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Notch1和HES1在骨肉瘤组织中的表达及其对U2OS细胞侵袭能力的影响
被引量：
6
1
作者
王勇
赵伟
马骥
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2015年第6期777-781,共5页
目的:研究Notch1和HES1基因在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系U2OS中的表达及其对U2OS侵袭能力的影响。方法:组织学水平研究中,配对选取23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本;细胞学水平研究中,选取骨肉瘤细胞系U2OS及人正常成骨细胞系h FO...
目的:研究Notch1和HES1基因在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系U2OS中的表达及其对U2OS侵袭能力的影响。方法:组织学水平研究中,配对选取23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本;细胞学水平研究中,选取骨肉瘤细胞系U2OS及人正常成骨细胞系h FOB1.19;采用免疫组化法检测组织学水平Notch1及HES1蛋白的表达,采用Western blot及Real-time PCR法检测组织学及细胞学水平Notch1、HES1蛋白及mRNA的表达。用Notch1-siRNA沉默U2OS细胞中Notch1基因后,应用Western blot及Real-time PCR法检测U2OS细胞中Notch1及HES1的表达,Transwell法检测U2OS侵袭能力的变化。结果:相比于正常组织,骨肉瘤组织中Notch1、HES1 mRNA和蛋白呈高表达(t配对=22.567,14.830和8.439,7.100,P<0.001)。U2OS细胞中Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达强于h FOB1.19细胞(t=11.053,20.482和28.845,34.681,P<0.001)。沉默Notch1基因后,U2OS细胞Notch1、HES1mRNA和蛋白表达下降(t=6.294,9.209和9.151,13.953,P<0.05),侵袭能力下降(t=71.387,P<0.001)。结论:Notch1和HES1在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中呈高表达,沉默Notch1基因可降低U2OS细胞侵袭能力。
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关键词
NOTCH1
HES1
骨肉瘤
侵袭
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职称材料
miR-335靶向Sp1对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控
被引量：
9
2
作者
王勇
赵伟
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期1428-1432,共5页
目的:探讨miR-335对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控是否通过靶向抑制Sp1基因的表达实现。方法:利用萤光素酶报告基因实验验证miR-335能否靶向作用于Sp1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);利用real-time PCR和Western blotting...
目的:探讨miR-335对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控是否通过靶向抑制Sp1基因的表达实现。方法:利用萤光素酶报告基因实验验证miR-335能否靶向作用于Sp1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);利用real-time PCR和Western blotting分析Sp1 mRNA和蛋白表达的变化;通过MTT法分析MG-63细胞增殖水平。结果:萤光素酶报告基因实验结果显示,miR-335可特异性结合于Sp1基因的3’-UTR。Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-335可减少Sp1蛋白的表达,但对mRNA表达无显著影响;转染Sp1表达质粒可上调Sp1 mRNA和蛋白表达。MTT结果显示,miR-335可抑制MG-63细胞增殖,转染Sp1表达质粒可部分逆转miR-335对MG-63细胞增殖的抑制作用。结论:miR-335可能通过靶向Sp1基因抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖。
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关键词
miR-335
Sp1转录因子
骨肉瘤
细胞增殖
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职称材料
miR-335靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移的实验研究
被引量：
4
3
作者
王勇
王科峰
赵伟
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期801-807,共7页
背景与目的:微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一类小分子内源性RNA,主要在转录后水平调节靶基因的表达。micro RNA-335(mi R-335)作为一种肿瘤抑制因子,参与了多种人类肿瘤的发生、发展过程。本研究旨在探讨mi R-335是否靶向抑制Rho相关卷...
