一氧化氮吸入对实验性胎粪吸入兔肺中性粒细胞表面CD11b表达的影响 被引量：4

1

作者 龙小雅 杜立中 +1 位作者 何良强 李文林 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期402-405,共4页

目的 :探讨在不同氧浓度下吸入不同浓度NO治疗胎粪吸入综合征大耳白兔 ,对兔肺中的中性粒细胞表面粘附分子CD11b表达的影响。方法 :对常频通气下的胎粪吸入综合征家兔分别在 2 1% ,10 0 %氧浓度下给予0 2× 10 -6 mol/L ,0 3 3... 目的 :探讨在不同氧浓度下吸入不同浓度NO治疗胎粪吸入综合征大耳白兔 ,对兔肺中的中性粒细胞表面粘附分子CD11b表达的影响。方法 :对常频通气下的胎粪吸入综合征家兔分别在 2 1% ,10 0 %氧浓度下给予0 2× 10 -6 mol/L ,0 3 3× 10 -6 mol/L ,0 67× 10 -6 mol/LNO治疗 12h ,通过左颈总动脉插管检测平均动脉压 ,血液高铁血红蛋白含量的变化。并采用流式细胞术检测肺泡灌洗液中中性粒细胞表面粘附分子CD11b的平均荧光强度。结果 :各组动物在各时间点平均动脉血压无差别。在两种氧浓度不同NO吸入浓度下血液各时点高铁血红蛋白含量在正常范围之内。不同氧浓度下 ,0 3 3× 10 -6 ,0 67× 10 -6 mol/LNO吸入治疗组肺泡灌洗液中的中性粒细胞上粘附分子CD11b的表达比非干预组要低 (平均数±标准差 :2 1%O2 ,0 3 3× 10 -6 mol/LNO ,12 1± 2 0vs 3 92± 2 0 4,0 67×10 -6 mol/LNO ,112± 3 0vs 3 92± 2 0 4;10 0 %O2 ,0 3 3× 10 -6 mol/LNO ,113± 2 4vs 2 93± 65 ,0 67× 10 -6 mol/LNO ,10 2±114vs 2 93± 65 ,P <0 0 5 ) ;0 2× 10 -6 mol/LNO吸入治疗组对粘附分子的表达无影响。 (平均数±标准差 :2 1%O2 ,190± 10 1vs 3 92± 2 0 4;10 0 %O2 ,2 2 2± 85vs 2 93± 65 ;P >0 0 5 ) ;同? 展开更多

关键词 一氧化氮吸入 实验性胎粪吸入 中性粒细胞 CD11B表达 兔 胎粪吸入综合征

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人可溶性粘附素5截短体的克隆、表达及生物活性测定

2

作者 李文林 石小玉 +3 位作者 熊丽霞 王志刚 周莹 李红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期62-64,70,共4页

目的:克隆和转染人可溶性粘附素5截短体(sCadherin5△),并检测其生物活性。方法:RT-PCR扩增Cadher-in5△cDNA,并克隆入pMSCV逆转录病毒载体,构建pMSCV/sCadherin5△,转化感受态大肠杆菌XL-blue菌株,提取、纯化和酶切质粒,测序分析sCadhe... 目的:克隆和转染人可溶性粘附素5截短体(sCadherin5△),并检测其生物活性。方法:RT-PCR扩增Cadher-in5△cDNA,并克隆入pMSCV逆转录病毒载体,构建pMSCV/sCadherin5△,转化感受态大肠杆菌XL-blue菌株,提取、纯化和酶切质粒,测序分析sCadherin5△,转染NIH3T3细胞,mRNA和蛋白质水平检测NIH3T3细胞表达和分泌sCadherin5△,MTT方法检测sCadherin5△生物活性。结果:PCR产物约为1128bp,构建了pMSCV/sCadherin5△质粒载体,序列测定的结果与GeneBank中Cadherin5胞膜外区121bp至1248bp之间的序列一致。pMSCV/sCadherin5△转染的NIH3T3细胞表达和分泌sCadherin5△,sCadherin5△抑制HUVEC细胞体外增殖。结论:克隆、表达和分泌了具有生物活性的人sCadherin5△。 展开更多

