损伤 神经保护
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补阳还五汤对脑缺血/再灌注损伤大鼠皮质区沉默信息调节因子1表达的影响 被引量:5
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作者 辛紫媛 靳晓飞 +4 位作者 周晓红 赵艳萌 刘真一 张彐宁 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1896-1901,共6页
目的建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,探讨补阳还五汤对皮质区沉默信息调节因子1(silent information regulation 1,SIRT1)蛋白表达的影响,研究脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion in... 目的建立大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,探讨补阳还五汤对皮质区沉默信息调节因子1(silent information regulation 1,SIRT1)蛋白表达的影响,研究脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CIRI)的可能作用机制。方法SD大鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO/R)、补阳还五汤组(BYHWT)、阿托伐他汀组(Atorvastatin),每组15只。缺血2 h/再灌注72 h及药物干预后,采用激光散斑血流监测视频系统评价模型建造成功。造模成功后通过Zea Longa神经功能学评分评价大鼠神经功能缺损情况;TTC染色检测脑梗死体积;尼氏染色观察神经细胞损伤情况;Western blot检测SIRT1蛋白表达水平;免疫荧光检测SIRT1荧光表达水平。结果与Sham组相比,MCAO/R组大鼠神经功能缺损严重(P<0.05);脑梗死体积增加(P<0.05);神经细胞损伤严重、排列紊乱、数量减少,细胞核固缩(P<0.05);SIRT1表达减少(P<0.05);SIRT1荧光强度减弱(P<0.05)。与MCAO/R组相比,BYHWT组和Atorvastatin组大鼠神经功能缺损减轻(P<0.05);脑梗死体积占比下降(P<0.05);神经细胞损伤减轻、数量增多(P<0.05);SIRT1表达增加(P<0.05);SIRT1荧光强度增强(P<0.05)。结论补阳还五汤可有效减轻脑缺血/再灌注大鼠的脑损伤,其发挥保护作用可能与提高缺血侧皮质区SIRT1蛋白表达有关。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑卒中 脑缺血/再灌注损伤 组蛋白去乙酰化酶 SIRT1 SD大鼠
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黄芪甲苷对脑缺血再灌注大鼠炎症因子及超微结构的影响 被引量:26
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作者 靳晓飞 张彐宁 +1 位作者 周晓红 高维娟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第4期1-6,共6页
目的观察黄芪甲苷对脑缺血再灌注大鼠炎症因子及超微结构的影响。方法以SD大鼠为实验对象,采用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。将40只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组(脑缺血再灌注损伤组)、黄芪甲苷组和尼... 目的观察黄芪甲苷对脑缺血再灌注大鼠炎症因子及超微结构的影响。方法以SD大鼠为实验对象,采用大脑中动脉闭塞(MCAO)法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。将40只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组(脑缺血再灌注损伤组)、黄芪甲苷组和尼莫地平组(阳性药物组)。除假手术组之外,其余组脑缺血2 h后再灌注24 h,其中黄芪甲苷组和尼莫地平组于造模前一周腹腔注射给药。用Zea Longa评分法检测各组大鼠神经功能缺损情况;TTC染色检测脑梗死体积;ELISA法检测脑组织中炎症因子--肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;尼氏染色检测大脑皮质区神经细胞损伤;透射电子显微镜检测大脑皮质区神经细胞超微结构变化。结果假手术组大鼠神经功能正常,未见脑梗死病灶,神经细胞和尼氏体数量丰富,细胞排列整齐,细胞超微结构清晰正常;与假手术组相比,模型组大鼠神经功能缺损较为严重,脑梗死体积显著增加(P<0.05),炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β含量均升高(P<0.05),细胞排列混乱,细胞核变形、固缩,染色质分布不均匀;与模型组比,黄芪甲苷组和尼莫地平组大鼠神经功能均得到改善,脑梗死体积均减少(P<0.05),TNF-α、IL-6、IL-1β含量均显著下降(P<0.05),细胞排列较为整齐,细胞核规整,染色质分布较为均匀。结论黄芪甲苷可抑制大鼠脑缺血再灌注损伤,改善神经细胞超微结构变化,其作用机制可能与黄芪甲苷减轻炎症反应有关。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 大鼠 脑缺血再灌注 炎症因子 超微结构
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补阳还五汤通过激活大鼠海马区沉默信息调节因子1减轻脑缺血/再灌注损伤后炎症反应的机制 被引量:7
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作者 辛紫媛 刘真一 +4 位作者 高萍 马娴 张彐宁 靳晓飞 高维娟 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期1787-1793,共7页