背景与目的:微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一类小分子内源性RNA,主要在转录后水平调节靶基因的表达。micro RNA-335(mi R-335)作为一种肿瘤抑制因子,参与了多种人类肿瘤的发生、发展过程。本研究旨在探讨mi R-335是否靶向抑制Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK1)基因的表达,并以此调控人骨肉瘤细胞MG-63侵袭及转移。方法:理论预测并通过荧光素酶基因报告验证mi R-335与ROCK1基因的3'-非翻译区(untranslated region,UTR)的特异性结合作用;real-time PCR和蛋白质印迹法(Western blot)分别从基因和蛋白水平检测mi R-335对ROCK1表达的负性调控作用;Transwell小室法检测mi R-335过表达及下调ROCK1表达后MG-63侵袭及转移能力的变化。结果:Targetscan预测显示,mi R-335与ROCK1 3'-UTR存在结合位点。荧光素酶基因报告实验结果显示,mi R-335 mimic和ROCK1 3'-UTR能够靶向结合;mi R-335在MG-63细胞中低表达,ROCK1则呈高表达。Western blot检测结果显示,转染mi R-335 mimic或转染ROCK1 si RNA后ROCK1的蛋白表达减少。Transwell小室法检测结果显示,过表达mi R-335或下调ROCK1后穿过基膜的细胞数目明显下降。结论:mi R-335能特异性结合于ROCK1基因的3'-UTR并下调ROCK1的表达,抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移。
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关键词
微小RNA-335
Rho相关卷曲螺旋形成蛋白液酶1
人骨肉瘤细胞MG-63
侵袭及转移
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职称材料
题名
Notch1和HES1在骨肉瘤组织中的表达及其对U2OS细胞侵袭能力的影响
被引量：
6
1
作者
王勇
赵伟
马骥
机构
沈阳医学院附属中心医院骨四科
出处
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2015年第6期777-781,共5页
基金
国家自然科学基金项目81502333
辽宁省教育厅科学研究一般项目2014418
+2 种基金
沈阳市卫生局青年基金项目辽科发[2013]31号
沈阳医学院青年科学基金项目20132041
沈阳医学院科学研究基金项目20151002
文摘
目的:研究Notch1和HES1基因在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系U2OS中的表达及其对U2OS侵袭能力的影响。方法:组织学水平研究中,配对选取23例骨肉瘤及临近瘤旁正常骨骼肌组织标本;细胞学水平研究中,选取骨肉瘤细胞系U2OS及人正常成骨细胞系h FOB1.19;采用免疫组化法检测组织学水平Notch1及HES1蛋白的表达,采用Western blot及Real-time PCR法检测组织学及细胞学水平Notch1、HES1蛋白及mRNA的表达。用Notch1-siRNA沉默U2OS细胞中Notch1基因后,应用Western blot及Real-time PCR法检测U2OS细胞中Notch1及HES1的表达,Transwell法检测U2OS侵袭能力的变化。结果:相比于正常组织,骨肉瘤组织中Notch1、HES1 mRNA和蛋白呈高表达(t配对=22.567,14.830和8.439,7.100,P<0.001)。U2OS细胞中Notch1、HES1 mRNA和蛋白表达强于h FOB1.19细胞(t=11.053,20.482和28.845,34.681,P<0.001)。沉默Notch1基因后,U2OS细胞Notch1、HES1mRNA和蛋白表达下降(t=6.294,9.209和9.151,13.953,P<0.05),侵袭能力下降(t=71.387,P<0.001)。结论:Notch1和HES1在骨肉瘤组织及骨肉瘤细胞系中呈高表达,沉默Notch1基因可降低U2OS细胞侵袭能力。
关键词
NOTCH1
HES1
骨肉瘤
侵袭
Keywords
Notch1
HES1
osteosarcoma
invasion
分类号
R738.7 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
miR-335靶向Sp1对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控
被引量：
9
2
作者
王勇
赵伟
机构
沈阳医学院附属中心医院骨四科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第8期1428-1432,共5页
基金
辽宁省自然科学基金资助项目(No.20102218)
文摘