关键词 粘附素5 克隆 逆转录病毒载体 NIH3T3细胞 HUVEC细胞

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ICU常见病原菌及鲍曼不动杆菌质粒上耐药基因的研究 被引量：11

3

作者 李蓉 李文林 +3 位作者 石小玉 廖晚珍 徐小文 赵林 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期375-378,共4页

目的分析南昌大学一附院ICU常见菌的种类、分布、耐药性及鲍曼不动杆菌(AB)质粒上的耐药基因。方法用Microscan-autoscan-φ型自动微生物分析仪鉴定到种并测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC50),按美国临床实验室标准委员会(NCCLS)... 目的分析南昌大学一附院ICU常见菌的种类、分布、耐药性及鲍曼不动杆菌(AB)质粒上的耐药基因。方法用Microscan-autoscan-φ型自动微生物分析仪鉴定到种并测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC50),按美国临床实验室标准委员会(NCCLS)2003年版标准判断结果,利用WHONET 5.2软件进行统计和分析,并用聚合酶链式反应(PCR)分析AB质粒上的耐药基因。结果ICU分离菌中革兰阴性菌占75.3%,常见的菌种有铜绿假单胞菌(16.27%)、金葡菌(15.66%)、AB(15.06%)和肺炎克雷伯菌(14.66%),非发酵菌的分离率明显上升,占分离菌总数的42.77%,87.35%的标本来自痰液。革兰阴性菌耐药率高,AB对包括IPM在内的13种常用抗生素均高度耐药且其质粒上携带可接合传递并稳定传代的三种耐药基因。结论细菌的多重耐药日趋严重,开展细菌耐药性监测,对指导临床合理使用抗生素,降低医院感染率和病死率有重要意义。质粒上带一种或多种可接合传递并稳定传代的blaTEM-1(EU022370)、blaPER-1(EU022369)和blaOXA-23(EU022368)基因是ICU AB多重耐药的分子学机制之一。 展开更多

关键词 ICU 鲍曼不动杆菌 耐药 基因 质粒

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医院分离致病菌的临床分布和耐药性监测 被引量：19

4

作者 李蓉 李文林 +2 位作者 石小玉 廖晚珍 徐小文 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期353-357,共5页

【目的】调查南昌大学第一附属医院临床分离致病菌的分布特点及对常用抗菌药物的耐药情况。【方法】用Microscan-autoscan-型自动微生物分析仪鉴定到种并测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC50),按美国临床实验室标准委员会(NCCLS... 【目的】调查南昌大学第一附属医院临床分离致病菌的分布特点及对常用抗菌药物的耐药情况。【方法】用Microscan-autoscan-型自动微生物分析仪鉴定到种并测定其对常用抗菌药物的最低抑菌浓度(MIC50),按美国临床实验室标准委员会(NCCLS)2003年版标准判断结果,利用WHONET5软件进行统计和分析。【结果】1344株菌中,革兰氏阳性(G+)菌占31.92%;革兰氏阴性(G-)菌占68.08%。最常见的G+菌有表皮葡萄球菌和金黄色葡萄球菌等;最常见的G-菌有大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、洛菲不动杆菌、短黄杆菌和阴沟肠杆菌等;细菌的分布以痰液中分离的最多(40.10%),其次为尿液(19.79%),分泌物占11.24%;主要来源于呼吸内科(11.53%)和ICU(10.79%)。药敏结果表明:利福平、万古霉素对常见G+菌治疗效果较好,但利福平对金黄色葡萄球菌无效;头孢西丁、哌拉西林/他巴唑、亚胺培南和阿米卡星是治疗肠杆菌感染的首选药,但对阴沟肠杆菌无效;鲍曼不动杆菌和嗜麦芽假单胞菌对常用抗菌药物的平均耐药率分别为37.67%和56.15%。【结论】细菌的多重耐药日趋严重,开展细菌耐药性监测,对指导临床合理使用抗生素,降低医院感染率和病死率有重要意义。 展开更多