目的探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWT)通过调节沉默信息调节因子1(silent information regulation 1,SIRT1)发挥对脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CIRI)大鼠脑组织海马区炎症反应的抑制作用及... 目的探讨补阳还五汤(Buyang Huanwu Decoction,BYHWT)通过调节沉默信息调节因子1(silent information regulation 1,SIRT1)发挥对脑缺血/再灌注损伤(cerebral ischemia/reperfusion injury,CIRI)大鼠脑组织海马区炎症反应的抑制作用及机制。方法大鼠制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO/R)、补阳还五汤组(BYHWT)、BYHWT+SIRT1抑制剂组(BYHWT+EX527)。各组大鼠通过Zea Longa检测神经功能学评分;TTC染色测定脑梗死体积;HE染色观察海马区的病理损伤情况;Western blot检测SIRT1、IL-6表达水平;免疫组化检测TNF-α、IL-1β表达水平。结果与Sham组相比,MCAO/R组神经功能学评分增高(P<0.05);脑梗死体积增加(P<0.05);海马区神经细胞损伤严重、排列紊乱、核破碎;SIRT1表达减少,IL-6表达增加(P<0.05);TNF-α、IL-1β表达增加(P<0.05)。与MCAO/R组相比,BYHWT组神经功能学评分降低(P<0.05);脑梗死体积减小(P<0.05);海马区神经细胞损伤减轻;SIRT1表达增加,IL-6表达减少(P<0.05);TNF-α、IL-1β表达减少(P<0.05)。与BYHWT组相比,BYHWT+EX527组神经功能学评分增高(P<0.05);脑梗死体积增加(P<0.05);海马区神经细胞损伤加重;SIRT1表达减少,IL-6表达增加(P<0.05);TNF-α、IL-1β表达增加(P<0.05)。结论BYHWT可激活大鼠脑组织海马区SIRT1,减轻CIRI后炎症反应发挥脑保护作用。 展开更多
关键词 补阳还五汤 脑缺血/再灌注损伤 组蛋白去乙酰化酶 SIRT1 炎症反应 海马
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毛蕊异黄酮对脑缺血/再灌注大鼠神经细胞凋亡的影响 被引量:3
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作者 张彐宁 高维娟 +1 位作者 周晓红 靳晓飞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1775-1776,共2页
脑缺血/再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)损伤由缺血脑组织恢复血流供应所引起,是缺血性脑卒中治疗过程中产生的病理性损伤[1],凋亡在其病理进程中发挥了重要作用。毛蕊异黄酮是中药黄芪的有效活性成分,是一种潜在的神经保护... 脑缺血/再灌注(cerebral ischemia-reperfusion,CIR)损伤由缺血脑组织恢复血流供应所引起,是缺血性脑卒中治疗过程中产生的病理性损伤[1],凋亡在其病理进程中发挥了重要作用。毛蕊异黄酮是中药黄芪的有效活性成分,是一种潜在的神经保护剂[2],本研究旨在探讨毛蕊异黄酮对脑缺血/再灌注损伤的保护作用及其作用机制。1材料与方法1.1动物SPF级SD大鼠60只,♂,体质量280±20 g,由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供,许可证号:SCXK(京)2016-0011。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 脑缺血/再灌注 凋亡 大鼠 神经细胞
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毛蕊异黄酮减轻缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞损伤 被引量:4
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作者 张彐宁 靳晓飞 +3 位作者 唐敬龙 赵艳萌 周晓红 高维娟 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第11期41-49,64,共9页
目的 探讨毛蕊异黄酮(calycosin)对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞损伤的影响。方法 采用缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)模型,将PC12细胞随机分为5组:正常对照组(control组),缺氧缺糖/复氧复糖组(model组),毛蕊异黄酮高、中、低剂量(0. 140μmol/... 目的 探讨毛蕊异黄酮(calycosin)对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞损伤的影响。方法 采用缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)模型,将PC12细胞随机分为5组:正常对照组(control组),缺氧缺糖/复氧复糖组(model组),毛蕊异黄酮高、中、低剂量(0. 140μmol/L、0. 070μmol/L、0. 035μmol/L)组。倒置显微镜观察细胞形态变化;CCK-8法检测细胞活力;LDH法检测细胞乳酸脱氢酶漏出率;PI荧光染色检测细胞膜完整性;免疫组化法检测caspase-3表达;Bax、Bcl-2免疫荧光法检测细胞凋亡情况。结果 Control组细胞生长状态良好;与control组比较,model组细胞数量减少,突触减少,细胞出现皱缩,胞膜破坏,细胞活性显著降低(P <0. 05),乳酸脱氢酶漏出率显著升高(P <0. 05),PI红染细胞数增多(P <0. 05),caspase-3表达明显升高(P <0. 05),Bax/Bcl-2比值显著升高(P <0. 05);与model组比较,calycosin中、低剂量组细胞数量均增多,突触增多,细胞较为规整,细胞活性显著提高(P <0. 05),乳酸脱氢酶漏出率显著降低(P <0. 05),PI红染细胞数减少(P <0. 05),caspase-3表达显著降低(P <0. 05),Bax/Bcl-2比值显著降低(P <0. 05),且以上指标中剂量组效果更加显著;而高剂量组与模型组比较,以上指标差异均不明显(P> 0. 05)。结论 毛蕊异黄酮可优化缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞生长状态,提高细胞活力,抑制乳酸脱氢酶漏出,并通过降低caspase-3表达和Bax/Bcl-2比值抑制细胞凋亡,有效减轻细胞损伤,发挥保护作用。 展开更多