目的:探讨miR-335对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控是否通过靶向抑制Sp1基因的表达实现。方法:利用萤光素酶报告基因实验验证miR-335能否靶向作用于Sp1基因的3’-非翻译区(untranslated region,UTR);利用real-time PCR和Western blotting分析Sp1 mRNA和蛋白表达的变化;通过MTT法分析MG-63细胞增殖水平。结果:萤光素酶报告基因实验结果显示,miR-335可特异性结合于Sp1基因的3’-UTR。Real-time PCR和Western blotting结果显示,转染miR-335可减少Sp1蛋白的表达,但对mRNA表达无显著影响;转染Sp1表达质粒可上调Sp1 mRNA和蛋白表达。MTT结果显示,miR-335可抑制MG-63细胞增殖,转染Sp1表达质粒可部分逆转miR-335对MG-63细胞增殖的抑制作用。结论:miR-335可能通过靶向Sp1基因抑制人骨肉瘤MG-63细胞增殖。
关键词
miR-335
Sp1转录因子
骨肉瘤
细胞增殖
Keywords
miR-335
Spl transcription factor
Osteosarcoma
Cell proliferation
分类号
R363 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
miR-335靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移的实验研究
被引量：
4
3
作者
王勇
王科峰
赵伟
机构
沈阳医学院附属中心医院骨四科
中国医
科
大学
附属
盛京
医院
泌尿外一
科
出处
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第11期801-807,共7页
基金
辽宁省教育厅科学研究一般项目(No:L2014428)
辽宁省社会发展公关计划项目(No:2013225086)
沈阳医学院青年科学基金(No:20132041)
文摘
背景与目的:微小RNA(micro RNA,mi RNA)是一类小分子内源性RNA,主要在转录后水平调节靶基因的表达。micro RNA-335(mi R-335)作为一种肿瘤抑制因子,参与了多种人类肿瘤的发生、发展过程。本研究旨在探讨mi R-335是否靶向抑制Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1(Rho associated coiled-coil forming protein kinase,ROCK1)基因的表达,并以此调控人骨肉瘤细胞MG-63侵袭及转移。方法:理论预测并通过荧光素酶基因报告验证mi R-335与ROCK1基因的3'-非翻译区(untranslated region,UTR)的特异性结合作用;real-time PCR和蛋白质印迹法(Western blot)分别从基因和蛋白水平检测mi R-335对ROCK1表达的负性调控作用;Transwell小室法检测mi R-335过表达及下调ROCK1表达后MG-63侵袭及转移能力的变化。结果:Targetscan预测显示,mi R-335与ROCK1 3'-UTR存在结合位点。荧光素酶基因报告实验结果显示,mi R-335 mimic和ROCK1 3'-UTR能够靶向结合;mi R-335在MG-63细胞中低表达,ROCK1则呈高表达。Western blot检测结果显示,转染mi R-335 mimic或转染ROCK1 si RNA后ROCK1的蛋白表达减少。Transwell小室法检测结果显示,过表达mi R-335或下调ROCK1后穿过基膜的细胞数目明显下降。结论:mi R-335能特异性结合于ROCK1基因的3'-UTR并下调ROCK1的表达,抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移。
关键词
微小RNA-335
Rho相关卷曲螺旋形成蛋白液酶1
人骨肉瘤细胞MG-63
侵袭及转移
Keywords
miR-335 Rho associated coiled-coil forming protein kinase MG-63 Migration and Invasion
分类号
R738.1 [医药卫生—肿瘤]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
Notch1和HES1在骨肉瘤组织中的表达及其对U2OS细胞侵袭能力的影响
王勇
赵伟
马骥
《郑州大学学报（医学版）》
CAS
北大核心
2015
6
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
miR-335靶向Sp1对人骨肉瘤MG-63细胞增殖的调控
王勇
赵伟
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
9
在线阅读
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职称材料
3
miR-335靶向Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1抑制人骨肉瘤细胞MG-63侵袭转移的实验研究
王勇
王科峰
赵伟
《中国癌症杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
4
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