关键词 临床分离致病菌 抗菌药物 耐药率 耐药性监测

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鲍曼不动杆菌OXA-23型碳青霉烯酶基因的研究 被引量：14

5

作者 李蓉 李文林 +3 位作者 石小玉 梁朝 徐小文 赵林 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期123-124,127,共3页

目的分析鲍曼不动杆菌的耐药性及其产OXA-23型碳青霉烯酶基因的核苷酸序列。方法用自动微生物分析仪测定常用抗菌药的M IC50;对OXA-23型碳青霉烯酶基因进行PCR扩增,产物纯化测序。结果15株产ESBL s鲍曼不动杆菌中有12株携带OXA-23型碳... 目的分析鲍曼不动杆菌的耐药性及其产OXA-23型碳青霉烯酶基因的核苷酸序列。方法用自动微生物分析仪测定常用抗菌药的M IC50;对OXA-23型碳青霉烯酶基因进行PCR扩增,产物纯化测序。结果15株产ESBL s鲍曼不动杆菌中有12株携带OXA-23型碳青霉烯酶;PCR产物纯化后测序表明与鲍曼不动杆菌(AY 795964.1)blaOXA-23基因序列100%同源。结论携带OXA-23型碳青霉烯酶基因的鲍曼不动杆菌对临床常用抗菌药的耐药率高,其编码基因为blaOXA-23。 展开更多

关键词 鲍曼不动杆菌 碳青霉烯酶 基因

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酪氨酸激酶抑制剂A77-1726阻断IL-13介导STAT6磷酸化和c-fos表达 被引量：5

6

作者 石小玉 龚妍春 +4 位作者 李文林 熊丽霞 周莹 蔡伟 赵林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期906-910,共5页

目的研究酪氨酸激酶抑制剂A77-1726对IL-13介导Dami细胞STAT6磷酸化和c-fos表达的影响,为A77-1726的临床应用和IL-13的信号通路研究提供新的实验依据。方法提取Dami细胞总RNA,RT-PCR检测c-fos mRNA表达。提取Dami细胞总蛋白,Western blo... 目的研究酪氨酸激酶抑制剂A77-1726对IL-13介导Dami细胞STAT6磷酸化和c-fos表达的影响,为A77-1726的临床应用和IL-13的信号通路研究提供新的实验依据。方法提取Dami细胞总RNA,RT-PCR检测c-fos mRNA表达。提取Dami细胞总蛋白,Western blot检测磷酸化STAT6和c-fos蛋白表达。凝胶定量软件Quantity One检测电泳条带光密度,统计学分析。结果100μg·L-1IL-13作用Dami细胞,可见STAT6磷酸化,50μmol·L-1A77-1726可阻断IL-13诱导的Dami细胞STAT6磷酸化。IL-13作用Dami细胞,c-fos mRNA表达增高(P<0.05),50μmol·L-1A77-1726阻断了IL-13诱导的Dami细胞c-fos mRNA的表达(P<0.05)。IL-13促进Dami细胞c-fos蛋白表达(P<0.05),50μmol·L-1A77-1726作用Dami细胞,阻断了IL-13诱导的c-fos蛋白表达(P<0.05)。结论酪氨酸激酶抑制剂A77-1726阻断了IL-13介导的白血病Dami细胞STAT6磷酸化和c-fos表达,JAK/STAT6通路是IL-13信号通路之一,IL-13诱导的c-fos表达与STAT6通路相关。 展开更多

关键词 酪氨酸激酶抑制剂 白细胞介素-13 细胞系 Dami STAT6 C-FOS

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纸片扩散确认法与聚合酶链式反应检测超广谱β-內酰胺酶的比较 被引量：3