关键词 毛蕊异黄酮 缺血性脑卒中 缺氧缺糖/复氧复糖 细胞凋亡 PC12细胞
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沉默Apaf-1基因对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响 被引量:3
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作者 张彐宁 高维娟 +1 位作者 周晓红 靳晓飞(指导) 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期21-25,30,共6页
目的:探讨RNA干扰沉默Apaf-1基因对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响。方法:PC12细胞随机分为3组:正常组(Control)、模型组(Model)、Apaf-1基因沉默组(Apaf-1-siRNA)。正常组于CO2培养箱内正常培养,其余2组给予氧糖剥夺2 ... 目的:探讨RNA干扰沉默Apaf-1基因对氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路的影响。方法:PC12细胞随机分为3组:正常组(Control)、模型组(Model)、Apaf-1基因沉默组(Apaf-1-siRNA)。正常组于CO2培养箱内正常培养,其余2组给予氧糖剥夺2 h、复氧复糖24 h处理,Apaf-1-siRNA组于造模前将化学合成的siRNA通过脂质体转染于PC12细胞靶向沉默Apaf-1基因。用荧光标记的siRNA检测Apaf-1转染效率,Western blot检测转染后PC12细胞Apaf-1蛋白表达,CCK-8检测细胞存活率,TUNEL染色检测细胞凋亡指数,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫荧光染色检测Bax/Bcl-2比值,Western blot检测线粒体凋亡通路关键蛋白Apaf-1、caspase-9、caspase-3表达。结果:Apaf-1-siRNA可有效沉默PC12细胞Apaf-1蛋白表达(P<0.05)。与Control组相比,Model组细胞存活率明显降低(P<0.05),细胞凋亡指数和凋亡率显著升高(P<0.05),Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05),线粒体凋亡通路关键蛋白Apaf-1、caspase-9、caspase-3表达显著升高(P<0.05);与Model组相比,Apaf-1-siRNA组细胞存活率显著升高(P<0.05),细胞凋亡指数和凋亡率显著降低(P<0.05),Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05),Apaf-1、caspase-9、caspase-3蛋白表达均明显降低(P<0.05)。结论:靶向沉默Apaf-1基因可有效降低氧糖剥夺/复氧复糖PC12细胞线粒体凋亡通路关键蛋白Apaf-1、caspase-9、caspase-3表达,抑制细胞凋亡,提高细胞存活率。 展开更多
关键词 APAF-1 凋亡 线粒体凋亡通路 PC12细胞
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铁死亡脂质过氧化机制及其与阿尔茨海默病的联系 被引量:12
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作者 李佳明 韩雅琪 +2 位作者 吴桐 张天赐 董贤慧 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期1142-1147,共6页
阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是多发于65岁及以上老年人群的中枢神经系统退行性疾病,临床表现以记忆、语言及其他认知能力衰退为主,主要病理特征为以β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)为核心成分的老年斑及tau蛋白过度磷酸... 阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)是多发于65岁及以上老年人群的中枢神经系统退行性疾病,临床表现以记忆、语言及其他认知能力衰退为主,主要病理特征为以β-淀粉样蛋白(amyloidβ-protein,Aβ)为核心成分的老年斑及tau蛋白过度磷酸化引起的神经原纤维缠结。在日益增强的老龄化趋势下. 展开更多
关键词 铁死亡 脂质过氧化 阿尔茨海默病 多不饱和脂肪酸
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气虚血瘀与细胞焦亡在缺血性脑卒中中的相关性探讨
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作者 王泽超 张怡 +2 位作者 张拴成 方敬 侯仙明 《中国免疫学杂志》 2025年第8期2019-2024,共6页
缺血性脑卒中(CIS)作为一种高致残率、严重危害人类健康的疾病,其发病机制复杂,目前尚未完全阐明,急需探索新的有效的治疗措施。细胞焦亡作为炎症反应性的程序性细胞死亡模式,参与了CIS的发病机制,抑制CIS过程中的细胞焦亡、减轻炎症反... 缺血性脑卒中(CIS)作为一种高致残率、严重危害人类健康的疾病,其发病机制复杂,目前尚未完全阐明,急需探索新的有效的治疗措施。细胞焦亡作为炎症反应性的程序性细胞死亡模式,参与了CIS的发病机制,抑制CIS过程中的细胞焦亡、减轻炎症反应可有效缓解CIS脑损伤。祖国医学认为气虚血瘀是CIS的基础病机,益气活血法是治疗CIS的主要原则,故本文将细胞焦亡与气虚血瘀相关联,就通过益气活血法抑制细胞焦亡,减轻CIS脑组织损伤的研究进展进行如下综述。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 细胞焦亡 气虚血瘀
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