7

作者 李蓉 赵林 +4 位作者 徐小文 李文林 石小玉 甘泉 王力薇 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期219-223,共5页

【目的】分析纸片扩散确认法与聚合酶链式反应(PCR)检测超广谱β-內酰胺酶(ESBL)检出率。【方法】以分离保存的30株多重耐药(MDR),对3种以上实验所用抗生素耐药)且β-内酰胺酶阳性鲍曼不动杆菌(AB)菌株作为研究对象,对其中15株经纸片扩... 【目的】分析纸片扩散确认法与聚合酶链式反应(PCR)检测超广谱β-內酰胺酶(ESBL)检出率。【方法】以分离保存的30株多重耐药(MDR),对3种以上实验所用抗生素耐药)且β-内酰胺酶阳性鲍曼不动杆菌(AB)菌株作为研究对象,对其中15株经纸片扩散确认ESBL+AB和15株ESBL-AB菌株的分布、药敏、质粒谱及基因型作了比较分析,并对两种方法检出ESBL的阳性率进行比较。【结果】通过纸片扩散确认法检出的ESBL+AB和ESBL-AB在不同科室间的分布(P>0.05)、不同标本间的分布(P>0.05)、对不同抗生素的耐药情况(P>0.05)及质粒谱都无明显差异,且用聚合酶链式反应在ESBL-AB质粒上也分离到了相同的3种耐药基因,PCR法检测ESBL的阳性率高于纸片扩散确认法(P<0.001)。【结论】用PCR法检测ESBL更快更敏感,对指导临床合理使用抗生素和降低医院感染率和病死率有重要意义。 展开更多

关键词 纸片扩散确认法 AB PCR ESBL

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白介素-13对与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF表达影响 被引量：3

8

作者 石小玉 陈少芬 +2 位作者 古华平 卢慧 李文林 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1303-1308,共6页

目的:为了探索白细胞介素-13(Interleukin-13,IL-13)在乳腺癌发展中的作用机制,我们研究了IL-13对与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞表达SDF-1(Stromal cell derived factor 1)和EGF(Epidermal growth factor)的影响。方法:采用体外和荷... 目的:为了探索白细胞介素-13(Interleukin-13,IL-13)在乳腺癌发展中的作用机制,我们研究了IL-13对与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞表达SDF-1(Stromal cell derived factor 1)和EGF(Epidermal growth factor)的影响。方法:采用体外和荷瘤裸鼠体内人乳腺癌细胞株MDA-MB-231和人成纤维细胞株CCC-ESF-1(ESF)共培养的方法,用定量PCR(RT-q PCR)方法、流式细胞术和Western blot方法检测在IL-13作用下体外共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF的表达,细胞增殖实验Cell counting kit-8(CCK-8)观察IL-13对体外共培养的乳腺癌细胞增殖的影响;免疫荧光激光共聚焦显微镜观察在IL-13作用下荷瘤裸鼠体内与乳腺癌细胞共生长的成纤维细胞SDF-1和EGF的表达,检测IL-13对荷瘤裸鼠肿瘤体积的影响。结果:IL-13上调体外与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF的表达,并促进共培养的乳腺癌细胞的增殖;IL-13上调荷瘤裸鼠乳腺癌组织成纤维细胞SDF-1和EGF的表达,并促进荷瘤裸鼠肿瘤生长。结论:IL-13上调与乳腺癌细胞共培养的成纤维细胞SDF-1和EGF的表达,IL-13对乳腺癌促进作用的分子机制涉及乳腺癌基质成纤维细胞的SDF-1和EGF。 展开更多

关键词 白细胞介素-13 成纤维细胞 乳腺癌 SDF-1 EGF

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干扰素γ抑制IL-13对成纤维细胞的纤维化作用 被引量：4

9

作者 熊丽霞 李文林 +5 位作者 蔡震宇 周莹 熊俊平 赵林 何晓燕 石小玉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期504-508,共5页

目的:研究干扰素γ(IFN-γ)抑制白细胞介素13(IL-13)对成纤维细胞纤维化作用的影响。方法:将成纤维细胞分为实验组和空白对照组,实验组加入IFN-γ(4×105U/L)和IL-13(100μg/L),共同作用24、48和72 h后,分别用羟脯氨酸法、RT-PCR和W... 目的:研究干扰素γ(IFN-γ)抑制白细胞介素13(IL-13)对成纤维细胞纤维化作用的影响。方法:将成纤维细胞分为实验组和空白对照组,实验组加入IFN-γ(4×105U/L)和IL-13(100μg/L),共同作用24、48和72 h后,分别用羟脯氨酸法、RT-PCR和Western blotting检测成纤维细胞分泌胶原蛋白、I型胶原α1(Col 1A1)mR-NA表达和I型胶原蛋白的表达水平。另外对比空白对照组、IFN-γ组、IL-13组和IFN-γ+IL-13组72 h后Col1A1mRNA表达和I型胶原蛋白的表达水平。结果:MTT结果表明IFN-γ浓度增加到4×105U/L后可显著抑制成纤维细胞的增殖(P<0.01)。羟脯氨酸法检测显示48 h和72 h实验组成纤维细胞分泌的胶原蛋白含量显著低于空白对照组(P<0.05);RT-PCR分析结果揭示48 h和72 h实验组的Col1A1 mRNA表达水平显著低于空白对照组(P<0.05);Western blotting检测也进一步证实了48 h和72 h实验组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组。另外各因素组对比结果显示,72 h后IFN-γ组Col1A1 mRNA和蛋白的表达水平显著低于空白对照组(P<0.05),IL-13组显著高于空白对照组(P<0.05),而IFN-γ+IL-13组显著低于显著低于其它组(P<0.01)。结论:IFN-γ可抑制IL-13对成纤维细胞的纤维化作用。 展开更多

关键词 干扰素Γ 白细胞介素13 成纤维细胞 胶原

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溶血磷酯酸诱导白细胞介素13受体α2 mRNA表达并抑制胶原蛋白合成 被引量：1

10

作者 石小玉 何晓璐 +3 位作者 夏小春 熊丽霞 赵林 李文林 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期764-768,共5页

目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对人肺成纤维细胞(HFL-1)白细胞介素-13受体α2(IL-13Rα2)表达和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLAⅠ)合成的影响。方法细胞培养,显微镜观察LPA对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,... 目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对人肺成纤维细胞(HFL-1)白细胞介素-13受体α2(IL-13Rα2)表达和Ⅰ型胶原(collagen typeⅠ,COLAⅠ)合成的影响。方法细胞培养,显微镜观察LPA对HFL-1细胞生长的影响,提取HFL-1细胞总RNA,用RT-PCR检测LPA对HFL-1细胞IL-13Rα2 mRNA和COLA I mRNA表达的影响。用免疫组化方法检测LPA和白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)对HFL-1细胞COLA I蛋白表达的影响。图像分析RT-PCR电泳条带和免疫组化图像,统计学处理。结果①LPA诱导HFL-1细胞IL-13Rα2 mRNA的表达,并呈时间依赖性。②1μmol.L-1 LPA刺激HFL-1细胞,IL-13Rα2 mR-NA的表达增强。③LPA作用HFL-1细胞,对IL-13Rα1的表达无影响。④LPA抑制HFL-1细胞COLA I mRNA的表达,IL-13促进COLA I mRNA的表达,LPA+IL-13混合组COLA I mRNA表达水平比LPA组高,比IL-13组低。⑤免疫组化结果与RT-PCR结果一致。结论溶血磷脂酸诱导人肺成纤维细胞表达IL-13 Rα2 mRNA,并下调人肺成纤维细胞合成COLAⅠ。 展开更多

关键词 溶血磷脂酸 人肺成纤维细胞 白细胞介素13受体α2 Ⅰ型胶原 纤维化 抑制性受体 白细胞介素13

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酪氨酸激酶抑制剂A77 1726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原合成作用 被引量：1

11

作者 熊丽霞 李文林 +2 位作者 石小玉 刘卓琦 唐洪林 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期16-19,共4页

目的:观察酪氨酸激酶抑制剂A771726对白细胞介素13(IL-13)促成纤维细胞胶原合成作用的影响。方法:MTT法观察不同浓度的A771726对成纤维细胞的增殖作用的影响。成纤维细胞分为实验组和实验对照组,实验对照组加入IL-13(100μg/L),实验组加... 目的:观察酪氨酸激酶抑制剂A771726对白细胞介素13(IL-13)促成纤维细胞胶原合成作用的影响。方法:MTT法观察不同浓度的A771726对成纤维细胞的增殖作用的影响。成纤维细胞分为实验组和实验对照组,实验对照组加入IL-13(100μg/L),实验组加入A771726(50μmol/L)和IL-13(100μg/L),作用24、48、72h后,羟脯氨酸(Hyp)检测A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌胶原蛋白的影响,RT-PCR观察A771726对IL-13促进成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平表达的影响,Western blot观察A771726对IL-13促进成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的影响。结果:A771726可抑制成纤维细胞的增殖。羟脯氨酸检测实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌胶原蛋白的含量显著低于实验对照组(P<0.05),RT-PCR观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞I型胶原α1基因(COL1A1)mRNA表达水平显著低于实验对照组(P<0.05),Western blot观察到实验组48h组和72h组成纤维细胞分泌I型胶原蛋白的水平显著低于空白对照组(P<0.05)。结论:酪氨酸酶抑制剂A771726阻断IL-13对成纤维细胞的促胶原蛋白合成作用,阻断IL-13促成纤维细胞I型胶原α1基因mRNA水平和蛋白水平的表达。 展开更多

关键词 酪氨酸酶抑制剂 A77 1726 白细胞介素13 成纤维细胞 胶原

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黏附素5胞外区克隆、转染及抗人乳腺癌细胞生长的研究

12

作者 石小玉 李文林 +3 位作者 熊丽霞 张际青 熊建军 李红 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期1710-1715,共6页

目的:克隆和转染黏附素5胞外区,并研究其对人乳腺癌MDA-MB435细胞株生长的影响。方法:RT-PCR技术克隆黏附素5胞外区(称为CED1-4),将其插入pMSCV质粒载体,在大肠杆菌XL-blue扩增,提取和纯化pMSCV-CED1-4,酶切、电泳和测序检测CED1-4序列... 目的:克隆和转染黏附素5胞外区,并研究其对人乳腺癌MDA-MB435细胞株生长的影响。方法:RT-PCR技术克隆黏附素5胞外区(称为CED1-4),将其插入pMSCV质粒载体,在大肠杆菌XL-blue扩增,提取和纯化pMSCV-CED1-4,酶切、电泳和测序检测CED1-4序列。CED1-4基因转染MDA-MB435细胞株,RT-PCR和Western blotting检测MDA-MB435细胞表达CED1-4。细胞增殖实验和乳腺癌裸小鼠致瘤实验检测CED1-4对MDA-MB435细胞体内外生长的影响。结果:构建了重组体pMSCV-CED1-4,电泳显示CED1-4条带在1636bp-1018bp区间,测序显示CED1-4基因长1452bp,编码484氨基酸。经PCR和Western blotting证实,CED1-4基因转染的MDA-MB435细胞在mRNA和蛋白质水平表达CED1-4。细胞增殖实验结果表明,实验组MDA-MB435细胞增殖低于实验对照组和空白对照组(P<0.05)。乳腺癌裸小鼠致瘤实验显示,实验组移植瘤平均体积和重量低于实验对照组和空白对照组(P<0.05)。结论:黏附素5胞外区CED1-4能在体内外抑制人乳腺癌MDA-MB435细胞株的生长。 展开更多

关键词 钙粘着糖蛋白类 克隆 乳腺肿瘤 基因转染

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